一种靶向PRDM1改善牛子宫内膜炎的核苷酸序列及其应用

本发明属于基因工程，具体涉及靶向prdm1的核苷酸序列及其在改善牛子宫内膜炎中的应用。

背景技术：

1、子宫是奶牛(bos taurus)生殖系统中的重要器官，子宫健康与否直接影响奶牛的繁殖性能，而繁殖性能是决定奶牛场盈利能力的关键因素。子宫内膜炎是奶牛子宫炎症的一种，严重危害奶牛的生殖系统健康，导致奶牛繁殖障碍，是我国奶牛养殖业最常见的繁殖障碍疾病之一。国内外不同地区奶牛子宫内膜炎的发病率存在差异，但基本均在14％～40％之间。子宫内膜炎造成奶牛繁殖障碍的主要原因是子宫内产生的大量白细胞和细菌抑制精子与卵子的结合，导致奶牛不孕，占奶牛不孕症的70％。子宫内膜炎高发于奶牛分娩后。奶牛分娩时产道受损，以及胎衣不下、流产、子宫感染等均可引发子宫内膜炎。患病奶牛主要表现为体温升高、食欲下降、精神萎靡、排出异味恶露、发情时间延迟等症状。若能及时有效治疗，奶牛可快速恢复繁殖性能。若治疗不当可引发败血症，导致奶牛长期不孕或继发流产，最终只能被迫淘汰，损害养殖效益。

2、在组织学上，子宫内膜炎的特点是子宫内膜上皮细胞崩解，内膜表层有不同程度的淋巴细胞和浆细胞聚集，炎性细胞浸润、血管充血、基质水肿。子宫内膜是母畜生殖系统中抵抗病原微生物感染的第一道屏障，是覆盖在富含血管、免疫细胞和子宫内膜基质细胞的基质上的一层含有单层柱状上皮细胞的黏膜层。子宫内膜上皮细胞存在于子宫内表面，与子宫腔直接接触。子宫内膜上皮接受胚胎附植，并与生殖道菌群接触，是子宫先天性免疫的一部分。子宫内膜上皮细胞通过多种途径发挥哨兵作用，具有分泌和免疫应答功能。子宫内膜上皮细胞通过其自身、细胞间的紧密连接及分泌到子宫腔的黏蛋白组成了物理屏障。子宫内膜上皮细胞的完整性对维持机体正常的生殖功能，如受精卵的着床、妊娠的维持，具有重要意义。当子宫内膜上皮的完整性遭到破坏，病原微生物和有害物质的进一步侵入，将危害整个机体的健康。很多致病菌如大肠杆菌造成子宫疾病的重要途径就是破坏子宫内膜上皮的完整性。上皮细胞作为子宫腔的外表面首先与进入子宫腔的病原菌相接触。因此，上皮细胞和免疫细胞之间的通信对于机体维持正常的生殖功能和免受感染尤为重要。研究表明，虽然奶牛子宫内膜上皮细胞不能像免疫细胞那样直接吞噬病原菌，但能通过分泌多种细胞因子如肿瘤坏死因子α、白细胞介素il-1、il-6、il-8等，作为子宫内细胞之间通讯的主要成分。此外，上皮细胞还在炎性反应的启动过程中扮演重要角色，通过表达toll样受体和核酸结合寡聚化结构域蛋白家族nod样受体等模式识别受体，参与大肠杆菌和脂多糖的识别，促进炎性细胞因子的合成和释放。因此，在奶牛子宫内膜炎的治疗过程中，促进子宫内膜上皮细胞的增殖，维持子宫内膜上皮细胞的活性和完整性十分重要。prdm1蛋白，全称为含pr域蛋白1(pr-domain containing protein 1)，也常被称为blimp-1(b lymphocyte-induced maturation protein-1)，是一种重要的转录因子，在细胞分化和免疫调节中扮演关键角色。目前，靶向prdm1的核苷酸序列在治疗奶牛子宫内膜炎中的作用和应用尚未见报道。

技术实现思路

1、基于背景技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种靶向prdm1的核苷酸序列及其在改善牛子宫内膜炎中的应用。

2、一方面，本发明提供一种靶向prdm1的核苷酸序列，所述核苷酸序列如seq idno.2所示。

3、优选地，所述靶向prdm1的核苷酸序列为sirna。

4、另一方面，本发明提供一种治疗牛子宫内膜炎的组合物，其特征在于，所述组合物包含前述核苷酸序列。

5、另一方面，本发明提供一种促进lps诱导的牛子宫内膜上皮细胞增殖的组合物，其特征在于，所述组合物包含前述核苷酸序列。

6、另一方面，本发明提供前述任一种核苷酸序列或组合物在制备治疗牛子宫内膜炎的药物中的应用。

7、另一方面，本发明提供前述任一种核苷酸序列或组合物在制备促进lps诱导的牛子宫内膜上皮细胞增殖的药物中的应用。

8、另一方面，本发明提供一种促进lps诱导的牛子宫内膜上皮细胞增殖的非疾病治疗方法，其特征在于，所述方法通过降低prdm1表达实现。

9、优选地，所述降低prdm1表达是通过干扰prdm1表达实现的。

10、优选地，所述干扰prdm1表达是通过利用权利要求1所述的核苷酸序列进行sirna干扰实现的。

11、另一方面，本发明提供前述任一种方法作为评价治疗牛子宫内膜炎的方法效果的阳性对照的应用，其特征在于，所述方法降低prdm1表达促进lps诱导的牛子宫内膜上皮细胞增殖。

12、优选地，所述降低prdm1表达是通过干扰prdm1表达实现的。

13、优选地，所述干扰prdm1表达是通过利用权利要求1所述的核苷酸序列进行sirna干扰实现的。

14、与现有技术相比，本发明具有如下优点：

15、1)本发明提供了一条全新的靶向prdm1的sirna，可研究prdm1功能的试剂，用于任何与prdm1相关的生物学功能研究中。

16、2)本发明提供了的sirna显著促进牛子宫内膜炎症中牛子宫内膜上皮细胞增殖，对改善牛子宫内膜炎症具备一定效果。

17、3)本发明的方法还可在基础科研中作为评价治疗牛子宫内膜炎的方法效果的阳性对照。

技术特征：

1.一种靶向prdm1的核苷酸序列，其特征在于，所述核苷酸序列如seq id no.2所示。

2.一种治疗牛子宫内膜炎的组合物，其特征在于，所述组合物包含权利要求1所述的核苷酸序列。

3.一种促进lps诱导的牛子宫内膜上皮细胞增殖的组合物，其特征在于，所述组合物包含权利要求1所述的核苷酸序列。

4.权利要求1～4任一项所述的核苷酸序列或组合物在制备治疗牛子宫内膜炎的药物中的应用。

5.权利要求1～4任一项所述的核苷酸序列或组合物在制备促进lps诱导的牛子宫内膜上皮细胞增殖的药物中的应用。

6.一种促进lps诱导的牛子宫内膜上皮细胞增殖的非疾病治疗方法，其特征在于，所述方法通过降低prdm1表达实现。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述降低prdm1表达是通过干扰prdm1表达实现的。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述干扰prdm1表达是通过利用权利要求1所述的核苷酸序列进行sirna干扰实现的。

9.权利要求6所述方法作为评价治疗牛子宫内膜炎的方法效果的阳性对照的应用。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述降低prdm1表达是通过干扰prdm1表达实现的。

技术总结
本发明提供了一种靶向PRDM1的核苷酸序列及其用途，属于基因工程技术领域。靶向PRDM1的核苷酸如SEQ ID NO.2所示。靶向PRDM1的核苷酸和通过siRNA降低PRDM1的表达，从而提高牛子宫内膜炎症过程中的子宫内膜上皮细胞的活力和增殖数量，可在改善牛子宫内膜炎症的治疗过程中进行应用，如制备治疗牛子宫内膜炎的核苷酸药物等。

技术研发人员：王雅春,韩丽云,张俊星,张海亮,盛辉,黄越川,王占伟,张伟,张娟,杨俊杰,胡启超,文汇玉,周吉清,陈超,胡帅帅
受保护的技术使用者：宁夏大学
技术研发日：
技术公布日：2024/9/23