一株植物乳杆菌及其在溃疡性结肠炎预防中的应用

本发明属于生物，具体涉及一株植物乳杆菌及其在溃疡性结肠炎预防中的应用。

背景技术：

1、溃疡性结肠炎的发生会导致胃肠道的慢性炎症，并提高结直肠癌的患病风险。近年我国溃疡性结肠炎发病率呈逐年上升趋势，且超50%患者患病时间长达3~10年，亟需研发高效、经济、安全的溃疡性结肠炎预防手段。肠道菌群是消化道免疫及代谢的重要组分。研究表明，肠道菌群失衡及部分病原微生物数量的异常扩增与溃疡性结肠炎的发生发展密切相关。通过维持肠道菌群平衡从而维持肠道稳态对于溃疡性结肠炎的有效预防具有潜力。

2、植物乳杆菌等肠道益生菌具有恢复肠道菌群和免疫反应失衡、调节肠道代谢产物、缓解炎症的功能。然而植物乳杆菌的效果会受到菌株本身肠道定殖能力、对病原微生物的拮抗能力、在肠道中的代谢活性等因素的影响。

3、选育能够有效定植于肠道并抑制肠道病原菌生长、发挥益生作用的乳酸菌菌株，作为维护肠道稳态、预防溃疡性结肠炎的益生菌菌剂或食品添加剂，是一种安全、经济、便捷的疾病预防策略。

技术实现思路

1、本发明所要解决的技术问题是提供一种能定植于肠道且能够有效预防溃疡性结肠炎的益生菌。所要解决的技术问题不限于所描述的技术主题，本领域技术人员通过以下描述可以清楚地理解本文未提及的其它技术主题。

2、为解决上述技术问题，本发明提供了以下技术方案：

3、本发明提供一种植物乳杆菌及其后代，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌( lactobacillus plantarum)，其菌株号为m67-25，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为cgmcc no. 28661。

4、本发明还提供植物乳杆菌的培养物，是将前述的植物乳杆菌在微生物培养基中培养得到的物质。

5、术语“培养物”是指经人工接种和培养后，长有微生物群体的液体或固体产物（培养容器内的所有物质即发酵产物）的统称。即通过将微生物进行生长和/或扩增而获得的产物，其可以是微生物的生物学纯培养物，也可以含有一定量的培养基、代谢物和/或培养过程中产生的其他成分。术语“培养物”还包括通过将微生物传代而获得的传代培养物，其可以是某一代的培养物，也可以是若干代的混合物。

6、如本文中所使用的，术语“后代”是指微生物通过生长（例如在培养基中培养生长）而产生的子代细胞。易于理解的是，在微生物的生长和培养中，尤其是细菌的生长和培养中，遗传物质可能发生一定的变化（例如，一个或几个碱基的突变），这些变化可以是自发发生，也可是因为化学和/或物理试剂（例如诱变剂）诱变和/或本领域已知的重组dna技术而导致的结果。因此，在本文中，xx菌的后代包含与本发明的xx菌相比遗传物质未发生变化和发生变化的后代。当然，所述后代保留其衍生自的菌株的功能（例如，预防溃疡性结肠炎、抑制具核梭杆菌、产肠毒素大肠杆菌、单核李斯特菌或/和鼠伤寒沙门氏菌的生长等）。

7、上述培养物中，所述微生物培养基可为固体培养基或液体培养基。

8、在本发的一些具体实施例中，上述微生物培养基为mrs液体培养基，所述培养的条件具体为37℃厌氧培养24 h。

9、在本发明的一些具体实施例中，上述培养物是m67-25的无菌发酵液。

10、所述无菌发酵液通过如下步骤制备而成：将m67-25活化后接种于mrs液体培养基中，37℃厌氧培养24 h，得到培养菌液。将培养菌液于1200rpm离心5min，取上清液通过0.45μm滤膜过滤，获得无菌发酵液。

11、本发明还提供一种菌剂，所述菌剂含有前述的植物乳杆菌或/和前述植物乳杆菌的代谢物或/和前述的培养物。

12、上述菌剂中，所述菌剂还可包括载体。所述载体可为固体载体或液体载体。

13、所述固体载体可为矿物材料、生物材料；所述矿物材料可为草炭、粘土、滑石、高岭土、蒙脱石、白碳、沸石、硅石和硅藻土中的至少一种；所述生物材料可为各类作物的秸秆、松壳、稻草、花生壳、玉米粉、豆粉、淀粉、草炭和动物的粪便中的至少一种；所述液体载体可为水；所述菌剂中，植物乳杆菌的代谢物可以以被培养的活细胞、活细胞的发酵液、细胞培养物的滤液或细胞与滤液的混合物的形式存在。所述菌剂的剂型可为多种剂型，如液剂、乳剂、悬浮剂、粉剂、颗粒剂、可湿性粉剂或水分散粒剂。

14、根据需要，所述菌剂中还可添加表面活性剂（如吐温20、吐温80等）、粘合剂、稳定剂（如抗氧化剂）、ph调节剂等。

15、本发明还提供前述植物乳杆菌或培养物或菌剂在抑制具核梭杆菌、产肠毒素大肠杆菌、单核李斯特菌或/和鼠伤寒沙门氏菌的生长中的应用。

16、前述植物乳杆菌对革兰氏阳性菌（单核李斯特菌baa和金黄色葡萄球菌atcc29213）的抑菌效果优于革兰氏阴性菌（鼠伤寒沙门氏菌atcc14028和产肠毒素大肠杆菌k88）。

17、本发明还提供前述植物乳杆菌或前述培养物或前述菌剂在制备抑制具核梭杆菌、产肠毒素大肠杆菌、单核李斯特菌或/和鼠伤寒沙门氏菌的生长的产品中的应用。

18、上述产品的的活性成分为前述植物乳杆菌或前述培养物或前述菌剂。

19、本发明还提供前述植物乳杆菌或前述培养物或前述菌剂在制备预防或治疗延缓急性溃疡性结肠炎的产品应用。

20、上述应用中，所述结肠炎为急性溃疡性结肠炎。急性溃疡性结肠炎的症状包括黏膜溃疡、炎症性细胞浸润黏膜组织、隐窝损伤等。

21、本发明还提供病原微生物抑制剂，所述病原微生物抑制剂含有前述的植物乳杆菌或/和前述的植物乳杆菌的代谢物或/和前述的培养物或/和前述的菌剂。

22、上述病原菌抑制剂抑制的病原菌包括具核梭杆菌、产肠毒素大肠杆菌、单核李斯特菌和鼠伤寒沙门氏菌中的至少一种。

23、本发明提供的植物乳杆菌是一种兼性厌氧菌，通过实验证明，该植物乳杆菌抑制具核梭杆菌、产肠毒素大肠杆菌、单核李斯特菌或/和鼠伤寒沙门氏菌的生长，在胃肠液消化生存率高，同时通过小鼠实验证实其可改善小鼠急性溃疡性结肠炎的黏膜溃疡、炎症性细胞浸润黏膜组织、隐窝损伤等症状。

24、保藏说明

25、菌种名称：植物乳杆菌

26、拉丁名： lactobacillus plantarum

27、菌株编号：m67-25

28、保藏机构：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心

29、保藏机构简称：cgmcc

30、地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号

31、保藏日期：2023年10月19日

32、保藏编号：cgmcc no. 28661。

技术特征：

1.植物乳杆菌及其后代，其特征在于，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)，其菌株号为m67-25，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为cgmcc no. 28661。

2.权利要求1所述的植物乳杆菌的培养物，是将权利要求1所述的植物乳杆菌在微生物培养基中培养得到的物质。

3.菌剂，其特征在于，所述菌剂含有权利要求1所述的植物乳杆菌或/和权利要求1所述植物乳杆菌的代谢物或/和权利要求2所述的培养物。

4.权利要求1所述的植物乳杆菌或权利要求2所述的培养物或权利要求3所述的菌剂在抑制具核梭杆菌、产肠毒素大肠杆菌、单核李斯特菌或/和鼠伤寒沙门氏菌的生长中的应用。

5.权利要求1所述的植物乳杆菌或权利要求2所述的培养物或权利要求3所述的菌剂在制备抑制具核梭杆菌、产肠毒素大肠杆菌、单核李斯特菌或/和鼠伤寒沙门氏菌的生长的产品中的应用。

6.权利要求1所述的植物乳杆菌或权利要求2所述的培养物或权利要求3所述的菌剂在制备预防或治疗延缓急性溃疡性结肠炎的产品应用。

7.根据权利要求6中所述的应用，其特征在于，所述结肠炎为急性溃疡性结肠炎。

8.病原微生物抑制剂，其特征在于，所述病原微生物抑制剂含有权利要求1所述的植物乳杆菌或/和权利要求1所述的植物乳杆菌的代谢物或/和权利要求2所述的培养物或/和权利要求3所述的菌剂。

9.根据权利要求8所述的病原菌抑制剂，其特征在于，所述病原菌抑制剂抑制的病原菌包括具核梭杆菌、产肠毒素大肠杆菌、单核李斯特菌和鼠伤寒沙门氏菌中的至少一种。

技术总结
本发明公开了一株植物乳杆菌及其在溃疡性结肠炎预防中的应用，属于生物技术领域。本发明所提供的菌株为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）M67‑25，其在中国普通微生物菌种保藏管理中心的保藏编号为CGMCC No.28661。植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）M67‑25可以作为益生菌、食品添加剂、食品发酵剂对溃疡性结肠炎进行预防。本发明在溃疡性结肠炎预防方面具有广阔的应用前景。

技术研发人员：杨逢源,王雁萍,刘康栋,薛建龙,马恒宇,李豪龙,汤晓雪,孙品天
受保护的技术使用者：郑州大学
技术研发日：
技术公布日：2024/9/19