UBC作为靶点在诊断和治疗非梗阻无精症中的应用

本发明涉及生物医药领域，特别涉及ubc作为靶点在诊断和治疗非梗阻无精症中的应用。

背景技术：

1、男性不育症是发生在男性生殖系统中的一类复杂性疾病，按照病因主要分为梗阻性无精子症(obstructive azoospermia，oa)与非梗阻性无精子症(non-obstructiveazoospermia，noa)。oa的病因比较明确，即精子流出的管道堵塞，而睾丸内包括精子在内的一系列生殖细胞无受损，患者通过治疗疏通堵塞或手术取精即可实现后续的正常生育过程。noa主要是由于睾丸内精子发生障碍导致几乎无精子产生，该病约占男性不育症的10～15％。noa患者睾丸组织的最终形态特征是没有或很少有生殖细胞，通过手术仅在10％的noa患者中发现生殖细胞，睾丸内精原干细胞和发育微环境体细胞的过度凋亡或坏死，会导致睾丸萎缩，引起最为严重的noa疾病，称为唯支持细胞综合症(sertoli cell-onlysyndrome，scos)。然而目前尚无药物被批准治疗noa，迫切需要加强对noa进展的相关机制的研究，以研究和筛选临床诊断和治疗的有效靶点。

2、泛素c(ubiquitin c，ubc)，作为参与泛素合成过程的关键基因之一，是泛素化反应中不可或缺的角色。泛素偶化不仅是一种高度精细的翻译后修饰，更是调控细胞众多生命活动的核心机制，涉及到蛋白酶体介导的蛋白水解。此外，泛素偶化还展现了泛泛的、多面的非降解功能，涵盖了从信号转导到基因转录的调控，从内吞作用的精细协调到蛋白质的精准运输，甚至包括dna损伤的修复以及细胞存活与增殖的维持。

3、鉴于当前临床对于非梗阻无精症治疗中针对睾丸支持细胞泛素化药物的迫切需求，亟需提供一种全新的治疗靶点，为非梗阻无精症的预防和治疗开辟新的思路和方法。

技术实现思路

1、针对现有技术中的缺陷，本发明提出ubc作为靶点在诊断和治疗非梗阻无精症中的应用。所述ubc的核苷酸序列如seq id no.3所示。

2、本发明提供了泛素c作为靶点在开发和/或筛选和/或制备用于预防和/或治疗非梗阻无精症的药物中的应用。

3、本发明还提供检测泛素c的物质在制备和/或筛选用于诊断或辅助诊断非梗阻无精症的产品的应用。

4、本发明还提供检测泛素c的物质在制备和/或筛选用于评估或辅助评估非梗阻无精症的治疗疗效的产品中的应用。

5、在一些实施方式中，所述检测泛素c的物质包括通过rt-pcr法、rt-qpcr法、生物芯片检测法、dna印迹法、原位杂交法、免疫印迹法、免疫组化法、空间转录组技术检测泛素c蛋白含量或基因表达水平所需的试剂。

6、在一些实施方式中，所述检测泛素c的物质为通过免疫组织化学技术检测泛素c蛋白的试剂。

7、在一些实施方式中，所述检测泛素c的物质为可检测与泛素c蛋白相关的核酸表达量或泛素c蛋白含量的试剂。

8、在一些实施方式中，所述产品包括试剂、试剂盒、芯片、试纸、膜条或检测平台中的任意一种。

9、本发明还提供泛素c抑制剂在如下至少一项中的应用：

10、(a)在筛选用于预防非梗阻无精症的药物中的应用；

11、(b)在制备和/或筛选用于治疗或辅助治疗非梗阻无精症的药物中的应用；

12、(c)在制备和/或筛选抑制非梗阻无精症的发生和/或发展的药物中的应用。

13、在一些实施方式中，所述泛素c抑制剂包括降低泛素c蛋白表达量的物质、降低泛素c蛋白含量的物质、降低泛素c蛋白活性的物质或抑制ubc基因表达的物质。

14、在一些实施方式中，所述物质包括但不限于核酸分子、小分子化合物、抗体、多肽、蛋白、基因编辑载体、慢病毒或腺相关病毒中的一种或多种。

15、本发明所述的泛素c抑制剂具有破坏或阻碍泛素c参与泛素蛋白合成和ubc转录表达的效果。

16、在一些实施方式中，所述泛素c抑制剂是与泛素c蛋白结合的抗体、多肽或小分子；或

17、所述泛素c抑制剂是shrna(短发夹rna)或sirna(小干扰rna)，其能降低编码泛素c蛋白的基因的表达。

18、在一些实施方式中，所述ubc抑制剂为序列如seq id no.1和seq id no.2所述的sirna。

19、综上，与现有技术相比，本发明达到了以下技术效果：

20、1、ubc在非梗阻无精症患者睾丸支持细胞表达水平显著下降，可作为非梗阻无精症诊断，或者评估治疗疗效的生物标志物，还可作为药物、药物靶点或者基因治疗中的靶基因，为非阻塞性无精症的诊断、治疗与缓解提供新的策略。

21、2、本发明提供了一种可敲低支持细胞(tm4)表达的ubc抑制剂sirna，可模拟体外非梗阻无精症中支持细胞的变化，用于评估和诊断ibc对非梗阻无精症的影响。

技术特征：

1.泛素c作为靶点在开发和/或筛选和/或制备用于预防和/或治疗非梗阻无精症的药物中的应用。

2.检测泛素c的物质在制备和/或筛选用于诊断或辅助诊断非梗阻无精症的产品的应用。

3.检测泛素c的物质在制备和/或筛选用于评估或辅助评估非梗阻无精症的治疗疗效的产品中的应用。

4.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于，所述检测泛素c的物质包括通过rt-pcr法、rt-qpcr法、生物芯片检测法、dna印迹法、原位杂交法、免疫印迹法、免疫组化法、空间转录组技术检测ubc蛋白含量或基因表达水平所需的试剂。

5.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于，所述产品包括试剂、试剂盒、芯片、试纸、膜条或检测平台中的任意一种。

6.泛素c抑制剂在如下至少一项中的应用：

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述泛素c抑制剂包括降低泛素c蛋白表达量的物质、降低泛素c蛋白含量的物质、降低泛素c蛋白活性的物质或抑制泛素c基因表达的物质。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述泛素c抑制剂是与泛素c蛋白结合的抗体、多肽或小分子；或

9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述泛素c抑制剂为序列如seq id no.1和seq id no.2所述的sirna。

技术总结
本发明公开了UBC作为靶点在诊断和治疗非梗阻无精症中的应用。所述UBC在非梗阻无精症患者睾丸支持细胞表达水平显著下降，可作为非梗阻无精症诊断，或者评估治疗疗效的生物标志物，还可作为药物、药物靶点或者基因治疗中的靶基因，为非阻塞性无精症的诊断、治疗与缓解提供新的策略。

技术研发人员：吴洪福,陈稼鸿,陈立基,王莉云,林若萍,蔡漫琪,张家俊
受保护的技术使用者：广东医科大学
技术研发日：
技术公布日：2024/11/18