蕲艾内生真菌ThyronectriacucurbitulaYAFEF1102及应用

本发明属于微生物防治，具体涉及一种蕲艾内生真菌 thyronectria  cucurbitulayafef1102及应用。

背景技术：

1、蕲艾（artemisia argyi levl. et vant. var. argyi. cv. qiai），菊科（asteraceae）蒿属（artemisia）植物，中国国家地理标志产品，是中国传统中草药。中医学认为蕲艾叶具有祛湿止痛、祛瘀消肿、疏通经络、温经活血的作用，有利于治疗风寒疾病、妇科疾病、呼吸系统疾病、风湿类疾病等病症。蕲艾也被认为是艾中之王，生长于湖北省蕲春县，为优质道地药材，含有挥发油、有机酸、黄酮类、萜类、大量元素及微量元素等多种活性成分，具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗肿瘤、免疫调节、抗感染、保护神经等药理作用。

2、植物内生真菌是寄生在健康植物组织和器官内的一类微生物。广义上指包括菌根真菌、营表生腐生菌以及对宿主暂时无害的潜伏性病原菌等在内的一大类群；狭义概念为生活史中一定阶段或全部阶段侵染并定殖于宿主植物而不引起明显病症的一类真菌。内生真菌与宿主植物建立了和谐互利的共生关系，其寄生在植物体内以吸收宿主植物的营养物质来完成自身生活史，与此同时，内生真菌定殖为宿主植物的生长和胁迫耐受等方面提供了帮助。与根际微生物、内生细菌和内生放线菌相比，内生真菌具有多样性丰富、数量庞大、可产生广泛应用价值的活性物质等优势。目前研究表明，植物内生真菌活性代谢物质是抗生素、抗癌药物或农药的潜在先导，具有重大的研究意义和经济价值。

技术实现思路

1、本发明的主要目的是提供一种蕲艾内生真菌 thyronectria  cucurbitulayafef1102及其液体培养的方法，通过液体发酵产生抑制细菌的化合物。

2、为了实现上述目的，本发明通过如下技术方案实现：

3、一种蕲艾内生真菌，保藏名称： thyronectria cucurbitulayafef1102，保藏编号：cctcc no：m2024711。

4、所述蕲艾内生真菌发酵液。

5、所述的发酵液制备方法，包括以下步骤：

6、（1） thyronectria cucurbitulayafef1102菌种活化；

7、（2）将活化好的 thyronectria cucurbitulayafef1102接种到bpgy液体培养基中培养，获得发酵液；

8、所述bpgy液体培养基配置方法：分别称取0.5g 溴化钾, 0.1g 蛋白胨，1.5g葡萄糖和0.5g酵母粉末加入到含有100ml水的三角瓶中，高压灭菌，冷却后获得bpgy液体培养基。

9、所述的制备方法，步骤（2）中，培养条件为：27℃，170rpm的恒温摇床中，培养15d，获得发酵液。

10、所述蕲艾内生真菌发酵液粗提物。

11、所述发酵液粗提物的制备方法，过滤所述发酵液中的菌丝体获得菌液，向菌液中加入乙酸乙酯，超声处理后，静置使其分层后萃取上清液；用旋转蒸发仪冷凝回流并干燥，获得所述真菌发酵液粗提物。

12、所述的制备方法，菌液中按照体积比1:1.5加入乙酸乙酯。

13、一种菌剂，所述菌剂含所述的蕲艾内生真菌、所述的发酵液或所述的发酵液粗提物。

14、一种所述蕲艾内生真菌用液体培养基，所用液体培养基每100ml中含有0.5g 溴化钾, 0.1g 蛋白胨，1.5g葡萄糖和0.5g酵母粉。

15、所述的蕲艾内生真菌、所述的发酵液、所述的发酵液粗提物或所述的菌剂在制备抑菌和/或杀菌产品中的应用。

16、所述菌包括金黄色葡萄球菌、缓慢芽孢杆菌、副溶血性弧菌或大肠埃希菌。

17、本发明具有以下有益效果：

18、本发明通过分离筛选蕲艾内生真菌，得到一株具有抗菌活性的真菌，保藏名称： thyronectria cucurbitulayafef1102，保藏编号：cctcc no：m 2024711，分类命名： thyronectria cucurbitula，通过实验发现，真菌yafef1102制备获得的发酵液粗提物，对金黄色葡萄球菌、缓慢芽孢杆菌、副溶血性弧菌或大肠埃希菌具有较好的抗细菌活性，为缓解致病菌耐药性对人类健康构成的威胁，研究开发新的抗细菌药物提供新的途径。

技术特征：

1.一种蕲艾内生真菌，其特征在于，保藏名称：thyronectria cucurbitulayafef1102，保藏编号：cctcc no：m2024711。

2.权利要求1所述蕲艾内生真菌发酵液。

3.权利要求2所述的发酵液制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，培养条件为：27℃，170rpm的恒温摇床中，培养15d，获得发酵液。

5.权利要求2所述蕲艾内生真菌发酵液粗提物。

6.权利要求5所述发酵液粗提物的制备方法，其特征在于，过滤权利要求2所述发酵液中的菌丝体获得菌液，向菌液中加入乙酸乙酯，超声处理后，静置使其分层后萃取上清液；用旋转蒸发仪冷凝回流并干燥，获得所述真菌发酵液粗提物。

7.一种菌剂，其特征在于，所述菌剂含权利要求1所述的蕲艾内生真菌、权利要求2所述的发酵液或权利要求5所述的发酵液粗提物。

8.一种培养权利要求1所述蕲艾内生真菌的液体培养基，其特征在于，所用液体培养基每100ml中含有0.5g 溴化钾, 0.1g 蛋白胨，1.5g葡萄糖和0.5g酵母粉。

9.权利要求1所述的蕲艾内生真菌、权利要求2所述的发酵液、权利要求5所述的发酵液粗提物或权利要求7所述的菌剂在制备抑菌和/或杀菌产品中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，所述菌包括金黄色葡萄球菌、缓慢芽孢杆菌、副溶血性弧菌或大肠埃希菌。

技术总结
本发明属于微生物防治技术领域，具体公开一种蕲艾内生真菌Thyronectria cucurbitula YAFEF1102及应用，具体的，本发明提供的蕲艾内生真菌，保藏名称：Thyronectria cucurbitula YAFEF1102，保藏编号：CCTCC NO：M2024711，通过实验发现，真菌YAFEF1102制备获得的发酵液粗提物，对金黄色葡萄球菌、缓慢芽孢杆菌、副溶血性弧菌、大肠埃希菌具有较好的抗细菌活性，为缓解致病菌耐药性对人类健康构成的威胁，研究开发新的抗细菌药物提供新的途径。

技术研发人员：余娇君,王毅,原晓龙
受保护的技术使用者：黄冈师范学院
技术研发日：
技术公布日：2024/11/11