一种核酸的提取方法与流程

本申请涉及核酸提取，具体涉及一种核酸的提取方法。

背景技术：

1、核酸是已知生命形式必不可少的组成部分，是分子诊断中的重要标志物。随着对传染病防治的日益关注以及分子生物学检测手段的发展，分子诊断技术在临床诊断、环境检测和食品安全检测等领域受到了广泛的重视和关注，核酸提取就是分子生物学和分子诊断中的关键步骤之一。分子诊断技术通过分析基因组、转录组或微生物的核酸序列来检测疾病、病原体或遗传变异。这些技术的准确性和可靠性在很大程度上依赖于高质量的核酸样品。因此，核酸提取在临床诊断、科研以及生物技术应用中都具有重要意义。

2、其中，磁珠法由于其高效性、易于自动化、高纯度和高产量以及广泛适用性被广泛采用。这种方法主要是通过四氧化三铁表面修饰的二氧化硅或者其他可以与核酸分子特异性结合的材料作为磁珠，在特定盐浓度和ph条件下与核酸分子进行可逆性结合，通过外加磁场的方式实现固液分离和转移。需要使磁珠充分混匀在混合液中，可使得核酸能够充分和磁珠结合，以在后续得到浓度较高的核酸。而目前磁珠的混匀主要是通过垂直、旋转等方式搅拌混合液，搅拌器浸入样品中进行磁珠和核酸的结合，这种方法存在样品污染、磁珠与样本接触的比表面积低等问题，不利于高纯度核酸的提取。

技术实现思路

1、本申请实施例的目的在于提供一种核酸的提取方法，能够通过非接触式的方法将磁珠和核酸结合，可提高核酸的提取纯度。

2、本申请实施例的一方面，提供了一种核酸的提取方法，包括将待测样本、裂解液和磁珠放入反应容器内，所述裂解液裂解所述待测样本释放核酸；

3、对所述反应容器内的溶液进行预设时间的超声波处理，以使所述磁珠分散在所述溶液中并和所述核酸结合；

4、将所述磁珠聚焦在移动棒上；

5、通过所述移动棒将所述磁珠从所述反应容器中转移至后续溶液中，对所述后续溶液进行超声波处理，以使所述磁珠重新分散在所述后续溶液中；

6、从所述后续溶液中移出所述磁珠，以得到所述核酸。

7、可选地，所述裂解液包括钠盐、蛋白变性剂、表面活性剂和醇的混合液，所述表面活性剂的体积浓度为1％～30％，所述醇的体积浓度为5％～40％。

8、可选地，所述对所述反应容器内的溶液进行预设时间的超声波处理，以使所述磁珠分散在所述溶液中并和所述核酸结合，包括：

9、将所述反应容器置于超声换能器上，使所述反应容器与所述超声换能器接触；

10、以所述超声换能器的谐振频率为中心、±0.2khz的范围作为超声工作频率、对所述反应容器内的溶液进行超声扫频。

11、可选地，所述将所述反应容器置于超声换能器上，使所述反应容器与所述超声换能器接触，包括：

12、将所述超声换能器置于所述反应容器的底部；或者，将所述超声换能器置于所述反应容器的四周。

13、可选地，所述超声换能器的使用功率在0～30w之间、超声处理时间在10s～120s之间。

14、可选地，所述将所述磁珠聚焦在移动棒上，包括：

15、采用磁棒作为所述移动棒非接触吸附所述反应容器内的所述磁珠，以使所述磁珠聚集在所述磁棒上。

16、可选地，所述将所述磁珠聚焦在移动棒上，包括：

17、将磁棒移动至磁棒套内，所述磁棒和所述磁棒套一体作为所述移动棒伸进所述反应容器内的溶液中吸附所述磁珠，以使所述磁珠聚集在所述磁棒套上。

18、可选地，所述通过所述移动棒将所述磁珠从所述反应容器中转移至后续溶液中，对所述后续溶液进行超声波处理，以使所述磁珠重新分散在所述后续溶液中，包括：

19、利用所述移动棒将所述磁珠从所述反应容器中移至清洗液，通过超声波处理使所述磁珠分散于所述清洗液；

20、再利用所述移动棒将所述磁珠从所述清洗液中移至洗脱液，通过超声波处理使所述磁珠分散于所述洗脱液，通过所述洗脱液以使结合在所述磁珠上的核酸与所述磁珠脱离。

21、可选地，所述利用所述移动棒将所述磁珠从所述反应容器中移至清洗液，通过超声波处理使所述磁珠分散于所述清洗液之后，所述方法还包括：

22、利用所述移动棒将所述磁珠从所述清洗液中移出；

23、对所述移动棒和所述磁珠进行干燥处理。

24、可选地，所述超声换能器包括压电陶瓷式换能器或者夹心式换能器。

25、本申请实施例提供的核酸的提取方法，包括：将待测样本、裂解液和磁珠放入反应容器内，裂解液裂解待测样本释放核酸；对反应容器内的溶液进行预设时间的超声波处理，以使磁珠分散在溶液中并和核酸结合；将磁珠聚焦在移动棒上；通过移动棒将磁珠从反应容器中转移至后续溶液中，对后续溶液进行超声波处理，以使磁珠重新分散在后续溶液中；从后续溶液中移出磁珠，以得到核酸。通过超声波的方式使磁珠和核酸结合，超声波产生的声流，非接触式的将磁珠分散在溶液中并以涡旋状流动，大幅增加比表面积，超声波的方式不需和溶液接触，就可使磁珠和核酸充分结合，避免了现有直接搅拌带来的污染问题，降低接触污染的几率，有效提高后续核酸提取的纯度。

技术特征：

1.一种核酸的提取方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的核酸的提取方法，其特征在于，所述裂解液包括钠盐、蛋白变性剂、表面活性剂和醇的混合液，所述表面活性剂的体积浓度为1％～30％，所述醇的体积浓度为5％～40％。

3.根据权利要求1所述的核酸的提取方法，其特征在于，所述对所述反应容器内的溶液进行预设时间的超声波处理，以使所述磁珠分散在所述溶液中并和所述核酸结合，包括：

4.根据权利要求3所述的核酸的提取方法，其特征在于，所述将所述反应容器置于超声换能器上，使所述反应容器与所述超声换能器接触，包括：

5.根据权利要求3或4所述的核酸的提取方法，其特征在于，所述超声换能器的使用功率在0～30w之间、超声处理时间在10s～120s之间。

6.根据权利要求1所述的核酸的提取方法，其特征在于，所述将所述磁珠聚焦在移动棒上，包括：

7.根据权利要求1所述的核酸的提取方法，其特征在于，所述将所述磁珠聚焦在移动棒上，包括：

8.根据权利要求1所述的核酸的提取方法，其特征在于，所述通过所述移动棒将所述磁珠从所述反应容器中转移至后续溶液中，对所述后续溶液进行超声波处理，以使所述磁珠重新分散在所述后续溶液中，包括：

9.根据权利要求8所述的核酸的提取方法，其特征在于，所述利用所述移动棒将所述磁珠从所述反应容器中移至清洗液，通过超声波处理使所述磁珠分散于所述清洗液之后，所述方法还包括：

10.根据权利要求3所述的核酸的提取方法，其特征在于，所述超声换能器包括压电陶瓷式换能器或者夹心式换能器。

技术总结
本申请提供一种核酸的提取方法，涉及核酸提取技术领域，包括将待测样本、裂解液和磁珠放入反应容器内，裂解液裂解待测样本释放核酸；对反应容器内的溶液进行预设时间的超声波处理，以使磁珠分散在溶液中并和核酸结合；将磁珠聚焦在移动棒上；通过移动棒将磁珠从反应容器中转移至后续溶液中，对后续溶液进行超声波处理，以使磁珠重新分散在后续溶液中；从后续溶液中移出磁珠，以得到核酸。通过超声波产生的声流，非接触式的将磁珠分散在溶液中并以涡旋状流动，大幅增加比表面积，超声波的方式不需和溶液接触，就可使磁珠和核酸充分结合，避免了现有直接搅拌带来的污染问题，降低接触污染的几率，有效提高后续核酸提取的纯度。

技术研发人员：田良飞,江星宇,王虹军,李冬,陈芝娟,贺贤汉
受保护的技术使用者：杭州博日科技股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2025/1/9