一种紫薯多糖的提取、纯化方法

本发明属于多糖提取，具体涉及一种紫薯多糖的提取、纯化方法。

背景技术：

1、多糖是动、植物和微生物体重要的生物活性大分子，具有众多的生理作用。而且一些多糖已被作为治疗疾病的药物和保健食品来开发，而多糖的提取和分离纯化是多糖后续研究包括多糖结构、功能活性等方面研究的首要和必要工艺，因此，有效提取和分离纯化多糖对于多糖的研究显得尤为重要。

2、目前对于多糖的提取发展了众多的技术，主要包括热水浸提法(或水提醇沉法)、超声波与微波辅助提取、酶法提取等。但这些提取技术各有优缺点，我们应该根据多糖的性质和自身实验条件选择合适的提取技术。近年来，紫薯中丰富的营养成分而引起了人们的关注，但对紫薯多糖的研究报道甚少。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的在于提供一种紫薯多糖的提取、纯化方法，以解决目前紫薯多糖提取方法较少的问题。

2、为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、本发明提供一种紫薯多糖的提取、纯化方法，包括以下步骤，

4、s1、准备紫薯、辅助试剂及仪器设备；

5、s2、将紫薯去皮、清洗、切片、晾干、粉碎并研磨，得紫薯粉末；

6、s3、将紫薯粉末加入无水乙醇中，进行冷凝回流脱脂处理，废弃上清液后加入蒸馏水，浸提；

7、s4、将提取后的混合物离心处理，收集上清液合并，减压浓缩后得浓缩液；

8、s5、向浓缩液中加入无水乙醇，置于过夜并收集多糖沉淀；再将多糖沉淀依次采用乙醇、丙酮洗涤并进行冷冻干燥，而后加入蒸馏水使其溶解；并进行脱蛋白处理，然后向溶解液中加入脱色剂进行脱色处理，搅拌后离心除去脱色剂；

9、s6、将步骤s5去除脱色剂后的溶剂装入透析袋中透析，冻干后得紫薯多糖粗品；

10、s7、称取紫薯多糖后采用蒸馏水复溶，并采用微孔滤膜过滤后装入纤维素柱中，使其静置吸附，而后采用nacl溶液洗脱，收集洗脱液；

11、s8、将收集到的洗脱液用苯酚-硫酸法显色后，用紫外-可见分光光度计测定490nm波长下的吸光度，直至无洗脱峰为止，合并主要吸收峰的洗脱液；

12、s9、将收集的洗脱液经浓缩，透析，冷冻干燥后用蒸馏水复溶，然后用sephadex g-100凝胶进一步分离，用蒸馏水洗脱，并收集洗脱液；采用与deae-52纤维素柱相同条件下监测、收集洗脱液，收集所得各组分收集，冻干后即可得紫薯多糖纯品。

13、进一步地，所述步骤s3中，紫薯粉末与无水乙醇的质量比为0.8-1.2∶6；浸提条件为80℃，共浸提2次，每次2h。

14、进一步地，所述步骤s4中，减压浓缩量为原浓缩前的0.15-0.25倍。

15、进一步地，所述步骤s5中，无水乙醇与浓缩液的体积比为3.8-4.2∶1-1.2，过夜温度为4℃；多糖与蒸馏水质量比为5∶2；脱蛋白处理时采用sevage试剂；脱色剂为硅藻土。

16、进一步地，所述步骤s6中，透析条件为，采用蒸馏水透析72h。

17、进一步地，所述步骤s7中，复溶后紫薯多糖的浓度为5mg/ml；微孔滤膜的孔径为0.45μm；deae-52纤维素柱为φ2×30cm；nacl溶液洗涤次数6次，每次浓度为0.05，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5mol/l，洗涤流速为1.2ml/min。

18、进一步地，所述步骤s8中，测定吸光度时，以管数为横坐标，a490nm为纵坐标绘制洗脱曲线。

19、进一步地，所述步骤s9中，洗脱时以0.5ml/min的流速。

20、本发明的有益效果在于：

21、1、本发明中，通过sevage法脱蛋白，蛋白脱除率为93.14％，与预测结果仅相差0.86％，验证结果表明，实验值与预测值无显著性差异，表明该响应模型能够充分反映预期的优化。

22、2、本发明中，通过deae-52纤维素柱和sephadex g-100凝胶柱对紫薯粗多糖进行分离、纯化，结果表明提取物种几乎不含蛋白质和糖醛酸，且糖含量高达92.52％，说明紫薯粗多糖得到有效提取。

23、3、采用本发明的提取、纯化方法，所得的紫薯多糖纯度高、收率高，纯化的紫薯多糖具有显著的抗氧化活性，对油脂等具有良好的抗氧化效果；此外纯化的紫薯多糖在ph值中性或偏碱性、温度低于45℃、自然光或避光条件下保存，稳定性较好。

24、4、本发明创造提供了一种高效、简便提取、纯化方法，为紫薯多糖的开发利用提供了有力支持。

25、本发明的其他优点、目标和特征将在随后的说明书中进行阐述，并且在某种程度上对本领域技术人员而言是显而易见的，或者本领域技术人员可以从本发明的实践中得到教导。本发明的目标和其他优点可以通过下面的说明书来实现和获得。

技术特征：

1.一种紫薯多糖的提取、纯化方法，其特征在于：包括以下步骤，

2.根据权利要求1所述的一种紫薯多糖的提取、纯化方法，其特征在于：所述步骤s3中，紫薯粉末与无水乙醇的质量比为0.8-1.2∶6；浸提条件为80℃，共浸提2次，每次2h。

3.根据权利要求1所述的一种紫薯多糖的提取、纯化方法，其特征在于：所述步骤s4中，减压浓缩量为原浓缩前的0.15-0.25倍。

4.根据权利要求1所述的一种紫薯多糖的提取、纯化方法，其特征在于：所述步骤s5中，无水乙醇与浓缩液的体积比为3.8-4.2∶1-1.2，过夜温度为4℃；多糖与蒸馏水质量比为5∶2；脱蛋白处理时采用sevage试剂；脱色剂为硅藻土。

5.根据权利要求1所述的一种紫薯多糖的提取、纯化方法，其特征在于：所述步骤s6中，透析条件为，采用蒸馏水透析72h。

6.根据权利要求1所述的一种紫薯多糖的提取、纯化方法，其特征在于：所述步骤s7中，复溶后紫薯多糖的浓度为5mg/ml；微孔滤膜的孔径为0.45μm；deae-52纤维素柱为φ2×30cm；nacl溶液洗涤次数6次，每次浓度为0.05，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5mol/l，洗涤流速为1.2ml/min。

7.根据权利要求1所述的一种紫薯多糖的提取、纯化方法，其特征在于：所述步骤s8中，测定吸光度时，以管数为横坐标，a490nm为纵坐标绘制洗脱曲线。

8.根据权利要求1所述的一种紫薯多糖的提取、纯化方法，其特征在于：所述步骤s9中，洗脱时以0.5ml/min的流速。

技术总结
本发明公开了一种紫薯多糖的提取、纯化方法，属于多糖提取技术领域。S1、将紫薯预处理，得紫薯粉末；S2、紫薯粉末粗提取：加无水乙醇、经凝回流脱脂处、浸提；减压浓缩后得浓缩液；对浓缩液醇沉，加入蒸馏水进行脱蛋白处理，而后脱色处理，离心除脱色剂；透析后冻干得紫薯多糖粗品；S3、紫薯多糖纯化：复溶紫薯多糖，装入纤维素柱中静置吸附，采用NaCl溶液洗脱，收集洗脱液显色后，测定吸光度直至无洗脱峰，合并洗脱液经浓缩、透析，复溶、分离后洗脱，收集洗脱液冻干后得紫薯多糖纯品。本发明所得的紫薯多糖纯度高、收率高，纯化的紫薯多糖具有显著的抗氧化活性，对油脂等具有良好的抗氧化效果；纯化的紫薯多糖自然光或避光条件下保存，稳定性好。

技术研发人员：黄刚良,周石洋,杨文健
受保护的技术使用者：重庆师范大学
技术研发日：
技术公布日：2025/1/9