一株迟缓芽孢杆菌及其在水产养殖中的应用的制作方法

本发明涉及功能微生物筛选与应用，具体涉及一株迟缓芽孢杆菌及其在水产养殖中的应用。

背景技术：

1、随着现代集约化和规模化水产养殖业的发展，应激原增多，导致水产养殖动物免疫抗病力下降，其对疾病的易感性大大增强。人们通常采用抗生素、化学合成药物等防治水产动物疾病，但长期大量使用抗生素的负面效应日益明显地暴露出来了：不仅破坏水产动物肠道正常菌群组成，造成肠道内微生态失调，导致对病原微生物的易感性以及细菌耐药性增强，而且会在体内残留，引起过敏等不良反应，并造成整个生态环境的污染。

2、益生菌通过定殖于水产动物宿主的肠道,加快宿主对其体内的营养物质的吸收利用,提高宿主机体免疫力和肠道菌群结构平衡，与抗生素不同，益生菌不会产生抗性问题，也不会对环境造成污染。相关研究表明益生菌能够促进水产动物的消化和营养吸收，从而提高其生长速度，还可以通过竞争肠道黏膜上的位点，阻止致病菌的附着，从而减少疾病的发生。并且能够分解水中的有害物质，如氨、亚硝酸盐等，降低水质中有毒物质的浓度，从而改善水质。这不仅可以减少对水生动物的毒性，还可以减少对环境的污染。总的来说，它们是一种安全、环保的微生物制剂，可以长期使用而不会影响动物的安全性和产品质量。

3、基于以上优势，筛选出能够在水产养殖业上高效利用的益生菌，对于水产养殖业绿色、健康、可持续发展具有重要意义。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一株迟缓芽孢杆菌及其在水产养殖中的应用。所述迟缓芽孢杆菌筛选自新鲜鱿鱼内脏，对环境耐受性强，能抑制多种病原菌，有助于减少病害发病率，提高水产动物的生长性能和免疫力，增加养殖效益，应用前景广阔。

2、为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、本发明一方面提供了一株迟缓芽孢杆菌(bacillus lentus)，命名为迟缓芽孢杆菌sk001，于2024年9月2日保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为cctcc no:m20241882。

4、本发明一方面提供了所述迟缓芽孢杆菌在制备水产饲料中的应用。

5、本发明还提供了所述迟缓芽孢杆菌在制备具有抑制病原菌功能的生物制品中的应用。

6、所述病原菌选自金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、蜡样芽胞杆菌、副溶血弧菌、嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌、大肠埃希氏菌中的任意一种或多种。

7、本发明还提供了所述迟缓芽孢杆菌在蛋白酶生产中的应用。

8、本发明还提供了一种微生物制剂，包含所述迟缓芽孢杆菌。

9、所述微生物制剂还包括地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、酿酒酵母、双歧杆菌、屎肠球菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌、乳酸片球菌、丁酸梭菌中的任意一种或多种。

10、所述微生物制剂中迟缓芽孢杆菌不低于108cfu/g。

11、本发明还提供了所述微生物制剂在制备水产饲料中的应用。

12、本发明提供的迟缓芽孢杆菌sk001对消化道环境的耐受能力强，在人工胃液、人工肠液中处理3h后，其存活率仍高达85％以上，可更好的通过胃部进入肠道，发挥其益生作用，取得了意料不到的技术效果。

13、本发明提供的迟缓芽孢杆菌sk001能高效抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、蜡样芽胞杆菌、副溶血弧菌、嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌、大肠埃希氏菌等多种病原菌，尤其是对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果最强，抑菌圈直径超过22mm，明显优于市售迟缓芽孢杆菌。该菌株的自聚性和疏水性分别高达43.1％和56.1％，均高于市售迟缓芽孢杆菌，有利于其在水产生物肠道更好的定植。

14、所述迟缓芽孢杆菌sk001能高产蛋白酶，发酵上清液中蛋白酶酶活达到389.1u/ml，明显高于对照组的市售迟缓芽孢杆菌，取得了意料不到的技术效果。

15、所述迟缓芽孢杆菌sk001可作为饲料添加剂广泛应用于水产养殖过程中，能够明显提高水产动物的生长性能和免疫力，增加肠道消化酶活性，提高饲料利用率。与对照组相比，饲喂迟缓芽孢杆菌sk001菌粉的益生菌组淡水石斑鱼的增重率提高了70.8％(p<0.05)，特定生长率提高了52.8％(p<0.05)，淡水石斑鱼血清中总超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性分别提高了24.2％和13.5％，过氧化氢酶、丙二醛含量分别下降了126.7％和9.5％，取得了意料不到的技术效果。

16、所述迟缓芽孢杆菌sk001能更好地诱导产生免疫因子，积极参与机体的免疫防御，从而提高机体免疫防御力。与对照组相比，饲喂迟缓芽孢杆菌sk001菌粉的益生菌组对虾的存活率、增重率、和特定生长率分别提高了25.3％、21.2％、12.9％，饵料系数降低了18.5％；而且益生菌组肝胰腺溶菌酶活力提高了42.0％，取得了意料不到的技术效果。

17、本发明提供的迟缓芽孢杆菌sk001可单独应用，也可与地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、酿酒酵母、双歧杆菌、屎肠球菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌、乳酸片球菌、丁酸梭菌等益生菌复配应用于水产饲料中，有助于增加养殖经济效益，应用前景广阔。

技术特征：

1.一种迟缓芽孢杆菌，其特征在于，所述的迟缓芽孢杆菌的保藏号为cctcc no：m20241882。

2.如权利要求1所述的迟缓芽孢杆菌在制备水产饲料中的应用。

3.如权利要求1所述的迟缓芽孢杆菌在制备具有抑制病原菌功能的生物制品中的应用。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的病原菌为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、蜡样芽胞杆菌、副溶血弧菌、嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌、大肠埃希氏菌中的任意一种或多种。

5.如权利要求1所述的迟缓芽孢杆菌在蛋白酶生产中的应用。

6.一种复合微生物制剂，其特征在于，所述复合微生物制剂包含权利要求1所述的迟缓芽孢杆菌。

7.如权利要求6所述的复合微生物制剂，其特征在于，所述复合微生物制剂还包含地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、酿酒酵母、双歧杆菌、屎肠球菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌、乳酸片球菌、丁酸梭菌中的任意一种或多种的组合。

8.如权利要求6所述的复合微生物制剂，其特征在于，所述复合微生物制剂中迟缓芽孢杆菌的活菌量至少为108 cfu/g。

9.如权利要求6-8任一所述的复合微生物制剂在制备水产饲料中的应用。

技术总结
本发明涉及功能微生物筛选与应用技术领域，具体提供了一种迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus)及其在水产养殖中的应用。所述迟缓芽孢杆菌的保藏号为CCTCC NO：M20241882，具有很强的产蛋白酶能力，能高效抑制多种病原菌，广泛应用于水产饲料中，能够明显提高水产动物的生长性能和免疫力，增加肠道消化酶活性，提高饲料利用率，应用前景广阔。

技术研发人员：戚成震,刘家园,魏万权,王磊,卢赛,刘广,刘雨,张建兴,陈致孝
受保护的技术使用者：青岛玛斯特生物技术有限公司
技术研发日：
技术公布日：2025/3/13