本发明涉及多肽的提取,具体是一种杏鲍菇多肽及其制备方法和应用。
背景技术:
1、人体很多活性物质都是以肽的形式存在的,肽涉及人体的激素、神经、细胞生长和生殖各领域,其重要性在于调节体内各个系统和细胞的生理功能,激活体内有关酶系,促进中间代谢膜的通透性,或通过控制dna转录或影响特异的蛋白合成,最终产生特定的生理效应,可见,肽对于人体具有极其重要的作用。
2、人体在代谢过程中会产生大量的自由基,自由基会通过氧化作用严重损害人体正常细胞,进而诱发人体衰老和疾病的发生,多肽具有极强的抗氧化性,能够有效减小自由基对人体的损伤,然而,人体内天然抗氧化肽含量很小,远不足以抵消自由基对人体细胞的损伤,因此,为了延缓人体衰老与降低人体疾病概率,人工提取抗氧化肽成为一种必然。
3、此外,随着经济发展水平的迅速提高及生活方式的改变,高糖、高脂肪的饮食结构及缺乏运动的生活方式使得糖尿病及其并发症的发病率、死亡率及医疗成本呈现快速上升趋势,糖基化抑制剂可显著减轻糖尿病症状、延缓糖尿病进程及降低糖尿病并发症风险,但是,长期服用这类药物容易引发多种毒副作用,所以,如何提取来源广泛、无毒无害和食用方便的天然晚期糖基化终产物(ages)抑制剂被广泛关注。
4、杏鲍菇作为一种食用菌,在我国大面积栽培,其干品中的蛋白质高达21.44%,远高于香菇、银耳和黑木耳干品的蛋白质含量,是一种理想的人工提取抗氧化肽的原料,此外,杏鲍菇的价格也相对比较低廉,尤其是,在生产过程中会产生大量的菇脚,价格更低,通常被作为饲料处理,因此,如何从杏鲍菇中提取糖基化终产物(ages)抑制剂和抗氧化肽,具有重要的现实意义。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的不足,本发明的目的是一种杏鲍菇多肽及其制备方法和应用,制备的杏鲍菇多肽具有良好的抗氧化活性和抗糖基活性。
2、为了实现上述目的,本发明采用以下技术方案予以实现:
3、一种杏鲍菇多肽的制备方法,包括如下步骤:
4、步骤1、杏鲍菇蛋白的制备
5、步骤1.1、将干燥的杏鲍菇打磨成粉末,按照比例1g:(20~60ml),将杏鲍菇粉末加入去离子水,得到混悬液a;
6、步骤1.2、先用碱液将混悬液a的ph值调节至8~12,再于20~60℃的提取温度下,搅拌提取2h,接着于4℃下,离心,收集上清液,同时,将沉淀物洗涤数次,并收集每次离心洗涤过程中的上清液,然后,将所有收集到的上清液混合备用;
7、步骤1.3、用酸液将步骤1.2收集到的上清液的ph值调节至等电点4.3,离心,收集沉淀并洗涤,得到产物b;
8、步骤1.4、向产物b中加入去离子水,得到溶液c,将溶液c的ph值调节至7,透析,冷冻干燥,得到杏鲍菇蛋白;
9、步骤2、杏鲍菇多肽的制备
10、步骤2.1、将杏鲍菇蛋白溶解于蒸馏水中,在75℃的水浴条件下,加热,得到浓度为21.45mg/ml的杏鲍菇蛋白溶液;
11、步骤2.2、75℃的水浴条件下,按照杏鲍菇蛋白质量的3%~7%,取碱性蛋白酶加入杏鲍菇蛋白溶液,酶解30~150min,接着,将水浴温度升高至95℃,酶解灭活,冷却后,离心,收集上清液,冷冻干燥,得到杏鲍菇多肽。
12、进一步地,所述步骤1.2的碱液是浓度为2.0mol/l的naoh溶液。
13、进一步地,所述步骤1.3的酸液是浓度为2.0mol/l的hcl溶液。
14、进一步地,所述步骤1.2和步骤1.3的离心是以8000r/min的转速,离心20min。
15、进一步地,所述步骤1.2和步骤1.3的洗涤是用去离子水离心洗涤3次。
16、进一步地,所述步骤1.4的透析时间为24h。
17、进一步地,所述步骤2.2的离心是以4000r/min的转速,离心20min。
18、一种杏鲍菇多肽。
19、一种杏鲍菇多肽作为抗氧化肽的应用。
20、一种杏鲍菇多肽作为ages抑制剂的应用
21、本发明与现有技术相比,具有如下技术效果:
22、本发明先从价格低廉的杏鲍菇中提取杏鲍菇蛋白,再从杏鲍菇蛋白提取杏鲍菇多肽,不仅工艺过程简单,而且制备的杏鲍菇多肽具有良好的抗氧化活性,可以有效减少h2o2的氧化损伤,同时,提取的杏鲍菇多肽具有良好的抗糖基化活性,对非酶糖基化过程中三个阶段产物果糖胺、二羰基化合物和荧光性ages均有良好的抑制作用,能够有效保护蛋白质免受活性羰基的攻击,从而阻断ages的形成,对糖尿病的治疗有潜在的应用前景,可见,本发明为开发抗衰老和抗糖尿病的药食品两用产品提供了理论指导。
1.一种杏鲍菇多肽的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的杏鲍菇多肽的制备方法,其特征在于,所述步骤1.2的碱液是浓度为2.0mol/l的naoh溶液。
3.根据权利要求1所述的杏鲍菇多肽的制备方法,其特征在于,所述步骤1.3的酸液是浓度为2.0mol/l的hcl溶液。
4.根据权利要求1所述的杏鲍菇多肽的制备方法,其特征在于,所述步骤1.2和步骤1.3的离心是以8000r/min的转速,离心20min。
5.根据权利要求1所述的杏鲍菇多肽的制备方法,其特征在于,所述步骤1.2和步骤1.3的洗涤是用去离子水离心洗涤3次。
6.根据权利要求1所述的杏鲍菇多肽的制备方法,其特征在于,所述步骤1.4的透析时间为24h。
7.根据权利要求1所述的杏鲍菇多肽的制备方法,其特征在于,所述步骤2.2的离心是以4000r/min的转速,离心20min。
8.一种如权利要求1~7任一项所述方法制备的杏鲍菇多肽。
9.一种如权利8所述的杏鲍菇多肽作为抗氧化肽的应用。
10.一种如权利要求8所述的杏鲍菇多肽作为ages抑制剂的应用。