一株植物乳植杆菌YM-7及其应用

本发明属于食品微生物，具体涉及一株植物乳植杆菌（ lactiplantibacillus plantarum）ym-7及其应用。

背景技术：

1、随着现代生活节奏的加快，氧化应激已成为影响人类健康的重要因素之一。氧化应激是指在生物体内由于活性氧种（ros）的过量产生与抗氧化防御系统失衡而导致细胞损伤。长期氧化应激与多种慢性疾病的发生发展密切相关，包括心血管疾病、癌症、糖尿病以及神经退行性疾病等。因此，寻找有效的抗氧化剂以减轻氧化应激的影响，已成为预防和治疗相关疾病的重要策略。

2、植物乳植杆菌（ lactiplantibacillus plantarum），作为一类广泛存在于发酵食品中的益生菌，因其对宿主健康的多种益处而受到广泛关注。除了改善肠道健康和增强免疫力外，植物乳植杆菌还显示出潜在的抗氧化活性，能够清除自由基，减轻氧化损伤。近年来，关于植物乳植杆菌抗氧化活性的研究逐渐增多，揭示了其在保护细胞免受氧化应激伤害中的重要作用。

技术实现思路

1、本发明提供一株植物乳植杆菌（ lactiplantibacillus plantarum）ym-7，于2024年11月11日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为gdmcc no: 65465；保藏地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼 广东省科学院微生物研究所。

2、本发明另一目的是将上述植物乳植杆菌ym-7应用在制备抑制金黄色葡萄球菌（ staphylococcus aureus）、大肠杆菌（ escherichia coli）、白色念珠菌（ candida  albicans）制剂中，或制备抗氧化制剂。

3、本发明所述制剂的成分（或有效成分）为上述植物乳植杆菌ym-7，还可以加入一种或多种食品生产上可接受的辅料，以改善有效成分的吸收效果或便于使用，如制成胶囊或丸剂、粉剂、片剂、粒剂、口服液和注射液等，即制成适宜的使用剂型。

4、为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

5、1、菌株分离纯化

6、将装有5ml mrs液体培养基的试管经121℃高压蒸汽灭菌20min，取3-5粒豆豉样品（云南传统发酵豆豉）快速接种于试管中，立即塞上胶塞，将试管置于37℃、150r/min下培养24h，在无菌操作台中吸取100μl培养菌液加入到已经分装好的900μl的无菌生理盐水中进行梯度稀释，稀释液涂布在mrs固体培养基上，37℃培养，挑取单菌落在mrs固体培养基上划线纯化，获得菌株ym-7；

7、2、菌株ym-7的鉴定

8、（1）菌株ym-7在mrs固体培养基上的菌落为圆形，革兰氏染色与镜检鉴定表明，该菌株为革兰氏阳性菌，杆状，乳白色，表面光滑湿润，边缘规则，不透明，有光泽。

9、（2）采用dna提取采用试剂盒qiaamp genomic dna and rna kits提取菌株ym-7的基因组 dna，以提取的基因组dna为模板，采用16s rrna 基因通用引物27f（5’-agagtttgatcctggctcag-3’）和1492r（5’-tacgacttaaccccaatcgc-3’）进行pcr扩增，pcr产物送至生工生物工程（上海）股份有限公司测序后，测序结果与ncbi上序列进行比对，结合形态学特征和分子鉴定结果，最终将该菌株鉴定为植物乳植杆菌（ lactiplantibacillus  plantarum）；

10、3、抑菌实验

11、用牛津杯法检测菌株ym-7三种病原菌金黄色葡萄球菌（ staphylococcus  aureus）、大肠杆菌（ escherichia coli）、白色念珠菌（ candida albicans）的作用， 实验结果显示菌株ym-7对3个病原菌均有抑制作用。

12、4、抗氧化实验

13、将活化后的菌株ym-7破碎后，离心取上清液，检测上清液的dpph清除率、羟基自由基以及超氧阴离子自由基清除率，结果显示菌株ym-7的dpph清除率为70.56%，羟基自由基的清除率为25.34%，超氧阴离子自由基清除率为21.35%，因此菌株ym-7具有较好的抗氧化活性。

14、本发明的优点和技术效果：

15、本发明从发酵食品中获得的植物乳植杆菌ym-7，安全性高，其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌具有抑制作用，且具有dpph、羟基自由基以及超氧阴离子自由基的清除效果，因此本发明菌株tn-7能作为食品添加剂使用，为具有抗氧化和抗菌食品添加剂的开发提供了一条新的途径。

技术特征：

1.一株植物乳植杆菌（lactiplantibacillus plantarum）ym-7，其在广东省微生物菌种保藏中心的保藏编号为gdmcc no: 65465。

2.权利要求1所述的植物乳植杆菌ym-7在制备抑制金黄色葡萄球菌（staphylococcus aureus）、大肠杆菌（escherichia coli）、白色念珠菌（candida albicans）制剂中的应用。

3.权利要求1所述的植物乳植杆菌ym-7在制备抗氧化制剂中的应用。

技术总结
本发明公开了一株植物乳植杆菌（Lactiplantibacillus plantarum）YM‑7，其在广东省微生物菌种保藏中心的保藏编号为GDMCC No:65465，从发酵食品中获得的植物乳植杆菌YM‑7，安全性高，其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌具有抑制作用，且具有DPPH、羟基自由基以及超氧阴离子自由基的清除效果，因此本发明菌株TN‑7能作为食品添加剂使用，为具有抗氧化和抗菌食品添加剂的开发提供了一条新的途径。

技术研发人员：李晓然,肖本涛,齐华,柳陈坚
受保护的技术使用者：昆明理工大学
技术研发日：
技术公布日：2025/3/20