专利名称:自备2-芳基丙酸的方法
本发明是关于下述化合物的制法具有药物活性的一种化合物-这种化合物具有式(Ⅰ)的立体结构-或其可作药用的盐或酯(例如，
碱金属或碱土金属盐或三甲基乙酰酯)。式(Ⅰ)中R1代表一种可任意取代的芳基(如苯基或萘基)，它可以存在一个可任意取代的杂环体系中;或者代表一个除碳原子外，还含有一个或多个氮原子、硫原子或氧原子的芳杂环体系，该体系可被任意取代。
众所周知，许多生物活性化合物都以一种立体异构体的混合物形成存在。直到现在，这些混合物常常用于农业和药物领域。这类混合物中常常只有一种立体异构体具有人们所希望的生物活性，所以含有两种或多种立体异构体的混合物的有效性(比单一异构体)至少要低一半，而人们仍然使用各立体异构体的混合物，其主要原因是，用于分离的花费太高，超过了分离后可能增加活性而带来的潜在利益。然而，很明显，现代药物学家愈来愈多地注意到服用下述立体异构体混合物产生的其它后果其中一种或多种立体异构体必须看成杂质，因为它(们)可能没有所需要的治疗作用，甚至会产生所不希望的生理效应，其中包括毒性。
特别是已经发现，有体外抗作炎作用活性的甲氧萘丙酸和异丁苯丙酸都是其S-对映体(旋光性立体异构体)，它的活性可达其对映体的150倍，见S.Adams等人，在“J.Pharm.Pharmac.，28(1976)256”和A.j.Hutt和J.Caldwell在“Clinical Pharmacokinetics 9(1984)371”中所述。
由J.Sugai和K.Mori的文章可知(见Agric.Biol.Chem.48(1984)2501)可以用1-异丁基-4-(1′-甲基辛基)苯-它是有一条适宜的非功能性脂肪链的芳烃-通过微生物氧化来选择性地制备异丁苯丙酸的非活性R-对映异构体。因此，仍然非常需要有一种能得到经济上有吸引力的产量的工业制备这些S-对映异构体的方法。本发明的目的就是提供这样一种方法。
经过广泛的研究和实验，现在已经出乎意料地找到了一种专门制备S-对映体化合物(Ⅰ)的改进合成方法，该方法包括使化合物(Ⅱ)与微生物作用，此微生物能使化合物(Ⅱ)立体选择地被氧化成化合物(Ⅰ)，
其中按重量计至少有70%为S-构型，如果需要，再进一步把化合物(Ⅰ)转化成其可作药用的盐或酯。式Ⅱ中R1的定义同上所述。
更具体地说，本发明是关于生产具有药物活性、S-立体构型占优势的式(Ⅰ)化合物或其可作药用的盐或酯的方法。优先选择的是碱金属盐或碱土金属盐。式(Ⅰ)中R1是可任意取代的芳基(例如，苯基或萘基)，它可以存在于一个可任意取代的杂环体系中;或者代表一个除碳原子外，还含有一个或多个氮原子、硫原子或氧原子的杂环体系，此杂环体系可被任意取代，该方法包括，使化合物(Ⅱ)与能把化合物(Ⅱ)立体有择地氧化成化合物(Ⅰ)的微生物作用。化合物(Ⅰ)中较好的有甲氧萘丙酸、异丁苯丙酸、α-甲基-4-(2-噻吩羰基)苯乙酸、苯氧苯丙酸、酮丙酸、2-(4-氯苯基)-α-甲基-5-苯并噁唑乙酸、6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸、芴丙酸(cicloprofen)、吡丙芬(pirprofen)、2-(对异丁苯基)丙酸1-细胞溶素盐、氟联苯丙酸、2-(3′-氟基-4-联苯基)丙酸、6-氯-5-环己基-2，3-二氢-1H-茚-1-羧酸、叔基丙酸(tertiprofen)、2-(4-环己苯基)丙酸、4-(1，3-二氢-1-氧代-2H-异氮茚-2-基)-α-甲基苯乙酸、2-[4-(反-2-甲基环己基)苯基]丙酸、α-甲基-5H-[1]苯并吡喃并[2，3-b]吡啶-7-乙酸、α-甲基-3-苯基-7-苯并呋喃乙酸(R803)、吩噻嗪丙酸、5-苯甲酰基-α-甲基-2-噻吩乙酸或2-[4-(对溴苯基)-2-噻唑基]丙酸。
按照本发明方法来制备S-构型占优势的甲氧萘丙酸和异丁苯丙酸更好。
根据较好的作法，上述方法是通过选择一种适宜的微生物来实施的，选择标准是能形成S-构型按重量计至少占90%的化合物(Ⅰ)。
适宜的微生物的例子有各种霉菌、酵母类霉菌和酵母。特别是能把化合物(Ⅰ)氧化成甲氧萘丙酸或异丁苯丙酸的微生物，包括属于虫草属霉菌的培养物，尤其是胃虫草属[例如，属于此种属的一个菌株储存在“霉菌培养物中心”(荷兰)(即CBS)储存号为267.85，储存日期为1985年6月7日]或其变种或突变体的培养物。
根据本发明的一种作法，能立体有择地把化合物(Ⅱ)氧化成化合物(Ⅰ)的微生物，是采用一种2-(R1)烷烃(R1的定义同前所述)作为碳源，在一种适宜的培养基中进行选择的。对于能产生甲氧萘丙酸的微生物的选择来讲，宜采用2-(6-甲氧基-2-萘基)烷烃，其中该烷烃为戊烷、庚烷、壬烷时是有利的。适宜培养基的例子有加有维生素溶液和(或)酵母浸取物的PS-Ⅲ盐培养基。
有若干种从自然来源，尤其是从土壤样品中分离出来的微生物是根据上述的筛选方法选出的。像下文所描述的那样，对这些微生物做进一步试验时，它们表现出把化合物(Ⅱ)立体有择地氧化为化合物(Ⅰ)的能力。
在加有维生素溶液和(或)0.01%酵母浸取物的PS-Ⅲ盐培养基中，采用2.5克/升的2-(6-甲氧基-2-萘基)庚烷作为碳源，可从土壤样品中分离得到新发现的本发明微生物。
PS-Ⅲ盐培养基中含有磷酸二氢钾(2.1克/升)、磷酸氢二铵(1.0克/升)、硫酸铵(0.9克/升)、氯化钾(0.2克/升)、二水硫酸钙(0.005克/升)、七水硫酸镁(0.2克/升)、六水硫酸亚铁·硫酸铵(2.5毫克/升)、七水硫酸锌(0.5毫克/升)、四水二氯化锰(0.3毫克/升)、五水硫酸铜(0.15毫克/升)、六水二氯化钴(0.15毫克/升)、硼酸(0.05毫克/升)、二水钼酸钠(0.055毫克/升)、碘化钾(0.1毫克/升)。
pH调到6.8，培养基在120℃灭菌20分钟。
维生素溶液中含有维生素H(0.002毫克/升)、泛酸钙(0.4毫克/升)、肌醇(2.0毫克/升)、烟酸(0.4毫克/升)、盐酸维生素B(0.4毫克/升)、盐酸维生素B(0.4毫克/升)、对氨基苯甲酸(0.2毫克/升)、维生素B(0.2毫克/升)、叶酸(0.01毫克/升)。
pH调到7.0，培养基用一个薄膜过滤器灭菌。
这些新发现的微生物是用凝固琼脂培养基纯化。
这些培养物的样品储存在CBS。用于氧化2-(6-甲氧基-2-萘基)丙烷成甲氧萘丙酸的微生物(用上述分离和选择方法得到的)，包括下列霉菌的培养物霉菌27-2，1-2x(这种霉菌的一个菌株储存在CBS，储存号是256.86，储存日期是1986年5月15日)、酵母类27-1，Ⅰ2(这种菌属的一个菌株储存在CBS，储存号257.86，储存日期1986年5月15日)、酵母类27-2，Ⅱ7(这种菌属的一个菌株储存在CBS中，储存号259.86，储存日期1986年5月15日)、酵母类22-2，Ⅰ5(这种菌属的一个菌株储存在CBS，储存号258.86，储存日期1986年5月15日)以及它们的变种或突变体。
为达到本发明目的，使用以聚合物凝胶固定的上述微生物是有利的。
根据实施本发明方法的一个较好作法，能够把化合物(Ⅱ)转变为S-构型按重量计至少为70%的化合物Ⅰ的微生物必须培养约0.5至10天，然后把其细胞悬浮在液体营养基中，最好是一种最小液体营养基，然后使化合物(Ⅱ)受到这些细胞的作用。上述大约1至10天的培养过程结束后，在把这些细胞悬浮在最小液体营养基中之前，可将其从培养基中分离出来。为了培养用于化合物(Ⅱ)的选择性氧化的各种微生物，可采用普通的培养基，其中含有可吸收的碳源(例如，葡萄糖、乳酸盐、蔗糖等)、可吸收的氮源(例如，硫酸铵、硝酸铵、氯化铵等)，并且含有有机营养源物质(例如，酵母浸取物、麦芽汁胨、肉汁等)以及无机营养源物质(例如磷酸盐、镁、钾、锌、铁以及其它微量金属)。较好的培养基可采用Czapek-Dox培养基、BHI培养基或YEPD培养基，其中可随意地添加一种或多种营养素。
在微生物培养过程中，温度要维持在0℃和45℃之间，pH要维持在3.5和8之间。最好在温度在20和37℃之间、pH在4和7之间的条件下培养微生物。
可以根据任何成熟的方法提供微生物繁殖期间所需要的好氧条件，只要该方法能提供足以满足微生物代谢所需要的氧即可。供氧以供给氧气，特别是空气形式的氧气最方便。在化合物(Ⅱ)向化合物(Ⅰ)转化的过程中，使用上述普通培养基，微生物可以处于生长阶段。
在化合物(Ⅱ)向化合物(Ⅰ)的转化过程中，最好是在一个最小培养基中把微生物基本上控制在非生长状态。最小培养基可采用普通培养基，其中需要时，可含有可吸收的碳源(例如，葡萄糖、乳酸盐、蔗糖等)，需要时，可含有可吸收的氮源(例如硫酸铵、硝酸铵、氯化铵等)，同时含有作为有机营养源的物质(例如酵母浸取物、盐汁、胨、肉汁等)以及作为无机营养源的物质(例如磷酸盐、镁、钾、锌、铁和其它微量金属)。除去可吸收的碳源或氮源，可将微生物控制在非生长状态下。在此期间，温度要维持在0℃和45℃之间，pH要维持在3.5和8之间。最好把微生物保持在温度为20到37℃、pH为4到7的条件下，可根据上文所叙述的方法提供这一阶段所需要的好氧条件，只要所提供的氧既能满足微生物代谢的需要，又能使化合物(Ⅱ)转化成化合物(Ⅰ)即可。通过上述微生物得到的化合物(Ⅰ)可按照用于这类产物的本身已知的方法回收和纯化。
下述实施例可用来说明本发明，但并不能限制本发明的范围。
实施例Ⅰ用胃虫草(Cordyceps militaris)(CBS267.85)把2-(6-甲氧基-2-萘基)丙烷转变为S-2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酸胃虫草系存放在偏斜地置于试管中的凝固了的各Czapek-Dox琼脂培养基上，从这些培养基中把胃虫草接种到加有下列成分的Czapek-Dox培养基上硝酸钠(3克/升)、磷酸氢二钾(1克/升)、七水硫酸镁(0.5克/升)、七水硫酸亚铁(0.01克/升)、麦芽汁(1克/升)、酵母浸取物(1克/升)和蔗糖(20克/升)。pH调至6.5。
在装有100毫升培养基的500毫升缓冲液烧瓶里培养霉菌6天。温度保持在25℃，同时维持振荡及好氧条件。
在培养了6天的培养基中，加入溶于十四烷(50毫克底物/毫升十四烷)中的20毫克2-(6-甲氧基-2-萘基)丙烷。
分析将培养物用85%磷酸酸化到pH2.0，加入少量的硫酸铵，然后用二氯甲烷提取混合物。
在薄层色谱板(Merck，预先用荧光显示剂涂覆的硅胶60F-254薄层板)上对二氯甲烷提取液进行分析。此薄板用体积比为1∶5的乙酸乙酯-己烷混合液作展开剂。将发现含有其比移值(Rf)和甲氧萘丙酸的相同的化合物的各提取液衍生化，形式萘甲酰胺类物质，并用高效液相色谱进行分离。
衍生化方法在N气流中干燥2毫升二氯甲烷提取液。使干燥样品在60℃与200微升苯+10微升亚硫酰氯反应10分钟。
在N气流中干燥反应混合物。
加入5%的溶于干燥二氯甲烷中的萘甲胺(200微升)。反应在室温下进行1小时。在N气流中干燥反应混合物，然后用体积比为2∶1的2毫升异辛烷/氯仿和2毫升1N盐酸提取。
高效液相色谱分析结果表明，每份培养物中含有8.2毫克S-甲氧萘丙酸和0.09毫克R-甲氧萘丙酸。S-和R甲氧萘丙酸对映体的相应分配百分比分别为98.9%和1.1%。
实施例Ⅱ在和例Ⅰ平行的实验中，把从6天培养的老培养物中获得的菌丝体重新接种到50毫升ASM培养基中，同时保持振荡和好氧条件。加入含有如下成分的铵盐培养基(ASM)(加入前要进行高压灭菌)氯化铵(0.54克/升)、磷酸二氢钾0.53克/升)、磷酸氢二钠(0.87克/升)、硫酸钾(0.17克/升)、七水硫酸镁(0.07克/升)、二水氯化钙(0.073克/升)、TK微量元素溶液11.0毫升)和七水硫酸亚铁(0.019克/升)。pH调到7.0。把溶于十四烷中的20毫克2-(6-甲氧基-2-萘基)丙烷底物加到培养物中，在25℃继续培养6天。以下步骤均与实施例Ⅰ中描述的相同提取、薄层色谱分析、衍生化和高效液相色谱分析。
测得每份培养物中含有总量为6.4毫克的S-甲氧萘丙酸和0.03毫克的R-甲氧萘丙酸，相应的对映体分配情况为S-构型占99.5%，R-构型占0.5%。
实施例Ⅲ用胃虫草(Cordyceps militaris)(CBS267.85)将2-(4-异丁基苯基)丙烷转变成S-2-(4-异丁基苯基)丙酸把500毫升一份的若干份胃虫草(Codyceps militaris)在加入的Czapex-Dox培养基中培养，培养在25℃和好氧条件下，在旋转振荡器上进行5天时间。根据“Oxoid手册”(“The Oxoid Manual”)调整后的Czapek-Dox培养基中含有如下成分硝酸钠(2.0克/升)、氯化钾(0.5克/升)、甘油磷酸镁(0.5克/升)、硫酸亚铁(0.01克/升)、硫酸钾(0.35克/升)以及蔗糖(30克/升)。对1升培养物肉汤进行过滤(Whafman No1)，把所得细菌重新悬浮于500毫升ASM培养基中，与0.34克(0.4毫升)2-(4-异丁基苯基)丙烷一起培养5天，培养在25℃及好氧条件下，在振荡器上进行。过滤培养混合物，滤液用1N盐酸酸化到pH2.0，再用二氯甲烷提取。产物用气液色谱鉴定，结果表明有所需要的酸产物存在。二氯甲烷提取液用碳酸氢钠(溶液)提取，(提取液)用1N盐酸酸化，(酸化液)再用二氯甲烷提取。蒸去溶剂，得到2-(4-异丁基苯基)丙酸的粗品。不能产品分成每30毫克1份，在己烷硅胶柱中以5%的乙醚/己烷作为洗脱剂进行纯化。得到S-2-(4-异丁基苯基)丙酸，对此化合物进行气液色谱和薄层色谱分析时，得到单一的组分。
总共得到43毫克做气液色谱和薄层色谱分析时显示为单一组分的S-2-(4-异丁基苯基)丙酸。它的质子磁共振谱(PMR)和外消旋物的一致;PMR(CDCl3)δ0.9(d，6H，CH-(CH3)2);1.5(d，3H，CH-CH3);1.85(m，1H，CH-(CH3)2);2.45(d，2H，-CH2);3.7(q，1H，-CH-CH3);7.1-7.25(m，4H，芳烃的)。使用Spherisorb S 5NH柱(25厘米×4.9毫米内径)，用制备性高效液相色谱除去微量杂质，用含20%异丙醇的己烷/二氯甲烷(60/40，体积比)溶液，以2毫升/分钟的速率进行洗脱。
重复注入洗脱剂，经过3.2分钟，洗脱得到4毫克S-2-(4-异丁基苯基)丙酸。
通过分析与S-(-)-α-甲基苄胺形成的非各种非对映异构体酰胺的组成的方法来测定S-2-(4-异丁基苯基)丙酸的对映体纯度。高效液相色谱的分析结果表明，有90%的非对映异构体对应于S-2-(4-异丁基苯基)丙酸，其保留时间为2.89分钟。保留时间为2.48分钟的10%的非对映异构体对应于R-2-(4-异丁基苯基)丙酸。
实施例Ⅳ使用胃虫草(CBS267.85)的制备性转化过程生产2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酸的一般方法包括，培养若干批微生物，培养是在25℃，在添加有0.1%麦芽汁和0.1%酵母浸取物的Czapek-Dox培养基中进行5天。过滤(Whatman no.1 paper)出2×500毫升培养物中的菌丝体，将其重新悬浮于500毫升铵盐培养基中，再用2毫升二甲基甲酰胺中的200毫克2-(6-甲氧基-2-萘基)丙烷进行处理。在某些情况下，是过滤出500毫升培养物中的菌丝体，将其重新悬浮在含有1毫升二甲基甲酰胺与100毫克2-(6-甲氧基-2-萘基)丙烷的500毫升的培养基中。在25℃，在旋转振荡培养器中培养6天。
培养后过滤得到的滤液用2N盐酸酸化到pH2.0，再用二氯甲烷提取。二氯甲烷提取液用1%的NaHCO3溶液提取除酸。碳酸氢盐提取液用2N盐酸酸化到pH2.0，过滤回收沉淀的酸。分批纯化粗酸把大约30-50毫克的不纯2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酸在用己烷处理过的硅胶(60-120目)柱(1厘米×7厘米)上纯化。用乙醚/己烷混合液洗脱出纯的2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酸，乙醚与己烷的体积比为3∶7。用上文所述的薄层色谱法检查纯度。纯酸样品用丙酮/己烷重结晶。
通过胃虫草(CBS267.85)制备S-2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酸800毫克2-(6-甲氧基-2-萘基)丙烷转化后得到50毫克碳酸氢盐提取物，该提取物经色谱分离后，得到40毫克纯S-2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酸，它在GLC和TLC分析中显示为单一组分，其[α]25D＝+58.1°，(C+1.24，CHCl3)。重结晶后得到熔点为152-153℃的物质(文献记载为152-154℃);[α]25D＝+62.2°(C＝1.08，CHCl3)，(文献记载[α]25D＝+66°)，PMR(CHCl3)δ1.6(d，3H，CH-CH3)，3.92(s，3H，OCH3)，3.88(q，1H，CH)和7-8(m，6H，芳香烃的)，此与商品S-甲氧萘丙酸的一致。
快速原子碰撞质谱在不同的m/z比值处产生信号231[M+H]+，185[M-HCO2H+H]+，323[M+6+H]+，115[G+Na]+及229[M-H]-，321[M+G-H]-(G＝丙三醇)。
用S-(-)-α-甲苄胺把R-和S-2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酸转变成非对映异构体的酰胺并用HPLC法进行分离来测定其光学纯度按已描述的条件，把从胃虫草中分离出的2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酸用S-(-)-α-甲苄胺转变成酰胺，按后文的说明，用高效液相色谱法分析产物，得到以下结果形成的非对映异构体的色谱组成是3.4%的R-2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酰胺(5.73/分钟)和96.6%的S-2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酰胺(6.78分钟);由商品甲氧萘丙酸得到的是5%的R-2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酰胺(4.08分钟)和95%的S-2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酰胺(4.83分钟)。
用HPLC系统分离由RS、R或S-2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酸与R或S-α-甲苄胺作用而形成的非对映异构体酰胺采用带紫外(250毫微米)检测器的Gilson Isocratic HPCL系统。在环境条件下，采用Spherisort S 5NH柱(25厘米×4.9毫米内径)。采用25%的己烷溶液(其中溶质为二氯甲烷-丙醇，9∶1)作为流动相，流速为2毫升/分钟。特征保留时间是，对于S，R和R，S非对映异构体，为4.0分钟;对于S，S和R，R非对映异构体，为4.8分钟。
实施例Ⅴ对以下霉菌菌株试验其氧化2-(6-甲氧基-2-萘基)丙烷的能力∶霉菌27-2，1-2x(CBS256.86)、酵母27-1，Ⅰ2(CBS257.86)、酵母22-2，Ⅰ5(CBS258.86)和酵母27-2，Ⅱ7(CBS259.86)。在30℃，在100毫升的培养基中培养这些菌株48小时。然后于培养物中加入溶于0.4毫升十四烷中的20毫克2-(6-甲氧基-2-萘基)丙烷，继续培养3或4天。在各个时刻用二氯甲烷提取每一种微生物的200毫升培养物两次。形成的甲氧萘丙酸被衍生化成萘甲酰胺，用高效液相色谱分析(参看实施例Ⅰ)。
表Ⅰ微生物 所用培养基 时刻 形成的甲氧 % S % R(天数) 萘丙酸＊＊毫克/升霉菌27-2，1-2x Czapek-Dox 3 3.7 98 2(CBS256.86) 4 7.8 95 5酵母浸取物27-1，Ⅰ2YEPD 3 4.2 81 19(CBS257.86) 4 6.9 84 16酵母22-2，Ⅰ5BHI 3 2.6 83 17(CBS258.86) 4 1.9 83 17酵母27-2，Ⅱ7YEPD 3 2.9 72 28(CBS259.86) 4 3.1 72 28＊Czapek-Dox培养基，和实施例Ⅰ中所用相同。
牛心浸出液(BHI)的组成37克/升(BHI)(Oxoid
)，pH调到7.0，培养基在120℃灭菌20分钟。
YEPD培养基组成10克/升酵母浸取物、20克/升细菌胨、20克/升葡萄糖，PH调到7.0，培养基在110℃灭菌30分钟。＊＊所标出的数值是经过衍生化后形成的甲氧萘丙酸的量，每一数据代表所得到的两个数据的平均值。
权利要求
1.制备式(Ⅰ)的立体有择形式的药物活性化合物或其可作药用的盐或酯-例如，碱金属盐、碱土金属盐或三甲基乙酰酯-的方法，
式(Ⅰ)中R1代表可任意取代的芳基，例如苯基或萘基，它可以存在于一个杂环体系中，该体系可以被取代，或者R1代表一个芳杂环体系，该体系除含碳原子外，还可含有一个或几个氮原子、硫原子或氧原子，此杂环体系可以被任意取代，该方法包括，使式(Ⅱ)的化合物与
能立体有择性地把化合物(Ⅱ)氧化为化合物(Ⅰ)的一种微生物作用而生成化合物(Ⅰ)，化合物(Ⅰ)中按重量计至少有70%是S-构型，如果需要，再把化合物(Ⅰ)转变为其可作药用的盐或酯。
2.根据权利要求
1的方法，其中化合物(Ⅰ)是甲氧萘丙酸、异丁苯丙酸、α-甲基-4-(2-噻吩羰基)苯乙酸、苯氧苯丙酸、酮丙酸、2-(4-氯苯基)-α-甲基-5-苯并噁唑乙酸、6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸、芴丙酸(cicloprofen)、吡丙芬(pirprofen)、2-(对异丁苯基)丙酸1-细胞溶素盐、氟联苯丙酸、2(-3′-氟基-4-联苯基)丙酸、6-氯-5-环己基-2，3-二氢-1H-茚-1-羧酸、叔基丙酸(tertiprofen)、2-(4-环己苯基)丙酸、4-(1，3-二氢-1-氧代-2H-异氮茚-2-基)-α-甲基苯乙酸、2-[4-(反-2-甲基环己基)苯基]丙酸、α-甲基-5H-[1]苯并吡喃并[2，3-b]吡啶-7-乙酸、α-甲基-3-苯基-7-苯并呋喃乙酸(R803)、吩噻嗪丙酸、5-苯甲酰基-α-甲基-2-噻吩乙酸或2-[4-(对溴苯基)-2-噻唑基]丙酸。
3.根据权利要求
2的方法，其中化合物(Ⅰ)是甲氧萘丙酸或异丁苯丙酸。
4.根据权利要求
1-3的方法，其中该微生物能把化合物(Ⅱ)转变成S-构型按重量计至少占90%的化合物(Ⅰ)。
5.根据权利要求
1-4的方法，其中该微生物是一种属于虫草属的霉菌。
6.根据权利要求
5的方法，其中该微生物是胃虫草类，最好是胃虫草(CBS267.85)或是其变种或突变体。
7.根据权利要求
1-4的方法，其中该微生物是在一种适宜的培养基中，以2-(R1)烷烃作为碳源，从自然来源中分离和选择出来的。
8.根据权利要求
7的方法，其中R1代表6-甲氧基-2-萘基，该烷烃最好是戊烷、庚烷或壬烷。
9.根据权利要求
1-4或8的方法，其中该微生物是霉菌，最好是27-2，1-2x(CBS256.86)或是其变种或突变体。
10.根据权利要求
1-4或8的方法，其中该微生物是一种酵母或是酵母类真菌。
11.根据权利要求
10的方法，其中该微生物是酵母27-1，Ⅰ2(CBS257.86)或其变种或突变体。
12.根据权利要求
10的方法，其中该微生物是酵母27-2，Ⅱ7(CBS259.86)或其变种或突变体。
13.根据权利要求
10的方法，其中该微生物是酵母22-2，Ⅰ5(CBS258.86)或是其变种或突变体。
14.根据前述任一权利要求
的方法，其中该微生物是固定在聚合物凝胶上。
15.根据前述任一权利要求
的方法制备的化合物(Ⅰ)或其可作药用的盐或酯，例如化合物(Ⅰ)的碱金属盐或碱土金属盐。
16.根据权利要求
15的化合物，其中按重量计至少有70%为S-构型。
17.根据权利要求
15-16的化合物，其中按重量计至少有90%为S-构型。
18.根据权利要求
1的方法，该方法实质上与前文中参照各实施例所描述的一致。
19.从自然来源中分离和选择下述微生物的方法这类微生物有立体选择地把化合物(Ⅱ)氧化成化合物(Ⅰ)的能力，R1代表一种可任意
取代的芳基，如苯基或萘基，它可以存在于一个任意取代的杂环体系中，或代表一个除碳原子之外，还含有一个或多个氮原子、硫原子或氧原子的芳杂环体系，该体系可以被任意取代，
化合物(Ⅰ)中按重量计至少有70%为S-构型，上述氧化过程是采用2-(R)烷烃作为碳源，在一种适宜的培养基中进行的。
20.根据权利要求
19的方法，其中R1代表6-甲氧基-2-萘基，该烷烃最好是戊烷、庚烷或壬烷。
21.胃虫草(CBS267.85)。
22.霉菌27-2，1-2x(CBS256.86)。
23.酵母27-1，Ⅰ2(CBS257.86)。
24.酵母27-2，Ⅱ7(CBS259.86)。
25.酵母22-2，Ⅰ5(CBS258.86)。
专利摘要
提供了式(I)的药物活性化合物及其可药用盐或酯的制法。该化合物是立体有择的。盐或酯的例子有碱金属盐、碱土金属盐或三甲基乙酰酯。式(I)中R1代表一种可任意取代的芳基如苯基、萘基，它可以存在于一个可任意取代的杂环体系中，或代表一个芳杂环体系，其中除碳原子外还可含一或几个氮、硫或氧原子，该体系可被任意取代，该法包括使式 (II)化合物与能立体有择地氧化化合物(II)的微生物作用形成化合物(I)，化合物(I)中按重量计至少有70％为S构型，如需要可把化合物(I)转变为可药用的盐或酯。
文档编号A61K31/33GK86103879SQ86103879
公开日1987年4月8日 申请日期1986年6月7日
发明者菲利浦·加里思·索马斯, 罗伯特森·布伦·威廉姆, 瓦茨·彼得·道格拉斯, 马特查姆·乔治·威廉姆·约翰, 伯托拉·莫罗·阿蒂利奥, 马尔克斯·阿瑟·弗里德里克, 科格·海茵·希蒙 申请人:吉斯特-布罗卡迪斯公司, 国际壳牌研究有限公司导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan