荸荠皮提取5-异戊烯基金鱼草素的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于天然有机化学领域，涉及一种5-异戊烯基金鱼草素的提取分离方法， 特别是涉及一种从荸荠皮中提取分离5-异戊烯基金鱼草素的方法。
【背景技术】
[0002] 5-异戊稀基金鱼草素（5-Prenylaureusidin)，化学名为5-异戊稀 基-4, 6, 3'，4'-四羟基橙酮，为橙色无定形粉末，溶于甲醇、乙醇，是天然植物中分布较 少的一类黄酮化合物。据报道，5-异戊烯基金鱼草素具有良好的抗氧化、抗真菌、抗微生 物、抑制葡萄糖合成酶等活性。5-异戊烯基金鱼草素可从植物中分离，也可合成制备，已有 外国专利WO 97/26873公开了其合成和抗微生物方面的研宄。该专利公布的合成方法，以 2, 4, 6-三羟基苯与3, 4-二甲氧基苯甲醛为原料，经五步反应合成5-异戊烯基金鱼草素，但 缺点是，合成过程容易带入构型相反的金鱼草素异构体。与合成相比，天然5-异戊烯基金 鱼草素避免了合成过程中带来的异构体，被认为更具安全性。目前还没有发现从植物中提 取天然5-异戊烯基金鱼草素的技术介绍。
[0003] 荸养（Eleocharis tuberosa)，又称马蹄，属莎草科多年生浅水草本植物荸养的地 下球茎，我国大部分地区都有栽培。其中，广西荸荠产量占全国70%，贺州荸荠产量占广西 70%。据文献报道，荸荠有抗菌、抗肿瘤、防治呼吸道疾病、利肠通便和利尿排淋等作用；临 床上可用于治疗咽喉疼痛、痰热咳嗽、热病烦渴、小便不利、痢疾等症。研宄表明，荸荠的活 性物质主要富集在果皮和果肉之间。在荸荠加工过程中，被丢弃的荸荠皮质量约占新鲜荸 荠质量的25%，资源非常丰富。我们在研宄中发现荸荠皮中含有5-异戊烯基金鱼草素，但 目前未见从荸荠皮中提取分离该化合物的文献报道。经中国公开专利检索，没有发现与本 专利申请相同的技术方案。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于：提出一种荸荠皮提取5-异戊烯基金鱼草素的方法。
[0005] 5-异戊烯基金鱼草素，其化学结构式如下：
[0006]
【主权项】
1. 一种荸荠皮提取5-异戊烯基金鱼草素的方法，其具体步骤如下： (1) 将新鲜的荸荠皮风干，粉碎，备用；以重量计，称取荸荠皮粉末1份，加入提取罐中， 每次加入4-10份70%体积百分比的丙酮水溶液，在25°C下浸泡24h，浸泡3次，过滤，合并 滤液，减压浓缩至膏状，获得提取物。 (2) 以重量计，将提取物1份分散在5份体积的水中制成悬浊液，用1-2份水体积的乙 酸乙酯萃取3次，合并萃取液，减压浓缩至干，获得萃取物； (3) 往萃取物中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍萃取物质量的聚酰胺拌样，将甲醇挥发 至干，装柱，连接MCI柱进行中压分离，以40-100%体积百分比的甲醇水溶液为流动相梯度 洗脱，薄层色谱法检测，收集合并流动相浓度为70-90%体积百分比的洗脱液，减压浓缩，获 得粗品A ; (4) 往粗品A中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍质量的聚酰胺拌样，将甲醇挥发至干，转 入聚酰胺色谱柱进行分离，用体积比为3:1-1:1的氯仿-甲醇溶液洗脱，薄层色谱法检测， 收集合并含有5-异戊烯基金鱼草素的洗脱液，减压浓缩，获得粗品B ; (5) 以重量计，将粗品B1份，溶于4-8份甲醇中，加入等体积的水制成悬浊液，用 Sephadex LH-20凝胶色谱柱纯化，用甲醇洗脱，薄层色谱法检测，收集合并含有5-异戊烯 基金鱼草素的洗脱液，减压浓缩，获得粗品C ;将所得粗品C再次用Sephadex LH-20凝胶色 谱纯化，用70%体积百分比的甲醇水溶液洗脱，薄层色谱法检测，收集合并含有5-异戊烯 基金鱼草素的洗脱液，减压浓缩，干燥，获得含量达95%以上的5-异戊烯基金鱼草素产品。
2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（3)中的所述的MCI柱规格 为70X460mm，填充材料为MCI-gel CHP-20P，柱色谱条件为：柱压为80Psi，流动相流速为 50mL/min，检测波长为245nm ;所述的流动相为40-100%体积百分比的甲醇水溶液。
3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（4)中所述的聚酰胺，规格为 200-300目；所用洗脱液为体积比为3:1-1:1的氯仿-甲醇溶液。
【专利摘要】本发明的荸荠皮提取5-异戊烯基金鱼草素的方法，属于天然有机化学领域，其特征在于，以丙酮水溶液为溶剂，提取荸荠皮中的5-异戊烯基金鱼草素，提取物用乙酸乙酯萃取后，萃取物经中压MCI柱色谱和聚酰胺柱色谱分离，然后用Sephadex LH-20凝胶色谱反复纯化，获得含量在95％以上的5-异戊烯基金鱼草素产品。本发明开辟了从天然植物中提取分离5-异戊烯基金鱼草素的新途径，分离效果好，产品纯度高，使一贯被视为废弃物的荸荠皮变废为宝，所选用的层析材料MCI、聚酰胺和凝胶可反复使用，原料易得，资源丰富，生产成本低，可进行规模化生产，满足医药工业需要。
【IPC分类】C07D307-83
【公开号】CN104529961
【申请号】CN201410833115
【发明人】罗杨合, 李行任, 刘珊, 方方, 韦家兴
【申请人】贺州学院
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2014年12月29日