一种提高质粒dna含量在大肠杆菌中菌比含量的培养基的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物医学领域，特别是涉及一种提高质粒DNA含量在大肠杆菌中菌比 含量的培养基。
【背景技术】
[0002] 随着近些年来将重组DNA技术和基因组测序的发展，基因治疗和DNA疫苗的研究 和使用已经取得了很多进展，其中PCR技术已经投入到了实际的医疗检测中。在研究过程 中，携带有外源基因的质粒DNA为基因治疗和DNA疫苗研究开发中使用的主要药物载体，大 量质粒DNA的制备需要大量的培养大肠杆菌来实现制备目的，大肠杆菌的大量繁殖需要有 好的培养基，现有的培养基不能有效的提高大肠杆菌的存活率和生长速度。
【发明内容】
[0003] 为克服现有技术上的不足，本发明目的是提供一种加厚耐用橡胶膜片的制造方 法。
[0004] 为实现本发明的目的，本发明的技术方案如下：
[0005] -种提高质粒DNA含量在大肠杆菌中菌比含量的培养基，每升含有下列配比组 分：
【主权项】
1. 一种提高质粒DNA含量在大肠杆菌中菌比含量的培养基，其特征在于，每升含有下 列配比组分： 酵母粉 5g 蛋白胨或牛肉膏 5g 氯化钠 9g 甘油 IOml 乳糖 5g 梓檬酸 Ig 磷酸氢二钠 IOg 透明质酸钠 〇. 2g 硫酸铵 3g 氯化钙 12g 加去离子水稀释定容至1L， 所述培养基搅拌溶解后，通入少量CO2进入溶液中。
2. 根据权利要求1所述一种提高质粒DNA含量在大肠杆菌中菌比含量的培养基，其特 征在于，将所述培养基置于高压灭菌锅中121°C，30min流通蒸汽灭菌。
3. 根据权利要求2所述的一种提高质粒DNA含量在大肠杆菌中菌比含量的培养基，其 特征在于，所述培养基灭菌后，自然放冷至60~70°C时，加入5%的乙醇20ml，混匀后分装。
4. 根据权利要求3所述的一种提高质粒DNA含量在大肠杆菌中菌比含量的培养基，其 特征在于，在所述分装培养基中，根据需要可加入4-甲基伞酮-β -D-葡萄糖甘酸。
【专利摘要】本发明公开了一种提高质粒DNA含量在大肠杆菌中菌比含量的培养基，涉及生物医学领域，每升含有下列配比组分：酵母粉5g、蛋白胨或牛肉膏5g、氯化钠9g、甘油10ml、乳糖5g、柠檬酸1g、磷酸氢二钠10g、透明质酸钠0.2g、硫酸铵3g、氯化钙12g，在原本的基础LB培养基的基础上减少蛋白胨或牛肉膏的含量，9g的氯化钠加入到1L中，得到与细胞等渗的培养液，氯化钙减少细菌的沉降，帮助阻止细菌絮凝，相互抑制生长，在培养基中通入部分CO2营造稍厌氧环境，增加大肠杆菌耐受性，透明质酸和硫酸铵的加入调节细胞膜通透性，维持水电解质的扩散和运转，提供细胞代谢微环境。
【IPC分类】C12N1-20, C12R1-19
【公开号】CN104651263
【申请号】CN201410801919
【发明人】崔强军, 张政, 刘新亮, 余炼
【申请人】广西大学
【公开日】2015年5月27日
【申请日】2014年12月22日