莫沙必利的活性代谢物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药技术领域，具体涉及莫沙必利的活性代谢物的制备方法及其应 用。
【背景技术】
[0002] 莫沙必利（mosapride)，（±)_4_ 氨基-5-氯-2-乙氧基-N-[[4_(4-氟节 基）-2-吗啉基]甲基]苯甲酰胺，是一强效、选择性苯甲酰胺类5-HT4受体激动剂，作为 新型胃动力药，其越来越多地用于日本和其它一些亚洲国家。莫沙必利具有以下的化学结 构：
【主权项】
1. 一种莫沙必利的活性代谢物，其结构如下：
2. 如权利要求1所述的化合物的制备方法，步骤如下： (1) 代谢物制备的的前期准备 将培养好的雅致小克银汉霉AS3. 156预培养24h后，加入莫沙必利DMF(N，N-二甲基甲 酰胺）溶液，使底物浓度达到200mg/L，转化120h，转化培养物于4000rpm离心20min，收集 上清转化液约3L，置-20°C冷冻，用于制备莫沙必利代谢物。同时，将离心后的菌丝体沉淀 收集在一起，以2倍量的乙酸乙酯超声20min,于4000rpm离心20min,收集上清液,重复以 上步骤两次，合并洗菌丝体的乙酸乙酯，置-20°C冷冻，用于制备莫沙必利代谢物。 (2) 代谢物的分离纯化 将转化液用饱和Na2C03碱化至pH9,以2倍量乙酸乙酯萃取2次，合并有机层，与洗菌 丝体的乙酸乙酯层合并，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，残渣用约8.OmL甲醇-水（7:3,v/v) 复溶，上样至填充有SephadexG10填料的内径约5cm的凝胶柱，以甲醇为洗脱溶剂，每8mL 收集一瓶。洗脱流份经UPLC-MS检测，将含有代谢物的流份合并，减压蒸干，用甲醇溶解，运 用0DS开放柱色谱法，以甲醇-水混合溶剂系统进行梯度洗脱（10:90, 30:70, 50:50, 70:30， 90:10)，每50mL收集一瓶。洗脱流份经UPLC-MS检测，合并含代谢物的流份，减压蒸干；用 甲醇复溶，用制备液相色谱进一步分离纯化即得。所采用的制备液相色谱条件为色谱柱： ZorbaxC18柱（10. 7X250mmI.D.，7iim，美国安捷伦公司）；流动相：甲醇-10mmol/L醋酸 铵水溶液（45:55,v:v)，等度洗脱；流速：20.OmL/min;检测波长274nm;柱温：室温。
3. 如权利要求1所述的化合物在制备胃动力药的应用。
【专利摘要】本发明提供了一种低毒、高效的莫沙必利的活性代谢物，从而为以后临床上成为莫沙必利的替代物。本发明提供的代谢物如下所示： 。
【IPC分类】C12P13-02, C07C237-44, A61K31-166, C12R1-645, A61P1-14
【公开号】CN104693064
【申请号】CN201310667000
【发明人】赵龙山, 孙晓红, 李发美
【申请人】沈阳药科大学
【公开日】2015年6月10日
【申请日】2013年12月10日