一种从甜茶中制备甜茶素的方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及生物技术领域的制备方法，具体说是一种从甜茶中制备甜茶素的方 法。
【背景技术】
[0002] 甜茶，又名广西甜茶，学名Rubus如aviss皿S S, Gee.英文名Sweet tea,是蓄薇科 悬钩子属植物中的一种，为多年生有刺落叶灌木，高l-2m，单叶，矩圆状卵形，长5-lOm，叶 柄长1.5-4畑1。花单生叶胶，白色，直径2-3畑1，垂生；專裂片长矩圆状卵形，渐尖，无毛。聚 合果球形、黄色。它和普通悬钩子不同之处是叶子味甜。甜茶全身是宝，根、茎、叶、果实均 可入茶入药。甜茶叶常用来作为甜味剂加工食品，民间入药用于补肾降压，被誉为神茶，与 罗汉果、合浦珍珠、广西香料等齐名为广西十大名品。甜茶鲜果别名树替，营养丰富，红里透 亮，果肉甜，清香味鲜，肉味独特，特别是富含抗癌物质一踩花酸，被称为第=代水果；其干 果实可作为中药覆盘子（或覆盆子）使用。甜茶叶虽然在广西民间应用已久，但我国八十 年代初药物调查时才发现该个新变种。广西甜茶生长在海拔800-1000m左右的荒山上，主 产区在广西大瑶山地区，主要分布在广西其它地区及广东、湖南、江西等省。悬钩子在我国 其它地方都可见到，却没有该种甜味。因此，学者们认为甜茶应定为一个新变种。
[0003] 据《广西中药标准》记载，广西甜茶有"清热降火、润肺、枯疲、止咳的功效"。被誉 为"神茶"，其药用性和食用性已为地方医药和民间所证实，广西甜茶中还含有3.2% W上 的黄酬、8. 94%的甜茶茶多酪和4-5%的甜茶素。甜茶茶多酪有明显抗氧化、抗突变、防癌、 降低胆固醇、降低血液中低密度脂蛋白、抑制血压上升、抑制血糖上升、抑制血小板凝集、抗 菌、抗食物过敏、改善肠胃微生物环境、消臭的作用，是目前发现最理想的纯天然抗氧化剂， 用途十分广泛。研究发现，甜茶素是一种高甜度的甜味剂，其甜度为庶糖的300倍，它是斯 替维醇（Steviol)和葡萄搪结合而成的二祗武。甜茶素分子式〔32&。〇12,在化学结构上与甜 叶菊武（Stevioside，斯替维武）相似，均由相同的武元组成，其区别仅在位上少接一分 子葡萄搪。广西甜茶中甜茶素的含量一般在4-6% ;广西甜茶中的甜茶素主要存在于甜茶 叶中，其含量受多种因素的影响：首先受产地的影响，不同地区所产的甜茶叶中的甜茶素含 量不一样，广西金秀县所产的甜茶叶中甜茶素的含量最高，其含量高达8. 07%。此外，广西 甜茶中甜茶素的含量与其生长时期有关，不同生长发育阶段叶子中甜茶素的含量有着明显 的差异，嫩叶中最高，成叶次之，落叶最低；甜茶叶中甜茶素的含量与季节也有关系，5月底 较高，6月底开始上升，7、8两月达到最高，9月底W后开始下降，12月底降到最低值。
[0004] 甜茶素是一种低热量甜味剂，是能替代糖的高甜度而低热能且无毒的天然甜味 剂。通过对甜茶的深加工，得到天然健康的活性成分具有很好的市场前景，也符合人们对自 然健康的追求。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从甜茶中制备甜茶素的方法，具有工艺简单，适合生产， 生产成本低等优点。
[0006] 本发明通过W下技术方案实现，具体包括如下步骤：
[0007] 1)原料处理；将甜茶的叶片粉碎；
[000引 2)高压微射流超微粉碎处理；将粉碎后的甜茶按照1:8-10的重量比加入纯净水， 用高速剪切乳化机处理10-20min，转速为8000-12000r/min，然后用高压微射流超微粉碎 设备于25°C进行处理，处理压力为80-120MPa，处理次数为2-4次，得到膏状浆液；
[0009] 3)发酵；将步骤2)得到的膏状浆液经过超高温瞬时灭菌，然后调整P册.5-7. 0， 按体积百分比为10-15%接入培养成熟的乳酸菌液体菌种，放入发酵罐中发酵，发酵温度在 35-37 °C，发酵时间3-化；
[0010] 4)步骤3)得到的发酵液经过超高温瞬时灭菌，离屯、，上清液进行HP20SS树脂柱层 析，再用50-60%的己醇溶液洗脱，经浓缩、喷雾干燥，得到甜茶素。
[0011] 本发明步骤3)中乳酸菌为保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、乳脂链球 菌、两歧双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌。
[0012] 步骤4)所述的HP-20SS树脂柱，树脂用量为上清液重量的40-60倍。
[001引本发明得到的甜茶素，为白色粉末，经HPLC检测，含量在99 % W上。
[0014] 与现有技术相比，本发明的优点：
[0015] 1、现有技术在进行甜茶素等成分的提取时，前处理一般都是W水或己醇等为溶 剂，通过加热提取来将有效成分溶出，而本发明采用高压微射流超微粉碎来处理甜茶原料， 结合乳酸菌发酵，相比加热提取，经过高压超微粉碎作用，使得甜茶茶中含有的咖啡碱、皂 武、踩质、苦味质等成分能充分溶出，利于后续工艺的处理，利于提高活性成分的收率，而 且，避免了高温对甜茶有效成分的破坏。
[0016] 2、现有技术得到的甜茶素含量一般不超过95%之间，本发明采用高压微射流超微 粉碎技术、乳酸菌发酵处理和柱层析吸附技术的结合，使得本发明的技术结合出现质的提 局，相比水提或醇提后柱层析，本发明时间短，甜茶素含量局湘比超临界C〇2流体萃取加柱 层析，本发明得到的甜茶素含量99% W上，提取率90% W上。
[0017] 3、本发明避免了无水己醇、甲醇等大量有机溶剂的使用，更加环保。
【具体实施方式】
[0018] 下面W实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于该些实施例。
[0019] 实施例1 ;
[0020] 一种从甜茶中制备甜茶素的方法，具体包括如下步骤：
[0021] 1)原料处理；将甜茶的叶片100kg粉碎；
[0022] 2)高压微射流超微粉碎处理；将粉碎后的甜茶加入800kg纯净水，用高速剪切乳 化机处理lOmin，转速为120(K)r/min，然后用高压微射流超微粉碎设备于25°C进行处理，处 理压力为lOOMPa，处理次数为3次，得到膏状浆液；
[002引 3)发酵；将步骤2)得到的膏状浆液经过超高温瞬时灭菌，然后调整抑7. 0,按体积 百分比为10%接入培养成熟的保加利亚乳杆菌液体菌种，放入发酵罐中发酵，发酵温度在 35-37°C，发酵时间化；
[0024] 4)步骤扣得到的发酵液经过超高温瞬时灭菌，离心上清液进行HP20SS树脂柱层 析，再用50-60%的己醇溶液洗脱，经浓缩、喷雾干燥，得到甜茶素。
[0025] 实施例2 ;
[0026] 一种从甜茶中制备甜茶素的方法，具体包括如下步骤：
[0027] 1)原料处理；将甜茶的叶片100kg粉碎；
[002引 2)高压微射流超微粉碎处理；将粉碎后的甜茶加入纯净水1000kg，用高速剪切乳 化机处理15min，转速为100(K)r/min，然后用高压微射流超微粉碎设备于25°C进行处理，处 理压力为80MPa，处理次数为4次，得到膏状浆液；
[0029] 3)发酵；将步骤2)得到的膏状浆液经过超高温瞬时灭菌，然后调整P册.5,按体 积百分比为12%接入培养成熟的嗜酸乳杆菌液体菌种，放入发酵罐中发酵，发酵温度在 35-37°C，发酵时间化；
[0030] 4)步骤扣得到的发酵液经过超高温瞬时灭菌，离心上清液进行HP20SS树脂柱层 析，再用50-60%的己醇溶液洗脱，经浓缩、喷雾干燥，得到甜茶素。
[0031] 实施例3;
[0032] 一种从甜茶中制备甜茶素的方法，具体包括如下步骤：
[0033] 1)原料处理；将甜茶的叶片100kg粉碎；
[0034] 2)高压微射流超微粉碎处理；将粉碎后的甜茶加入纯净水9(K)kg，用高速剪切乳 化机处理20min，转速为8000r/min，然后用高压微射流超微粉碎设备于25°C进行处理，处 理压力为120MPa，处理次数为2次，得到膏状浆液；
[0035] 3)发酵；将步骤2)得到的膏状浆液经过超高温瞬时灭菌，然后调整抑7.0,按体 积百分比为15%接入培养成熟的乳脂链球菌液体菌种，放入发酵罐中发酵，发酵温度在 35-37°C，发酵时间化；
[0036] 4)步骤扣得到的发酵液经过超高温瞬时灭菌，离心上清液进行HP20SS树脂柱层 析，再用50-60%的己醇溶液洗脱，经浓缩、喷雾干燥，
[0037] 得到甜茶素。
[003引 结果；
[0039]
【主权项】
1. 一种从甜茶中制备甜茶素的方法，其特征在于，包括如下步骤： 1) 原料处理：将甜茶的叶片粉碎； 2) 高压微射流超微粉碎处理：将粉碎后的甜茶按照1:8-10的重量比加入纯净水，用高 速剪切乳化机处理10-20min，转速为8000-1200()r/min，然后用高压微射流超微粉碎设备 于25°C进行处理，处理压力为80-120MPa，处理次数为2-4次，得到膏状浆液； 3) 发酵：将步骤2)得到的膏状浆液经过超高温瞬时灭菌，然后调整pH6. 5-7. 0,按 体积百分比为10-15%接入培养成熟的乳酸菌液体菌种，放入发酵罐中发酵，发酵温度在 35-37°C，发酵时间 3-4h; 4) 步骤3)得到的发酵液经过超高温瞬时灭菌，离心，上清液进行HP20SS树脂柱层析， 再用50-60 %的乙醇溶液洗脱，经浓缩、喷雾干燥，得到甜茶素。
2. 根据权利要求1所述的一种从甜茶中提取甜茶素的方法，其特征在于：步骤3)中乳 酸菌为保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、乳脂链球菌、两歧双歧杆菌、婴儿双歧杆 菌、长双歧杆菌。
3. 根据权利要求1所述的一种从甜茶中提取甜茶素的方法，其特征在于：步骤4)所述 的HP20SS树脂柱，树脂用量为上清液重量的40-60倍。
【专利摘要】本发明公开了一种从甜茶中制备甜茶素的方法，包括下述步骤:原料处理、高压微射流超微粉碎处理、发酵处理，收集发酵后得到的发酵液，离心，上清液进行HP20SS树脂柱层析，再用50-60％的乙醇溶液洗脱，经浓缩、喷雾干燥，得到甜茶素。具有含量高，提取率高，工艺简单，适合生产，生产成本低等优点。
【IPC分类】C07H1-08, C07H15-256
【公开号】CN104725445
【申请号】CN201510147547
【发明人】覃永亮
【申请人】桂林市一峰食品有限公司
【公开日】2015年6月24日
【申请日】2015年3月31日