一种幽门螺杆菌运送培养基及其制备与应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及微生物学领域，具体涉及一种幽门螺杆菌运送培养基及其制备与应 用。
【背景技术】
[0002] 幽门螺旋杆菌（Helicobacter pylori, Hp)是一种革兰阴性微需氧杆菌。2005年 的诺贝尔生理学和医学奖获得者Warren及Marshall在1983从慢性胃炎病人的胃镜活检 标本中分离出Hp以来，受到国内外医学界众多学者的高度关注。Hp感染呈全球性分布，Hp 和一些上消化道疾病发生有紧密联系，是慢性胃炎、胃十二指肠溃疡的重要致病因素，与胃 癌、胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤发生密切相关，世界卫生组织已将其列为一类致病因子。
[0003] 现阶段的临床检测，主要有侵入性和非侵入性两大类，前者有细菌培养、快速尿酶 试验等，后者有尿呼吸试验、抗体检测等。细菌培养为诊断幽门螺杆菌的金标准。幽门螺杆 菌稳定生长需要依赖微需氧环境，其次在培养时需保持环境相对湿度达到90%以上，以及 最适生长的温度为37°C，pH值为中性。幽门螺杆菌在自然环境中不能生长繁殖，临床从采 集样本到真正开始培养检测还需要一段时间，而这段时间对于幽门螺杆菌的后续培养繁殖 是至关重要的，临床上往往由于样本保存不当，即使采用最好的培养基，也会导致阳性检出 率大大降低。目前国内对标本的运输保存条件研宄得还比较少，或者说是关注度还不高。本 发明解决的正是样本从采集后到开始培养的这段时间如何有效地保证幽门螺杆菌存活率 的问题。
【发明内容】
[0004] 针对现有技术中所存在的缺陷，本发明的目的在于，提供一种幽门螺杆菌运送培 养基，以长时间地保存所采集到的种幽门螺杆菌样本，提高幽门螺杆菌的阳性检出率。
[0005] 本发明的另一目的在于，提供所述幽门螺杆菌运送培养基的制备方法及其应用。
[0006] 本发明的再一目的在于，提供一种提高幽门螺杆菌的阳性检出率的方法。
[0007] 本发明是通过以下技术方案实现的：
[0008] 本发明通过在琼脂中添加还原剂，研发出一种能够提供适合幽门螺杆菌稳定生长 所需气体环境和营养成分的运送培养基。
[0009] 本发明的第一方面提供了一种幽门螺杆菌运送培养基，每1000ml所述幽门螺杆 菌运送培养基中含有：琼脂3. 0-8. 0g ;抗坏血酸5. 0-15. Omg ;葡萄糖5. 0-10. 0g ;甘氨酸 10. 0-50.0 mg ;二硫苏糖醇 5. 0-15. Omg ;硫酸亚铁按 3. 0-8. Omg ;硼氢化钠 3. 0-8. Omg。
[0010] 优选地，每1000ml所述幽门螺杆菌运送培养基中含有：琼脂5. 0g。
[0011] 优选地，每l〇〇〇ml所述幽门螺杆菌运送培养基中含有：琼脂5. 0g，葡萄糖7. 0g，二 硫苏糖醇10. 〇mg。
[0012] 更优选地，每1000ml所述幽门螺杆菌运送培养基中含有：琼脂5. 0g;抗坏血 酸l〇mg ;葡萄糖7. 0g ;甘氨酸30.0 mg ;二硫苏糖醇10.0 mg ;硫酸亚铁按5. Omg ;硼氢化钠 5. Omg〇
[0013] 本发明第二方面提供了一种制备所述幽门螺杆菌运送培养基的方法，包括步骤： 按重量份称取各组分，加入至去离子水中，溶解，高压灭菌，分装即可。
[0014] 本发明第三方面提供了所述幽门螺杆菌运送培养基在运送幽门螺杆菌中的用途。
[0015] 优选地，所述用途为将所述幽门螺杆菌运送培养基用于运送幽门螺杆菌样本以提 高幽门螺杆菌阳性检出率。
[0016] 本发明的第四方面提供了一种运送幽门螺杆菌样本的方法，包括步骤：将采集的 幽门螺杆菌样本放入所述幽门螺杆菌运送培养基中运送。
[0017] 本发明的第五方面还提供了一种提高幽门螺杆菌阳性检出率的方法，包括步骤： 将采集的幽门螺杆菌样本放入前述幽门螺杆菌运送培养基运送，再进行后续的培养检测。
[0018] 本发明的有益效果在于：
[0019] (1)本发明的幽门螺杆菌转运培养基配制简单，成本低廉。
[0020] (2)本发明的幽门螺杆菌运送培养基为半固体培养基，运输方便，易携带。克服了 液体状的培养基在运输过程中容易与瓶口接触，导致开盖关盖染菌几率大大提高的缺陷。 而本发明的半固体的培养基由于其流动性差，就大大降低这种染菌情况的发生。
[0021] ⑶本发明所添加的还原剂，能有效地保证幽门螺杆菌的一种微需氧环境，因而能 尽可能长时间保存临床样本的活性状态，在非培养状态下存活的时间可达48h以上，有利 于标本远距离的转运，利于医院和检验人员的灵活安排标本的检验时间。
[0022] (4)本发明的幽门螺杆菌运送培养基由于能长时间保存样本的活性状态，因而对 后续的培养有很好的促进作用，能够避免采集到的幽门螺杆菌变成非可培养态的状态，大 大提高阳性检出率。与以往不采用的转运培养基相比，采用本发明的转运培养基，阳性检出 率提高40%以上。
【附图说明】
[0023] 图1 :为本发明半固体状的转运培养基示意图。
[0024] 图2 :为本发明实施例5采样具体流程示意图。
【具体实施方式】
[0025] 在进一步描述本发明【具体实施方式】之前，应理解，本发明的保护范围不局限于下 述特定的具体实施方案；还应当理解，本发明实施例中使用的术语是为了描述特定的具体 实施方案，而不是为了限制本发明的保护范围。
[0026]当实施例给出数值范围时，应理解，除非本发明另有说明，每个数值范围的两个端 点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义，本发明中使用的所有技术和 科学术语与本技术领域技术人员通常理解的意义相同。除实施例中使用的具体方法、设备、 材料外，根据本技术领域的技术人员对现有技术的掌握及本发明的记载，还可以使用与本 发明实施例中所述的方法、设备、材料相似或等同的现有技术的任何方法、设备和材料来实 现本发明。
[0027] 除非另外说明，本发明中所公开的实验方法、检测方法、制备方法均采用本技术 领域常规的分子生物学、生物化学、染色质结构和分析、分析化学、细胞培养、重组DNA技 术及相关领域的常规技术。这些技术在现有文献中已有完善说明，具体可参见Sambrook等MOLECULARCLONING:ALABORATORYMANUAL，Secondedition，ColdSpringHarbor LaboratoryPress，1989andThirdedition，2001;Ausubel等，CURRENTPROTOCOLSIN MOLECULARBIOLOGY,Johnffiley&Sons,NewYork,1987andperiodicupdates；theseries METHODSINENZYMOLOGY,AcademicPress,SanDiego；ffolffe,CHROMATINSTRUCTUREAND FUNCTION,Thirdedition,AcademicPress,SanDiego,1998 ；METH0DSINENZYMOLOGY, Vol. 304,Chromatin(P.M.ffassarmanandA.P.ffolffe,eds.),AcademicPress，SanDiego， 1999;和METHODSINMOLECULARBIOLOGY，Vol. 119,ChromatinProtocols(P.B.Becker， ed.)HumanaPress，Totowa，1999 等。
[0028] 实施例1
[0029] 本发明所述的运送培养基配制方法为，按下表组分称量：
【主权项】
1. 一种幽门螺杆菌运送培养基，每1000 ml所述幽门螺杆菌运送培养基中含有：琼脂 3. 0-8.Og;抗坏血酸 5. 0-15.Omg;葡萄糖 5. 0-10.Og;甘氨酸 10. 0-50.Omg;二硫苏糖醇 5. 0-15.Omg;硫酸亚铁按 3. 0-8.Omg;硼氢化钠 3. 0-8.Omg。
2. 根据权利要求1所述的幽门螺杆菌运送培养基，其特征在于，每1000ml所述幽门螺 杆菌运送培养基中含有：琼脂5. Og。
3. 根据权利要求1所述的幽门螺杆菌运送培养基，其特征在于，每1000 ml所述幽门螺 杆菌运送培养基中含有：琼脂5. 0g，葡萄糖7. 0g，二硫苏糖醇10.Omg。
4. 根据权利要求1所述的幽门螺杆菌运送培养基，其特征在于，每1000ml所述幽门螺 杆菌运送培养基中含有：琼脂5.Og;抗坏血酸10.Omg;葡萄糖7.Og;甘氨酸30.Omg;二硫苏 糖醇10.Omg;硫酸亚铁按5.Omg;硼氢化钠5.Omg。
5. -种制备如权利要求1~4任一权利要求所述幽门螺杆菌运送培养基的方法，包括 步骤：按重量份称取各组分，加入至去离子水中，溶解，高压灭菌，分装即可。
6. 如权利要求1~4任一权利要求所述幽门螺杆菌运送培养基在运送幽门螺杆菌样本 中的用途。
7. 根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述用途为将所述幽门螺杆菌运送培养 基用于运送幽门螺杆菌样本以提高幽门螺杆菌阳性检出率。
8. -种运送幽门螺杆菌样本的方法，包括步骤：将采集的幽门螺杆菌样本放入如权利 要求1~4任一权利要求所述幽门螺杆菌运送培养基中运送。
9. 一种提高幽门螺杆菌阳性检出率的方法，包括步骤：将采集的幽门螺杆菌样本先放 入如权利要求1~4任一权利要求所述幽门螺杆菌运送培养基中运送，再进行后续的培养 检测。
【专利摘要】本发明涉及微生物学领域，具体涉及一种幽门螺杆菌运送培养基及其制备与应用。所述运送培养基包括琼脂和还原剂等，能有效地保证幽门螺杆菌的一种微需氧环境，因而能尽可能长时间保存临床样本的活性状态，在非培养状态下存活的时间可达48h以上，有利于标本远距离的转运，利于医院和检验人员的灵活安排标本的检验时间。本发明的幽门螺杆菌运送培养基由于能长时间保存样本的活性状态，因而对后续的培养有很好的促进作用，能够避免采集到的幽门螺杆菌变成非可培养态的状态，大大提高阳性检出率。与以往不采用的转运培养基相比，采用本发明的转运培养基，阳性检出率提高40%以上。
【IPC分类】C12Q1-04, C12N1-20, C12R1-01
【公开号】CN104762235
【申请号】CN201510167773
【发明人】郭尧
【申请人】上海千麦博米乐医学检验所有限公司
【公开日】2015年7月8日
【申请日】2015年4月10日