单一核甘酸突变型的引物组与检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种引物组与检测方法，特别是涉及一种单一核甘酸突变型的引物 组与检测方法。
【背景技术】
[0002] 目前针对全球及华人发生率与死亡率高的癌症为主要研宄标的，例如：开发以非 侵入式诊断策略进行结直肠癌早期肿瘤基因诊断标记的研发；针对肺癌的标靶与化疗用药 后复发、转移与抗药性，开发循环肿瘤细胞捕获技术、验证预后突变基因群检测，监控肿瘤 化疗与靶向用药的疗效等。都需要高阶基因组技术平台、转化医学研宄与验证为解决方案， 满足这些医疗上还未被解决的急迫需求。
[0003] 传统疾病诊断都通过临床经验、病理检测、与细胞检测作为依据，有灵敏度的限 制，也无法做到早期发现早期治疗，或提早预测提早预防。
【发明内容】
[0004] 本发明所要解决的技术问题是提供一种单一核甘酸突变型的引物组与检测方法， 其对疾病做到预测、预防等积极主动管理，做到早期发现早期治疗，或提早预测提早预防。
[0005] 本发明是通过下述技术方案来解决上述技术问题的：本发明提供一种单一核甘酸 突变型的引物组，其特征在于，其包括五十二组扩增引物对，其分别对应下表组号的扩增引 物对：
【主权项】
1. 一种单一核甘酸突变型的引物组，其特征在于，其包括五十二组扩增引物对，其分别 对应下表组号的扩增引物对：
O
2. -种单一核甘酸突变型的检测方法，其特征在于，其包括以下步骤： 步骤一，采集待检全血样本，提取循环肿瘤DNA ; 步骤二，将获取的DNA产物加入扩增引物对进行油包水扩增反应； 步骤三，使用去稳定剂以及磁珠纯化扩增产物，去除产物中的油以及残留在反应体系 中的寡核苷酸； 步骤四，将经过纯化处理后的扩增产物加入测序转接头以及条形码序列，进行延伸反 应； 步骤五，使用磁珠纯化延伸产物； 步骤六，将纯化好的延伸产物进行DNA质量评估； 步骤七，评估通过的延伸产物直接进行第二代测序仪上机检测； 步骤八，读取并分析检测数据，确认样本的肿瘤基因的单一核甘酸突变型。
【专利摘要】本发明公开了一种单一核甘酸突变型的引物组与检测方法，该方法包括以下步骤：步骤一，采集待检全血样本，提取循环肿瘤DNA；步骤二，将获取的DNA产物加入扩增引物对进行油包水扩增反应；步骤三，去除产物中的油以及残留在反应体系中的寡核苷酸；步骤四，将经过纯化处理后的扩增产物加入测序转接头以及条形码序列，进行延伸反应；步骤五，使用磁珠纯化延伸产物；步骤六，将纯化好的延伸产物进行DNA质量评估；步骤七，评估通过的延伸产物直接进行第二代测序仪上机检测；步骤八，读取并分析检测数据。本发明对疾病做到预测、预防等积极主动管理，做到早期发现早期治疗，或提早预测提早预防。
【IPC分类】C12N15-11, C12Q1-68
【公开号】CN104830856
【申请号】CN201510270886
【发明人】杨鑫, 陈根德, 童凯泽, 张天昫, 陈昱廷, 张汉铭
【申请人】上海基龙生物科技有限公司
【公开日】2015年8月12日
【申请日】2015年5月26日