桑葚花色苷的提取工艺的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种植物提取方法，具体涉及一种桑葚花色苷的提取工艺。
【背景技术】
[0002] 桑葚又名桑果桑枣，在我国南方及新疆等地产量较大，桑葚果实中含有丰富的活 性蛋白、维生素、氨基酸、胡萝卜素、矿物质等成分。桑葚中含有丰富的花色苷，花色苷是 由花色苷培基与糖通过糖苷键结合而成的一类多酚类化合物，广泛存在于植物的花、果实、 茎、叶和根器官的细胞液中。由于其独特的功能性，而被应用于清除体内自由基、抗肿瘤、抗 癌、抗炎、抑制脂质过氧化和血小板凝集、预防糖尿病、减肥、保护视力等。花色甙作为一种 天然色素，安全、无毒，且对人体具有许多保健功能，已被应用于食品、保健品、化妆品、医药 等行业。
[0003] 花色苷的提取纯化方法是现将桑葚采用溶剂萃取法、超临界流体萃取法、超声波 辅助提取法或者酶法提取得到花色苷粗提取，其中仍含有胶质、淀粉、糖类、脂肪、有机酸 减、无机盐、金属离子等，甚至有特殊的异味，然后再采用吸附解析法、膜分离法进行进一步 纯化。由于花色苷性质不稳定，在提取纯化过程中，花色苷会发生降解而引起褪色，提取的 花色苷色价低，着色力差。
【发明内容】
[0004] 本发明要解决的技术问题是提供一种桑葚花色苷的提取工艺，该工艺提取的桑葚 花色苷性质稳定，色价高。
[0005] 本发明提供的技术方案是提供一种从桑葚中提取花色苷的方法，包括以下步骤：
[0006] 1)将桑葚破碎，加入体积浓度为40~50 %且pH值为2. 0~4. 0的酸化乙醇回流 提取1~3次，每次提取1~3h，将提取液合并，过滤，滤液即为花色苷粗提液；
[0007] 2)将花色苷粗提液上HPD-300型大孔树脂柱，收集流出液，用蒸馏水洗柱至无色， 再用体积浓度为40~50%乙醇溶液洗柱，收集乙醇洗脱液；
[0008] 3)将步骤2)中的流出液上AB-8型大孔树脂柱，用体积浓度为80~95%乙醇溶 液洗柱，收集乙醇洗脱液；
[0009] 4)将步骤2)和步骤3)的乙醇洗脱液合并，减压浓缩回收乙醇，真空冷冻干燥，即 得桑葚花色苷粉末。
[0010] 步骤2)中，花色苷粗提物的上柱流速为2. 0~3. 5BV/h，蒸馏水洗柱速度为1~ 3BV/h，乙醇洗柱速度为2. 0~3. 5BV/h。
[0011] 步骤3)中，流出液的上柱流速为2. 0~3. 5BV/h，乙醇洗柱速度为2. 0~3. 5BV/ h〇
[0012] 步骤4)中，所述减压浓缩是指在-0· 05~-0· 09MPa、45~55°C下进行。
[0013] 将花色苷粗提液先上HPD-300型大孔树脂柱，该树脂为非极性树脂，其平均孔径 为5. 0~5. 5nm，比表面积为800~870m2/g，对苷类物质的吸附能力较强，再加之其孔径较 小，与花色苷分子刚好相适应，HPD-300型树脂会优先吸附花色苷直至饱和，而对其他杂质 的吸附能力大大降低，大大增加了后续乙醇洗脱液中花色苷的纯度。而粗提液中的黄酮醇 类、黄酮类、多糖类和蛋白质等大分子物质则无法进入树脂孔，不经吸附直接流出，因此，流 出液中含有大量的黄酮醇类、多糖类和蛋白质等大分子物质。
[0014] 将HPD-300型大孔树脂柱的流出液上AB-8型大孔树脂柱，AB-8型大孔树脂为弱 极性树脂，其平均孔径为13. 0~14. Onm，比表面积为480~520m2/g，由于AB-8型大孔树 脂孔径较大，流出液中的大分子多糖和蛋白质仍然无法通过AB-8型树脂孔，但黄酮醇类和 黄酮类物质则可以顺利进入树脂孔内并被树脂吸附，用80~95v%乙醇溶液洗柱，即可将 黄酮醇类和类黄酮类物质洗脱下来。
[0015] 将步骤2)中的乙醇洗脱液和步骤3)的乙醇洗脱液混合，即将花色苷与黄酮类和 黄酮醇类物质混合，黄酮类物质和黄酮醇类物质通过氢键和疏水键与花色苷形成复合物， 使花色苷稳定性提高，而且复合物使花色苷对光的吸收在可见光区明显红移，同时增大其 吸光系数，从而大大提高了终产品的色价，从而提高产品的着色力。
[0016] 与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
[0017] 1)采用HPD-300型大孔树脂可以最大限度吸附花色苷，又不吸附其他杂质，经乙 醇洗脱后，洗脱液中花色苷的纯度高。
[0018] 2)将HPD-300型大孔树脂的流出液再经AB-8型大孔树脂吸附，乙醇洗脱后，洗脱 液中黄酮醇和黄酮类物质纯度较高。
[0019] 3)将两组洗脱液混合，使得花色苷与黄酮醇、黄酮类物质形成复合物，大大增强成 品花色苷的稳定性和色价。
【具体实施方式】
[0020] 以下具体实施例对本发明作进一步阐述，但不作为对本发明的限定。
[0021] 实施例1
[0022] 1)将Ikg桑葚破碎，加入体积浓度为40%且pH值为2. O的酸化乙醇回流提取1 次，每次提取lh，将提取液合并，过滤，滤液即为花色苷粗提液；
[0023] 2)将花色苷粗提液上HPD-300型大孔树脂柱，花色苷粗提物的上柱流速为2. OBV/ h，收集流出液，用蒸馏水洗柱至无色，蒸馏水洗柱速度为lBV/h，再用体积浓度为40%乙醇 溶液洗柱，乙醇洗柱速度为2. OBV/h，收集乙醇洗脱液；
[0024] 3)将步骤2)中的流出液上AB-8型大孔树脂柱，上柱流速为2. OBV/h，用体积浓度 为80%乙醇溶液洗柱，乙醇洗柱速度为2. OBV/h，收集乙醇洗脱液；
[0025] 4)将步骤2)和步骤3)的乙醇洗脱液合并，在-0. 05MPa、45°C下减压浓缩回收乙 醇，真空冷冻干燥，即得桑葚花色苷粉末。经称重，桑葚花色苷粉末重量为I. 58g，纯度为 86. 1% 〇
[0026] 按文献报道的方法（江苏农业学报，2004, 20(2) :111~115)测定桑葚花色苷提 取物的色价。将桑葚花色苷粉末配制成质量浓度为0. 025%的溶液，放入Icm厚的比色杯， 在535nm波长下测定不同浸提条件下提取液的吸光度A，并以此A值计算色价。其色价计算 的方法按下式进行Ε==Α/π?
[0027] 式中，A为吸光度；m为样品的质量（g) ;1%为样品浓度；Icm为比色皿最大吸收波 长下的吸光度值。
[0028] 经计算，桑葚花色苷粉末的色价为110。
[0029] 实施例2
[0030] 1)将Ikg桑葚破碎，加入体积浓度为50%且pH值为4. 0的酸化乙醇回流提取3 次，每次提取3h，将提取液合并，过滤，滤液即为花色苷粗提液；
[0031] 2)将花色苷粗提液上HPD-300型大孔树脂柱，花色苷粗提物的上柱流速为3. 5BV/ h，收集流出液，用蒸馏水洗柱至无色，蒸馏水洗柱速度为3BV/h，再用体积浓度为50%乙醇 溶液洗柱，乙醇洗柱速度为3. 5BV/h，收集乙醇洗脱液；
[0032] 3)将步骤2)中的流出液上AB-8型大孔树脂柱，上柱流速为3. 5BV/h，用体积浓度 为95%乙醇溶液洗柱，乙醇洗柱速度为3. 5BV/h，收集乙醇洗脱液；
[0033] 4)将步骤2)和步骤3)的乙醇洗脱液合并，在-0. 09MPa、55°C下减压浓缩回收乙 醇，真空冷冻干燥，即得桑葚花色苷粉末。经称重，桑葚花色苷粉末重量为I. 62g，纯度为 86. 1%。按照实施例1的方法计算色价为123。
[0034] 实施例3
[0035] 1)将Ikg桑葚破碎，加入体积浓度为45%且pH值为3. 0的酸化乙醇回流提取2 次，每次提取2h，将提取液合并，过滤，滤液即为花色苷粗提液；
[0036] 2)将花色苷粗提液上HPD-300型大孔树脂柱，花色苷粗提物的上柱流速为3BV/h， 收集流出液，用蒸馏水洗柱至无色，蒸馏水洗柱速度为2BV/h，再用体积浓度为45%乙醇溶 液洗柱，乙醇洗柱速度为3BV/h，收集乙醇洗脱液；
[0037] 3)将步骤2)中的流出液上AB-8型大孔树脂柱，上柱流速为3BV/h，用体积浓度为 90%乙醇溶液洗柱，乙醇洗柱速度为3BV/h，收集乙醇洗脱液；
[0038] 4)将步骤2)和步骤3)的乙醇洗脱液合并，在-0. 07MPa、50°C下减压浓缩回收乙 醇，真空冷冻干燥，即得桑葚花色苷粉末。经称重，桑葚花色苷粉末重量为I. 63g，纯度为 86. 1%。按照实施例1的方法计算色价为116。
【主权项】
1. 桑葚花色苷的提取工艺，其特征在于：包括以下步骤： 1) 将桑葚破碎，加入体积浓度为40~50 %且pH值为2. O~4. O的酸化乙醇回流提取 1~3次，每次提取1~3h，将提取液合并，过滤，滤液即为花色苷粗提液； 2) 将花色苷粗提液上HPD-300型大孔树脂柱，收集流出液，用蒸馏水洗柱至无色，再用 体积浓度为40~50%乙醇溶液洗柱，收集乙醇洗脱液； 3) 将步骤2)中的流出液上AB-8型大孔树脂柱，用体积浓度为80~95%乙醇溶液洗 柱，收集乙醇洗脱液； 4) 将步骤2)和步骤3)的乙醇洗脱液合并，减压浓缩回收乙醇，真空冷冻干燥，即得桑 葚花色苷粉末。2. 根据权利要求1所述的桑葚花色苷的提取工艺，其特征在于：步骤2)中，花色苷粗 提物的上柱流速为2. 0~3. 5BV/h，蒸馏水洗柱速度为1~3BV/h，乙醇洗柱速度为2. 0~ 3. 5BV/h〇3. 根据权利要求1所述的桑葚花色苷的提取工艺，其特征在于：步骤3)中，流出液的 上柱流速为2. 0~3. 5BV/h，乙醇洗柱速度为2. 0~3. 5BV/h。4. 根据权利要求1所述的桑葚花色苷的提取工艺，其特征在于：步骤4)中，所述减压 浓缩是指在-〇. 05~-0. 09MPa、45~55°C下进行。
【专利摘要】本发明提供了一种桑葚花色苷的提取工艺，包括以下步骤：1)将桑葚破碎，加入酸化乙醇回流提取，得到花色苷粗提液；2)将花色苷粗提液上HPD-300型大孔树脂柱，收集流出液，用蒸馏水洗柱至无色，再用体积浓度为40～50％乙醇溶液洗柱，收集乙醇洗脱液；3)将步骤2)中的流出液上AB-8型大孔树脂柱，用体积浓度为80～95％乙醇溶液洗柱，收集乙醇洗脱液；4)将步骤2)和步骤3)的乙醇洗脱液合并，减压浓缩回收乙醇，真空冷冻干燥，即得桑葚花色苷粉末。本发明提取的桑葚花色苷性质稳定，色价高。
【IPC分类】C07H1/08, C09B61/00, C07H17/065, C09B67/54
【公开号】CN105061529
【申请号】CN201510541533
【发明人】文继承
【申请人】桂林茗兴生物科技有限公司
【公开日】2015年11月18日
【申请日】2015年8月31日