一种高纯度岩藻多糖的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明公开了一种高纯度岩藻多糖的制备方法，属于多糖类的制备技术领域。
【背景技术】
[0002]岩藻多糖又叫褐藻多糖，是褐藻中所固有的细胞间多糖，存在于细胞壁基质中。其功能可能是当低潮时藻体暴露在大气中有吸潮防干的作用。研究表明褐藻多糖具有一定的抗高血脂和抑制肿瘤的药物活性，近几年已引起药学研发人员的关注，产品可生产出抗肿瘤、抗病毒、降血脂的天然活性药物，用于肿瘤、心脏血管疾病及肾功能疾病的治疗，也可生产出抗氧化、降血脂、提高人体免疫力的保健品。
[0003]总结分析现有从海藻中提取岩藻多糖的方法，主要包括水提法和酸提法两种。本发明采用高效清洁的生物酶解法将岩藻多糖从海藻中提取出来，不仅克服了传统水提法和酸提法提取岩藻多糖，其提取物中有效成分和结构易被降解破坏的弊端；此外，酶法提取还具有适用范围广，岩藻多糖收率与纯度高的特点；更值得一提的是酶法提取得到的岩藻多糖多为低分子量多糖，更易于人体吸收利用。
[0004]目前，海藻破碎都是机械破碎或酶法破壁，提取温度在80?100°C，提取时间一般在4?6小时，提取次数在两次以上，采用碱性、中性或酸性溶液浸泡或搅拌提取，提取得率在1%?3%，但浸提液中蛋白质等杂质较多，而且高温还可能引起多糖分解。虽然可以采用氢氧化钠及甲醛法等对藻体或浸提液进行预处理减少杂质含量，但预处理往往会造成多糖损失达10%以上。
【发明内容】
[0005]本发明主要解决的技术问题:针对目前目前传统提取岩藻多糖的过程中，浸提液中杂质多，气人在高温下多糖分解，且在预处理过程中多糖损失达到10%以上，本发明提供了一种高纯度岩藻多糖的制备方法，本发明首先对新鲜海草进行培养，使其岩藻多糖含量增加，再使用盐酸溶液，在微波辅助下进行浸提，将所得的浸提液进行脱色，然后将其与海泡石、醋酸钠混合均匀，在通电状况下纯化，将所得的纯化液与三氯乙酸混合，去除蛋白沉淀，最后提纯得纯度在45?55%的岩藻多糖。
[0006]为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是:
(1)取I?3kg新鲜海草放入培养池内，按固液比1:3向其中加入海水，再分别向其中加入10?15g磷酸氢二钠、3?5g磷酸二氢钠、100?200g硝酸钱及280?380g氨基酸螯合钙搅拌均匀，然后向培养池内充入氧气，保证培养池内的溶液内的含氧量为8.6?9.2mg/L，在光照强度为8000?9000Lux，温度为30?38°C下，培养2?4天；
(2)上述培养结束后将海草取出，使用蒸馏水将其表面洗净，再将其放入冷冻室内，温度设定为-15?_5°C，待海草变硬后，将其取出放入粉碎机中，粉碎成30?50目颗粒，将所得的颗粒物放入容器中，向其中加入120?300g纤维素复合酶，使用去离子水浸泡颗粒物，然后使用质量分数为45%的盐酸溶液调节pH为4?5，在温度为50?60°C，微波为600?800MHz下，缓慢搅拌2?4h，转速设定为120?160r/min ；
(3)待上述搅拌结束后过滤，将所得的过滤液放入容器中，向其中加入300?400g氯酸钠搅拌10?15min后，向其中加入质量分数为70%的氢氧化钠溶液调节pH为8?9，然后将其倒入离心机中进行离心分离，取上清液；
(4)将上述所得的上清液放入容器中，向其中加入质量分数为25%的双氧水直至无沉淀产生，然后再向其中加入分别加入50?70g80目海泡石粉末以及300?400g醋酸钠，搅拌均匀，控制电流密度0.09?0.12A/cm2,纯化70?90min后，经行过滤；
(5)将上述所得的过滤液放入容器中，向其中加入三氯乙酸使其在溶液中的浓度为
3.0?3.5g/mL，静置20?24h，离心去除蛋白沉淀，然后再向上清液中，加入质量分数为25%的氧化钙溶液调节pH值为7.5?8.0，再加入无水乙醇使其上清液中乙醇的体积分数为25?30%，在温度为5?10°C下，静置直至无沉淀产生，再将其进行离心分离，收集离心物，将离心物放入风干机中进行风干，得到高纯度岩藻多糖。
[0007]本发明所制得的岩藻多糖生物活性高，并保持了天然组分的含量与比例。
[0008]本发明的有益效果是:
(1)本发明所制得的岩藻多糖的纯度达到45?55%;
(2)本发明在制备过程中，使用的有机溶剂易于回收，且得到的产品中，溶剂残留量低于1% ;
(3)本发明制作成本低，易于操作。
【主权项】
1.一种高纯度岩藻多糖的制备方法，其特征在于具体制备步骤为: (1)取I?3kg新鲜海草放入培养池内，按固液比1:3向其中加入海水，再分别向其中加入10?15g磷酸氢二钠、3?5g磷酸二氢钠、100?200g硝酸钱及280?380g氨基酸螯合钙搅拌均匀，然后向培养池内充入氧气，保证培养池内的溶液内的含氧量为8.6?.9.2mg/L，在光照强度为8000?9000Lux，温度为30?38°C下，培养2?4天； (2)上述培养结束后将海草取出，使用蒸馏水将其表面洗净，再将其放入冷冻室内，温度设定为-15?_5°C，待海草变硬后，将其取出放入粉碎机中，粉碎成30?50目颗粒，将所得的颗粒物放入容器中，向其中加入120?300g纤维素复合酶，使用去离子水浸泡颗粒物，然后使用质量分数为45%的盐酸溶液调节pH为4?5，在温度为50?60°C，微波为600?.800MHz下，缓慢搅拌2?4h，转速设定为120?160r/min ； (3)待上述搅拌结束后过滤，将所得的过滤液放入容器中，向其中加入300?400g氯酸钠搅拌10?15min后，向其中加入质量分数为70%的氢氧化钠溶液调节pH为8?9，然后将其倒入离心机中进行离心分离，取上清液； (4)将上述所得的上清液放入容器中，向其中加入质量分数为25%的双氧水直至无沉淀产生，然后再向其中加入分别加入50?70g80目海泡石粉末以及300?400g醋酸钠，搅拌均匀，控制电流密度0.09?0.12A/cm2,纯化70?90min后，经行过滤； (5)将上述所得的过滤液放入容器中，向其中加入三氯乙酸使其在溶液中的浓度为.3.0?3.5g/mL，静置20?24h，离心去除蛋白沉淀，然后再向上清液中，加入质量分数为.25%的氧化钙溶液调节pH值为7.5?8.0，再加入无水乙醇使其上清液中乙醇的体积分数为25?30%，在温度为5?10°C下，静置直至无沉淀产生，再将其进行离心分离，收集离心物，将离心物放入风干机中进行风干，得到高纯度岩藻多糖。
【专利摘要】本发明公开了一种高纯度岩藻多糖的制备方法，属于多糖类的制备技术领域。本发明针对目前传统提取岩藻多糖的过程中，浸提液中杂质多，气人在高温下多糖分解，且在预处理过程中多糖损失达到10％以上，本发明提供了一种高纯度岩藻多糖的制备方法，本发明首先对新鲜海草进行培养，使其岩藻多糖含量增加，再使用盐酸溶液，在微波辅助下进行浸提，将所得的浸提液进行脱色，然后将其与海泡石、醋酸钠混合均匀，在通电状况下纯化，将所得的纯化液与三氯乙酸混合，去除蛋白沉淀，最后提纯得纯度在45～55％的岩藻多糖。
【IPC分类】C08B37/00
【公开号】CN105218696
【申请号】CN201510722133
【发明人】仇颖超, 宋国
【申请人】仇颖超
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2015年10月31日