用于治疗精神病症的(r)-3-((3s,4s)-3-氟-4-(4-羟基苯基)哌啶-1-基)-1-(4-甲基苄基 ...的制作方法
【专利摘要】本公开主要涉及式I化合物，包括它们的盐，以及组合物及使用所述化合物的方法。所述化合物是NR2B NMDA受体的配体且可用于治疗各种中枢神经系统病症。
【专利说明】用于治疗精神病症的（R )-3-( (3S，4S )-3-氣-4-(4-哲基苯基） 脈暗-1 -基)-1 - (4-甲基苄基)P比略烧-2-酬及其前药
[0001] 相关申请的交叉引用 本申请要求2014年1月9日提交的临时专利申请USSN 61/925,405的优先权，其全文W 引用方式并入本文中。
[0002] 发明背景 本公开主要设及式I化合物，包括它们的盐，W及组合物及使用所述化合物的方法。所 述化合物是NR2B NMDA受体的配体且可用于治疗各种中枢神经系统病症。
[000引N-甲基-D-天冬氨酸盐(NMDA)受体是通过谷氨酸盐（即中枢神经系统中的兴奋性 神经递质）的结合闽控的离子通道。据信其在多种神经疾病(包括抑郁症、神经性疼痛、阿兹 海默氏病及帕金森氏病）的发展中起关键作用。功能性NMDA受体是主要包括两个NRl及两个 NR2亚单元的四聚体结构。NR2亚单元进一步细分成四个独立亚型:NR2A、NR2B、NR2C及NR2D， 其差异性分布于整个脑中。已研究NMDA受体、具体而言含有NR2B亚单元的信道的括抗剂或 别构调节剂作为用于治疗重度抑郁症的治疗剂(G. Sanacora, 2008,化ture Rev. Drug Disc. 7: 426-437)O
[0004] NR2B受体含有除针对谷氨酸盐的配体结合位点外的额外配体结合位点。非选择性 NMDA括抗剂(例如氯胺酬)是干扰化H穿过通道运输的孔阻断剂。氯胺酬已证实在人类临床 试验中作为i.v.药物的快速且持久的抗抑郁药性质。另外，通过重复、间歇输注氯胺酬维持 效能（Zarate等人，2006, Arch. Gen. Psychiahy 63: 856-864)。但此类药物由于其CNS 副作用(包括解离效应)而具有有限治疗价值。
[0005] 亦已在NR2B的N-末端结构域中鉴别出别构非竞争性结合位点。于此位点处选择性 结合的药剂(例如曲索罗地(Traxoprodi 1))作为i . V.药物在人类临床试验中展现持续抗抑 郁反应及改良的副作用特性（Preskorn等人，2008, J. Clin. Psychopharmacol., 28: 631-637,及F. S. Menniti等人，1998，CNS Drug Reviews, 4，4，307-322)。然而，此种 类的药物的研发因低生物利用度、差药物动力学及针对其它药理学祀标(包括hERG离子通 道)无选择性而受阻。阻断hERG离子通道可导致屯、律不齐，包括潜在致命性尖端扭转型室性 屯、动过速(Torsades de pointe)，因此针对此通道的选择性是至关重要的。因此，在重度抑 郁症的治疗中，仍存在研发具有有利的耐受性特性的有效NR2B选择性负向别构调节剂的未 满足的临床需求。
[0006] 已在PCT公开WO 2009/006437中公开NR2B受体括抗剂。
[0007] 本发明提供技术优点，例如，所述化合物是新颖的且是NR2B受体的配体且可用于 治疗各种中枢神经系统病症。另外，所述化合物在(例如）W下一或多个方面向医药用途提 供优点:其作用机制、结合、抑制功效、祀标选择性、溶解性、安全特性或生物利用度。
[000引发明描述 本发明的一个方面是式I化合物 其中：
Ari是苯基或二氨化巧基且经O至3个选自W下的取代基取代:氯基、面素、烷基、面代烧 基及面代烷氧基； Ar2是经1个OR取代基取代且亦经O至3个选自W下的取代基取代的苯基:氯基、面素、烧 基、面代烷基及面代烷氧基； R是选自W下的前药部分:烷基醋、氨基酸醋、烷氧基醋、麟酸、麟酸烷基醋、烷氧基麟 酸、烷氧基麟酸烷基醋、氨基甲酸烷基醋、氨基酸氨基甲酸醋、氨基憐酸烷基醋、氨基憐酸芳 基醋及氨基横酸醋； X是键或C1-C3亚烷基； n是1或2;且 环A是氮杂环下烷基、化咯烷基、赃晚基、赃嗦基、局赃晚基或局赃嗦基且经0至4个选自 面素、烷基、径基或烷氧基的取代基取代； 或其医药上可接受的盐。
[0009] 本发明的另一方面是下式化合物
其中R是选自W下的前药部分:烷基醋、氨基酸醋、烷氧基醋、麟酸、麟酸烷基醋、烷氧基 麟酸、烷氧基麟酸烷基醋、氨基甲酸烷基醋、氨基酸氨基甲酸醋、氨基憐酸烷基醋、氨基憐酸 芳基醋及氨基横酸醋;或其医药上可接受的盐。
[0010]合成方法 式I化合物可通过业内已知的方法(包括哪些下文所述的且包括技术能力内的变化形 式)制得。一些试剂及中间体已为业内已知。其它试剂及中间体可通过业内已知的方法使用 容易获得的材料制得。用于阐述化合物的合成的变量(例如编号为"r的取代基)仅欲阐释 如何制备化合物，且不应与权利要求书或说明书其它部分中所使用的变量混淆。W下方法 是出于阐释性目的且并不意欲限制本发明的范畴。方案涵盖业内已知的合理变化形式。
[00川方案1显示实例1 (R)-3-((3S，4S)-3-氣-4-(4-径基苯基)赃晚-1-基)-1-(4-甲基 苄基川比咯烧-2-酬的有效合成。径基内酷胺1是W光学纯形式商业购得。其可经保护及N-烧 基化W形成内酷胺4。用甲烧横酷氯使径基去保护及活化产生内酷胺5。单独地，化合物6可 通过使市售4-节氧基漠苯与市售4-(4,4,5,5-四甲基-1，3,2-二氧杂棚杂环戊烧-2-基)-5， 6-二氨化晚-U2H)-甲酸叔下醋之间的Suzuki偶联反应制得。用原位制得的棚烧处理6、之 后氧化，从而可形成反式外消旋醇7。可将醇7分离成分别的对映异构体，且可在标准条件下 使用氨化暴露酪W制备经取代的酪8。用de-oxofluoH式剂氣化，从而选择性提供反式芳基 氣9,且利用盐酸使Boc基团去保护，从而提供呈盐酸盐形式的赃晚。在碱性条件下简单萃 取，从而提供呈游离碱形式的赃晚10。在轻度碱性条件下小屯、使赃晚10与内酷胺5反应，从 而提供(R)-3-((3S，4S)-3-氣-4-(4-?基苯基)赃晚-1-基)-1-(4-甲基苄基)化咯烧-2-酬， 即实例1的标题化合物。
[0012] 方案1. (r)-3-((3S，4S)-3-氣-4-(4-?基苯基）赃晚-1-基)-1-(4-甲基苄基川比 咯烧-2-酬的合成.
可使用业内已知的方法将实例1的化合物转变成各种前药。因此，根据方案2,用P0C13、 化晚及DMAP处理酪、之后水性水解，从而提供实例2,即实例1的憐酸二氨醋。
[0013] 方案2.实例2、即实例1的化合物的麟酸前药的合成.
类似地，使用业内已知的各种方法、但优选使用二环己基碳二亚胺及4-二甲基氨基化 晚使实例1的化合物与Boc保护的氨基酸反应，从而提供醋11。在酸、优选HCl中使Boc基团解 离，从而提供醋，其包括实例3及4的化合物。
[0014] 方案3.氨基酸前药的合成
W类似方式，可经由未经保护的侧链使Boc保护的天冬胺酸叔下醋（12)与实例I的化合 物偶合W提供醋13。再次利用HCl去保护，从而提供实例5的化合物。
[0015] 方案4.经由侧链簇酸附接的天冬胺酸前药的合成
具体实施例的描述 方案中所使用的缩写通常遵循业内所使用的惯例。说明书及实例中所使用的化学缩写 定义如下："化丽DS"用于双（立甲基甲娃烷基）氨基钢；"DMF"用于N，N-二甲基甲酯胺； "MeOH"用于甲醇；"NBS"用于N-漠班巧酷亚胺；"Ar"用于芳基；叮FA"用于立氣乙酸；"LAH"用 于氨化裡侣；"B0C'用于叔下氧基幾基，"DMS炉用于二甲基亚讽；V用于小时；"EtOAc"用于 乙酸乙醋；叮HF"用于四氨巧喃；巧DTA"用于乙二胺四乙酸；巧t2炉用于二乙酸；"DMP"用于 4-二甲基氨基化晚；"D成'用于1,2-二氯乙烧；"ACN"用于乙腊；"DME"用于1,2-二甲氧基乙 烧；"HO化"用于1-径基苯并S挫水合物；"DIEA"用于二异丙基乙胺，"Nf"用于CF3(CF2) 3SO2-;且叮MOf'用于原甲酸S甲醋。
[0016] 如本文中所用的缩写是定义如下："IX"用于一次，"2X"用于两次，"3X"用于S 次，"°C"用于摄氏度，"eq"用于当量，V用于克，"mg"用于毫克，"L"用于升，"mL"用于毫升， "山'用于微升，"N"用于当量浓度，用于摩尔浓度，"mm〇r用于毫摩尔，"min"用于分钟， 节'用于小时，用于室溫，"RT"用于滞留时间，"atm"用于大气压，"psi"用于磅/平方英 寸，"cone 用于浓缩物，"sat"或"satd."用于饱和，"MW"用于分子量，"mp"用于烙点， "ee"用于对映体过量，"MS"或"Mass Spec"用于质谱/'ESr用于电喷射离子化质谱，"邮'用 于高分辨率，"HRMS"用于高分辨率质谱，"LCMS"用于液相色谱-质谱，"HPLC"用于高效液相 色谱，"RP HPLC'用于反相HPLC，"DCM"用于二氯甲烧，叮LC"或"tic"用于薄层层析，"SFC"用 于超临界流体色谱，"NMR"用于核磁共振谱，"1矿用于质子，用于S，用于单峰，"d"用 于双峰，"t"用于S重峰，"q"用于四重峰，V'用于多重峰，"br"用于宽峰/'化"用于赫兹，且 "R"、"S"、"护及"Z"是熟习本领域技术人员熟悉的立体化学名称。
[0017] LC/MS数据是使用W下条件获得： 条件A:AscentisC18 50 X 2.1 mm，2.7皿柱，使用lmL/min流速，梯度为经1.7分钟 0-100% B、之后于100% B下I. 3分钟。溶剂A: 10 mM于水：乙腊(98:2)中的NH4C00H;溶剂B = 10 mM于水：乙腊(2:98)中的畑4〇30山
[001 引条件BJhenomenex C18 2.0 X 50 mm，5皿柱，使用0.8 mL/min流速，梯度为经4 分钟0-100% B。溶剂A = 10% MeOH/90%水/0.1% TFA，溶剂B = 90% MeOH/10%水/0.1% TFA。
[0019] 中间体的合成 中间体A. 4-(4-(节氧基)苯基)-5,6-二氨化晚-U2H)-甲酸叔下醋
将市售1-(节氧基)-4-漠苯（104 g，395 mmol)及市售4-(4,4,5,5-四甲基-1，3,2-二 氧杂棚杂环戊烧-2-基)-5,6-二氨R比晚甲酸叔下醋（147 g, 474 mmol)于1100 ml 乙腊中的溶液用氮气吹扫2 min。添加水（1100 mL)，之后添加碳酸钢（126 g, 1186 mmol) 及四苯基麟)钮(27.4 g，23.7 mmol)。将反应混合物用氮气吹扫5 min,且随后加热至 90°C并揽拌16 h。随后将反应混合物冷却至d并用1 L乙酸乙醋稀释。分离各层，且再用两 份250 mL乙酸乙醋萃取水层。合并有机层，用200 mL盐水洗涂，经硫酸钢干燥，并在真空中 蒸发，W提供灰白色固体。通过硅胶层析用石油酸中的6%乙酸乙醋洗脱来纯化产物，W提供 129 g (88%)期望产物。
[0020] 中间体B. (+/-)-相对-(3S，4S)-4-(4-(节氧基)苯基)-3-径基赃晚-1-甲酸叔下 醋
将棚氨化钢（15.5 g，410 mmol)溶解于THF中，并将溶液冷却至0°C。向溶液中添加 S 氣化棚酸合物（52.3 mL, 424 mmol)并使混合物升溫至d并揽拌30 min。随后添加4-(4-(节氧基）苯基）-5,6-二氨[I比晚甲酸叔下醋（50 g，137 mmol,中间体A)于500 ml THF中的溶液并将反应混合物于d下揽拌2 h。随后向混合物中缓慢添加一份100 mL的水 (注意：观察到冒泡）。将混合物用100 mL乙醇稀释，并添加氨氧化钢(228 mL，于水中的10% 溶液，0.684 mol)及过氧化氨(20.5 mL, 0.684 mol)。将反应混合物加热至回流溫度并揽 拌16 h。将混合物冷却至10°C并用1 L DCM稀释。随后用1.5 L 1.5 N HCl将pH调节至7。随 后分罔各层，并再用两份500 HiL的DCM卒取水层。合并有机层，用2 X 1 L水及200 mL盐水 洗涂，经硫酸钢干燥，并在真空中蒸发，W提供灰白色固体。将固体与500 mL石油酸一起研 磨，并通过过滤分离，W产生46.5克产物(88%，通过HPLC纯度为99.0%)。
[0021] 中间体C. (3S，4S)-4-(4-(节氧基)苯基)-3-径基赃晚-I-甲酸叔下醋
在W下条件下使用制备型超临界流体层析将外消旋相对-(3S，4S)- 4-(4-(节氧基)苯 基)-3-径基赃晚-1-甲酸叔下醋（112 g，中间体B)分离成各对映异构体:利用Iliar SFC-250 仪器与Lux- Cellulose -2 (250 X 21 mm),5皿柱，用60% CO2及0.3%二乙胺于甲醇中的 40〇/〇溶液WlOO.O g/min的流速洗脱。W74 mg/mL注射试样。在Lux- Cellulose -2 (250 X 4.6 mm)、5皿柱上，用55% CO2及0.3%二乙胺于甲醇中的45%溶液W3.0 g/min的流速洗脱， 实施分析型SFC。回收率是50.0 g峰1，滞留时间为2.49分钟，其对应于期望的（3S，4S)-4-(4-(节氧基)苯基)-3-?基赃晚-1-甲酸叔下醋。分析数据与外消旋体的那些匹配。
[0022] 中间体D. (3S，4S)-3-哲某-4-(4-辉某龙某）脈暗-1-甲酸叔下醋
在压力瓶中（3S，4S)-4-(4-(平氧基）苯基）-3-巧基贩晚-1-甲酸叔下醋（26 g，67.8 mmol,中间体C)于260血甲醇中的溶液用1.6克10%碳载钮（13.6 mmol)处理。引入50 psi氨 气，且将反应混合物揽拌16 h。混合物经由娃藻±过滤并浓缩成粗产物（18.9 g，64.4 mmol )，其足够纯，未经进一步纯化即继续使用。
[0023] 中间体E. (3S，4S)-3-氣-4-(4-哲基
苯基)脈晚-1-甲酸叔下醋 将(3S,4S)-3-^基-4-(4-?基苯基）赃晚-1-甲酸叔下醋（15.5 g，61.4 mmol，中间体 D)于270 mL乙腊中的溶液冷却至(TC。经65 min经由添加漏斗向揽拌溶液中逐滴添加双(2-甲氧基乙基)氨基S氣化硫于甲苯中的50%溶液(Deoxo-fluor, 58.4 ni, 159 mmol)。添加 后，将反应混合物于(TC下揽拌30 min且随后使其达到的并再揽拌2 h。随后添加饱和氯化 锭溶液(150 mU，并将混合物用两份150 mL的DCM萃取。合并有机层，经硫酸钢干燥并浓缩， W得到粗产物。通过硅胶层析（1.5 kg二氧化娃）用己烧中的0-15%丙酬的梯度洗脱纯化产 物，W得到11.9 g (75%)期望(3S，4S)-3-氣-4-(4-?基苯基)赃晚-1-甲酸叔下醋。
[0024] 中间体F. 4-((3S，4S)-3-氣脈晚-4-基)苯酪
将(3S, 4S) -3-氣-4-(4-径基苯基)赃晚-1 -甲酸叔下醋（12.0 g，40.6 mmo 1，中间体E) 于无水二嗯烧(80 mL)中的溶液用肥1 (4M，于1,4-二嗯烧中，40.6 mL，162 mmol)处理。将 反应混合物于K下揽拌6 h且随后在真空中蒸发W提供期望产物的肥1盐。在未进一步分离 情况下，将HCl盐悬浮于CHCh中并添加80 mL饱和化肥化溶液。分离有机层，且用CHCh (2 X 100 mL)卒取水层。合并有机层,经化2SO4干撫并浓缩，W广生t不题化合物(7.1 g, 36.4
[0025] 中间体G. (S)-3-((叔下基二甲基甲娃烷基)氧基川比咯烧-2-酬
将市售(5)-3-?基化咯烧-2-酬(5 g，49.5 mmol)于DCM (198 ml)中的揽拌溶液用 DMAP (0.199 g, 1.632 mmol)、咪挫（6.73 g, 99 mmol)及TBDMS-Cl (8.94 g, 59.3 mmol)处理。将反应混合物于d下揽拌16h，且随后用饱和Na肥化溶液洗涂。浓缩有机层并通 过硅胶层析用石油酸中的50%乙酸乙醋洗脱纯化粗制反应产物。分离出白色固体状期望产 物（8.1 g, 76%)。
[0026] 中间体H. (S)-3-((叔T其二甲其甲巧糕其)氣其)-1-(4-甲基苄基川比咯烧-2-酬
将(S)-3-((叔下基二甲基甲娃烷基)氧基川比咯烧-2-酬(5 g，23.22 mmol,中间体G)溶 解于无水THF (46.4 ml)中并在氮气气氛下将反应混合物冷却至0°C。随后一次性添加氨化 钢（1.393 g，34.8 mmol)并将反应混合物揽拌5 min,之后逐滴添加无水THF (46.4 ml)中 的1-(漠甲基)-4-甲苯(5.37 g，29.0 mmol)。将反应物于(TC下揽拌5 min,随后移除冷却 浴并将混合物升溫至d过夜。将反应物小屯、地用水（100 mL)泽灭且随后用乙酸乙醋（3 X 100 mL)萃取。随后将合并的有机层用盐水(200 mU洗涂并干燥(MgS化）。在真空中蒸发溶 剂，从而产生粗产物(9.6 g，油），随后通过硅胶层析(330 g二氧化娃）用己烧中的0%至20% 乙酸乙醋的梯度洗脱对其进行纯化，W提供6.53 g (88%)期望产物。
[0027]中间体I. (s)-3-径基-1-(4-甲基苄基川比咯烧-2-酬
于的下向（S)-3-((叔下基二甲基甲娃烷基)氧基)-1-(4-甲基苄基)邮咯烧-2-酬(6.53 g，20.44 mmol,中间体H)于无水DCM (20.4血）中的溶液中一次性添加肥1 (4 M，于1,4-二 嗯烧中，25.5 ml, 102 mmol)。注意到稍微放热。将反应混合物于K下揽拌2 h且随后在真空 中蒸发。将残余物吸收于DCM (IOOmL)中并用饱和碳酸氨钢溶液（100 mU及盐水巧0 mL)洗 涂，且随后将溶液经MgS〇4干燥并浓缩成残余物。通过硅胶层析（120 g二氧化娃）用己烧中 的40%至100%乙酸乙醋的梯度洗脱纯化粗产物，W提供3.73 g (89%)期望产物。
[002引中间体J. (S)-甲烧横酸1-(4-甲基苄基)-2-氧代化咯烧-3-基醋
于(TC下在氮气气氛下向（5)-3-?基-1-(4-甲基苄基）化咯烧-2-酬（0.5 g，2.436 mmol,中间体I)于无水DCM (12.18 ml)中的冷却溶液中添加 S乙胺（0.509 ml, 3.65 mmol)。随后逐滴添加甲烧横酷氯(0.198 ml, 2.56 mmol)并将反应物于0°C下揽拌15 min， 之后用饱和碳酸氨钢溶液（10 mL)泽灭。使混合物升溫至的并分离水层并用DCM (2X)萃 取。将合并的有机层经MgS04干燥并在真空中蒸发，W产生白色固体(0.73 g)，随后通过娃 胶层析（40 g二氧化娃）用己烧中的0%至50%乙酸乙醋的梯度洗脱对其进行纯化，W提供 0.63 g (91%)白色固体状期望产物。
[0029] 中间体K. (S)-3-(叔下基二甲基甲娃烷基氧基)-1-(4-(二氣甲基)苄基川比咯烧-2-酬
于(TC下向（S)-3-((叔下基二甲基甲娃烷基)氧基川比咯烧-2-酬(762 mg，3.54 mmol， 中间体G)于THF (7 mL)中的揽拌溶液中添加氨化钢于矿物油中的60%分散液（232 mg, 5.31 mmol)Dl5 min后，向反应混合物中添加 1-(漠甲基)-4-(二氣甲基)苯(980 mg, 4.43 mmol)于THF (7 mL)中的溶液。将所得混合物于室溫下揽拌6 h。将反应物用几克冰丸小屯、 地泽灭。用化OAc萃取所得混合物。将合并的有机层用水洗涂，经硫酸钢干燥，过滤并在真空 中浓缩。使用硅胶柱层析(0-30% EtOAc/己烧)纯化粗制反应混合物，W得到白色固体状期 望产物(440 mg ,35%产率）：
[0030] 中间体L. (S)-1-(4-(二氣甲基)苄基)-3-径基化咯烧-2-酬
于的下向（S)-3-((叔下基二甲基甲娃烷基)氧基)-1-(4-(二氣甲基)苄基川比咯烧-2-酬(440 mg，l.24 mmol,中间体K)于二氯甲烧（1.24 mL)中的揽拌溶液中添加4 M HCl于二 嗯烧中的溶液(0.62 mL，2.5 mmol)。将反应混合物揽拌2 h。在真空中浓缩反应混合物，W 得到期望产物(368 mg，定量产率）：LC-MS (M+H)+ 242.1。
[0031] 中间体M. (S)-甲烧横酸1-(4-(二氣甲基)苄基)-2-氧代化咯烧-3-基醋
于0°C下向（S)-1-(4-(二氣甲基)苄基)-3-?基[I比咯烧-2-酬(368 mg，1.53 mmol,中间 体L)于二氯甲烧(7.63 mL)中的揽拌溶液中添加 S乙胺(0.319 mL, 2.29 mmol)及甲横酷 氯(0.131 mL, 1.68 mmol)。将反应混合物于(TC下揽拌1 h。将所得混合物用水稀释并将水 性混合物用二氯甲烧萃取。将合并的有机层用10%碳酸氨钢溶液洗涂，经硫酸钢干燥，过滤 并在真空中浓缩。使用硅胶柱层析(0-100%化OAc)纯化粗物质。将纯部分合并并在真空中 浓缩，W得到白色固体状期望产物（322 mg,66%产率）：
[0032] 中间体N. 4-径基-4-(4-甲氧基苯基)赃晚-1-甲酸叔下醋
将市售4-氧代赃晚-1-甲酸叔下醋（2.0 g，10.0 mmol)及二乙酸(30 ml)的混合物冷 却至0°C。向此混合物中逐滴添加（4-甲氧基苯基）漠化儀的溶液(0.5 M，于二乙酸中，30 ml，15 mmol)。完全添加后，使反应混合物升溫至的并揽拌2 h。随后将其缓慢用150 ml冰冷 水泽灭且随后将所得混合物用3X150 ml DCM萃取。合并有机层，干燥，过滤且在真空中浓 缩。通过硅胶柱层析(30:70乙酸乙醋：己烧)纯化粗产物，W提供期望产物(3.0 g，100 %产 率)：
[0033] 中间体0. 4-(4-甲氧基苯基)-1，2,3,6-四氨化晚盐酸盐
将4-径基-4-(4-甲氧基苯基)赃晚-1-甲酸叔下醋(700 mg，2.27 mmol,中间体N)及二 嗯烧中的肥1 (4.0 ml, 16 mmol)的混合物于K下揽拌3 h。在真空下浓缩粗物质并将固体 残余物用3X10 ml DCM洗涂W移除非极性杂质。收集呈微细固体形式的期望盐(480 mg, 93〇/〇)。
[0034] 中间体P. 4-(4-甲氧基苯基)赃晚盐酸盐
向4-(4-甲氧基苯基)-1，2,3,6-四氨化晚肥1 (3.00 g，13.3 mmol,中间体0)于甲醇 (20 mL)中的揽拌溶液中添加10%碳载钮（1.4 g)并将反应混合物于20 PSi氨气下揽拌12 h。将反应混合物经由娃藻±垫过滤，用乙酸乙醋洗涂，且浓缩合并的有机部分W获得白色 固体(2.0 g，70%产率）：
[0035] 中间体Q. 2,4-二漠-N-(4-氣苄基)下酷胺
于(TC下向市售(4-氣苯基）甲胺(4.0 g，32.0 mmol)于二乙酸（15 mU中的溶液中依 序添加 TEA (8.91血，63.9 mmol)及2,4-二漠下酷氯巧.07血，38.4 mmol)。使反应混合 物升溫至的并再揽拌24 h。过滤反应混合物。用二乙酸洗涂固体。在真空中浓缩滤液，W得 到含有2.4-二滋-N-(4-氣,书其）T醜膀的粗制混合物(8.0 g，71%产率）：
[0036] 中间体R. 3-漠-1-(4-氣苄基川比咯烧-2-酬
于(TC下向2,4-二漠-N-(4-氣苄基）下酷胺（10.0 g，28.3 mmol,中间体Q)于THF (25 mU中的揽拌溶液中添加化H于矿物油中的60%分散液(1.70 g，42.5 mmol)。使反应混合物 升溫至的并再揽拌2 h。将反应混合物小屯、地用冰泽灭并用水稀释。用化OAc萃取所得混合 物。用水及随后盐水溶液洗涂合并的有机层。有机层经硫酸钢干燥，过滤并在真空中浓缩。 使用硅胶柱层析(10%化OAc/己烧)纯化粗产物，W得到期望产物(5.90 g，64%产率）：
[0037] 中间体S. 1-(4-氣苄基)-3-(4-(4-甲氧基苯基)赃晚-1-基川比咯烧-2-酬
向3-漠-1-(4-氣苄基)化咯烧-2-酬(0.3 g，1.10 mmol，中间体R)及4-(4-甲氧基苯基)赃 晚盐酸盐(0.276 g，l.213 mmol,中间体P)于乙腊(10 mU中的揽拌溶液中添加 TEA (0.768 mL，5.51 mmol)。将反应混合物密封并在化学微波中于100°C下加热Ih。将反应混合物冷却至 的并在真空中浓缩。用化OAc稀释残余物。用水及盐水溶液洗涂有机混合物。将有机层经硫酸 钢干燥，过滤并在真空中浓缩，W得到含有1-(4-氣苄基)-3-(4-(4-甲氧基苯基)赃晚-1-基） 化咯烧-2-酬的粗制混合物(0.35邑，83%产率）:扮;絲象態^^~没巧条;城為.嫉裝复《滅對難。
[0038] 实例1. (R)-3-((3S，4S)-3-氣-4-(4-?基苯基）赃晚-1-基)-1-(4-甲基苄基川比 咯烧-2-酬
将4-((3S，4S)-3-氣赃晚-4-基）苯酪(7.10 g，36.4 mmol,中间体F)及DIEA (16 mL， 92 mmo 1)于100 mL乙腊中的溶液加热至80°C。经4小时的时段将此溶液逐滴用（S)-甲烧横 酸1-(4-甲基苄基)-2-氧代化咯烧-3-基醋（10.5 g，37.0 mmol,中间体J)于乙腊(80血）中 溶液处理。在完成添加后，将反应混合物于80°C下揽拌16 h。随后使反应混合物冷却至d， 且通过旋转蒸发将体积减少至80 mL。随后添加饱和N也Cl溶液（100 mL)，且分离各层。用 DCM (2 X 100 mU萃取水层并合并有机层，经化2S〇4干燥并在真空中浓缩W产生粗产物。 通过硅胶层析(750 g硅胶）用溶剂A中的0%至20%溶剂B的梯度洗脱纯化粗产物，其中溶剂B =20%甲醇/DCM且溶剂A = DCM。合并含有产物的部分。蒸发溶剂，从而产生9.3克期望产物， 通过LC/MS分析(条件B)纯度为97%。将由此获得的产物(8.5 g)在丙酬:己烧（1:5, 200 mL) 中制成浆液并通过过滤分离固体产物并风干。小屯、SFC分析显示产物中存在2.1%杂质。使用 Cel 14 0.46 X 25 cm 5皿柱且用C〇2中的45%甲醇W3 mL/min洗脱，于3.800分钟时洗脱 出期望产物且于4.848分钟时洗脱出不期望杂质。随后通过SFC色谱使用Cell4 3 X 25 cm 5曲1柱W150血/min注射1.5 ml 80 mg/mL溶液进一步纯化产物。浓缩活性部分，从而提供 7.82克（20.4 mmol, 56%) >99.7%纯的白色粉末状实例1。
[0039] 实例2.憐酸二氨4-((3S，4S)-3-氣-1-((R)-1-(4-甲基苄基)-2-氧代化咯烧-3-基)赃晚-4-基)苯基醋.
向（R)-3-((3S，4S)-3-氣-4-(4-?基苯基）赃晚-1-基)-1-(4-甲基苄基)邮咯烧-2-酬 (100 mg，0.261 mmol,实例1)于10 mL二氯甲烧中的悬浮液中添加化晚（0.106 mL, 1.31 mmol)及DMAP (160 mg, 1.31 mmol)。将反应混合物冷却至-20°C。向冷却溶液中逐滴添加 POCb (0.122血，1.31 mmol),且随后使反应混合物升溫至K并揽拌1 h。添加水（10血） 并将混合物揽拌1.5 h。随后分离各层并将有机层经化2S化干燥并蒸发至干燥。通过HPLC在 Symmet巧CS (300 X 17 mm) 7 mM柱上用经7分钟20%B至50% B的梯度W15 mL/min洗脱 来纯化粗产物，其中溶剂A =水中的10 mM乙酸锭，pH 4.5,且溶剂B =乙腊。产物RT = 2.2 min。通过冻干自适当部分分离出白色固体状期望产物(5.8 mg, 4.7%)。
[0040]实例3. (s)-2-氨基-3-甲基下酸4-((3S，4S)-3-氣-1-((R)-1-(4-甲基苄基)-2-氧代化咯烧-3-基)赃晚-4-基)苯基醋盐酸盐.
步骤3A. (S -1-((R)-1-(4- 甲基苄基)-2-氧' 向（R)-3-((3S，4S)-3-氣-4-(4-?基苯基）赃晚-1-基)-1-(4-甲基苄基)邮咯烧-2-酬 (0.02 g，0.052 mmol,实例1)于DCM (3 mL)中的溶液中添加（S)-2-((叔下氧基幾基）氨 基）-3-甲基下酸（0.059 g, 0.272 mmol),之后添加 DCC (0.032 g, 0.157 mmol)及DMAP (6.39 mg, 0.052 mmol)。反应混合物于室溫揽拌18 h。随后添加水（10 mL)，并分离各层。 用DCM (3 X 10 mL)萃取水层，有机层合并，经化2S(k干燥，并浓缩成粗产物。通过制备型 TLC用石油酸中的35%乙酸乙醋洗脱纯化粗产物，W提供纯化产物(S)-2-((叔下氧基幾基） 氨基)-3-甲基下酸4-((3S，4S)-3-氣-1-((R)-1-(4-甲基苄基)-2-氧代化咯烧-3-基)赃晚-4-基)苯基醋(27 mg, 79%)。
[0041] 步骤3B. (S)-2-氨基-3-甲基下酸4-((3S，4S)-3-氣-1-((R)-1-(4-甲基苄基)-2-氧代化咯烧-3-基)赃晚-4-基)苯基醋盐酸盐.
于-20°C向（S)-2-((叔下氧基幾基)氨基)-3-甲基下酸4-((3S，4S)-3-氣-1-((R)-1-(4-甲基苄基）-2-氧代化咯烧-3-基）赃晚-4-基）苯基醋（0.025 g，0.043 mmol)于DCM (1.5血）中的溶液中添加二乙酸中的肥1 (2.5 ml, 2.50 mmol, 1.0 M)。反应混合物经10 min缓慢升溫至K且随后于的揽拌19 h。随后在真空中移除溶剂W提供浅黄色半固体。随后 通过RP-HPLC在Sunfire C18 (250 X 20 mm) 5皿柱上使用10%溶剂B至75%溶剂B的梯度 W15 mL/min经12分钟纯化粗产物，其中溶剂A =水中的0.05% HCl且溶剂B =乙腊。通过 冻干浓缩活性部分，W提供10.2 mg (44%)灰白色固体状(S)-2-氨基-3-甲基下酸4-((3S, 4S)-3-氣-1-((R)-1-(4-甲基苄基)-2-氧代化咯烧-3-基)赃晚-4-基)苯基醋盐酸盐，即实 例2的标题化合物。
[0042] 实例4. (S)-2-氨基丙酸4-((3S，4S)-3-氣-1-((R)-1-(4-甲基苄基)-2-氧代化咯 烧-3-基)赃晚-4-基)苯基醋盐酸盐
步骤4A. (S)-2-((叔下氧基幾基)氨基)丙酸4-( (3S,4S)-3-氣-1-( (R)-1-(4-甲基节 基)-2-氧代化咯烧-3-基)赃晚-4-基)苯基醋
向（R)-3-((3S，4S)-3-氣-4-(4-?基苯基）赃晚-1-基)-1-(4-甲基苄基)邮咯烧-2-酬 (0.03 g，0.078 mmol,实例1)于DCM (5 mL)中的溶液中添加（S)-2-((叔下氧基幾基)氨 基）丙酸（0.077 g，0.408 mmol),之后添加 DCC (0.049 g, 0.235 mmol)及DMAP (9.58 mg, 0.078 mmol)。将反应混合物于的下揽拌18 h。随后添加水（15血），并分离各层。用DCM (3 X 15 mL)萃取水层且合并有机层，经化2S〇4干燥，并浓缩成粗产物。通过制备型化C用石 油酸中的20%乙酸乙醋洗脱纯化粗产物，W提供灰白色半固体状纯化产物(S)-2-((叔下氧 基幾基)氨基)丙酸4-( (3S,4S)-3-氣-1-( (R)-1-(4-甲基苄基)-2-氧代[I比咯烧-3-基)赃晚-4-基)苯基醋(0.032 g，0.058 mmol,74 %产率）。
[0043]步骤4B. (S)-2-氨基丙酸4-((3S，4S)-3-氣-1-((R)-1-(4-甲基苄基)-2-氧代化 咯烧-3-基)赃晚-4-基)苯基醋盐酸盐
于-20°C下向（S)-2-((叔下氧基幾基)氨基)丙酸4-((3S，4S)-3-氣-1-((R)-1-(4-甲基 苄基)-2-氧代化咯烧-3-基)赃晚-4-基)苯基醋(0.032 g，0.058 mmol)于DCM (2 mL)中的 溶液中添加二乙酸中的HCl (2.0 ml, 2.0 mmol, 1.0 M)。经10 min使反应混合物缓慢升 溫至d且随后于的下揽拌19 h。随后在真空中移除溶剂，W提供浅黄色半固体。随后通过 RP-HPLC在Kinetex C18 (250 X 20 mm) 5 皿柱上W15 mL/min使用经7分钟 10%溶剂B至 40%溶剂B的梯度纯化粗产物，其中溶剂A =水中的0.05%肥1且溶剂B =乙腊。通过冻干浓 缩活性部分，W提供4.7mg(16%)灰白色固体状（S)-2-氨基丙酸4-((3S，4S)-3-氣-1-((R)-1-(4-甲基苄基)-2-氧代化咯烧-3-基）赃晚-4-基)苯基醋盐酸盐，即实例4的标题化 合物。
[0044] 实例5. (S)-2-氨基-4-(4-((3S，4S)-3-氣-1-((R)-1-(4-甲基苄基)-2-氧代化咯 烧-3-基)赃晚-4-基)苯氧基)-4-氧代下酸盐酸盐
步骤5A. (S 巧比咯烧-3-基） 赃晚-4-基)苯基： 向（R)-3-((3S，4S)-3-氣-4-(4-?基苯基）赃晚-1-基)-1-(4-甲基苄基川比咯烧-2-酬 (0.03 g，0.078 mmol)于DCM (5 mU中的溶液中添加(S)-4-(叔下氧基)-3-((叔下氧基幾 基)氨基)-4-氧代下酸(0.118 g，0.408 mmol),之后添加 DCC (0.049 g，0.235 mmol)及 DMAP (9.58 mg, 0.078 mmol)。将反应物于K下揽拌18小时。随后添加水（15血），并分离 各层。用DCM (3 X 15血)萃取水层并合并有机层，经NasS化干燥，并浓缩成粗产物。通过制 备型化C用石油酸中的25%乙酸乙醋洗脱纯化粗产物，W提供灰白色半固体状纯化产物（37 mg, 68%)O
[0045] 步骤58.(5)-2-氨基-4-(4-((35,45)-3-氣-1-((1〇-1-(4-甲基苄基)-2-氧代11比 咯烧-3-基)赃晚-4-基)苯氧基)-4-氧代下酸盐酸盐
于-20°C下向（S)-2-((叔下氧基幾基)氨基)班巧酸I-叔下醋4-(4-((3S，4S)-3-氣-1-((R)-1-(4-甲基苄基)-2-氧代化咯烧-3-基)赃晚-4-基）苯基）醋(0.032 g，0.049 mmol) 于DCM (2血）中的溶液中添加二乙酸中的肥I (2.0 ml, 2. 0 mmol, 1.0 M)。经10 min使 反应混合物缓慢升溫至的且随后于的下揽拌19 h。随后在真空中移除溶剂W提供浅黄色半 固体。随后通过RP-HPLC在YMC hiad C18 (150 X 19 mm) 5皿柱上W15血/min使用经 7分钟10%溶剂B至40%溶剂B的梯度纯化粗产物，其中溶剂A =水中的0.05% HCl且溶剂B = 乙腊。通过冻干浓缩活性部分，W提供17 mg (57%)灰白色固体状(S)-2-氨基-4-(4-((3S, 4S )-3-氣-1-( (R)-1-( 4-甲基苄基)-2-氧代[I比咯烧-3-基)赃晚-4-基)苯氧基)-4-氧代下酸 盐酸盐，即实例5的标题化合物。
[0046]实例6. (R)-i-(4-(二氣甲基)苄基)-3-((3S，4S)-3-氣-4-(4-?基苯基)赃晚-1-基)化咯烧-2-酬
经1.5 h向维持于85°C下的4-((3S，4S)-3-氣赃晚-4-基）苯酪盐酸盐（363 mg，1.57 mmol,中间体F)及N,N-二异丙基乙胺（1.09 ni, 6.26 mmol)于5.0 mL乙腊中的揽拌混合物 中逐滴添加（S)-甲烧横酸1-(4-(二氣甲基）苄基）-2-氧代化咯烧-3-基醋（500 mg，1.57 mmo 1，中间体M)于5.0 mL乙腊中的溶液。在完全添加后，将反应混合物于85°C下揽拌16 h。 在真空中浓缩反应混合物。使用硅胶柱层析(0-100% EtOAc/己烧)纯化残余物，W得到1-(4-(二氣甲基)苄基)-3-((3S，4S)-3-氣-4-(4-?基苯基）赃晚-1-基）化咯烧-2-酬的非对 映异构体混合物（内酷胺立体中屯、的局部差向异构化）（235 mg，35%产率）。通过制备型手 性SFC (柱=Lux Cellulose-2 (21 X 250 mm, 5 皿）；等度溶剂=20%甲醇(具有15 mM 氨）/ 80% C〇2;溫度=35°C;流速=60 mL/min;注射体积=1.0 ml (约20 mg/mL，于 MeOH中），Wl3 min间隔堆找;A = 210 nM;峰1 = 19.6 min,峰2 = 24.5 min)分离非对映 异构体混合物的试样(780 mg)，W得到实例6的标题化合物(峰-1,389 mg)及(S)-1-(4-(二 氣甲基)苄基)-3-( (3S，4S)-3-氣-4-(4-?基苯基)赃晚-I-基川比咯烧-2-酬(峰2,242 mg)。 实例6的数据：
通过单晶X射线分析确认实例114的相对及绝对构形P-1。
[0047]实例7.憐酸二氨4-((3S，4S)-3-氣-1-((R)-1-(4-甲基苄基)-2-氧代化咯烧-3-基)赃晚-4-基)苯基醉
于-20°C下向（R)-1-(4-(二氣甲基)苄基)-3-((3S，4S)-3-氣-4-(4-?基苯基)赃晚-1-基川比咯烧-2-酬（100 mg，0.239 mmol,来自实例6)于二氯甲烧（10 mL)中的悬浮液中添加 S乙胺（0.233 ml, 1.67 mmol)。于-20°C下向冷却溶液中添加 POCh (0.111 ml, 1.20 mmol),且随后将反应混合物于-20°C下揽拌2-3小时。添加水（10 mL)并将混合物揽拌1.5 h。用二氯甲烧萃取混合物。将有机层经硫酸钢干燥，过滤并在真空中浓缩。通过反相制备型 HPLC在LUNA C8 (250 mm X 19 mm ID) 5皿柱上用溶剂A =水中的10 ml乙酸锭抑4.5 及溶剂B =乙腊的梯度洗脱纯化粗产物。通过冻干自适当部分分离出白色固体状实例7的 标题化合物(21 mg, 18 %)。
[004引实例8. (R)-i-(4-氣苄基)-3-(4-(4-径基苯基)赃晚-1-基川比咯烧-2-酬
在化气气氛下于-78°C下向1-(4-氣苄基)-3-(4-(4-甲氧基苯基)赃晚-1-基）化咯烧- 2-酬(3 g，7.9 mmol,中间体S)于无水二氯甲烧(100 mL)中的溶液中添加二氯甲烧中的I M S漠化棚(39 mL，39 mmol)并在揽拌下经3 h使所得混合物升溫至室溫。用水(30血)泽灭 反应物并分离有机层，用水及盐水洗涂，并浓缩。通过硅胶上急骤层析使用石油酸中的15% 化OAc纯化粗产物，W产生外消旋1-(4-氣苄基)-3-(4-(4-?基苯基)赃晚-1-基川比咯烧-2-酬（2. Ig,73%产率）；
经由SFC在Qiiralpak-IA 250 mm X 4.6 mm 5皿柱上用35%溶剂B洗脱分离一部分外 消旋体(40 mg)，其中溶剂A = 0)2且溶剂B =甲醇中的0.3% DEA，总流量为3 mL/min。峰1显 不RT为4.35 min (11 mg)且峰2显不RT为6.29 min (13 mg)。
[0049]实例9. (R)-憐酸二氨4-(1-(1-(4-氣苄基)-2-氧代化咯烧-3-基)赃晚-4-基)苯 基醋
向装有THF (10 mL)的圆底烧瓶中添加憐酷氯(1.27 mL 13.6 mmol)。使用冰/甲醇浴 将溶液冷却于〇°(：^下。添加(1〇-1-(4-氣苄基)-3-(4-(4-径基苯基)赃晚-1-基川比咯烧-2-酬（1.00 g，2.71 mmol,实例8)于THF (18 mL)中的悬浮液。5 min后，于低于5°C下的浴溫下 缓慢添加 S乙胺(0.946血，6.79 mmol)。将反应混合物于0°C下揽拌90 min。逐滴添加1 N 氨氧化钢水溶液(8.69 mL, 8.69 mmol) dpH经量测为约0。使混合物升溫至的并揽拌3 h。在 真空中于< 30°C下浓缩粗制反应混合物，W得到澄清溶液。将溶液与1 N化OH水溶液一起 研磨至抑约1。在冰浴中冷却混合物。析出半固体。倾析出所有液体。将半固体悬浮于90%乙 醇中且随后通过真空过滤收集。推测产物为(R)-憐酸二氨4-(1-(1-(4-氣苄基)-2-氧代化 咯烧-3-基)赃晚-4-基)苯基醋的HCl盐(560 mg, 42 %)。向（R)-憐酸二氨4-(1-(1-(4-氣节 基)-2-氧代化咯烧-3-基)赃晚-4-基)苯基醋肥1巧60 mg, 1.16 mmol)于甲醇中的浆液中 添加甲醇钢于甲醇(250 mg, 1.16 mmol)中的25%溶液。揽拌混合物直至澄清且随后在真空 中浓缩。将残余物溶解于90%乙醇/水中并在冷冻箱中冷却。使用真空过滤收集固体沉淀。在 高真空下干燥固体，W得到实例9的标题化合物(230 mg，19%产率）：
[0化日]生物方法 放射性配体结合分析.使用化Ro 25-6981在8至10周龄雄性Sprague Dawl巧大鼠 化arlan,化therlands)的前脑上实施用W测定与NR2B-亚型NMDA受体的结合的结合实验 (Mutel V；Buchy D；Klingelschmidt A；Messer J；Bleuel Z；Kemp JA；Richards JG . Journal of Neurochemistry , 1998, 70(5):2147-2155)。使用断头台（Guillotine)在未 麻醉情况下使大鼠断头（由动物伦理委员会批准)且将收获的脑速冻并于-80°C下储存3至6 个月用于膜制备。
[(K)引]对于膜制备，将大鼠前脑在包括50 ml KH2PO4 (用KOH将pH调节至7.4)、1 ml EDTA、0.005% Triton X 100及蛋白酶抑制剂混合剂(Sigma Al化ich)的均质化缓冲液中在 冰上解冻20分钟。将解冻的脑使用Dounce均质器均质化且W48000 X g离屯、20 min。将沉 淀物再悬浮于冷缓冲液中并再次使用Dounce均质器均质化。随后，将均质物分成等分试样， 速冻并于-8〇°C下储存不超过3至4个月。
[0052] 为实施竞争结合分析，向96孔板的每一孔中添加解冻的膜均质物(20 yg/孔）。将 实验化合物连续稀释于100% DMSO中并添加至分析板的每一行中W达成期望化合物浓度， 从而保持分析板中的DMSO浓度为最终反应体积的1.33%。接下来，向分析板中添加化Ro 25-6981 (4 nM)。于室溫下培育1 hr后，在GF/B滤板(于室溫下用0.5%阳I处理1 hr川欠获 膜结合的放射性配体。将滤板于50°C下干燥20 min,与microscint 20-起培育10分钟，且 最后，在TopCount (Perkin Elmer)上对计数进行读数。使用MK-0657 (此化合物的制备是 如WO 2004 108705中实例1所述(40 yM))测定非特异性结合。CPM值转化为抑制%且使用定 制软件绘示浓度反应曲线。重复每一实验至少两次W获得实验化合物的最终结合Ki值。使 用此分析，实例1的化合物显示4 nM的结合Ki,实例6的化合物显示4 nM的结合Ki,实例8的 化合物显示1.4 nM的结合Ki。
[0053] 离体化X vivo)占据分析.此分析证实，在投药后动物中，实例1的化合物占据脑驻 留NR2B-亚型受体。在由10%二甲基乙酷胺、40%阳G-400、30%径丙基0环糊精及30%水组成的 媒介物中向7至9周龄雄性CD-I小鼠静脉内给予实验化合物并在投药后15分钟通过断头收 获前脑。立刻将脑试样速冻并储存于-80°C下。次日，将投药的脑试样在冰上解冻15-20分 钟，之后在包括50 ml K也P〇4 (用KO聞尋抑调节至7.4)、1 ml抓TA、0.005% Triton X 100及 蛋白酶抑制剂混合剂(Sigma Al化ich)的冷均质化缓冲液中使用化1 yhon均质化10秒。使 用Dounce均质器进一步均质化粗制均质物且将所有动物的均质化膜等分试样快速冷冻并 储存于-80°C下直至进一步使用为止。整个均质化过程皆是在冰上实施。
[0054] 对于测定占据，首先在冰上解冻膜均质物且随后使用25号针进行针均质化。向96 孔板中添加均质化膜(6.4 mg/ml)，之后添加化Ro 25-6981 (6 nM)。将反应混合物于4°C 下在振荡器上培育5分钟且随后收获至GF/B滤板(于室溫下用0.5%阳I处理1 hr)上。将滤 板于50°C下干燥20 min,与microscint 20-起培育10分钟并在TopCount (Perkin Elmer) 上读数。每一剂量或化合物组由4至5只动物组成。向动物的对照组仅给予媒介物。向分析板 中一式=份地添加每一动物的膜。使用添加至含有给予媒介物的动物的膜均质物的孔中的 10 yM Ro 25-6981测定非特异性结合。使用W下等式将特异性计数/分钟转化成每一动物 的每一化合物剂量下的占据％:
[(K)扣」化用化巧斤，头例i的化甘倒显不仕；3 mg/Kg I.V.絕于后yw。NR2B受体占据。通过 质谱W常用方式测定药物含量。此剂量下血浆中的药物含量是1106 nM，且均质化脑组织中 的药物含量是1984 nM。实例6的化合物显示3 mg/Kg i.v.投药后97% NR2B受体占据。此剂 量下血浆中的药物含量是1800 nM，且均质化脑组织中的药物含量是2200 nM。实例8的化合 物显示3 mg/Kg i.v.投药后96% NR2B受体占据。此剂量下血浆中的药物含量是570 nM，且 均质化脑组织中的药物含量是900 nM。
[0化6] hERG电生理学分析.使用膜片错制技术评价实验化合物对稳定表达hERG通道的 肥K 293细胞的hERG活性。将经表达hERG的细胞铺板的盖玻片放置于实验室中并于室溫下 灌注包括 W 下（WmM 计）的溶液：140 化 Cl、4 KCK1.8 CaCl2、l MgCbUO GlucoseUO 肥阳S (pH 7.4,化OH)。棚娃酸盐膜片吸管在填充有含有W下的内部溶液时具有2 MO至4 MQ的端电阻：130KCl、lMgCl2、lCaCl2、10EGTA、10肥阳S、5ATP-K2(pH7.2，K0H)。使 用由pClamp (Axon仪器)软件控制的Axopatch 200B (Axon仪器，Union City, CA)膜片错 放大器于-80 mV下W在全细胞构形错制细胞。在形成吉咖封口（gigaseal)后，重复(0.05 Hz)施加 W下电压方案W记录尾电流：自-80 mV至+20 mV达2秒去极化步骤，之后至-65 mV (3秒)的超极化步骤W引发尾电流且随后返回至保持电位。在尾电流稳定后施加化合物。首 先，在仅细胞外溶液(对照)存在下且随后在含有增加化合物浓度的细胞外溶液中记录尾电 流。施加每一化合物浓度2-5分钟。每一浓度下的抑制%计算为峰尾电流相对于在对照溶液 存在下记录的峰尾电流的减少。在定制软件中实施数据分析。绘制不同浓度下的抑制％曲线 W获得浓度反应曲线，随后利用四参数方程拟合该曲线W计算hERG ICso值。使用此程序，实 例1的化合物是hERG通道的差抑制剂，其中ICsq = 28測。实例6的化合物是hERG通道的差抑 制剂，其中ICso = 13.5測。
[0057] 小鼠强迫游泳测试(mFST).强迫游泳测试(FST)是在临床前研究中用于评价抗抑 郁化合物的动物模型。FST是类似于Porsolt等人的方法且进行修改实施（Porsolt RD、 Bertin A、Jalfre M. Behavioral despair in mice: a primary screening test for antidepressants. Arch Int 陆armacodyn 1?紅 1977;229:327-36)。在此范例中，强制小 鼠在填充水的不可逃脱的圆筒中游泳。在运些条件下，小鼠将最初尽力逃脱且最终进行不 动行为;将此行为解释为被动应激应对策略或抑郁样行为。游泳池位于由塑料制得的盒内 部。通过达到圆筒的高度的不透明塑料片将每一罐彼此隔开。=只小鼠同时经受测试。通过 将小鼠置于含有水(20 cm深，维持于24°C至25°C下）的独立玻璃圆筒(46 cm高度X 20 cm 直径）中实施6 min的游泳期。在此水位准下，小鼠尾不会接触容器底部。当小鼠保持被动漂 浮且在水中不挣扎并仅作出保持其鼻/头在水上方且保持其漂浮所必需的那些运动时，贝U 将小鼠判断为不动的。在总共6 min的测试期间评估不动性的持续时间，且表示为不动性的 持续时间（sec)。对每一小鼠仅测试一次。在每一期结束时，利用干布干燥小鼠且使其返回 至其置于热毯上的圈养笼中W防止体溫降低。每一试验后更换水。使用相机（Sony 化ndicam，型号：DCR-HC38E;PAL)记录所有测试期，且使用Forced Swim Scan 2.0版软件 (Clever Systems公司，Reston, VA, USA;参见Hayashi E、Shimamura M、Kuratani K、 Kinoshita M、Hara H. Automated experimental system capturing three behavioral components during murine forced swim test. Life Sci. 2011 年2 月28 日；88(9-10): 411-7及Yuan P、Tra邑on T、Xia M、Leclair CA、Skoumbourdis AP、Zhen邑 W、Thomas CJ、 Huang R、Austin CP、Chen G、Guitart X. Phosphodiesterase 4 inhibitors enhance sexu曰I pie曰sure-seeking 曰ctivity in rodents. Phsrmscol Biochem Beh曰v. 2011;98 (3): 349-55)进行评分。对于NCE测试:在游泳期前15 min在小鼠中通过i . V.途径给予测试 化合物，且接下来6 min记录不动时间。在FST结束时，通过快速断头方法对小鼠实施安乐 死，且收集血浆及脑试样并储存于-80°C下直至进一步分析。在小鼠强迫游泳分析中，在30% 径丙基0环糊精/70%巧樣酸盐缓冲液(pH 4)的媒介物中W5 mL/Kg投药体积静脉内给予实 例1的化合物。在运些条件下在1 mg/Kg下，实例1的化合物证实统计学上显著的不动时间减 少。在此剂量下，药物含量在血浆中为268 +/- 128 nM且在脑中为749 +/- 215 nM。如上文 所报导测定NR2B受体占据且经测定为73%。在运些相同条件下在1 mg/Kg下，实例6的化合物 证实统计学上显著的不动时间减少。血浆中的药物含量为360 nM"NR^受体占据经测定为 79〇/〇。
【主权项】
1. 一种式I化合物，其中： Ar1是苯基或二氢化茚基且被0至3个选自以下的取代基取代:氰基、卤素、烷基、卤代烷 基及卤代烷氧基； Ar2是被1个OR取代基取代且亦被0至3个选自以下的取代基取代的苯基:氰基、卤素、烷 基、卤代烷基及卤代烷氧基； R是选自以下的前药部分:烷基酯、氨基酸酯、烷氧基酯、膦酸、膦酸烷基酯、烷氧基膦 酸、烷氧基膦酸烷基酯、氨基甲酸烷基酯、氨基酸氨基甲酸酯、氨基磷酸烷基酯、氨基磷酸芳 基酯及氨基磺酸酯； X是键或&-C3亚烷基； η是1或2;及 环Α是氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、高哌啶基或高哌嗪基且被0至4个选自 卤素、烷基、羟基或烷氧基的取代基取代； 或其药学上可接受的盐。2. 如权利要求1的化合物，其具有下式：其中R是选自以下的如药部分:烷基酯、氣基酸酯、烷氧基酯、勝酸、勝酸烷基酯、烷氧基 膦酸、烷氧基膦酸烷基酯、氨基甲酸烷基酯、氨基酸氨基甲酸酯、氨基磷酸烷基酯、氨基磷酸 芳基酯及氨基磺酸酯;或其药学上可接受的盐。3. 如权利要求2的化合物，其是磷酸二氢4-((3S，4S)-3-氟-1-((R)-1-(4-甲基苄基)-2_氧代吡咯烷-3-基)哌啶-4-基)苯基酯，或其药学上可接受的盐；4. 如权利要求2的化合物，其是(S)-2-氨基-3-甲基丁酸4-((3S，4S)-3-氟-1-((R)-1-(4-甲基苄基)-2-氧代吡咯烷-3-基)哌啶-4-基)苯基酯盐酸盐，或其药学上可接受的盐；5. 如权利要求2的化合物，其是(S)-2-氨基丙酸4-((3S，4S)-3-氟-1-((R)-1-(4-甲基 苄基)-2_氧代吡咯烷-3-基)哌啶-4-基)苯基酯盐酸盐，或其药学上可接受的盐；6. 如权利要求2的化合物，其是（S)-2-氨基-4-(4-((3S，4S)-3-氟-1-((R)-1-(4-甲基 苄基)-2_氧代吡咯烷-3-基)哌啶-4-基)苯氧基)-4-氧代丁酸盐酸盐，或其药学上可接受的 盐：7. 如权利要求1的化合物，其是磷酸二氢4-((3S，4S)-3-氟-1-((R)-1-(4-甲基苄基)-2_氧代吡咯烷-3-基)哌啶-4-基)苯基酯，或其药学上可接受的盐；8. -种药物组合物，其包含权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐及药学上可接 受的载体。9. 一种治疗抑郁症、阿兹海默氏病、神经性疼痛或帕金森氏病的方法，其包括给予患者 治疗有效量的权利要求1的化合物。10. 如权利要求9的方法，其用于抑郁症的治疗。11. 如权利要求9的方法，其用于阿兹海默氏病的治疗。12. 如权利要求9的方法，其用于神经性疼痛的治疗。
【文档编号】A61K31/454GK105873915SQ201580004095
【公开日】2016年8月17日
【申请日】2015年1月8日
【发明人】L.A.汤普森三世, J.E.马科
【申请人】百时美施贵宝公司