以花生根提取防癌剂白藜芦醇的方法
【专利摘要】本发明属于生物提取领域，公开了以花生根提取防癌剂白藜芦醇的方法，其包括如下步骤：步骤1）浸泡和粉碎，步骤2）混匀和提取，步骤3）浓缩、提取以及过滤，步骤4）水解，步骤5）干燥。本发明方法操作简单，成本低廉，产品纯度和收率高，提取时间缩短，工业化应用前景广阔。
【专利说明】
以花生根提取防癌剂白藜芦醇的方法[0001]
技术领域
[0002]本发明属于生物提取领域，具体涉及以花生根提取防癌剂白藜芦醇的方法。
[0003]【背景技术】
[0004]白藜芦醇是多酚类化合物，中文别名:3，4 ’，5-三羟基芪;虎杖甙元；芪三酚;芪三酚；3,4’，5_三羟基芪；3,4’，5_三羟基二苯乙烯；(E)-5-[2-(4-羟苯基)-乙烯基]-1，3-苯二酚，3,4,5_三羟基反式(E)-3,5,4’_三羟基芪。白藜芦醇是一种生物性很强的天然多酚类物质，又称为芪三酚，是肿瘤的化学预防剂，可作为防癌剂使用，也是对降低血小板聚集，预防和治疗动脉粥样硬化、心脑血管疾病的化学预防剂。白藜芦醇是一种对人类健康有着显著保健作用的天然活性物质，已引起国际社会的普遍关注。
[0005]在1939年首次发现白藜芦醇，20世纪70年代首次发现葡萄中含有这种物质，后来人们发现虎杖、花生、桑椹等植物中也含有这种成分。天然白藜芦醇是一种天然活性成分， 它能以游离态(顺式、反式)和糖苷结合态(顺式、反式)2种形式在植物中分布及生物合成， 且均具有抗氧化效能，其中反式异构体的生物活性强于顺式，是葡萄中的一种重要的植物抗毒素。人们对其自然资源进行了广泛的研究，至少在21个科、31个属的72种植物中发现了白藜芦醇，如:葡萄科的葡萄属、蛇葡萄属，豆科的落花生属、决明属、槐属，百合科的藜芦属，桃金娘科的桉属，寥科的寥属等。
[0006]天然植物虎杖中含有大量的虎杖甙(又名白藜芦醇甙)和白藜芦醇从中提取白藜芦醇并且取得了可喜的进展，但由于其原料虎杖为中药，原料来源较少，从中提取白黎芦醇存在与药争源。近年来研究结果表明，花生红衣与花生根中也含有相当多的白藜芦醇。虽然花生根含量比虎杖中要低，但原料来源丰富，价格低廉。近年来，已经有多篇文献对提取工艺进行了研究，但是仍然存在提取率低、提取成本高以及操作工艺繁琐等缺陷。
【发明内容】
[0007]本发明的目的是解决现有技术中白藜芦醇提取工艺提取率低、提取成本高以及操作工艺繁琐等缺陷，提供了以花生根提取防癌剂白藜芦醇的方法。
[0008]本发明是通过如下技术方案来实现的:以花生根提取防癌剂白藜芦醇的方法，其包括如下步骤:步骤1)浸泡和粉碎，步骤2)混匀和提取，步骤3)浓缩、提取以及过滤，步骤4)水解，步骤 5)干燥。
[0009]具体地，所述方法包括如下步骤:步骤1):将花生秧下部的根剪下来，浸泡在5%(w/w)的氯化钠溶液中120min，然后取出， 洗净晾干，粉碎成10-50目的粉末；步骤2):将步骤1)所得粉末与硅藻土按照1:1的质量比混合均匀得到混合物，然后添加占混合物10倍重量的60%(v/v)的乙醇浸泡30min，再加热至50-55°C，回流提取60-100min， 收集提取液；步骤3):将步骤2)得到的提取液蒸馏回收乙醇，然后将残液浓缩至稠浆状提取液，再添加两倍体积的95%(v/v)的乙醇搅拌均勾，静置30-50min，再添加l%(w/w)的活性炭，200转/ min搅拌30min，停止搅拌，过滤，收集滤液；步骤4):将滤液蒸馏回收乙醇，然后往残液中添加10%的稀硫酸调节pH为2.5,维持在70 °(:搅拌水解4-6小时，再添加1M的氢氧化钠溶液调节水解液的pH为7;步骤5 ):将步骤4)的水解液置于4 °C的条件下12小时，过滤，减压干燥，得到白黎芦醇提取物。
[0010]本发明还公开了按照所述的方法获得的白黎芦醇提取物，其可作为防癌剂使用。
[0011]本发明取得的有益效果主要但不限于以下几点:提取工艺中采用硅藻土与花生根粉末混合，可通过硅藻土的吸附作用，使得细胞壁稳定性进一步下降，细胞胀裂过程加剧，提高白黎芦醇的浸出率，同时吸附力较小，容易解离， 而且硅藻土的成本小于树脂等吸附材料，减轻了企业负担；花生根经盐环境逆境胁迫，可以诱导活性分子的分泌，而且使得细胞壁处于不稳定状态，白藜芦醇含量相应增加，提高了白藜芦醇的产量；优化了乙醇萃取的料液比和温度等提取参数，使用酸碱水解，避免了使用酶水解，节约了企业成本；采用本发明提取方法生产成本低，而且溶剂消耗少成本低廉，产品纯度和收率高，提取时间缩短，操作步骤简单，工业化应用前景广阔。【具体实施方式】
[0012]为了使本技术领域的人员更好地理解本申请中的技术方案，下面将结合本申请具体实施例，对本发明进行更加清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。[0〇13] 实施例1以花生根提取防癌剂白藜芦醇的方法，其包括如下步骤:步骤1):将花生秧下部的根剪下来，浸泡在5%(w/w)的氯化钠溶液中120min，然后取出， 洗净晾干，粉碎成10目的粉末；步骤2):将步骤1)所得粉末与硅藻土按照1:1的质量比混合均匀得到混合物，然后添加占混合物10倍重量的60%( v/v)的乙醇浸泡30min，再加热至50°C，回流提取60min，收集提取液；步骤3):将步骤2)得到的提取液蒸馏回收乙醇，然后将残液浓缩至稠浆状提取液，再添加两倍体积的95%(v/v)的乙醇搅拌均勾，静置30min，再添加l%(w/w)的活性炭，200转/min 搅拌30min，停止搅拌，过滤，收集滤液；步骤4):将滤液蒸馏回收乙醇，然后往残液中添加10%(w/w)的稀硫酸调节pH为2.5,维持在70°C搅拌水解4小时，再添加1M的氢氧化钠溶液调节水解液的pH为7;步骤5 ):将步骤4)的水解液置于4 °C的条件下12小时，过滤，减压干燥，得到白黎芦醇提取物;经HPLC检测提取物中白黎芦醇的含量为35.1%，收率为82.6%。
[0014]实施例2以花生根提取防癌剂白藜芦醇的方法，其包括如下步骤:步骤1):将花生秧下部的根剪下来，浸泡在5%(w/w)的氯化钠溶液中120min，然后取出， 洗净晾干，粉碎成50目的粉末；步骤2):将步骤1)所得粉末与硅藻土按照1:1的质量比混合均匀得到混合物，然后添加占混合物10倍重量的60%(v/v)的乙醇浸泡30min，再加热至55°C，回流提取lOOmin，收集提取液；步骤3):将步骤2)得到的提取液蒸馏回收乙醇，然后将残液浓缩至稠浆状提取液，再添加两倍体积的95%(v/v)的乙醇搅拌均勾，静置50min，再添加l%(w/w)的活性炭，200转/min 搅拌30min，停止搅拌，过滤，收集滤液；步骤4):将滤液蒸馏回收乙醇，然后往残液中添加10%(w/w)的稀硫酸调节pH为2.5,维持在70°C搅拌水解6小时，再添加1M的氢氧化钠溶液调节水解液的pH为7;步骤5 ):将步骤4)的水解液置于4 °C的条件下12小时，过滤，减压干燥，得到白黎芦醇提取物;经HPLC检测提取物中白黎芦醇的含量为35.3%，收率为83.1%。
[0015]对比例1操作工艺同实施例1，不同在于缺少步骤1)浸泡到氯化钠溶液的步骤;经HPLC检测提取物中白黎芦醇的含量为27.5%，收率为63.9%。
[0016]对比例2操作工艺同实施例1，不同在于缺少步骤2)添加硅藻土的步骤;经HPLC检测提取物中白黎芦醇的含量为28.9%，收率为69.5%。
[0017]最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。
【主权项】
1.以花生根提取防癌剂白藜芦醇的方法，其包括如下步骤:步骤1)浸泡和粉碎，步骤2) 混匀和提取，步骤3)浓缩、提取以及过滤，步骤4)水解，步骤5)干燥。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤:步骤1):将花生根剪下来，浸泡在5%(w/w)的氯化钠溶液中120min，然后取出，洗净晾 干，粉碎成10-50目的粉末；步骤2):将步骤1)所得粉末与硅藻土按照1:1的质量比混合均匀得到混合物，然后添加 占混合物10倍重量的60%(v/v)的乙醇浸泡30min，再加热至50-55°C，回流提取60-100min， 收集提取液；步骤3):将步骤2)得到的提取液蒸馏回收乙醇，然后将残液浓缩至稠浆状提取液，再添 加两倍体积的95%(v/v)的乙醇搅拌均勾，静置30-50min，再添加l%(w/w)的活性炭，200转/ min搅拌30min，停止搅拌，过滤，收集滤液；步骤4):将滤液蒸馏回收乙醇，然后往残液中添加10%的稀硫酸调节pH为2.5,维持在70 °(:搅拌水解4-6小时，再添加1M的氢氧化钠溶液调节水解液的pH为7;步骤5):将步骤4)的水解液置于4°C的条件下12小时，过滤，减压干燥，得到白黎芦醇提 取物。3.按照权利要求1-2任其一所述的方法获得的白黎芦醇提取物。
【文档编号】C07C37/82GK106008173SQ201610337866
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年5月22日
【发明人】陈佩, 董景峰, 谢来宾, 王鹏亭, 柴行, 周秋云, 谢海涛
【申请人】深圳市先康达生物科技有限公司