一种细菌性阴道病联合测定试剂盒的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种细菌性阴道病联合测定试剂盒。
【背景技术】
[0002]细菌性阴道病(Bacterial Vaginosis简称BV)，是妇科三种最常见的疾病之一。BV的病原体可产生毒力因子造成上皮细胞损伤，使液体渗出及阴道鳞状上皮细胞脱落，产生典型的BV的分泌物。加特纳菌等细菌附着在脱落的阴道上皮细胞上形成线索细胞。阴道分泌物的生化成分发生相应改变时，PH值则升高。乳酸杆菌尤其是产过氧化氢的乳酸杆菌对维持正常阴道的生态内环境十分关键，但碱性环境不利于乳杆菌的黏附和生长，利于加德纳菌等厌氧菌的生长，从而引发细菌性阴道病。妊娠妇女发病率高，提示与雌激素水平相关。其病理特征无炎症病变和白细胞浸润。酶和有机酸可破坏宿主的防御机制，如溶解宫颈黏液，可促进微生物进入上生殖道，引起上生殖道炎症。
[0003]随着检验医学的发展，检测阴道分泌物的新指标:唾液酸苷酶、过氧化氢、白细胞酯酶、PH值，已开始互补甚至替代旧指标应用于临床。唾液酸苷酶是普雷沃菌、拟杆菌、加德纳氏菌等BV致病菌分泌的特异性酶，阳性表明有细菌性阴道病；过氧化氢的浓度是反映阴道微生态平衡的重要指标，产H202的乳酸杆菌是维系阴道微生态平衡的优势菌；白细胞酯酶为多形核白细胞释放的酯酶，在健康状态下含量低。机体发生炎症反应时，由于多形核白细胞的趋化性，在炎性病灶聚集并大量释放白细胞酯酶，因此检测阴道LE的含量可反映细菌性阴道病症的程度；pH值是反映阴道微生态平衡的重要指标。
【发明内容】
[0004]本实用新型所要解决的技术问题是提供一种细菌性阴道病联合测定试剂盒，其制造和使用均方便。为此，本实用新型采用以下技术方案:
[0005]一种细菌性阴道病联合测定试剂盒，包括干化学反应装置，其特征在于所述干化学反应装置由上下两块塑料板和反应基组成，其中上塑料板有四个通孔，分别为PH值孔、白细胞酯酶孔、过氧化氢孔和唾液酸苷酶孔；下塑料板有一个对应处于上塑料板四个通孔下方的凹槽；所述反应基处在所述凹槽内，所述反应基由一块载体层和四块反应底物固化层组成，所述四块反物固化层分别为过氧化氢孔反应底物固化层、白细胞酯酶孔反应底物固化层、唾液酸苷酶孔反应底物固化层和pH值孔反应底物固化层；所述四块反应底物固化层固定在载体层之上并分别一一对应地处于所述四个通孔的其中一个通孔下方。
[0006]在采用上述技术方案的基础上，本实用新型还可采用以下进一步的技术方案:
[0007]所述凹槽和载体层均为长条形，所述四个通孔的位置相应处在它们的上方。
[0008]所述四块反应底物固化层由玻璃纤维滤纸，纤维素滤纸，层析纸，聚酯膜或尼龙膜包被底物溶液烘干切割而成。
[0009]所述载体层由一面带有粘性的PET、PVC、PE或PS片材中的一种切割而成。
[0010]相邻反应底物固化层之间有间距，间距为:5mm-15mm。
[0011]上塑料板和下塑料板以卡槽的形式固定连接。
[0012]由于采用本实用新型的技术方案，本发明的细菌性阴道病联合测定试剂盒在制造时非常方便、良率高，避免一一加入反应基造成的繁琐工序和潜在错误风险，可同时测定过氧化氢浓度、pH值、白细胞酯酶浓度和唾液酸苷酶浓度，集中显示测定结果，评估受检者生殖道的微生态环境、PH值、清洁度、细菌性阴道病致病菌状况；操作简单、准确性高、操作时间短，无需特殊的仪器，适用于临床常规特别是医院门诊的使用。
【附图说明】
[0013]图1为本实用新型细菌性阴道病联合测定试剂盒干反应装置上塑料板的主视图。
[0014]图2为本实用新型细菌性阴道病联合测定试剂盒干反应装置下塑料板的主视图。
[0015]图3为本实用新型细菌性阴道病联合测定试剂盒干反应装置反应基的主视图。
[0016]图4为本实用新型细菌性阴道病联合测定试剂盒干反应装置的剖视图。
【具体实施方式】
[0017]以下通过实施例进一步阐明本实用新型，应该理解的是，这些实例例仅用于例证的目的，决不限制本实用新型的范围。
[0018]参照附图。本实用新型一种细菌性阴道病联合测定试剂盒，包括干化学反应装置，所述干化学反应装置由上下两块塑料板1、2和长条形反应基3组成，其中上塑料板I有四个通孔，分别为PH值孔11、白细胞酯酶孔12、过氧化氢孔13和唾液酸苷酶孔14 ;下塑料板2中间有一个对应处于上塑料板四个通孔下方的长条形凹槽20 ;长条形反应基3处在长条形凹槽20内，长条形反应基3由一块长条形的载体层30和四块反应底物固化层组成，所述四块反物固化层分别为过氧化氢孔反应底物固化层33、白细胞酯酶孔反应底物固化层32、唾液酸苷酶孔反应底物固化层34和pH值孔反应底物固化层31 ;所述四块反应底物固化层固定在载体层之上并分别一一对应地处于所述四个通孔的其中一个通孔下方。
[0019]过氧化氢孔的反应底物固化层33包被有4-氨基安替吡啉、3，5- 二氯_2_羟基苯磺酸钠或四甲基联苯胺、蔗糖、辣根过氧化物酶和磷酸盐缓冲液。各物质浓度如下:
[0020]4-氨基安替吡啉:250-800mg/m2;3，5-二氯-2-羟基苯磺酸钠:2-11.5g/m2或四甲基联苯胺:5-12.9g/m2;蔗糖:25-40mg/m2;辣根过氧化物酶:5000000-725000U/m 2;磷酸盐缓冲液:40mol/m2。
[0021]所述的白细胞酯酶孔反应底物固化层32包被有5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸乙酯、蔗糖、无水乙醇和磷酸盐缓冲液。各物质浓度如下:
[0022]5-溴-4-氯-3-卩引噪乙酸乙醋:200-800mg/m2;鹿糖:25_40mg/m2;无水乙醇25-40ml/m2;磷酸盐缓冲液:40mol/m2o
[0023]所述的唾液酸苷酶孔反应底物固化层34包被有5-溴-4-氯_3_吲哚-a -D-N-乙酰神经氨酸钠盐、鹿糖、乙酸-乙酸钠缓冲液。各物质浓度如下:
[0024]5-溴-4-氯-3-吲哚-a -D-N-乙酰神经氨酸钠盐:100-325mg/m2;蔗糖:40_76mg/m2;乙酸-乙酸钠缓冲液:50mol/m2;
[0025]所述的pH值孔反应底物固化层31为市售精密pH试纸。
[0026]所述载体层30由一面带有粘性的PET、PVC、PE或PS片材中的一种切割而成。尺寸如下:
[0027]长:50mm-150mm，优选:70mm-90mm;
[0028]宽:lmm-10mm，优选:4mm-6mm;
[0029]厚度:0.lmm-lmm,优选:0.2mm-Q.5mm。
[0030]其上粘帖的四块反应底物固化层间距为:5mm-15mm，优选8mm-12mm。
[0031]上塑料板和下塑料板采用卡槽的形式固定连接。
[0032]试剂盒中还有稀释液和显色液，所述稀释液为含0.9%氯化钠的pH=6.00±0.10的磷酸盐缓冲溶液，所述显色液为含0.5%-1.5%氯化硝基四氮唑蓝的氢氧化钠溶液。
[0033]使用本实用新型的试剂盒进行细菌性阴道病联合测定的使用步骤如下:
[0034](I)取出试剂盒平衡至室温；
[0035](2)撕开铝箔包装，取出本实用新型反应装置并轻轻揭掉铝箔封条；
[0036](3)将取样棉签先在pH值孔下方的反应底物固化层(也即pH值孔反应底物固化层31)点印一下，立即观察结果，然后加入400ul稀释液于试管中，反复挤压管壁，使目的物充分释出；
[0037](4)在反应装置的其它三个通孔下方的反应底物固化层各滴加一滴(35ul)处理过的样品；
[0038](5)在唾液酸苷酶孔下方的固化层滴加一滴显色液，然后将反应装置放置于45°C恒温干浴器上15分钟，判定结果。
[0039]检验结果的解释
[0040]I)过氧化氢孔:其下方的反应底物固化层显示红色或浅红色为阴性，指示可能阴道菌群正常，不变色为阳性，指示菌群可能失调
[0041]2)唾液酸苷酶孔:其下方的反应底物固化层不变色为阴性；显示色紫灰色、褐色或黑色为阳性，表示可能感染细菌性阴道病。
[0042]3)白细胞酯酶孔:其下方的反应底物固化层不变色阴性；显示蓝绿色、蓝色为阳性，表明患者阴道内有不同程度的炎症反应。
[0043]4) pH值孔:其下方的反应底物固化层显示黄色或黄绿色，为阴性；表明样品pH ( 4.5，显示深绿、蓝绿色或蓝色，为阳性，表明样品pH>4.5。
[0044]以上所述仅为本实用新型的优选实施例，对本实用新型而言仅是说明性的，而非限制性的；本领域普通技术人员理解，在本实用新型权利要求所限定的精神和范围内可对其进行许多改变、修改，但都落入本实用新型的保护范围。
【主权项】
1.细菌性阴道病联合测定试剂盒，包括干化学反应装置，其特征在于所述干化学反应装置由上下两块塑料板和反应基组成，其中上塑料板有四个通孔，分别为PH值孔、白细胞酯酶孔、过氧化氢孔和唾液酸苷酶孔；下塑料板有一个对应处于上塑料板四个通孔下方的凹槽；所述反应基处在所述凹槽内，所述反应基由一块载体层和四块反应底物固化层组成，所述四块反物固化层分别为过氧化氢孔反应底物固化层、白细胞酯酶孔反应底物固化层、唾液酸苷酶孔反应底物固化层和pH值孔反应底物固化层；所述四块反应底物固化层固定在载体层之上并分别一一对应地处于所述四个通孔的其中一个通孔下方。2.如权利要求1所述的细菌性阴道病联合测定试剂盒，其特征在于所述凹槽和载体层均为长条形，所述四个通孔的位置相应处在它们的上方。3.如权利要求1所述的细菌性阴道病联合测定试剂盒，其特征在于所述四块反应底物固化层由玻璃纤维滤纸，纤维素滤纸，层析纸，聚酯膜或尼龙膜包被底物溶液烘干切割而成。4.如权利要求1所述的细菌性阴道病联合测定试剂盒，其特征在于所述载体层由一面带有粘性的PET、PVC、PE或PS片材中的一种切割而成。5.如权利要求1所述的细菌性阴道病联合测定试剂盒，其特征在于相邻反应底物固化层之间有间距，间距为:5mm-15mm。6.如权利要求1所述的细菌性阴道病联合测定试剂盒，其特征在于上塑料板和下塑料板以卡槽的形式固定连接。
【专利摘要】本实用新型提供了一种细菌性阴道病联合测定试剂盒，其干化学反应装置的上塑料板有pH值孔、白细胞酯酶孔、过氧化氢孔和唾液酸苷酶孔；下塑料板有凹槽；反应基处在长条形凹槽内，反应基上有过氧化氢孔反应底物固化层、白细胞酯酶孔反应底物固化层、唾液酸苷酶孔反应底物固化层和pH值孔反应底物固化层。本实用新型制造和使用均可方便，可同时评估受检者生殖道的pH值、细菌性阴道病致病菌状况、清洁度、微生态环境；其操作简单，检测时间短，无需特殊的仪器，适用于临床常规特别是医院门诊的使用。
【IPC分类】C12M1/34
【公开号】CN204714803
【申请号】CN201520283720
【发明人】任晶晶
【申请人】杭州协合医疗用品有限公司
【公开日】2015年10月21日
【申请日】2015年5月4日