专利名称：具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料的制作方法
技术领域：
本发明涉及生物医用材料和高分子化学领域，特别是涉及一种能够促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料及其制备和用途。
背景技术：
聚氨酯(PU)材料具有优良的耐磨性、耐挠曲、软触感、耐湿气和耐多种化学品性能，以及易于加工，能采用常规方法消毒等优点，因此在各种医疗环境特别是在制造植入人体的各种器件如人工心脏瓣膜、人工血管等方面有巨大应用价值。然而，传统的聚氨酯材料的血液相容性还未彻底解决，因此制约了其临床应用。此外，如果聚氨酯材料能够同时具有良好的细胞相容性，能有效促进人体细胞的黏附和生长，可以使其在作为人工血管材料、植入人体的人造器官与器件的生物医用材料方面发挥更大的用途。
医用高分子材料的表面性能在其应用过程中起关键性作用，决定了材料与人体血液、细胞、组织的生物反应，而对材料的表面设计和修饰就成为改变材料表面性能的重要手段。聚乙二醇(PEG)能够阻抗多种蛋白质和血细胞的粘附，是一种理想的改善生物医用材料表面血液相容性的物质。Lee等人(J.Biomed.Mater.Res.，40，314-323，1998)用PEG改性PU后，对改性后的表面进行蛋白质吸附和血小板黏附试验，发现用分子量小于10000的PEG改性后的表面具有显著的抗蛋白吸附和血小板黏附作用。利用PEG作为间隔臂再接枝其它活性物质到基材表面，可以在材料表面形成一种生物活性表面层(Biomaterials，24，2213-2223，2003)，在PEG链段和生物活性分子的协同作用下，有效抑制或促进特定的生理过程，使基材表面生物性能得到明显改善。此外，对黏附蛋白的研究表明，黏附蛋白结构中的精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸(Arg-Gly-Asp)RGD三肽为主要的细胞黏附决定簇。RGD是许多细胞表面某些整合素(如α3β1、α5β1、αvβ1)特异性配体之一，是目前应用最广泛，且被证明是最有效的促黏附多肽。Maheshwari等(J.Cell.Sci.，113，1677-1686，2000)采用一个星形PEG连接多个YGRGD的形式，造成肽在材料表面的丛集，以促进肽段与丛集整合素的结合，提高成纤维细胞的黏附。Wang等人把蛋白质和RGD多肽通过PEG间隔臂接枝到PU表面，获得了一种促进内皮细胞黏附与生长的表面(Biomacromolecules，3，1286-1295，2002)，提高基材的生物相容性。另外，McClung等人的研究表明ε-氨基端自由的赖氨酸对血纤维蛋白溶酶原(Plg)有特殊的高亲合力(J.Biomed Mater Res.，66A，795-801，2003)，并且固定的Plg在t-PA的作用下迅速转变成纤溶酶具有溶解血块的能力(Biomaterials，22，1919-1924，2001)。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是基于以上研究，提供一种改性的聚氨酯材料，该材料具有良好的细胞相容性，能够有效促进人体细胞的黏附和生长，并且具有良好的血液相容性，能够有效溶解材料表面形成的血栓，从而可作为人工血管材料、植入人体的人造器官与器件的生物医用材料，具有广泛的用途；同时，该材料的制备方法较简单，易于控制，成本较低廉。
本发明按下述技术方案解决其技术问题本发明提供的具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料，由修饰层和基层组成，基层由普通商用聚氨酯材料或合成聚氨酯材料构成，修饰层是在该基层的表面通过化学修饰方法而形成，修饰层中含有与聚氨酯基材通过共价健链接的PEG间隔基，以及利用PEG末端官能团共价健链接的NHS进行表面接枝而同时引入的两种生物活性物质RGD多肽和赖氨酸，材料表面的RGD多肽使其具有促进细胞黏附生长的功能，材料表面的赖氨酸使其具有溶解血栓的功能，NHS为N-羟基琥珀酰亚胺。
本发明提供的上述聚氨酯材料，是通过化学修饰方法对普通商用聚氨酯材料或合成聚氨酯材料进行表面修饰而得到。具体方法是通过化学修饰方法，先在基层表面接枝带有活性基团的聚乙二醇间隔基，再利用聚乙二醇上的官能团与N，N’-二琥珀酰亚胺基碳酸酯(DSC)生成活泼的反应基团NHS，然后通过NHS表面接枝同时引入两种生物活性物质RGD多肽和赖氨酸，从而构成修饰层；基层采用普通商用聚氨酯材料或合成聚氨酯材料，其和修饰层构成所述的具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料。本方法的步骤包括用MDI对PU材料进行官能化，PEG的表面接枝，表面引入NHS活性反应基团，RGD多肽和赖氨酸的接枝，赖氨酸的ε-NH2的脱保护。
本发明提供的具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料，作为人工血管材料、植入人体的人造器官与器件的生物医用材料，在生物医用领域具有广泛的用途。
本发明与现有技术相比，具有以下的主要优点其一.具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能本发明提供的是改性的聚氨酯材料，即在现有的聚氨酯材料的表面同时接枝有RGD多肽和赖氨酸，这两种生物活性物质通过共价键的方式固定在聚氨酯材料表面，通过RGD多肽的特殊活性使材料具有良好的细胞相容性，能够有效促进人体细胞的黏附和生长(见附图2)；同时通过赖氨酸使其能够有效的选择性吸附血纤维蛋白溶酶原Plg，通过与Plg激活物的作用，激活血纤维蛋白溶解系统，使在材料表面形成的血栓得到有效溶解。
其二.具有广泛的用途可作为生物医用材料，如作为人工血管材料、植入人体的人造器官与器件等医用材料。
其三.制备方法较简单，易于控制，成本较低廉。
总之，本发明提供的聚氨酯材料具有促进细胞黏附生长和溶血栓的功能，能够在医疗领域，特别是作为人工血管材料、植入人体的人造器官与器件的生物医用材料，具有广泛的用途；同时，该材料的制备方法较简单，易于控制，成本较低廉。
图1是具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料的制备过程示意图。
图2是未经表面修饰的PU材料(PU)、表面接枝了RGD多肽和赖氨酸的PU材料(PU-PEG-Lysine/RGD)对L-02人体肝细胞黏附生长的显微镜图。试验条件为在材料上加入浓度为1×103的人体肝细胞悬液，培养基为含20％FBS的RPMI 1640，在37℃下5％CO2恒温培养箱中培养44小时，然后通过共聚焦显微镜观察肝细胞在修饰前后的PU材料表面黏附与生长情况(图中显微镜放大倍数为×40)。
图3是未经表面修饰的PU材料、经过表面修饰但未进行赖氨酸的ε-NH2脱保护的材料、以及进行了赖氨酸的ε-NH2脱保护的材料PU-PEG-Lys(t-BOC)/RGD溶解血栓性能测试图谱。
具体实施例方式
本发明提供的具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料，由修饰层和基层组成，修饰层是通过化学修饰方法在聚氨酯基材上逐步进行表面修饰而获得，即首先利用聚乙二醇阻抗非特异作用，在最大程度上降低非特异蛋白的吸附及细胞的粘附从而抑制凝血通道；然后利用聚乙二醇末端链接枝两种生物活性物质RGD多肽和ε-赖氨酸，通过赖氨酸溶解并彻底消除血栓，通过RGD多肽促进细胞黏附与生长，得到所述聚氨酯材料。
下面结合实施例及附图对本发明作进一步说明，但不限定本发明。
一.具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料由修饰层和基层组成。基层由普通商用聚氨酯材料或合成聚氨酯材料构成，修饰层是在该基层的表面通过化学修饰方法而形成。修饰层中含有与聚氨酯基底材料通过共价健链接的PEG间隔基，以及利用PEG末端的官能团共价健链接的NHS进行表面接枝引入的两种生物活性物质RGD多肽和赖氨酸，使其同时具有促进细胞黏附生长和溶解血栓的功能。
二.具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料的制备方法1.制备通过化学修饰方法，先在基材表面以共价健方式接枝带有活性基团的聚乙二醇间隔基，再利用聚乙二醇上的官能团与DSC进行反应生成活泼的反应基团NHS，然后通过NHS表面接枝两种生物活性物质RGD多肽和赖氨酸。通过基材表面的RGD多肽使其具有促进细胞黏附生长的功能；通过基材表面的赖氨酸激活血纤维蛋白溶解途径，使其具有溶解血栓的功能，从而构成修饰层。基材采用普通商用聚氨酯材料或合成聚氨酯材料。基层和修饰层构成具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料。
参见附图1，具体步骤包括用MDI对PU材料进行官能化，PEG的表面接枝，表面引入NHS活性反应基团，RGD多肽和赖氨酸的接枝，以及赖氨酸的ε-NH2的脱保护。
(1)用MDI对PU材料进行官能化首先将纯化好的粒状商用聚氨酯材料或合成聚氨酯材料溶于挥发性有机溶剂中，倒入平底模具内，待溶剂挥发后再进行真空干燥处理得到PU膜，将PU膜切成直径为10mm厚为0.5mm的小片，放入质量比为3～7.5％的4，4’-二苯基甲烷二异氰酸酯(MDI)的甲苯溶液中，搅拌并加热至40～50℃后，通入N2保护，然后将三乙胺按照质量比MTEA/MToluene＝1～2.5％加入反应体系，混合均匀后开始反应，60～120分钟后用甲苯洗涤PU膜4～6次。
(2)PEG的表面接枝将上述官能化的PU膜放入质量比为5～20％的聚乙二醇的甲苯溶液中，搅拌下加热到40～50℃反应，12～24小时后用蒸馏水洗涤1～3次，然后真空干燥12～24小时。
(3)表面引入NHS活性反应基团取出干燥好的PU膜，放入质量比为1～3.5％DSC的乙腈溶液中，再通入N2保护，再将三乙胺按照摩尔比MTEA/MDSC＝1～2.5％加入反应体系，搅拌下反应4～8个小时，得到表面具有NHS活性反应基团的聚氨酯材料，然后取出用乙腈迅速洗涤1～3次。
(4)RGD多肽和赖氨酸的接枝将上述洗涤后的PU膜放入含有H-Lys(t-BOC)-OH和RGD的1～10mg/mL PBS缓冲溶液中，其中H-Lys(t-BOC)-OH与RGD的质量比为1∶2～2∶1，该缓冲溶液pH＝7.4～9.4，搅拌反应过夜，得到PU-PEG-Lys(t-BOC)/RGD膜。
(5)赖氨酸的ε-NH2的脱保护先将PU-PEG-Lys(t-BOC)/RGD膜浸入15～40％的三氟乙酸溶液中，再搅拌反应15～30分钟。
通过上述步骤，得到具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料。
L-02人体肝细胞在修饰前后的PU材料表面黏附与生长情况见附图2。在改性前后的材料上加入培养基为含20％FBS的RPMI 1640，浓度为1×103的人体肝细胞悬液，在37℃下5％CO2恒温培养箱中培养44小时。通过显微镜观察可以看到，未经表面修饰的PU表面上很难找到完整、明确的铺展细胞，表明它不能有效促进人体细胞的黏附与生长。表面接枝了RGD多肽和赖氨酸的PU材料(PU-PEG-Lysine/RGD)上细胞已充分铺展在基材表面，细胞生长状态良好，表明人体细胞在改性的PU上总体生长形态与生长进度均十分优良。细胞培养的结果表明，这种新型聚氨酯材料能够有效促进人体细胞的黏附与生长，改善材料的细胞相容性。
表面修饰前后的PU材料的溶解血栓性能测试图谱见附图3，显然未经过表面修饰的PU材料浸泡于血浆后，在血栓溶解试验的第8分钟后产生的血栓量达到最大，并一直保持，随着时间的延长无任何溶解迹象，说明未经过表面修饰的PU材料不具有血栓溶解的能力；而经过表面修饰的PU材料虽然在血栓溶解试验的第6分钟后达到了产生血栓量的最大值，但在测试条件下16分钟左右即可将该材料最初所形成的血栓全部溶解，证明该PU材料具有十分显著的溶解血栓的能力。
2.具体实例实施例1首先将纯化好的粒状商用聚氨酯材料(上海鹏博盛聚氨酯有限公司产品)溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，倒入平底模具内，待溶剂挥发后再进行真空干燥处理得到PU膜，将PU膜切成直径为10mm厚为0.5mm的小片，放入质量比为5％的MDI的甲苯溶液中，搅拌并加热至50℃后，通入N2保护，将三乙胺(TEA)按照质量比MTEA/MToluene＝2.5％加入反应体系，混合均匀后开始反应，60分钟后用甲苯洗涤PU膜4次。再将上述官能化的PU膜放入质量比为10％的聚乙二醇的甲苯溶液中，搅拌下加热到40℃反应，24小时后用蒸馏水洗涤2次，然后真空干燥24小时。取出干燥好的PU膜，放入质量比为1.5％DSC的乙腈溶液中，通入N2保护，然后将三乙胺按照摩尔比MTEA/MDSC＝2.5％加入反应体系，搅拌下反应6个小时，取出用乙腈迅速洗涤3次。洗涤后的PU膜放入含有H-Lys(t-BOC)-OH和RGD的10mg/mL PBS缓冲溶液中，其中H-Lys(t-BOC)-OH与RGD的质量比为1∶1，该缓冲溶液pH＝8.8，搅拌反应过夜，得PU-PEG-Lys(t-BOC)/RGD膜。最后将PU-PEG-Lys(t-BOC)/RGD膜浸入15％的三氟乙酸(TFA)溶液中，搅拌反应30分钟后，即可制备得到上述具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料。
实施例2在三口瓶中加入磁子，称取5克聚四氢呋喃醚二醇(分子量为1000)，5克甲苯，以及量取25mL的DMF，然后用恒温磁力搅拌器加热到110℃保温1小时，将水份以甲苯共沸物的方式去除。然后，将其控温在60℃，然后将称量的4.0克MDI和量取的25mL的DMF混合溶液加入到反应的三口瓶中，在此温度段下控温1.5小时。然后用滴管缓缓加入0.9克的扩链剂1，4-丁二醇于三口烧瓶中，升温到80℃，控温反应3.5小时。再将三口瓶中的反应液沿玻棒倒入准备好的盛有蒸馏水的大烧杯中，边倒边快速搅拌，得到白色的粘稠产物为聚氨酯，将其取出后放入表面皿中，然后将其放入真空干燥箱中40℃下真空干燥一周。
将合成得到的聚氨酯材料纯化后溶于DMF中，倒入平底模具内，待溶剂挥发后再进行真空干燥处理得到PU膜，将PU膜切成直径为10mm厚为0.5mm的小片，放入质量比为7.5％的MDI的甲苯溶液中，搅拌并加热至50℃后，通入N2保护，将TEA按照质量比MTEA/MToluene＝2.5％加入反应体系，混合均匀后开始反应，80分钟后用甲苯洗涤PU膜5次。再将上述官能化的膜放入质量比为15％的聚乙二醇的甲苯溶液中，搅拌下加热到45℃反应，18小时后用蒸馏水洗涤3次，然后真空干燥18小时。取出干燥好的PU膜，放入质量比为2％DSC的乙腈溶液中，通入N2保护，然后将三乙胺按照摩尔比MTEA/MDSC＝1.5％加入反应体系，搅拌下反应5个小时，取出用乙腈迅速洗涤3次。洗涤后的PU膜放入含有H-Lys(t-BOC)-OH和RGD的10mg/mL PBS缓冲溶液中，其中H-Lys(t-BOC)-OH与RGD的质量比为1∶1，该缓冲溶液pH＝8.0，反应过夜，搅拌反应4小时，得PU-PEG-Lys(t-BOC)/RGD膜。最后将PU-PEG-Lys(t-BOC)/RGD膜浸入25％的三氟乙酸(TFA)溶液中，搅拌反应20分钟后，即可制备得到上述具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料。
实施例3首先将纯化好的粒状商用聚氨酯材料(上海鹏博盛聚氨酯有限公司产品)溶于DMF中，倒入平底模具内，待溶剂挥发后再进行真空干燥处理得到PU膜，将PU膜切成直径为10mm厚为0.5mm的小片，放入质量比为6％的MDI的甲苯溶液中，搅拌并加热至40℃后，通入N2保护，将TEA按照质量比MTEA/MToluene＝2.5％加入反应体系，混合均匀后开始反应，120分钟后用甲苯洗涤PU膜4次。再将上述官能化的膜放入质量比为20％的聚乙二醇的甲苯溶液中，搅拌下加热到45℃反应，16小时后用蒸馏水洗涤3次，然后真空干燥24小时。取出干燥好的PU膜，放入质量比为3％DSC的乙腈溶液中，通入N2保护，然后将三乙胺按照摩尔比MTEA/MDSC＝2.5％加入反应体系，搅拌下反应7个小时，取出用乙腈迅速洗涤3次。洗涤后的PU膜放入含有H-Lys(t-BOG)-OH和RGD的10mg/mL PBS缓冲溶液中，其中H-Lys(t-BOC)-OH与RGD的质量比为1∶1，该缓冲溶液pH＝8.8，反应过夜，搅拌反应5小时，得PU-PEG-Lys(t-BOC)膜。最后将PU-PEG-Lys(t-BOC)/RGD膜浸入30％的三氟乙酸(TFA)溶液中，搅拌反应15分钟后，即可制备得到上述具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料。
三.具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料的用途本发明中，具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料可作为人工血管材料、植入人体的人造器官与器件等生物医用材料。
权利要求
1.一种具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料，其特征是由修饰层和基层组成，基层由普通商用聚氨酯材料或合成聚氨酯材料构成，修饰层是在该基层的表面通过化学修饰方法而形成，修饰层中含有与聚氨酯基底材料通过共价健链接的PEG间隔基，并利用PEG末端官能团共价健链接的NHS进行表面接枝而同时引入的两种生物活性物质RGD多肽和赖氨酸，使其具有促进细胞黏附生长和溶解血栓的功能，PEG为聚乙二醇，NHS为N-羟基琥珀酰亚胺，RGD为精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸多肽。
2.根据权利要求1所述的具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料，其特征在于所述聚氨酯材料浸泡于血浆后，在测试条件下14～17分钟材料表面所形成的血栓能够全部溶解消失。
3.一种制备如权利要求1或2所述的具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料的方法，其特征是通过化学修饰方法，先在基层表面接枝带有活性基团的聚乙二醇间隔基，再利用聚乙二醇上的官能团与DSC反应生成活泼的反应基团NHS，然后通过NHS表面同时接枝两种生物活性物质RGD多肽和赖氨酸，使其具有促进细胞黏附生长和溶解血栓的功能，从而构成修饰层；基层采用普通商用聚氨酯材料或合成聚氨酯材料，其和修饰层构成所述的具有促进细胞黏附生长和溶解血栓的聚氨酯材料，DSC是N，N’-二琥珀酰亚胺基碳酸酯；上述化学修饰方法的具体步骤包括(1)用MDI对PU材料进行官能化首先将纯化好的粒状商用聚氨酯材料或合成聚氨酯材料溶于挥发性有机溶剂中，倒入平底模具内，待溶剂挥发后再进行真空干燥处理得到PU膜，将PU膜切成直径为10mm厚为0.5mm的小片，放入MDI的甲苯溶液中，加热搅拌并通入N2保护，将TEA加入反应体系，混合均匀后进行反应，再用甲苯洗涤PU膜数次，MDI是4，4’-二苯基甲烷二异氰酸酯，PU是聚氨酯，TEA是三乙胺；(2)PEG的表面接枝将上述官能化的PU膜放入聚乙二醇的甲苯溶液中，搅拌下加热反应进行PEG的接枝，用蒸馏水洗涤和浸泡后，再真空干燥；(3)表面引入NHS活性反应基团取出干燥好的PU膜放入DSC的乙腈溶液中，再通入N2保护，然后将三乙胺加入反应体系，搅拌下反应后，得到表面含有NHS活性反应基团的聚氨酯材料，取出用乙腈洗涤；(4)RGD多肽和赖氨酸的接枝将洗涤后的PU膜放入含有H-Lys(t-BOC)-OH和RGD的PBS缓冲溶液中，反应过夜，得到PU-PEG-Lys(t-BOC)/RGD膜，Lys是赖氨酸，t-BOC是叔丁氧基羰基，RGD是精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸多肽；(5)赖氨酸的ε-NH2的脱保护将PU-PEG-Lys(t-BOC)/RGD膜浸入三氟乙酸溶液中，搅拌下进行赖氨酸的ε-NH2的脱保护，得到上述的具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料。
4.根据权利要求3所述的具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料的制备方法，其特征在于步骤(1)中，先将商用聚氨酯材料或合成聚氨酯材料制备的PU膜放入质量比为3～7.5％MDI的甲苯溶液中，搅拌并加热至40～50℃后，通入N2保护，然后将三乙胺按照质量比MTEA/MToluene＝1～2.5％加入反应体系，混合均匀后开始反应，60～120分钟后用甲苯洗涤PU膜4～6次。
5.根据权利要求3所述的具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料的制备方法，其特征在于步骤(2)中，先将官能化的PU膜放入质量比为5～20％的聚乙二醇的甲苯溶液中，搅拌下加热到40～50℃反应，12～24小时后用蒸馏水洗涤1～3次，然后真空干燥12～24小时。
6.根据权利要求3所述的具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料的制备方法，其特征在于步骤(3)中，取出干燥好的PU膜，放入质量比为1～3.5％DSC的乙腈溶液中，通入N2保护，再将三乙胺按照摩尔比MTEA/MDSC＝1～2.5％加入反应体系，搅拌下反应4～8小时，得到表面具有NHS活性反应基团的聚氨酯材料，然后取出用乙腈迅速洗涤1～3次。
7.根据权利要求3所述的具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料的制备方法，其特征在于步骤(4)中，将上述洗涤后的PU膜放入含有H-Lys(t-BOC)-OH和RGD的1～10mg/mL PBS缓冲溶液中，其中H-Lys(t-BOC)-OH与RGD的质量比为1∶2～2∶1，该缓冲溶液pH＝7.4～9.4，搅拌反应过夜，得到PU-PEG-Lys(t-BOC)/RGD膜。
8.根据权利要求3所述的具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料的制备方法，其特征在于步骤(5)中，先将PU-PEG-Lys(t-BOC)/RGD膜浸入15～40％的三氟乙酸溶液中，然后搅拌反应15～30分钟。
9.一种将权利要求1或2所述的具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料，在作为人工血管材料或植入人体的人造器官与器件的生物医用材料中的用途。
全文摘要
本发明具有促进细胞黏附生长和溶血栓功能的聚氨酯材料由修饰层和基层组成，基层由普通商用聚氨酯材料或合成聚氨酯材料构成，修饰层中含有与聚氨酯基底材料通过共价健链接的PEG间隔基，并利用PEG末端官能团共价健链接的NHS进行表面接枝而同时引入的两种生物活性物质RGD多肽和赖氨酸。本材料的制备步骤包括用MDI对PU材料进行官能化，PEG的表面接枝，引入NHS活性反应基团，RGD多肽和赖氨酸的接枝，赖氨酸的ε－NH
文档编号B01J31/06GK101032692SQ200710051899
公开日2007年9月12日 申请日期2007年4月17日 优先权日2007年4月17日
发明者陈红, 王亮, 王艺峰, 袁琳 申请人:武汉理工大学