一种通过高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维萃取活性物质的方法与流程

本发明涉及活性物质分离提纯的，更具体地说，它涉及一种通过高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维萃取活性物质的方法。

背景技术：

1、脂溶性色素、维生素、生长因子、抗肿瘤药物等活性物质在化学成像、化妆品、组织修复、肿瘤治疗等多个领域具有广泛应用前景，而此类活性物质大多为疏水性活性物质，不可直接在水中进行分散，如何解决这些活性物质在水相环境中的分散和转移成为制约其实际应用的瓶颈。

2、随着纳米技术的发展，不同种类纳米载体被成功开发并用于脂溶性物质的加载和转移。丝素蛋白具有良好的生物相容性和可调节的降解速度，同时具备稳定活性物质、促进活性物质分散/加载/控释的能力，是多种类型活性物质的通用载体。丝素蛋白的结构可以通过修饰进一步优化，形成纳米颗粒、微球、纳米纤维、水凝胶等不同形态，更好满足不同活性物质的递送需要，在保证活性的同时具有可设计的释放行为。而目前研究人员已开发出结构稳定的高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维（sfn），调控浓度可形成溶液或凝胶，并通过物理吸附的方式加载活性物质。

3、但通过上述方法加载活性物质存在如下缺点：（1）因为其水分散液或水凝胶的形式，加载的活性物质需要水溶或水分散，而疏水性活性物质难以于水中溶解或分散；（2）丝蛋白纳米纤维可降低油水界面张力，可以通过乳化的方式在油水体系中包覆疏水性活性物质，然而，通过此法包覆活性物较难去除疏水性溶剂。

技术实现思路

1、针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种通过高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维萃取活性物质的方法，使疏水性活性物质可于水中分散，具有易于去除疏水性溶剂的优点。

2、本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的，一种通过高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维萃取活性物质的方法，包括以下步骤：

3、（1）将疏水性活性物质均匀分散于疏水性溶剂中，获得第一混合液；

4、（2）将高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维加入至水中，获得第二混合液；

5、（3）将所述第一混合液加入至所述第二混合液中，同时在加入过程中，保持所述第一混合液处于所述第二混合液的上层，静置；

6、（4）当所述第一混合液的浓度恒定时，获得处于上层的处理液，移除所述处理液，获得目标产物。

7、在其中一个实施例中，所述疏水性活性物质为油溶活性物质或油分散活性物质。

8、在其中一个实施例中，所述疏水性溶剂为和水不互溶的油脂或非极性有机溶剂。

9、在其中一个实施例中，所述高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维的长度为20-4000nm、直径为5-30nm。

10、在其中一个实施例中，所述高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维中β-折叠的含量大于或等于30%。

11、在其中一个实施例中，所述第二混合液包括高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维水溶液和高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维凝胶的任意一种。

12、在其中一个实施例中，所述第二混合液中所述高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维的浓度小于或等于10w% wt。

13、在其中一个实施例中，所述步骤（4）中，通过观察颜色变化或化学分析判断所述第一混合液的浓度恒定性。

14、在其中一个实施例中，所述步骤（4）中，通过分液或抽取的方法移除所述处理液。

15、上述一种通过高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维萃取活性物质的方法，具有以下有益效果：

16、其一，本发明利用特殊结构丝蛋白对脂溶性物质优异的吸附能力，通过类似萃取方法直接实现疏水性活性物质的水相分散和使用，不涉及复杂的载体制备和疏水性溶剂去除工艺，同时疏水性溶剂可循环使用，方法简单、可控、易于稳定制备，具有优异的产业转化前景；

17、其二，本发明通过物理相互作用实现油溶性药物分散，可实现色素、维生素、抗菌药物、抗肿瘤药物等不同种类活性成分的转移，可解决多个领域活性物水相应用问题，具有优异的普适性；

18、其三，本发明所采用丝蛋白具有优异的生物相容性，结合温和的制备条件，不仅能够有效保持活性成分的活性，同时可避免载体的副作用，极大提升多种活性成分在化妆品、医疗等领域的应用性。

技术特征：

1.一种通过高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维萃取活性物质的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种通过高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维萃取活性物质的方法，其特征在于：所述疏水性活性物质为油溶活性物质或油分散活性物质。

3.根据权利要求1所述的一种通过高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维萃取活性物质的方法，其特征在于：所述疏水性溶剂为和水不互溶的油脂或非极性有机溶剂。

4.根据权利要求1所述的一种通过高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维萃取活性物质的方法，其特征在于：所述高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维的长度为20-4000nm、直径为5-30nm。

5.根据权利要求1所述的一种通过高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维萃取活性物质的方法，其特征在于：所述高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维中β-折叠的含量大于或等于30%。

6.根据权利要求1所述的一种通过高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维萃取活性物质的方法，其特征在于：所述第二混合液包括高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维水溶液和高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维凝胶的任意一种。

7.根据权利要求1所述的一种通过高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维萃取活性物质的方法，其特征在于：所述第二混合液中所述高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维的浓度小于或等于10w% wt。

8.根据权利要求1所述的一种通过高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维萃取活性物质的方法，其特征在于：所述步骤（4）中，通过观察颜色变化或化学分析判断所述第一混合液的浓度恒定性。

9.根据权利要求1所述的一种通过高β-折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维萃取活性物质的方法，其特征在于：所述步骤（4）中，通过分液或抽取的方法移除所述处理液。

技术总结
本发明涉及活性物质分离提纯的技术领域，更具体地说，它涉及一种通过高β‑折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维萃取活性物质的方法，其技术方案要点是，包括以下步骤：（1）将疏水性活性物质均匀分散于疏水性溶剂中，获得第一混合液；（2）将高β‑折叠含量蚕丝蛋白纳米纤维加入至水中，获得第二混合液；（3）将所述第一混合液加入至所述第二混合液中，同时在加入过程中，保持所述第一混合液处于所述第二混合液的上层，静置；（4）当所述第一混合液的浓度恒定时，获得处于上层的处理液，移除所述处理液，获得目标产物。本发明可直接实现疏水性活性物质的水相分散和使用，具有易于去除疏水性溶剂和操作工艺简单的优点。

技术研发人员：王凡,吕强,李瑞,洪奇
受保护的技术使用者：美尚（广州）化妆品股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/12