本发明涉及一种复合光催化抑菌剂及其制备方法,属于水产病害。
背景技术:
1、嗜水气单胞菌广泛分布于淡水环境中,是感染鱼类的主要病原体,会导致疖病、溃疡、出血性败血症等鱼类疾病。这些疾病具有流行区域广,流行周期长,死亡率高等特点,每年造成的经济损失高达几百亿元。
2、在水产养殖中,通常使用抗生素来治疗嗜水气单胞菌的感染,但是,抗生素的过度使用甚至滥用不仅会污染环境,还会诱发抗生素耐药性。因此,开发一种新型的绿色的具有显著抑菌效果的抑菌剂具有重要意义。
3、中药天然产物大黄素含有大π共轭蒽醌结构而具有优秀的光学性能,在可见光照射下可以产生ros,具有高效、无耐药性和副作用的优点,可以作为光催化抑菌剂。现有技术中专利cn115590062a披露了将大黄素作为光催化抑菌剂用于灭活大肠埃希菌及金黄色葡萄球菌,其中对于不同菌种的灭活效果存在差异。现有技术中没有披露以大黄素制备复合光催化抑菌剂,进一步增强大黄素光催化抑菌效果,并用于灭活嗜水气单胞菌的研究。
技术实现思路
1、为了解决现有技术存在的问题,本发明提供了一种复合光催化抑菌剂,通过将大黄素(em)负载到海藻酸钠(sa)中,制备复合光催化抑菌剂em/sa。所述复合光催化抑菌剂em/sa可以显著增强大黄素的光催化抑菌效果。
2、本发明提供了一种复合光催化抑菌剂,所述复合光催化抑菌剂由海藻酸钠和以下(a)-(b)至少一种物质组成:
3、(a)作为活性成分的大黄素;
4、(b)具有蒽醌结构的大黄素衍生物;
5、在本发明的一种实施方式中,所述大黄素衍生物包括芦荟大黄素、大黄素甲醚、大黄酚或大黄酸。
6、本发明还提供了一种复合光催化抑菌剂的制备方法,所述方法包括以下步骤:
7、(1)将大黄素或大黄素衍生物与海藻酸钠水溶液混合,搅拌;
8、(2)将步骤(1)所得溶液与氯化钙溶液混合;
9、(3)将步骤(2)所得混合液冲洗,预冷,冷冻干燥,得到复合光催化抑菌剂。
10、在本发明的一种实施方式中,所述步骤(1)中,大黄素与或大黄素衍生物海藻酸钠的质量比为1:5或更多,或为1:(5-100),或为1:(5-20)。
11、在本发明的一种实施方式中,所述步骤(1)中,海藻酸钠水溶液为将海藻酸钠与水混合,搅拌溶解得到,所述海藻酸钠水溶液的浓度为5-20g/l,优选为10g/l。
12、在本发明的一种实施方式中,所述步骤(1)中搅拌时间为6-10h,优选为8h。
13、在本发明的一种实施方式中,所述步骤(2)中混合方式为,将步骤(1)滴加至氯化钙溶液中,或将步骤(1)所得溶液以5-20ml/min的速度滴加至氯化钙溶液中;优选的,将步骤(1)所得溶液以10ml/min的速度滴加至氯化钙溶液中。
14、在本发明的一种实施方式中,所述步骤(2)中氯化钙溶液的浓度为0.05-0.2mol/l,优选为0.1mol/l。
15、本发明还提供一种灭活嗜水气单胞菌的方法,所述方法为将所述复合光催化抑菌剂与嗜水气单胞菌混合,在光源照射下灭活嗜水气单胞菌。
16、在本发明的一种实施方式中,所述光源包括可见光。
17、在本发明的一种实施方式中,所述光源包括白色荧光灯。
18、在本发明的一种实施方式中,所述光源的功率为5-45w。
19、在本发明的一种实施方式中,所述光源的照射时间为10-60min。
20、在本发明的一种实施方式中,所述复合光催化抑菌剂的添加量为0.2-4mg/ml。
21、在本发明的一种实施方式中,所述方法为将复合光催化抑菌剂加入至嗜水气单胞菌中,避光培养后,光照培养。
22、在本发明的一种实施方式中,所述避光培养时间为1-3h,优选为2h。
23、在本发明的一种实施方式中,所述光照培养时间为不小于10min,优选为10-60min,或优选为30min。
24、本发明还提供含有所述复合光催化抑菌剂,或所述方法制备得到的复合光催化抑菌剂的产品。
25、本发明还提供所述复合光催化抑菌剂,或所述产品在不以疾病治疗诊断为目的的灭活嗜水气单胞菌中的应用。
26、有益效果:
27、(1)本发明通过将大黄素负载到海藻酸钠中,制备复合光催化抑菌剂em/sa,相较于单独使用大黄素,复合光催化抑菌剂em/sa可以实现对嗜水气单胞菌细胞灭活效果的进一步提升。对于菌浓为107cfu/ml的嗜水气单胞菌悬液,复合光催化抑菌剂em/sa(活性成分0.5mg大黄素)相较于0.5mg大黄素的单独使用,在功率为32w可见光作为光源,照射时间为30min的条件下,使得嗜水气单胞菌的存活率从单独使用大黄素的99.33%,下降至了低于21.65%。
28、(2)方法简单,环境友好:负载型光催化抑菌剂em/sa的制备方法简单绿色,且光灭活嗜水气单胞菌过程使用的复合光催化抑菌剂em/sa中只含有中草药天然产物大黄素和海藻酸钠,反应在光照下进行,不会对环境造成二次污染。
29、(3)高效省时:本发明只需将em/sa投入到嗜水气单胞菌细胞悬液中,用白光灯光照30min,可以高效实现嗜水气单胞菌的光灭活,使得存活率下降至低于21.65%。
1.一种复合光催化抑菌剂,所述复合光催化抑菌剂由海藻酸钠和以下(a)-(b)至少一种物质组成:
2.根据权利要求1所述复合光催化抑菌剂,其特征在于,所述大黄素衍生物包括芦荟大黄素、大黄素甲醚、大黄酚或大黄酸。
3.权利要求1或2所述复合光催化抑菌剂的制备方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述大黄素或大黄素衍生物与海藻酸钠的质量比为1:(5-100)。
5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中,海藻酸钠水溶液为将海藻酸钠与水混合,搅拌溶解得到,所述海藻酸钠水溶液的浓度为5-20g/l。
6.一种灭活嗜水气单胞菌的方法,其特征在于,所述方法为将权利要求1或2所述复合光催化抑菌剂,或权利要求3-5任一所述方法制备得到的复合光催化抑菌剂与嗜水气单胞菌混合,在光源照射下灭活嗜水气单胞菌。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述复合光催化抑菌剂的添加量为0.2-4mg/ml。
8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述光源照射的时间为不小于10min;所述光源包括可见光。
9.含有权利要求1或2所述复合光催化抑菌剂,或权利要求3-5任一所述方法制备得到的复合光催化抑菌剂的产品。
10.权利要求1或2所述复合光催化抑菌剂,或权利要求3-5任一所述方法制备得到的复合光催化抑菌剂,或权利要求6-8任一所述方法,或权利要求9所述产品在不以疾病治疗诊断为目的的灭活嗜水气单胞菌中的应用。