一种适用于MALDI-MSI成像的9-AA基质喷雾方法与流程

本发明属于maldi-msi成像领域，具体涉及一种适用于maldi-msi成像的9-aa基质喷雾方法。

背景技术：

1、基质辅助激光解吸电离质谱成像(matrix-assisted laser desorptionionization mass spectrometry imaging,maldi-msi)是一种兼具物质鉴定和成像功能的先进质谱成像技术，能够直接在组织中提供生物分子丰度和空间信息的分子图。该技术于20世纪80年代开始发展，应用范围从蛋白质、多肽、核酸等生物大分子拓展到了氨基酸、脂质、神经递质等小分子代谢物的检测，同时开发了碳、硅、金属纳米材料等无机材料和新型有机分子等新型基质，使maldi-msi的检测灵敏度、质量分辨率、成像分辨率均得到显著提升，这些新型基质虽能提高物质检测灵敏度，但是很难使其均匀的附着在样品表面，从而影响maldi-msi成像效果。

2、9-aa(9-氨基吖啶，9-aminoacridine)是maldi-msi成像过程中常用的基质，9-aa由于极易结晶，难以均匀分布在导电玻片，影响maldi-msi成像结果。因此迫切需要一种适用于改善9-aa基质在导电玻片分散性的喷雾方法，以改善maldi-msi成像，更好提供组织切片原位点信息。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种用于maldi-msi成像的9-aa基质喷雾方法，本发明通过配制9-aa基质，并在喷雾过程中设置包括气压、喷头温度、喷雾轮数、基质流速、喷头移动速度等喷雾参数，使9-aa基质均匀的附着于组织切片表面，从而获得良好的maldi-msi成像效果。

2、为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

3、一种适用于maldi-msi成像的9-aa基质喷雾方法，包括以下步骤：

4、将80％乙醇水溶液和三氟乙酸加入到9-氨基吖啶中，利用超声仪超声30min，使原料混合均匀得到9-aa基质；

5、使用50％甲醇水溶液排出htx tm-sprayer-htx imaging基质喷雾仪中气泡后，设置喷雾参数如下：气压设置为10psi，喷头温度设置为80℃，喷雾轮数设置为10次，基质流速设置为0.065ml/min，喷头移动速度设置为1200mm/min，喷头移动间隔设置为1mm，气体流速设置为2l/min，干燥时间设置为10s；

6、使用乙腈冲洗定量环两次，注入超声好的9-aa基质；

7、待喷头温度达到设定值，且基质正常从喷头喷出时，开始对选定区域进行基质喷雾；

8、利用喷雾好的样品进行maldi-msi成像。

9、本发明具有以下有益效果：

10、相比于现有技术中存在的由于基质喷雾不均匀会影响maldi-msi成像的结果，导致分子成像效果部分区域出现较多微粒，本发明通过对基质喷雾条件优化后，使9-aa基质均匀的附着于组织切片表面，使分子成像效果平整连贯，呈现出物质原有的效果，从而获得良好的maldi-msi成像效果。

技术特征：

1.一种适用于maldi-msi成像的9-aa基质喷雾方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的适用于maldi-msi成像的9-aa基质喷雾方法，其特征在于：所述气压设置为10psi。

3.根据权利要求1所述的适用于maldi-msi成像的9-aa基质喷雾方法，其特征在于：所述喷头温度设置为80℃。

4.根据权利要求1所述的适用于maldi-msi成像的9-aa基质喷雾方法，其特征在于：所述喷雾轮数设置为10次。

5.根据权利要求1所述的适用于maldi-msi成像的9-aa基质喷雾方法，其特征在于：所述基质流速设置为0.065ml/min。

6.根据权利要求1所述的适用于maldi-msi成像的9-aa基质喷雾方法，其特征在于：所述喷头移动速度设置为1200mm/min。

7.根据权利要求1所述的适用于maldi-msi成像的9-aa基质喷雾方法，其特征在于：所述喷头移动间隔设置为1mm。

8.根据权利要求1所述的适用于maldi-msi成像的9-aa基质喷雾方法，其特征在于：所述气体流速设置为2l/min。

9.根据权利要求1所述的适用于maldi-msi成像的9-aa基质喷雾方法，其特征在于：所述干燥时间设置为10s。

技术总结
本发明公开了一种适用于MALDI‑MSI成像的9‑AA基质喷雾方法，包括以下步骤：将乙醇水溶液和三氟乙酸加入到9‑氨基吖啶中，混合均匀得到9‑AA基质；排出喷雾仪中气泡后，设置喷雾参数；将9‑AA基质注入至喷雾仪中，待喷头温度达到设定值且基质正常从喷头喷出时，开始对选定区域进行基质喷雾；利用喷雾好的样品进行MALDI‑MSI成像。相比于现有技术中由于基质喷雾不均匀会影响MALDI‑MSI成像结果，导致分子成像效果部分区域出现较多微粒的问题。本发明通过对基质喷雾条件优化后，使9‑AA基质均匀的附着于组织切片表面，使分子成像效果平整连贯，从而获得良好的MALDI‑MSI成像效果。

技术研发人员：朱洪影,柴兆良,苗臣俭,吴萍
受保护的技术使用者：合肥综合性国家科学中心人工智能研究院（安徽省人工智能实验室）
技术研发日：
技术公布日：2024/6/20