专利名称：液相色谱仪的制作方法
技术领域：
本发明涉及液相色谱仪。
在液相色谱仪中，定性的信息是少的。因此，为了正确的鉴定与识别，制备洗脱成分并根据需要进行浓缩之后用其他分析仪器进行定性。
也可以采取使液相色谱仪与质谱仪在一起进行联机分析的方法。但是，为了制约向其他分析仪器中导入溶剂的量，因此采用了将大半洗脱液分开排出等方法。为了使溶剂量变少，色谱柱内径为1mm以下的微型液相色谱仪是有效的，然而，在这种情况下，需要正确地注入一微升以下的试样溶液。
然而，在液相色谱仪中，制备洗脱液并导入定性分析仪器的方法不仅费时费力，而且在浓缩过程中还有产生试样变质或损失，或混入杂质的危险。
并且，采用液相色谱仪与质谱分析仪等联机分离方法，对质谱分析仪而言，虽然是有效的，然而有降低定量性和灵敏度的危险。
此外，液相色谱仪为得到高分辨能力，需要以尽可能狭的谱带注入试样溶液，因此即使试样浓度低，也无法大量地注入。
因此，本发明的目的在于，提供一种即使试样浓度低，但经过对试样浓缩后可进行分析的液相色谱仪。
本发明的液相色谱仪，利用第1稀释用输液泵通过注射器稀释试样溶液，将进一步输送用的第1输液管线，与由另一洗脱液用输液泵经分析柱使洗脱液流向达到检测器的流路的分析管线分别与转换阀连接，在转换阀上设置浓缩柱，将该浓缩柱与所述第1输液管线和所述分析管线转换并自由连接。此外，在所述注射器与所述转换阀之间设置接头，将由第2稀释用输液泵输送稀释液的第2输液管线连接起来。这里所谓的试样溶液系指含有试样的溶液。
为了省略费时费事等诸多不便的脱机的制备与浓缩过程，将液相色谱仪与质谱分析仪等其他分析仪器连接为联机，利用了尤其可将溶剂分离量变小的微型液相色谱仪时，通过设计试样的浓缩过程，可注入大量的低浓度试样溶液。
进而，通过调节第1稀释用输液泵与第2稀释用输液泵的流量，可调节来自接头中的第1稀释用输液泵一侧的溶液与第2稀释用输液泵一侧溶液的混合比，可自由地设定试样溶液的稀释率。
此外，如所周知，液相色谱仪中，试样溶液的溶剂对分离是有影响的。因此，在使用液相色谱仪进行分析时，需要将导入分析管线的注入溶剂量及组成作成所希望的洗脱液组成。若利用本发明的液相色谱仪，则可用稀释液稀释或置换在浓缩柱中所收集的试样溶剂，即导入分析管线的注入溶剂，因此在适当条件下可进行分析。
以下对附图作简单说明。
图1为表示一实施例的流路图。
图2为表示另一实施例的流路图。
最佳实施例第1输液管线与第2输液管线至少一方最好具有除去柱，在该除去柱中设置有有选择地或者与稀释液混合进行输液并可向排水管排出的流路。其结果，可防止稀释液杂质进入分析管线。
第1输液泵与第2输液泵最好是输送相互不同的稀释液。其结果，通过来自第2输液泵的稀释液，可进行试样溶剂的pH调整、离子对试剂的混合以及离子强度的调整等试剂溶剂的调制，并可给浓缩柱的模式带来灵活性。
下面通过图1所示的实施例详细说明本发明。
1为注射器，通过3通接头与6通转换阀3的转换口3a连接。4为浓缩柱，其两端与6通转换阀3的转换口3c和转换口3f连接。5为分析柱，其一端与6通转换阀3的转换口3e连接，另一端则与检测器6连接，构成分析管线28。
在色谱柱烘箱7中收入并设置有注射器1、3通接头2、6通转换阀3、浓缩色谱柱4和分析柱5。8为输液泵，其吸入侧与收容了洗脱液的洗脱液容器9连接，排出则与6通转换阀3的转换口3d连接，这些构件构成了洗脱液系统21。
10为输液泵(第1稀释用输液泵)，其吸入侧与收容了稀释用及移送用溶液(以下称为稀释液)的稀释液容器11连接，排出侧与注射器1连接，这些构件构成了输液管线20。12为输液泵(第2稀释用输液泵)，其吸入侧与收容了稀释用稀释液的稀释液容器13连接，排出侧与3通接头2连接。17、18为排水管，排水管17与6通转换阀3连接，排水管18与检测器6连接。
接着，说明其使用方法及动作。6通转换阀3中分别连接有转换口3a与3f、转换口3b与3c、转换口3d与3e。此外，也勿使泵12动作。
这里，在使输液泵10动作时，则稀释液由稀释液容器11经过输液泵10输送到注射器1。在向该注射器1注入试样溶液时，通过稀释液运作，经过3通接头2到达6通转换阀3。6通转换阀3连接有其转换口3a与3f，因此试样溶液通过稀释液送入浓缩柱4。在该浓缩柱4中通过与色谱柱填充剂相应的作用，浓缩并收集试样。通过浓缩柱4的稀释液由转换口3c返回6通转换阀3，经过转换口3b由排水管17排出。
另一方面，通过输液泵8的动作，洗脱液由洗脱容器9经过6通转换阀3的转换口3d、3e，通过分析柱5、检测器6由排水管18排出。
其次，通过6通转换阀3的转换，连接转换口3a与3b、转换口3c与3d、转换口3e与3f时，通过3通接头2所供给的稀释液经过转换3a与3b向排水管17排出。另一方面，来自输液泵8的洗脱液过转换口3d与3c进入浓缩柱4，将在浓缩柱4内浓缩、收集的试样洗脱之后送出，经过转换口3f与3e进入分析柱5。试样在分析柱5中分离，由检测依次检测各成分。
这样，即使是浓度低的试样溶液，也可以经过浓缩柱4进行浓缩并分析。
在本实施例中，在大量注入试样溶液时，或者在溶解试样成分的试样溶液的溶剂强度大时，使在图1中输液泵12动作，并将来自稀释液容器13的稀释液流量设定为给定量，由向3通接头2的通口19送入，而且若其流量大于由注射器1流进的试样溶液所发生的稀释液的量，则通过3通接头2来稀释试样溶液。换言之，可将试样溶剂转换为稀释液。因此，可容易地通过浓缩柱进行收集及浓缩。
再有，通过调节稀释用输液泵10、12的流量，可以调节来自3通接头中稀释用输液泵10一侧的试样溶液和来自稀释用输液泵12一侧的稀释液的混合比，可自由地设定试样溶液的稀释率。
例如，为了防止试样在流路中的残留，在溶剂强度大的稀释液收容在稀释液容器11的情况下，将收容在稀释容器13中的稀释溶液作成溶剂强度小的稀释液，通过在3通接头2中加大由输液泵12所导入的稀释液的比例，可减轻稀释容器11中所收容的稀释液时对浓缩柱4收集试样的不良影响。
此外，通过给收容在稀释液容器13中的稀释液带来对试剂溶剂的pH调整、离子对试剂的混合以及离子强度的调整等功能，也可给浓缩柱的收集模式带来灵活性。
其次，参照图2说明在上述机构中装入除去稀释液中含有杂质的除去装置的实施例。
作为输液泵10使用2台泵10a、10b。其一方的泵10a与稀释液容器22连接，另一方的泵10b与淋洗液容器23连接。输液泵10a、10b均通过或者不通过混合器24，与除去柱25连接。输液泵10与稀释液容器22以及淋洗液容器23的连接，也可以只将吸入管分别放入各溶液中。除去色谱柱25与3通转换阀26连接，在三通转换阀26上设置有向排水管27的转换口26a与向输液管线20的转换口26b。
作为输液泵12使用2台泵12a、12b。其一方的泵12a与稀释液容器33连接，另一方的泵12b与淋洗液容器23连接。输液泵12a、12b均通过或者不通过混合器29，与除去柱30连接。输液泵12与稀释液容器33、淋洗液容器23的连接也可以只将吸入管分别放入各溶液中。除去色谱柱30与3通转换阀31连接，在3通转换阀31上设置有向排水管32的转换口31a和向3通接头2的转换口31b。
除去柱25、30可用于临时吸附稀释液中的杂质，或者将其除去。
以下说明图2实施例的动作。在输送稀释液时，使输液泵10a、12a动作，将该稀释液送入除去柱25、30。于是，可临时吸附或除去杂质。这样被净化的稀释液被输送至输液管线20。
在除去柱25、30对杂质达到了饱和状态的时刻，停止输液泵10a、12a动作，将3通转换阀26转换为转换口26a并与排水管27连接，将3通转换阀31转换为转换口31a并与排水管32连接。此后，使输液泵10b、12b动作，淋洗液被输送到除去柱25、30，淋洗临时被吸附或除去的杂质，并向排水管27、32中排出。
为了淋洗除去柱，也可以适当的混合比使用淋洗液与稀释液。为此，通过控制输液泵10a、10b、12a、12b的输液量或者通过控制向混合器24、29的流量，也可以适当的混合比吸入淋洗液与稀释液，并向除去柱25、30输入。
通过如上所述，可防止稀释液的杂质混入分析管线28，防止杂质峰出现，使试样成分峰明确化，使定量的再现性变得良好。
这里，同时进行了除去柱25、30的淋洗，但是也可以分别进行淋洗。此外，就输液泵10、12而论，也可以使用这样的泵，即分别将其作为一台，设置转换阀，可进行稀释液与淋洗液的选择。
在如上所述的各操作中，通过色谱柱烘箱7的加温，可提高再现性。
此外，也可以考虑将阻尼管用于流量控制，但是，在本发明中由于没有使用阻尼管，所以不需要使分析管线的管内径小于分析本来所需要的管内径，而且可避免起因于稀释的在配管中杂质的滞留，可稳定地连续进行麻烦少的分析动作。
在图1及图2的实施例中，在输液泵10、12中分别设有稀释液容器，但是在输液泵10、12中也可设置共用的稀释液容器。
若示出本发明液相色谱仪的适用例，则可使用判定在医药品制造装置清洗后流入装置内的乙醇中的药物浓度是否在残留药物浓度容许量以下进行测定的例子。过去，用蒸发器蒸发已排出的乙醇并经浓缩之后，通过液相色谱仪进行了定量，但其浓缩操作需要长时间。若使用本发明的液相色谱仪，则可将已排出的乙醇直接作成试样溶液导入后即可测定，因此可缩短时间。
此外，若示出适用于药物动态领域的例子，则可用于测定血液中药物浓度和代谢物。一般说来，在用液相色谱仪测定血液中药物浓度和代谢物时，必须进行用乙腈或甲醇等的有机溶剂除去血清中的蛋白。已有的液相色谱仪中，不能大量地注入作为试样溶液的有机溶剂，因此试样溶液经减压除去并干燥之后，再在水溶液中溶解，注入液相色谱仪中，使用本发明的液相色谱仪，可稀释试样溶液，因此试样溶液即使是有机溶剂也可以直接测定，可缩短测定时间。
权利要求
1.一种液相色谱仪，包括第一输液管线，该管线具有注入试样溶液的接头，通过第1稀释用输液泵输送稀释溶液，将来自所述接头的注入试样溶液稀释并输送；分析管线，该管线通过洗脱液用输液泵经过分析柱使洗脱液流向到达检测器的流路；转换阀，该阀具有浓缩柱，将通过该浓缩柱的流路转换为所述第1输液管线与所述分析管线并连接；第2输液管线，该管线在所述注射器与所述转换阀之间连接，通过第2稀释用输液泵来输送稀释液。
2.根据权利要求1所述的液相色谱仪，所述第1输液管线与所述第2输液管线的至少一方具有除去稀释液中杂质的除去柱；在该除去柱上设置有流路，该流路有选择地输送淋洗液或者与稀释液混合输液，并可向排水管排出。
3.根据权利要求1所述的液相色谱仪，所述第1输液泵与所述第2输液泵，能输送相互不同的稀释液。
4.根据权利要求1所述的液相色谱仪，至少将所述注射器、分析柱及浓缩柱收容烘箱内并控制温度。
全文摘要
一种液相色谱仪,在六通转换阀3中,连接转换口3a与3f、转换口3b与3c、转换口3d与3e,关闭通口19,使输液泵10动作,在试样溶液注入注射器1时,试样溶液经过三通接头2及三通转换阀3输入浓缩柱4,试样在浓缩柱4被收集、浓缩。在大量注入试样溶液或在试样溶液的溶剂强度大时,使输液泵12动作,以给定量设定来自稀释液容器13的稀释液流量,通过由通口19向三通接头2输入使试样溶液转换为稀释液,可很容易地通过由浓缩柱进行收集及浓缩。
文档编号G01N30/06GK1327157SQ0111858
公开日2001年12月19日 申请日期2001年6月5日 优先权日2000年6月5日
发明者海藤克明, 岩田庸助, 村田薰, 浅川直树 申请人:株式会社岛津制作所, 卫材株式会社