专利名称：一种β－兴奋剂金标层析快速检测方法及装置的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种β-兴奋剂金标层析快速检测方法及装置背景技术普通的β-兴奋剂如摄入过量，会对人体造成极大的危害，比如致癌、中毒等。国家明令禁止在有关饲料中使用。
目前对食品中β-兴奋剂含量的检测方法比较复杂，通常采用HPLC或GC/MS等。
发明内容
一种β-兴奋剂金标层析快速检测方法包括以下步骤(1)取液体样本先与金标克伦特罗抗体反应结合成抗原-抗体结合物；(2)再与克伦特罗-BSA偶联物结合；(3)最后抗原-抗体结合物与抗抗体反应结合。
上述的金标克伦特罗抗体为20～90nm直径范围胶体金颗粒和50～200ug/ml浓度范围的克伦特罗PBS溶液。
上述的β-兴奋剂金标快速检测方法，所述的克伦特罗抗体为单克隆抗体。
上述的β-兴奋剂金标快速检测方法，所述的克伦特罗抗体为多克隆抗体。
上述的β-兴奋剂金标快速检测方法，所述的抗抗体由普通动物免疫另一种动物来获得。
一种β-兴奋剂金标快速检测装置，包括滤纸；其特征在于玻璃纤维、聚脂纤维、硝酸纤维素膜依次固定于基板上；其中聚脂纤维上包被有金标克伦特罗抗体，在硝酸纤维素膜上间隔一定距离依次包被有偶联物和抗抗体。
图1为本发明检测装置的结构示意图。
具体实施例方式实施例1用70nm胶体金颗粒(紫红色)和100ug/ml克伦特罗抗体溶液制成金标抗体；并把其以2ul/cm的量包被在聚脂膜的一端；本实施例中采用的克伦特罗抗体为多克隆抗体。
把克伦特罗-BSA偶联物2000ug/ml(PBS溶液)以1ul/cm的量包被在硝酸纤维素膜上，位于的金标抗体上端，形成T线区域；用抗抗体4000ug/ml(PBS溶液)以1ul/cm的量包被在硝酸纤维素膜偶联物区域的上端形成C线区域。
包被以后需要进行干燥处理。
把聚脂膜固定在基板上，可以采用普通的粘贴方法。
同时在聚脂膜金标抗体一端连接固定玻璃纤维，在聚脂膜另一端，即C线区域上端连接滤纸。玻璃纤维能吸收样品溶液，而滤纸能增强吸力，使整个产品形成从玻璃纤维一端到滤纸的一个吸力方向，使溶液能从一个反应区进入另一个反应区，先后进行反应，以完成检测过程。
产品检测β-兴奋剂时，将玻璃纤维一端插入样品溶液内，样品溶液先经金标抗体区域，与金标克伦特罗抗体反应结合生成抗原-抗体结合物，使抗体结合位点饱和，当随同液体到达T线处时，抗体无法再与包被在这里的偶联物结合(竞争结合原理)，因此在T线处不显色；到达C线处后，抗原-抗体结合物与包被在这里的抗抗体反应结合，因此在此处显色。此为阳性结果。
如果样本中不含克伦特罗(或含量没有达到一定量)，则金标抗体未达到饱和状态，随同液体爬升到T线处时，会与这里的偶联物反应结合从而显色；在C线处，剩余的金标抗体仍然要与抗抗体结合反应而显色。此为阴性结果。
因此，定性结果的判断是C、T线均显色为阴性(二条紫红色线)；只有C线显色为阳性(一条紫红色线)。
C线为产品本身的质控线。当检测时，发生C线不显色时，说明检测产品本身出现质量问题，可能是抗原、抗体失去活性，或产品质保期已，产品失效。
抗原、抗体作为生物活性物质，一般在4℃条件下贮存并保持较长时间的生物活性，当它们包被在固相载体(如硝酸纤维素膜等)上并干燥以后，则能在常温(2～30℃)下长期保持生物活性。
实施例2与实施例1不同的是本实施例采用的是单克隆抗体，在检测瘦肉精即克伦特罗时，非常简便。
产品可以作为猪、牛、羊等牲畜初筛检测是否有β-兴奋剂使用的一种现场快速出结果的手段，尿液、奶汁、血液、肌肉或内脏提取液都可以作为样本。
权利要求
1.一种β-兴奋剂金标层析快速检测方法包括以下步骤(1)取液体样本先与金标克伦特罗抗体反应结合成抗原-抗体结合物；(2)再与克伦特罗-BSA偶联物结合；(3)最后抗原-抗体结合物与抗抗体反应结合。
2.如权利要求1所述的金标克伦特罗抗体为20～90nm直径范围的胶体金颗粒和50～200ug/ml浓度范围的克伦特罗PBS溶液。
3.如权利要求1β-兴奋剂金标快速检测方法，其特征在于所述的克伦特罗抗体为单克隆抗体。
4.如权利要求1β-兴奋剂金标快速检测方法，其特征在于所述的克伦特罗抗体为多克隆抗体。
5.如权利要求1β-兴奋剂克标快速检测方法，其特征在于所述的抗抗体由普通动物免疫另一种动物来获得。
6.一种β-兴奋剂金标快速检测装置，包括滤纸；其特征在于玻璃纤维、聚脂纤维、硝酸纤维素膜依次固定于基板上；其中聚脂纤维上包被有金标克伦特罗抗体，在硝酸纤维素膜上间隔一定距离依次包被有偶联物和抗抗体。
全文摘要
一种β－兴奋剂金标层析快速检测方法包括以下步骤取液体样本先与金标克伦特罗抗体反应结合成抗原－抗体结合物，并使抗体结合位点饱和或未饱和；与克伦特罗－BSA偶联物竞争结合抗体；最后抗原－抗体结合物或金标抗体与抗体反应结合。本产品用于检测克伦特罗方便快捷，非常适用于现场快速检测。
文档编号G01N33/558GK1435693SQ02111518
公开日2003年8月13日 申请日期2002年4月24日 优先权日2002年4月24日
发明者王旻子 申请人:王旻子