专利名称：：中药药材红外光谱非分离提取多级宏观指纹鉴定方法
技术领域：
：本发明涉及一种成分极其复杂的混合物溶液的非分离提取光谱分析鉴定、鉴别方法，尤其是涉及一种中药药材红外光谱非分离提取多级宏观指纹鉴定方法，属于中药检测
技术领域：
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背景技术：
：中药的质量控制是弘扬中医、中药学的基础与关键。2000年10月中国国家药品监督管理局发布了《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》对中药指纹图谱的研究作出指导和规范。欧共体是最早以立法形式规定指纹图谱作为质量标准的(QualityofHerbalRemedies，Eudra/Q/88/028)。美国FDA近来已明确将指纹图谱作为植物草药混合物质群的质量控制方法。但在实际运用中都还是以指标成分作为衡量植物药的质量。并且人们也不断发现分离植物的单体化合物的疗效不如粗提物来得好，甚至无效。然而，却远未能制定出关于药材、配方颗粒的全面的、明确的更科学的质量控制方法。中药药材是极其复杂的混合物体系。目前通常包括传统经验鉴别，基原鉴别、性状鉴别、显微鉴别，理化鉴别和色谱鉴别，有的用光谱法来鉴别。依靠人工的传统经验鉴别最多，进一步从基原、性状、显微鉴别达到在形貌特征上来鉴定。然而此法是不能判断药物内部成分的变化。比如炮制过的人参的切片干在外形上与原人参切片干相似，但其有效成分会有很大的不同。因此其科学性不足。这时常辅以理化鉴别。已采用薄层色谱(孔C)法来鉴定、鉴别。它根据试样在薄层色谱板上出现的色谱斑点位置与已知中药对照品的位置相比较，可以比较快速、简便地、准确地判断。然而，由于它易受实验条件与环境等多因素的影响而实验技术要求很高，以致方法的再现性较差。此外，有人提出用不同极性的一组溶剂浸取或萃取后，利用光谱法(紫外、红外)所测得的谱图的特征性来判断。《中药鉴别紫外谱线组法及应用》(袁久荣著，人民卫生出版社，1999年，北京)中，曾提出“紫外谱线组法”来鉴别中药(四种溶剂的浸取液的UV谱，导数UV谱)。近来，田进国(中国药科大学学报，1997，20(1)23-28)对数十种中药材进行红外谱线组的鉴别。他们都是在对中药预先作多溶剂的浸取分离后进行鉴别、鉴定的。也已有人经溶剂浸取或萃取后，用气相色谱，液相色谱来分离，随后可用各种仪器分析手段联用获取有效成分来判断。然而，这些方法丧失了整体分析性，丧失体系的原本性和配伍性。虽然气相色谱，液相色谱有非常强的分离能力，但是由于药材本身因随生长等条件的差异，即中药药材往往从源头便不能严格控制，将造成其“有效成分”或“控制成分”的不稳定性或本身可靠性不足，又加上分析时标准化合物不容易获得从而导致难于实现鉴别。中药(药材、配方颗粒、注射剂等)的鉴定、鉴别和质量控制中，药材的鉴定、鉴别和质量控制是最为棘手的问题。
发明内容本发明的目的是提供一种无损，无需分离提取，试样处理简单，快速，简便，整体上不丧失原本性配伍性，符合中药中医辩证施治原则的中药药材红外光谱非分离提取多级宏观指纹鉴定方法。本方法是一种集红外谱—导数谱—二维红外相关谱为一体进行分析的方法。本发明提出的一种中药药材红外光谱非分离提取多级宏观指纹鉴定方法，其特征在于，该方法包括以下步骤(1)先将中药药材切断、粉碎、过筛；(2)在小于200目的药材粉末中加入溴化钾粉末进行压片制样；(3)测定压片试样的普通红外光谱，近红外光谱，漫反射近红外光谱、漫反射光谱、衰减全反射光谱；(4)求出并绘出上述相应红外光谱图的二阶导数谱；(5)测定压片试样的二维相关红外谱，产生它的是任何形式的扰动；(6)分级对比相应图谱，即可直接进行中药药材的非分离提取鉴定、鉴别。在上述鉴定方法中，步骤(5)所述的二维相关红外谱可以是同步谱，或异步谱或两者兼用；步骤(5)所述的二维相关红外谱可以是各种形式的图象，优选为等强度图、鱼网图，多维立体图，彩色图中的任何一种或两种；步骤(5)所述的扰动形式为热、光、电、磁、机械力的扰动的其中之一。在上述鉴定方法中，步骤(6)所述的分级对比可以是红外光谱、二阶导数谱和二维相关红外谱三种谱图单个进行对比，或者将其中任意两者结合在一起进行对比，或者将三者结合在一起相互进行对比。在上述鉴定方法中，所述分级对比以步骤(3)所得红外光谱为一级对比、以步骤(4)所得二阶导数谱为二级对比、以步骤(5)所得二维相关红外谱为三级对比。在上述鉴定方法中，所述分级对比中的一级红外光谱对比为(1)观察红外图谱总体形状或形貌，即峰位、峰强度、峰形的相似性来初步鉴别；(2)在1800～400cm-1区间内选取3～5个强谱峰簇，其峰位波动在±2cm-1之内，视为相同或相近，将谱峰簇中最强峰的强度大小依次排序，根据它们的排序和相对强度比来鉴别鉴定；(3)在1800～400cm-1区间内上述峰簇中选取3～5个次强谱峰，其峰位波动在±2cm-1之内，视为相同或相近为辅来鉴别。在上述鉴定方法中，所述分级对比中的二级二阶导数谱对比为(1)观察导数谱总体形状或形貌，即峰位、峰强度、峰形的相似性来初步鉴别；(2)在1800～400cm-1区间内选取红外图谱中最强谱峰峰位就近处出现的相应导数峰视为相同或相近，该导数谱峰峰位波动在±2cm-1之内，并且比较各强峰之间的相对强度的大小和次序；(3)在1800～400cm-1区间内选取红外图谱中最强谱峰两侧是否出现相应的肩峰峰位来鉴别，该肩峰峰位波动在±2cm-1之内。在上述鉴定方法中，所述分级对比中的三级二维相关红外谱对比是用二维相关谱进行对比来判断选取同步相关谱中的强峰或强峰簇的自动峰，对比它们的峰位及其强度，以及对比所选取的自动峰与其它自动峰之间的交叉峰的正负号的异同来鉴别它们的异同。在上述鉴定方法中，粉末试样可直接测定近红外光谱，漫反射近红外光谱、漫反射光谱、衰减全反射光谱。基于红外本身的丰富的指纹性及利用部分特征峰的峰位、峰形及其变化，峰强度或/及相对峰强度的变化，本发明提出用无损的红外光谱法直接进行中药药材的鉴定鉴别。包括与标准样的图谱比对法，借助于计算机辅助解析的多种技术进行鉴定与识别，以及二维红外相关分析技术来监控药物的稳定性等方法。从而可以不失源本性、无损地、简便、快捷，无需进行分离过程便直接测试，不破坏中药的配伍性，即可获取中药的整体信息，并以此来鉴定、鉴别中药。这被称作为宏观指纹法。为了能整体地、无损地、不经过分离提取、试样仅作简单处理、经快速测定便能简便地、正确地鉴定、鉴别中药药材并使之规范化，本发明提出采用的红外光谱法，包括测定试样的常规红外光谱图、导数光谱图、二维相关红外谱为一体的多级宏观指纹鉴定法。通过此法获得不失试样原本性，配伍性的宏观的指纹信息，因此更具有直观性。它符合中医药辩证施治原则。此外还可以同时获取药品稳定性和变质机理的信息，并且便于推广。本发明基于这样的原理，即物质的红外光谱图具有指纹性可作为一级谱图进行对比鉴定，当极其相似的物质可能其差异性仍然不够明显时，可借助其导数光谱，作为二级谱图进行对比，进一步检验出较为微小的差异，当上述两级谱图的差异仍不足以区别与鉴定时，可以进一步用分辨率更高的二维红外相关谱图进行对比鉴定。从而可非常直观地进行鉴定、鉴别与质量控制。采用本发明提出的中药药材红外光谱非分离提取多级宏观指纹鉴定方法无需对试样进行分离，即可无损地、非破坏性地、快速地、简便地、不失原本性和配伍性地直接判断被测试样的品种、产地、栽培或野生、等级、真伪优劣的依据。因此可广泛用于中药药材快速简便地鉴定、鉴别与质量控制。它的建立与推广将大大加速中药质控进程，大大加速中药现代化和国际化的速度。图1为实施例1中一等丹参的红外谱图。图2a、2b为实施例1中一等丹参的导数谱图。图3a、3b为实施例1中一等丹参的二维相关等位线谱图。图4a、4b为实施例1中一等丹参的二维相关鱼网图。图5为实施例1中二等丹参的红外谱图。图6a、6b为实施例1中二等丹参的导数谱图。图7a、7b为实施例1中二等丹参的二维相关等位线谱图。图8a、8b为实施例1中二等丹参的二维相关鱼网图。图9为实施例1中一等、二等丹参的红外谱图比较。图10a、10b为实施例1中一等、二等丹参的导数谱图比较。图11a、11b为实施例1中一等、二等丹参的二维相关等位线谱图比较(图11a为900～1150/cm-1，图11b为1200～1500/cm-1)。图12为实施例1中栽培丹参的红外谱图。图13a、13b为实施例1中栽培丹参的导数谱图。图14a、14b为实施例1中栽培丹参的二维相关等位线谱图。图15a、15b为实施例1中栽培丹参的二维相关鱼网图。图16为实施例1中野生丹参的红外谱图。图17a、17b为实施例1中野生丹参的导数谱图。图18a、18b为实施例1中野生丹参的二维相关等位线谱图。图19a、19b为实施例1中野生丹参的二维相关鱼网图。图20为实施例1中栽培、野生丹参的红外谱图比较。图21a、21b为实施例1中栽培、野生丹参的导数谱图比较。图22a、22b为实施例1中栽培、野生丹参的二维相关等位线谱图比较(图11A为900～1150/cm-1，图11B为1200～1500/cm-1)。图23为实施例2中广霍香的红外谱图。图24a、24b为实施例2中广霍香的导数谱图。图25a、25b为实施例2中广霍香的二维相关等位线谱图。图26a、26b为实施例2中广霍香实施例1中二等丹参的二维相关鱼网图。图27为实施例2中南香的红外谱图。图28a、28b为实施例2中南香的导数谱图。图29a、29b为实施例2中南香的二维相关等位线谱图。图30a、30b为实施例2中南香的二维相关鱼网图。图31为实施例2中牌香的红外谱图。图32a、32b为实施例2中牌香的导数谱图。图33a、33b为实施例2中牌香的二维相关等位线谱图。图34a、34b为实施例2中牌香的二维相关鱼网图。图35为实施例2中湛香的红外谱图。图36a、36b为实施例2中湛香的导数谱图。图37a、37b为实施例2中湛香的二维相关等位线谱图。图38a、38b为实施例2中湛香的二维相关鱼网图。图39为实施例2中四种霍香的红外谱图比较。图40为实施例2中四种霍香的导图比较。图41为实施例2中四种霍香的二维相关等位线谱图比较。图42为实施例3中八角茴香及莽草的红外谱图比较。图43a、43b为实施例3中八角茴香及莽草的导数谱图比较。图44a、44b为实施例3中八角茴香及莽草的二维相关等位线谱图比较。具体实施例方式下面结合附图和实施例对本发明做进一步说明实施例1丹参的鉴定与鉴别(1)实验采用SpectrumGXFTIR光谱仪(PerkinElmer，USA)，DTGS检测器，分辨率为4cm-1，测量范围4000～400cm-1，扫描32次累加获谱。采用50-886型PortableController可编程温度控制单元(LoveControl公司)；(2)丹参样品粉碎后加入KBr，压片，制成试样，置于仪器变温池内，温度程控从室温到150℃，原位实时间隔采样，每升温10℃，采集红外光谱，连续获取系列谱图—变温动态谱；(3)对于室温(～20℃)的红外光谱图，进行谱图的求导处理，获得导数图谱；(4)对于系列变温动态谱，利用2D-相关分析软件处理，获得2DIR相关谱图同步相关谱、异步相关谱；(5)四川中江栽培一等、二等丹参的中红外谱图及其导数谱图和热微扰的同步二维相关谱图(等强度图和立体鱼网图)及其特征的描述及它们的中红外谱图对比图。河南灵宝栽培的和野生的中红外谱图及其导数谱图和热微扰的同步二维相关谱图(等强度图和立体鱼网图)及其特征的描述及它们的中红外谱图对比图。显然通过各级谱图主要谱峰的峰位、峰形、峰宽作简单的对比已足以区别和认定有关丹参的不同产地、不同等级以及不同种植方式所产的药材的特点。如表1所示。表1药材IR(主峰；副峰)/cm-1导数(主峰异峰2D(主峰，簇峰)/cm-1区)/cm-1四川中江1635②，1409④，1265～1450～1466，1384①，1461栽培一等⑤，1146③，1051①～1325～1375丹参四川中江1635③，1416④，1265～1450～1466，1464①；1384，1199，1222栽培二等⑤，1145②，1055①～1325～1375丹参河南灵宝1636③，1416④，1265～1450～1466，967①(正交叉峰)，1200栽培丹参⑤，1145②，1055①～1325～1375①，1223②，1466③(负交叉峰)河南灵宝1631②，1415④，1264～1450～1466，1467①，1200，1223②(负野生丹参⑤，1149③，1050①～1325～1375交叉峰)，1412④四川中江栽培一等丹参，1051①1146③1635②＝1.15∶0.71∶0.8四川中江栽培二等丹参，1051①1146③1635②＝1.2∶0.8∶0.66河南灵宝栽培丹参，1055①1145②1636③＝1.25∶0.84∶0.6河南灵宝野生丹参，1050①1149③1631②＝1.20∶0.75∶0.78注①②③④⑤——用以标记主峰或主峰簇的相对强度。最强者记以①，依次减弱，⑤为其中最弱者。四川中江栽培一等丹参图1为四川中江栽培一等丹参的KBr压片红外谱图，主要吸收峰如图所示。图2a和2b为850～1180cm-1和1180～1500cm-1范围内的二阶导数图，谱峰如图所示。图3a和图3b为860～1170cm-1和1170～1500cm-1波数范围的二维红外相关图。图3a中，明显的自动峰有7个，分别在904cm-1，970cm-1，1010cm-1，1036cm-1，1070cm-1，1100cm-1和1132cm-1。其中970cm-1的自动峰强度最大，1036cm-1和1070cm-1的自动峰强度较小，其它自动峰强度中等。它们的交叉峰均为正。图3b中，明显的自动峰有2个，分别在1384cm-1和1461cm-1。其中1384cm-1的自动峰强度最大，1461cm-1的自动峰强度较小。它们之间的交叉峰为负。附四川中江栽培二等丹参谱图说明图5为四川中江栽培二等丹参的KBr压片红外谱图，主要吸收峰如图所示。图6a和6b为850～1180cm-1和1180～1500cm-1范围内的二阶导数图，谱峰如图所示。图7a和图7b为860～1170cm-1和1170～1500cm-1波数范围的二维红外相关图。图7a中，明显的自动峰有7个，分别在905cm-1，971cm-1，1011cm-1，1037cm-1，1069cm-1，1099cm-1和1132cm-1。其中971cm-1的自动峰强度最大，1037cm-1和1069cm-1的自动峰强度较小，其它自动峰强度中等。它们的交叉峰均为正。图7b中，明显的自动峰有4个，分别在1199，1222cm-1，1384cm-1和1464cm-1。其中1464cm-1的自动峰强度最大，其它自动峰强度中等。1464cm-1的自动峰同其它自动峰之间的交叉峰为负，其它自动峰之间的交叉峰为正。四川中江栽培丹参比较图9为四川中江栽培一等和二等丹参的KBr压片红外谱图的比较。图10a和图10b分别为两种丹参850～1180cm-1和1180～1500cm-1范围内的二阶导数图的比较。图11a和图11b(A、B)为两种丹参860～1170cm-1和1170～1500cm-1波数范围的二维红外相关图的比较。实施例2霍香的鉴定与鉴别(1)实验采用SpectrumGXFTIR光谱仪(PerkinElmer，USA)，DTGS检测器，分辨率为4cm-1，测量范围4000～400cm-1，扫描32累加获谱。采用50-886型PortableController可编程温度控制单元(LoveControl公司)；(2)四种霍香样品粉碎后分别加入KBr压片，制成试样，置于仪器变温池内，温度程控从室温到150℃，原位实时间隔采样，每升温10℃采集红外光谱，连续获取系列谱图一变温动态谱；(3)对于室温(～20℃)的红外光谱图，进行谱图的求导处理，获得导数图谱；(4)对于系列变温动态谱，利用2D-相关分析软件处理，获得2DIR相关谱图同步相关谱、异步相关谱；(5)广藿香、南香、牌香及湛香的中红外谱图及其导数谱图和热微扰的同步二维相关谱图(等强度图和立体鱼网图)及其特征的描述及四种藿香的红外、导数谱图和热微扰的同步二维相关谱图(等强度图)的对比图。显然，通过各级谱图主要谱峰的峰位、峰形、峰宽作简单的对比已足以认定和区别有关藿香种类的特点。如表2所示。表2药材IR(主峰；副峰)/cm-1导数(主要差异峰)/cm-12D(主峰，簇峰)/cm-1广藿香1734，1635②，1514；1059940①，974，1149②1421，1377，1320，1251③；1159，1055，1036①南香1647①，1542，1516；1442，1059不明显942②，1149①1377，1320，1260③；1158，1059②，1035牌香1736，1652②，1514；1059947①，975②1423，1378，1321，1255③；1158，1055，1037①湛香1735，1646②，1512；1421，1059947①，975②1378，1321与1248①，1159，1053，1037注①②③④⑤标记同实施例1。附广藿香(肇香)谱图说明图23为广藿香的KBr压片红外谱图，主要吸收峰如图所示。图24a和24b为850～1180cm-1和1180～1530cm-1范围内的二阶导数图，谱峰如图所示。图25a和图25b为860～1160cm-1和1160～1510cm-1波数范围的二维红外相关图。图25a中，明显的自动峰有6个，分别在887cm-1，940cm-1，974cm-1，998cm-1，1092cm-1和1149cm-1。其中940cm-1的自动峰强度最大，974cm-1和1149cm-1的自动峰强度较大，其它自动峰强度较小或中等。它们的交叉峰均为正。图25b中，明显的自动峰有5个，分别在1198cm-1，1214cm-1，1459cm-1，1468cm-1和1495cm-1。其中1198cm-1和1214cm-1的自动峰强度最大，1495cm-1的自动峰强度较小，其它的自动峰强度较大。1459cm-1和1468cm-1的自动峰同其它自动峰之间的交叉峰为负，其它自动峰之间的交叉峰为正。广藿香(南香)图27a为南香的KBr压片红外谱图，主要吸收峰如图所示。图28a和28b为860～1180cm-1和1180～1530cm-1范围内的二阶导数图，谱峰如图所示。图29a和图29b为860～1160cm-1和1160～1510cm-1波数范围的二维红外相关图。图29a中，明显的自动峰有7个，分别在908cm-1，942cm-1，973cm-1，1022cm-1，1037cm-1，1088cm-1和1149cm-1。其中1149cm-1的自动峰强度最大，942cm-1的自动峰强度较大，其它自动峰强度较小或中等。1022cm-1和1037cm-1的自动峰同其它自动峰之间的交叉峰为负，其它自动峰之间的交叉峰为正。图29b中，明显的自动峰有7个，分别在1198cm-1，1213cm-1，1323cm-1，1382cm-1，1453cm-1，1467cm-1和1494cm-1。其中1198cm-1和1213cm-1的自动峰强度最大，1453cm-1和1467cm-1的自动峰强度较大，其它的自动峰强度中等或较小。1198cm-1，1213cm-1和1494cm-1的自动峰同其它自动峰之间的交叉峰为负，其它自动峰之间的交叉峰为正。广藿香(牌香)图31为牌香的KBr压片红外谱图，主要吸收峰如图所示。图32a和32b为860～180cm-1和1180～1530cm-1范围内的二阶导数图，谱峰如图所示。图33a和图33b为860～1160cm-1和1160～1510cm-1波数范围的二维红外相关图。图33a中，明显的自动峰有6个，分别在886cm-1，947cm-1，975cm-1，1000cm-1，1092cm-1和1151cm-1。其中947cm-1的自动峰强度最大，975cm-1的自动峰强度较大，其它自动峰强度较小或中等。它们的交叉峰均为正。图33b中，明显的自动峰有6个，分别在1200cm-1，1214cm-1，1325cm-1，1458cm-1，1468cm-1和1494cm-1。其中1214cm-1的自动峰强度最大，1200cm-1，1458cm-1和1468cm-1的自动峰强度较大，其它的自动峰强度较小。1325cm-1，1458cm-1和1468cm-1的自动峰同其它自动峰之间的交叉峰为负，其它自动峰之间的交叉峰为正。广藿香(湛香)图35a为湛香的KBr压片红外谱图，主要吸收峰如图所示。图36a和36b为860～1180cm-1和1180～1530cm-1范围内的二阶导数图，谱峰如图所示。图37a和图37b为860～1160cm-1和1160～510cm-1波数范围的二维红外相关图。图37a中，明显的自动峰有6个，分别在886cm-1，947cm-1，975cm-1，1000cm-1，1092cm-1和1151cm-1。其中947cm-1的自动峰强度最大，975cm-1的自动峰强度较大，其它自动峰强度较小或中等。它们的交叉峰均为正。图37b中，明显的自动峰有6个，分别在1200cm-1，1214cm-1，1325cm-1，1458cm-1，1468cm-1和1494cm-1。其中1214cm-1的自动峰强度最大，1200cm-1，1458cm-1和1468cm-1的自动峰强度较小，其它的自动峰强度较小。1325cm-1，1458cm-1和1468cm-1的自动峰同其它自动峰之间的交叉峰为负，其它自动峰之间的交叉峰为正。实施例3八角茴香及莽草的鉴定与鉴别(1)实验采用SpectrumGXFTIR光谱仪(PerkinElmer，USA)，DTGS检测器，分辨率为4cm-1，测量范围4000～400cm-1，扫描32次累加获谱。采用50-886型PortableController可编程温度控制单元(LoveControl公司)；(2)八角茴香和莽草样品粉碎后加入KBr，压片，制成试样，置于仪器变温池内，温度程控从室温到150℃，原位实时间隔采样，每升温10℃，采集红外光谱，连续获取系列谱图一变温动态谱；(3)对于室温(～20℃)的红外光谱图，进行谱图的求导处理，获得导数图谱；(4)对于系列变温动态谱，利用2D-相关分析软件处理，获得2DIR相关谱图同步相关谱、异步相关谱；(5)八角茴香及莽草的中红外谱图及其导数谱图和热微扰的同步二维相关谱图(等强度图)及其特征的描述及两两的各自对比图。显然，通过各级谱图主要谱峰的峰位、峰形、峰宽作简单的对比已足以认定和区别两两的各自的真伪。如表3所示。表3药材IR(主峰；副峰)/cm-1导数(主峰异峰2D(主峰，簇区)/cm-1峰)/cm-1八角3392，1613②；1444，1376，1248960，(1055)1374①；1290茴香宽③；1093，1059①莽草3482，33871647②；1444，1386，948，1055，1092，11311385，1351①；1294，1276，1238③；1091，1070，1294，12731035，1018①注①②③④⑤标记同实施例1。附八角茴香和莽草比较谱图说明；图42为八角茴香及其伪品莽草的KBr压片红外谱图的比较。图43a和图43b分别为它们在850～1180cm-1和1180～1500cm-1范围内的二阶导数图的比较。图44a和图44b(A、B)为它们在860～1170cm-1和1170～1500cm-1波数范围的二维红外相关图的比较。权利要求1.中药药材红外光谱非分离提取多级宏观指纹鉴定方法，其特征在于，该方法包括以下步骤(1)先将中药药材切断、粉碎、过筛；(2)在小于200目的药材粉末中加入溴化钾粉末进行压片制样；(3)测定压片试样的中红外光谱，近红外光谱，漫反射近红外光谱、漫反射光谱、衰减全反射光谱；(4)求出并绘出上述相应红外光谱图的二阶导数谱；(5)测定压片试样的二维相关红外谱，产生它的是任何形式的扰动；(6)依次分级对比相应图谱，即可直接进行中药药材的非分离提取鉴定、鉴别。2.根据权利要求1所述的中药药材红外光谱非分离提取多级宏观指纹鉴定方法，其特征在于步骤(5)所述的二维相关红外谱可以是同步谱，或异步谱或两者兼用。3.根据权利要求1所述的中药药材红外光谱非分离提取多级宏观指纹鉴定方法，其特征在于步骤(5)所述的二维相关红外谱可以是各种形式的图象，优选为等强度图、鱼网图，多维立体图，彩色图中的任何一种或两种。4.根据权利要求1所述的中药药材红外光谱非分离提取多级宏观指纹鉴定方法，其特征在于步骤(5)所述的扰动形式为热、光、电、磁、机械力的扰动的其中之一。5.根据权利要求1所述的中药药材红外光谱非分离提取多级宏观指纹鉴定方法，其特征在于步骤(6)所述的分级对比可以是红外光谱、二阶导数谱和二维相关红外谱三种谱图单个进行对比，或者将其中任意两者结合在一起进行对比，或者将三者结合在一起相互进行对比。6.根据权利要求1所述的中药药材红外光谱非分离提取多级宏观指纹鉴定方法，其特征在于所述分级对比以步骤(3)所得红外光谱为一级对比、以步骤(4)所得二阶导数谱为二级对比、以步骤(5)所得二维相关红外谱为三级对比。7.根据权利要求1或5或6所述的中药药材红外光谱非分离提取多级宏观指纹鉴定方法，其特征在于，所述分级对比中的一级红外光谱对比为(1)观察红外图谱总体形状或形貌，即峰位、峰强度、峰形的相似性来初步鉴别；(2)在1800～400cm-1区间内选取3～5个强谱峰簇，其峰位波动在±2cm-1之内，视为相同或相近，将谱峰簇中最强峰的强度大小依次排序，根据它们的排序和相对强度比来鉴别鉴定；(3)在1800～400cm-1区间内上述峰簇中选取3～5个次强谱峰，其峰位波动在±2cm-1之内，视为相同或相近为辅来鉴别。8.根据权利要求1或5或6所述的中药药材红外光谱非分离提取多级宏观指纹鉴定方法，其特征在于，所述分级对比中的二级二阶导数谱对比为(1)观察导数谱总体形状或形貌，即峰位、峰强度、峰形的相似性来初步鉴别；(2)在1800～400cm-1区间内选取红外最强谱峰峰位就近处出现的相应导数峰视为相同或相近，该导数谱峰峰位波动在±2cm-1之内，并且比较各强峰之间的相对强度的大小和次序；(3)在1800～400cm-1区间内选取红外图谱中最强谱峰两侧是否出现相应的肩峰峰位来鉴别，该肩峰峰位波动在±2cm-1之内。9.根据权利要求1或5或6所述的中药药材红外光谱非分离提取多级宏观指纹鉴定方法，其特征在于，所述分级对比中的三级二维相关红外谱对比是用二维相关谱进行对比来判断选取同步相关谱中的强峰或强峰簇的自动峰，对比它们的峰位及其强度，以及所选取的自动峰与其它自动峰之间的交叉峰的正负号的异同来鉴别它们的异同。10.根据权利要求1所述的中药药材红外光谱非分离提取多级宏观指纹鉴定方法，其特征在于，粉末试样可直接测定近红外光谱，漫反射近红外光谱、漫反射光谱、衰减全反射光谱。全文摘要本发明涉及一种中药药材红外光谱非分离提取多级宏观指纹鉴定方法，属于中药检测
技术领域：
。其特征是先将中药药材切断、粉碎、过筛；在小于200目的药材粉末中加入溴化钾粉末进行压片制样；测定粉末样品的压片试样的中红外光谱、漫反射近红外、漫反射中红外光谱、反射光谱及衰减全反射光谱；求出并绘出相应光谱图的二阶导数光谱图；测定试样的二维相关红外谱；分级对比相应图谱。本方法无需对试样进行分离，即可无损地、快速地、不失原本性和配伍性地直接判断被测试样的品种、产地、栽培或野生、等级、真伪优劣的依据。因此可广泛用于中药药材快速简便地鉴定、鉴别与质量控制。文档编号G01N21/35GK1447110SQ03123389公开日2003年10月8日申请日期2003年4月26日优先权日2003年4月26日发明者孙素琴,秦竹,周群,陶家洵申请人:清华大学