专利名称：血清镁检测试剂盒及其制备方法
技术领域：
本发明涉及用于检测血清中镁含量的检测试剂盒及其制备方法。
背景技术：
镁是人体必需的常量元素。
血清镁增高见于肾脏疾病、内分泌疾病、多发性骨髓瘤、严重脱水症等。血清铜降低见见于慢性腹泻、吸收不良综合症、慢性肾炎综合症、甲状腺机能亢进症、甲状旁腺机能亢进症、糖尿病酸中毒以及长期使用皮质激素治疗者等。准确测定血清中镁的含量，对人体健康至关重要。
血清镁的测定方法有原子吸收分光光度法、酶偶联速率测定法和分光光度法等。原子吸收分光光度法虽准确性好，但仪器昂贵，不适于常规分析。酶偶联速率测定法试剂需进口、成本高亦难以普及。目前《全国临床检验操作规程》推荐为临床实验室常规分析的甲基百里酚蓝(MTB)法和Calmagite染料法虽简便、快速，但两法的灵敏度、试剂本身稳定性及显色络合物的稳定性均不甚理想。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种用于测定血清中镁含量的操作简便快速、灵敏度高且廉价易得的试剂盒，发明还要提供这种该试剂盒的制备方法。
本发明试剂盒的原理是在弱碱性缓冲液中，血清镁与偶氮类显色剂作用生成蓝紫色配合物，其颜色深浅与血清镁含量成正比，与同样处理的标准液进行比较，可求得血清镁含量。
为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是一种用于检测血清中镁含量的检测试剂盒，它由下列试剂组成(1)偶氮类显色液偶氮类显色液中溶质包括偶氮类有机物、表面活性剂和掩蔽剂，溶剂由pH＝8～10的三乙醇胺-盐酸或三羟甲基氨基甲烷缓冲液组成，
所述表面活性剂为固体表面活性剂、液体表面活性剂或固体表面活性剂和液体表面活性剂的混合物，所述液体表面活性剂为聚氧乙烯异辛基苯基醚，所述固体表面活性剂为聚氧乙烯月桂醚或聚乙烯吡咯烷酮中的一种或两种任意比例的混合物，所述掩蔽剂为乙二醇双(α-氨基乙基)醚四乙酸，每升显色液中溶剂的含量如下
(2)镁标准液浓度为0.823～1.234mmol/L。
所述溶质还包括叠氮钠，每升显色液含叠氮钠0.2～0.8g；所述偶氮类有机物为偶氮胂III、偶氮胂I或偶氮氯磷I。
本发明还提供了上述吡啶偶氮类显色液的制备方法为每升偶氮类显色液按照上述比例称取吡啶偶氮类有机物、表面活性剂和掩蔽剂，用pH＝8～10的三乙醇胺-盐酸或三羟甲基氨基甲烷缓冲液稀释为1000ml的吡啶偶氮类显色液。
本发明所能达到的有益效果是用本试剂盒进行血清镁测定具有灵敏度高，准确度好，试剂空白值低，试剂简单稳定、操作快速简便等优点，适合临床常规普及应用。
具体实施例方式
实施例一一种血清镁检测试剂盒，本试剂盒是由以下物质组成的偶氮类显色液1瓶镁标准液(浓度为0.823mmol/L) 1瓶本试剂盒的制备方法是通过如下步骤实现的(1)偶氮类显色液的制备方法a、称取偶氮氯磷I 50mg，乙二醇双(α-氨基乙基)醚四乙酸70mg，聚氧乙烯异辛基苯基醚5.0ml，用pH＝9.8的三羟甲基氨基甲烷缓冲液稀释至1000ml；(2)镁标准液按常规方法配置。
检测方法1.手工分析法血清(U管)、镁标准液(S管)、蒸馏水管(B管)各取50μl，然后在各管中分别加入显色液3.0ml，混匀，在分光光度计上用1cm光径比色皿空白管调零，然后在580nm处读取各管的吸光度(A)。
2.自动分析仪分析参数反应类型终点法；波长640nm(主)/750nm(次)；反应温度37℃；校准方法Linear；显色液300μl；标本5μl；读数时间180秒。
血清镁的含量(μmol/L)＝0.823×Au/As实施例二一种血清镁检测试剂盒，本试剂盒是由以下物质组成的偶氮类显色液 1瓶镁标准液(浓度为1.234mmol/L) 1瓶本试剂盒的制备方法是通过如下步骤实现的(1)偶氮类显色液的制备方法a、称取偶氮胂III75mg，乙二醇双(α-氨基乙基)醚四乙酸75mg，聚氧乙烯异辛基苯基醚5.0ml，聚氧乙烯月桂醚10.0g，用pH＝9.0的三乙醇胺-盐酸缓冲液稀释至1000ml；(2)镁标准液按常规方法配置。
检测方法1.手工分析法血清(U管)、镁标准液(S管)、蒸馏水管(B管)各取50μl，然后在各管中分别加入显色液3.0ml，混匀，在分光光度计上用1cm光径比色皿空白管调零，然后在650nm处读取各管的吸光度(A)。
2.自动分析仪分析参数反应类型终点法；波长650nm(主)/750nm(次)；反应温度37℃；校准方法Linear；显色液300μl；标本5μl；读数时间180秒。
血清镁的含量(μmol/L)＝1.234×Au/As实施例三一种血清镁检测试剂盒，本试剂盒是由以下物质组成的偶氮类显色液 1瓶镁标准液(浓度为0.983mmol/L) 1瓶本试剂盒的制备方法是通过如下步骤实现的(1)偶氮类显色液的制备方法a、称取偶氮氯磷I 85mg，乙二醇双(α-氨基乙基)醚四乙酸100mg，叠氮钠0.5g，聚乙烯吡咯烷酮15.0g，用pH＝9.5三羟甲基氨基甲烷缓冲液稀释至1000ml；(2)镁标准液按常规方法配置。
检测方法手工分析法血清(U管)、镁标准液(S管)、蒸馏水管(B管)各取50μl，然后在各管中分别加入显色液3.0ml，混匀，在分光光度计上用1cm光径比色皿空白管调零，然后在580nm处读取各管的吸光度(A)。
血清镁的含量(μmol/L)＝0.983×Au/As实施例四一种血清镁检测试剂盒，本试剂盒是由以下物质组成的偶氮类显色液 1瓶镁标准液(浓度为0.823mmol/L)1瓶本试剂盒的制备方法是通过如下步骤实现的(3)偶氮类显色液的制备方法a、称取偶氮胂I 100mg，乙二醇双(α-氨基乙基)醚四乙酸120mg，聚氧乙烯异辛基苯基醚10.0ml，用pH＝8.5的三乙醇胺-盐酸缓冲液稀释至1000ml；(4)镁标准液按常规方法配置。
检测方法1.手工分析法血清(U管)、镁标准液(S管)、蒸馏水管(B管)各取50μl，然后在各管中分别加入显色液3.0ml，混匀，在分光光度计上用1cm光径比色皿空白管调零，然后在580nm处读取各管的吸光度(A)。
2.自动分析仪分析参数反应类型终点法；波长580nm(主)/750nm(次)；反应温度37℃；校准方法Linear；显色液300μl；标本5μl；读数时间180秒。
血清镁的含量(μmol/L)＝0.823×Au/As实施例五一种血清镁检测试剂盒，本试剂盒是由以下物质组成的偶氮类显色液 1瓶镁标准液(浓度为1.234mmol/L) 1瓶本试剂盒的制备方法是通过如下步骤实现的(5)偶氮类显色液的制备方法a、称取偶氮胂III 150mg，乙二醇双(α-氨基乙基)醚四乙酸150mg，聚氧乙烯月桂醚10g、聚乙烯吡咯烷酮8g，叠氮钠0.8g，用pH＝8.5的三乙醇胺-盐酸缓冲液稀释至1000ml；(6)镁标准液按常规方法配置。
检测方法1.手工分析法血清(U管)、镁标准液(S管)、蒸馏水管(B管)各取50μl，然后在各管中分别加入显色液3.0ml，混匀，在分光光度计上用1cm光径比色皿空白管调零，然后在650nm处读取各管的吸光度(A)。
2.自动分析仪分析参数反应类型终点法；波长650nm(主)/750nm(次)；反应温度37℃；校准方法Linear；显色液300μl；标本5μl；读数时间180秒。
血清镁的含量(μmol/L)＝1.234×Au/As。
权利要求
1.一种用于检测血清中镁含量的检测试剂盒，它由下列试剂组成(1)偶氮类显色液偶氮类显色液中溶质主要包括偶氮类有机物、表面活性剂和掩蔽剂，溶剂由pH＝8～10的三乙醇胺-盐酸或三羟甲基氨基甲烷缓冲液组成，所述表面活性剂为固体表面活性剂、液体表面活性剂或固体表面活性剂和液体表面活性剂的混合物，所述液体表面活性剂为聚氧乙烯异辛基苯基醚，所述固体表面活性剂为聚氧乙烯月桂醚或聚乙烯吡咯烷酮中的一种或两种任意比例的混合物，所述掩蔽剂为乙二醇双(α-氨基乙基)醚四乙酸，每升显色液中溶剂的含量如下
(2)镁标准液浓度为0.823～1.234mmol/L。
2.根据权利要求1所述的一种用于检测血清中镁含量的检测试剂盒，其特征在于所述溶质还包括叠氮钠，每升显色液含叠氮钠0.2～0.8g。
3.根据权利要求1所述的一种用于检测血清中镁含量的检测试剂盒，其特征在于所述偶氮类有机物为偶氮胂III、偶氮胂I或偶氮氯磷I。
4.根据权利要求1所述的一种用于检测血清中镁含量的检测试剂盒的制备方法，其特征在于吡啶偶氮类显色液的制备方法为每升偶氮类显色液按照上述比例称取吡啶偶氮类有机物、表面活性剂和掩蔽剂，用pH＝8～10的三乙醇胺-盐酸或三羟甲基氨基甲烷缓冲液稀释为1000ml的吡啶偶氮类显色液。
全文摘要
本发明公开了一种用于测定血清中镁含量的试剂盒及其该试剂盒的制备方法。本发明试剂盒的原理是在弱碱性缓冲液中，血清镁与偶氮类显色剂作用生成蓝紫色配合物，其颜色深浅与血清镁含量成正比，与同样处理的标准液进行比较，可求得血清镁含量。本发明试剂盒操作简便快速、灵敏度高且廉价易得，适合临床常规普及应用。
文档编号G01N21/77GK1869705SQ20061008390
公开日2006年11月29日 申请日期2006年6月6日 优先权日2006年6月6日
发明者周铁丽, 曹建明, 王占岳 申请人:周铁丽