专利名称：多功能干片检测板的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种多功能干片检测板。具体的说是一种能够快速定量或定 性完成多项生化指标同时检测的多功能干片检测板。
背景技术：
医学检验向来是疾病诊断最为准确有效的手段之一。在医学检验技术发展日 新月异的今天，人们已经可以利用当今各学科先进技术服务于临床检验，及时有 效的对疾病进行诊断。自上世纪末，人们已将集生命科学技术、电子技术、计算 机技术等先进技术于一体的全自动生化仪应用于临床生化检验，开创了生化项目 检验的自动化道路。由于全自动生化仪存在价格高昂，体积庞大， 一次性样品总 量大，对试剂要求高，操作相对繁琐等问题，致使其无法全面普及。
干(生物)化学检测技术是近年来发展起来的一项新型生化检验技术。干(生 物)化学检测技术以其独特的性能正在为临床实验室所接受,成为临床生化检验 常规和急诊检测工作的新生力量。与传统方法相比，具有操作简单、速度快、污 染少、结果稳定准确等诸多优点。干(生物)化学检测的方式，通常是将参与反 应的各化学、生物试剂按比例配成溶液，加与固相反应载体之上，经干燥后可用 于临床检测。检测过程中，干(生物)化学试剂溶解速度快、局部浓度高、反应 速度快，同时，可保证一些试剂在固体干物料状态下保持长期稳定。
目前，干(生物)化学快速检测技术，在临床检测领域尚属于新兴技术，在 国内外应用尚不十分广泛，其主要原因除了技术上存在一定难度之外，其检测方 式上只能实现单人单项目检测，检测效率偏低，这也是阻碍干(生物)化学检测 技术进一步发展和全面普及的重要原因。
实用新型内容
本发明的目的是提供一种多功能干片检测板，可以实现一次检测同时完成 1~4 (亦可扩展更多)项生化指标的检测。
多功能干片检测板由血标本分离区(全血过滤板)和固相试剂反应区(固相 反应载体膜)两部分组成。其中血标本分离区的功能是将全血中的血浆或血清与 血细胞自动分离并传送到相应的固相试剂反应区，其主要部件包括全血过滤纸、支撑垫及聚乙烯塑料支架；固相试剂反应区的功能是将各种反应试剂和显色剂预 先固化在高分子材料上，当分离出的血浆或血清传送到反应区时完成相应的化学 反应，其主要部件包括固相反应载体膜、碳纤维条架等。
多功能干片检测板的结构，包括吸附生化试剂的固相反应载体膜l、碳纤维 条架2、上层附有薄玻纤纸3的支撑垫5、加装了全血过滤纸4的硬质支架7及 弹性垫6;其特征在于，固相反应载体膜1固定在碳纤维条架2的各个窗口之上; 碳纤维条架2通过固定在硬质支架7两端的弹性垫6与硬质支架7相连接;硬质 支架7中间内嵌了加样槽，加样槽前端有全血过滤纸4;硬质支架7靠近固相反 应载体膜的一侧粘贴有支撑垫5，支撑垫5上有薄玻纤纸3。当弹性垫6被压縮 时全血过滤纸4能与薄玻纤纸3相接触，同时薄玻纤纸3能与固相反应载体膜1 相接触；全血样本即是通过全血过滤纸4实现血细胞与血清的分离，其后血清得 以传输至薄玻纤纸3并最终传至固相反应载体膜1上与生化试剂发生指示反应。
上述所说的固相反应载体膜为一种高分子材料。支撑垫为具有一定弹性的疏 水材料；其上粘附的薄玻纤纸为一种玻璃纤维纸。硬质支架为一种硬度较高的高 分子材料，可以是聚乙烯、聚氯乙烯、聚丙烯等塑料或有机玻璃等。
多功能干片检测板可以有多个固相反应区，最好为四个，即每个多功能干片 检测板可在碳纤维条架上加装1~4片相对独立的固相反应载体膜。由于固相反应 区中所固化的化学试剂不同，因此，临床检测时只需一滴血液标本即可同时完成 不同项目指标的检测，体现了该实用新型产品的先进性和创新性。
多功能干片检测板的检测原理是通过血标本中的被测物与固相反应载体膜 上的生化试剂相接处后，发生显示反应，经特定的"干片式快速检测仪"，通过 光学传感器，检测反应膜上的颜色变化进而计算出被测物的浓度。不同生化指标 的检测，其化学反应显色原理不尽相同，检测过程中，检测仪内部传感器对光电 信号的采集及信号分析、数据处理方式亦不相同。干片检测板上化学反应过程在 检测仪恒温控制下自动进行，具有反应速度快、重复性好、准确度、精密度高等 优点。
多功能干片检测板的制备方法，包括如下步骤
①切割、固定将固相反应载体膜l、薄玻纤纸3、全血过滤纸4按规格切
割，并分别固定或加装在碳纤维条架2、支撑垫5及硬质支架7的凹槽内。② 点样按检测不同生化指标所需试剂配方，配制反应工作液，定量点样 于不同固相反应载体膜上。
③ 干燥将点样后的载体膜在30-6(TC烘箱中干燥30-120分钟。
④ 组装将固定载体膜1的碳纤维条架2与硬质支架7通过弹性垫6的上
下两层胶固定在一起。
多功能干片检测板的应用，包括临床上用于快速定量或定性检测血糖、血脂 (高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、总胆固醇、甘油三酯等)、谷丙转氨酶、谷草 转氨酶、乙肝表面抗原等、肾功能指标(肌酐、尿素氮、总二氧化碳和血#)及 部分血常规指标等。由于本实用新型产品具有反应迅速、准确度、精密度高等特 点，故实际应用中可满足常规诊断、急诊、血源筛査等多方面要求。
本实用新型涉及产品多功能干片检测板的设计开发及技术路线科学、合理， 自动化程度高，性能稳定，功能齐全，外观精巧，方便易用。检测结果准确度高， 重复性好，检测速度快，完全可以满足各级医院及流动采血车上大规模快速检验 的需要。以下结合附图和实施例对本实用新型进一 步说明。
图1为本实用新型产品多功能干片检测板横截面示意图。 '
图2为固相反应载体膜及碳纤维条架的正面放大示意图。
其中，l-固相反应载体膜；2-碳纤维条架；3-薄玻纤纸；4-全血过滤纸；5-
支撑垫；6-弹性垫；7-硬质支架.
具体实施方式
实施例一 ALT干片检测板
ALT干片检测板基于丙酮酸氧化酶法对人体血标本中的谷丙转氨酶进行定 量检测的。首先ALT催化丙氨酸和a-酮戊二酸转化生成丙酮酸和谷氦酸，丙酮酸 与磷酸根、02等在丙酮酸氧化酶催化作用下氧化生成乙酰憐酸和过氧化氢,生成 的过氧化氢具有强氧化性,可以将还原性的显色剂氧化从而产生颜色变化。，反应 式如下
丙氨酸+01-酮戊二酸4一丙酮酸+谷氨酸丙酮酸+磷酸盐+02 + h20 画画-乙酰磷酸+ h202+ c02 显色剂(还原态)+験魏纖 - 显色剂(氧化态)+h20
每片检测板上包含有下列生化反应试剂:
L-丙氨酸 a-酮戊二酸 TPP MgCl2
丙酮酸氧化酶
过氧化物酶
显色剂
168~252吗
15.7~25.6吗
10.9~17.4昭
L7 2.化g
L9 2.8U
18.0~26.3U
24.8~35.6昭
ALT干片检测板的制备
① 切割、固定将固相反应载体膜l、薄玻纤纸3、全血过滤纸4按规格切 割，并分别固定或加装在碳纤维条架2、支撑垫5及聚乙烯塑料支架7的凹槽内。
② 点样按上述试剂配方，配制反应工作液，定量1.5-2.5pl/片点f于固 相反应载体膜上。
③ 干燥将点样后的固定有载体膜1的碳纤维条架2在3(TC-6(TC烘箱中 干燥30-120分钟。
组装将干燥好的固定载体膜1的碳纤维条架2与聚乙烯塑料支架7通 过弹性垫6的上下两层胶固定在一起。密封于铝箔袋中，0-l(TC冰箱中储存、备 用。
制得的干片检测板结构如图1和2所示，包括吸附生化试剂的固相反应载体 膜1、碳纤维条架2、上层附有薄玻纤纸3的支撑垫5、加装了全血过滤纸4的 硬质支架7及弹性垫6;固相反应载体膜1固定在碳纤维条架2的各个窗口之上； 碳纤维条架2通过固定在硬质支架7两端的弹性垫6与硬质支架7相连接 硬质 支架7中间内嵌了加样槽，加样槽前端有全血过滤纸4;硬质支架7靠近固相反 应载体膜的一侧粘贴有支撑垫5，支撑垫5上有薄玻纤纸3。临床检测
取25-45H1指尖末梢血，加于ALT干片检测板的加样槽内，并将检测板放于 "干片式快速检测仪"内，4分钟内检测仪自动显示结果。 实施例二(血脂、血糖干片检测板)
血脂、血糖干片检测板基于胆固醇氧化酶法、磷酸甘油氧化酶法、以及葡萄 糖氧化酶法对人体血标本中的总胆固醇、高密度脂蛋白、甘油三酯和葡萄糖进行 定量检测的。其反应方程式分别如下
总胆固醇+水
胆固醇+02+1120
胆固醇酯酶
游离胆固醇+脂肪酸
胆固醇氧化酶
乙酰磷酸+ h202+ c02
显色剂(还原态)+h202鄉進 一 显色剂(氧化态)+h20
甘油三酯+水
丙三醇+atp 甘油激酶、Mg2+
丙三醇+脂肪酸 磷酸甘油+adp
石舞酸甘油+02磷酸甘油氧化酶^ 磷酸二羟丙酮+h202
显色剂(还原态)+h202魏麵 一 显色剂(氧化态)+h20
葡萄糖+ 02
葡萄糖氧化酶
d-脱氧葡萄糖内酯+h202
显色剂(还原态)+h202魏麵 一 显色剂(氧化态)+h20
每片检测板上包含有下列生化反应试剂:
胆固醇酯酶0.1-0.9U
胆固醇氧化酶0.01~0.07U
甘油激酶0.2~0.7U
磷酸甘油氧化酶0.卜0.9U
辣根过氧化酶0.K5U
MgCl21.7~2.4|_ig
葡萄糖氧化酶0.2~1UATP 18~26昭 显色剂 50~120吗 血脂、血糖千片检测板的制备
① 切割、固定将固相反应载体膜l、薄玻纤纸3、全血过滤纸4按规格切 割，并分别固定或加装在碳纤维条架2、支撑垫5及聚乙烯塑料支架7的凹槽内。
② 点样按上述试剂配方，配制反应工作液，定量1.5-2.5nl/片点样于固
相反应载体膜上。
③ 干燥将点样后的固定有载体膜1的碳纤维条架2在3CTC-6(TC烘箱中 干燥30-120分钟。
组装将干燥好的固定载体膜1的碳纤维条架2与聚乙烯塑料支架7通 过连接垫6的上下两层胶固定在一起。结构如图1和2.密封于铝箔袋中，0-10 'C冰箱中储存、备用。
临床检测
取25-45^1指尖末梢血，加于血脂、血糖干片检测板的加样槽内，并将检测 板放于"干片式快速检测仪"内，4分钟内检测仪自动显示结果。
实施例三肾功能(肌酐、尿素氮、血钾、二氧化碳含量)检测板
肌酐的检测原理基于肌酐在肌酐酶作用下生成肌酸，肌酸在肌酸酶作用下生 成肌氨酸，最后肌氨酸在肌氨酸氧化酶的作用下生成双氧水，从而使显色剂氧化
显色° 肌酐酶
肌酐+ H20-—肌酸
肌酸藤
肌酸+H2。 -^-一尿素+肌氨酸
肌氨酸氧化酶
肌氨酸+ H20+ O 2-一甘氨酸+甲醛+ H202
过氧化物酶
&02+显色剂(还原态)-~^1120+显色剂(氧化态)
尿素氮的检测原理基于尿素在尿素酶的作用下生成氨，氨在次氯酸钠和水杨 酸钠作用下显色。
尿素酶
尿素+21120 _^ 2NH3+C02NH3+次氯酸钠+水杨酸钠Na2Fe(「N)6NO -靛蓝色
血钾的检测原理基于反应体系中的离子载体(2,3-naphtho-15-crown-5) —旦 与钾离子特异性结合，会使报告底物(7-decyl-MEDPIN)失去质子，从而改变 其颜色。
碳酸氢根的检测基于碳酸氢根会直接影响反应体系的pH值，从而使酚红显 现出不同的颜色。
每片检测板上包含有下列生化反应试剂
肌酐酶1.9~3.6U
肌酸酶4.8~7.2U
肌氨酸氧化酶1.8~3.9U
过氧化物酶20~40U
MgCl25.6~7.8昭
显色剂24.8~35.6吗
尿素酶1.3~3.5U
次氯酸钠2.0~8.0^ig
水杨酸钠96~146昭
Na2Fe(CN)6NO10~25吗
2,3 -naphtho-15-crown-55~15昭
7-decyl-MEDPIN1~6吗
酚红1.2~4.8吗
肾功能干片检测板的制备过程，除试剂与实施例一基本相同。
临床检测
取25-45nl指尖末梢血，加于肾功能干片检测板的加样槽内，并将检测板放 于"千片式快速检测仪"内，4分钟内检测仪自动显示结果。
本实用新型不限于这些公开的实施方案，本发明将覆盖在专利书中所描述的范围，以及 权利要求范围的各种变型和等效变化。
权利要求1、一种多功能干片检测板，包括吸附生化试剂的固相反应载体膜(1)、碳纤维条架(2)、上层附有薄玻纤纸(3)的支撑垫(5)、加装了全血过滤纸(4)的硬质支架(7)及弹性垫(6)；其特征在于，固相反应载体膜(1)固定在碳纤维条架(2)的各个窗口之上；碳纤维条架(2)通过固定在硬质支架(7)两端的弹性垫(6)与硬质支架(7)相连接；硬质支架(7)中间内嵌了加样槽，加样槽前端有全血过滤纸(4)；硬质支架(7)靠近固相反应载体膜的一侧粘贴有支撑垫(5)，支撑垫(5)上有薄玻纤纸(3)。
2、 如权利要求1所述的多功能干片检测板，其特征在于吸附生化试剂的 固相反应载体膜为高分子材料。
3、 如权利要求1所述的多功能干片检测板，其特征在于支撑垫为具有弹性的疏水材料，其上粘附的薄玻纤纸为玻璃纤维纸。
4、 如权利要求1所述的多功能干片检测板，其特征在于硬质支架为硬度较高的疏水高分子材料。
5、 如权利要求4所述的多功能干片检测板，其特征在于所说的硬度较高的疏水高分子材料，是聚乙烯、聚氯乙烯、聚丙烯或有机玻璃。
6、 如权利要求1所述的多功能干片检测板，其特征在于固定载体膜的碳纤维条架上，同时固定l-4片彼此分开、相对独立的固相反应载体膜。
专利摘要本实用新型涉及一种多功能干片检测板，属于医疗器械领域。所说的多功能干片检测板，包括吸附生化试剂的固相反应载体膜(1)、碳纤维条架(2)、上层附有薄玻纤纸(3)的支撑垫(5)、加装了全血过滤纸(4)的硬质支架(7)及弹性垫(6)。本实用新型的产品为一次性医学检验耗材，属快速微量检测；能够定量/定性快速检测人体血标本(全血、血浆、血清)中的多项生化指标，检测过程可在5分钟内完成，对于临床快速定量检测及疾病诊断具有重要意义。
文档编号G01N33/50GK201255742SQ200820186959
公开日2009年6月10日 申请日期2008年9月17日 优先权日2008年9月17日
发明者吕炜锋, 蒋昵真, 郝曦东 申请人:吕炜锋