专利名称：更年期用药指导遗传检测的制作方法
技术领域：
本发明涉及分子生物学和医学领域，更具体的，本发明涉及一种更年期用药指导 遗传检测的方法。
背景技术：
进入围绝经期是女性的一个特殊阶段，受到生物、心理和社会因素的影响，现代医 学研究认为，卵巢功能衰退、性激素分泌减少、促性腺激素升高以及不适应机体内分泌的重 新调整而引起植物神经功能紊乱是导致绝经期综合征发病的主要原因。科学研究发现，雌 激素受体广泛分布在女性全身组织和器官的细胞膜上，当雌激素减少时，这些组织和器官 就会发生退行性变或代谢上的变化，进而出现一系列神经、内分泌、代谢和心理的失衡，引 起各系统改变的综合征候群。目前认为卵巢功能衰退、雌激素分泌减少、促性腺激素升高及 内分泌平衡状况改变是引起绝经期综合征的主要原因，并发现雌激素降低的水平与绝经期 综合征的严重度基本呈正相关。近十几年，国外相继成功研制了不同于传统雌激素的新型药物组织选择性雌 激素活性调节剂(Selective Tissue Estrongenic Activity Regulations, STEARs)和 SERMs0 STEARs具有组织特异性留体激素活性的化合物，具有弱雌、孕、雄激素样活性，利维 爱是STEARs家族的第一个成员，其代谢产物强烈抑制雌酮转化，故无乳腺癌及子宫内膜癌 发生的危险，且用药期间阴道出血率相对较小，出血量较少。在有效治疗绝经相关症状的同 时降低部分不良反应的发生，被认为是当今较接近于理想的绝经后HT药物。SERMs是指一 类结构多样的化合物，可与雌激素受体ER结合，在不同的靶组织依据细胞种类和激素环境 的不同，可以表现为雌激素激动剂或拮抗剂的作用。雷洛昔芬是其中的重要成员，它对骨组 织和血清中的脂蛋白有雌激素样作用，已用于治疗绝经后妇女骨质疏松症，能保护心血管 系统，改善认知功能，但SERMs不能解除绝经期潮热、汗出等症状，甚至可能诱发或加重这 些症状。
发明内容
本发明提供一种更年期用药指导遗传检测的方法。通过采集受检者的口腔粘膜细胞，提取其基因组DNA，对其基因组DNA的CYPlAl基 因上rs4646903位点、CYPlBl基因上Leu432Val位点、COMT基因上Val 158Met位点和GSTTl 基因上I^esent/Null位点多态性进行检测，从基因层面评估更年期用药代谢能力，并作为 用药指导。
具体实施例方式下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。下列实施例中未注明具体条件的实验 方法，通常按照常规条件，或按照厂商所建议的条件。实施例
步骤1 :DNA模板的抽取用硅胶吸附法抽提口腔上皮细胞的基因组DNA。步骤2 荧光定量PGR反应使用检测试剂盒中的荧光定量PCR套装，进行荧光定量PCR反应，反应的体系为总 体积10 μ 1，包含浓度为20ng/ μ 1的DNA模板2 μ 1、1 μ 1 IOX荧光定量PCR反应缓冲液、 0. 1 μ 1 25mM dNTP 混合液、0. 6 μ 1 25mMMgCl2 溶液、0. 025 μ 1 (5units/ μ 1) Taq DNA 聚合 酶、20 μ M的有义引物和反义引物各0. 225 μ 1、10 μ M的带VIC荧光探针和带FAM荧光探针 各0. 25μ 1，去离子水5. 325 μ 1。在PCR扩增仪上进行反应，反应条件为50°C、2分钟，95°C、10分钟，进行60个循环 的95°C、30秒，60°C、1分钟。反应结束后在荧光定量PCR仪上读取样品荧光量。步骤4:基因型分析根据试剂盒使用说明书标示的基因分型图示对SNP位点进行基因型分析。熟悉荧光定量PCR技术的本领域技术人员能够通过辨识荧光定量PCR仪上显示 的最终样品荧光量，根据不同序列探针荧光信号的强弱即可确定所检测的SNP位点的基因 型。
权利要求
1. 一种更年期用药指导遗传检测的方法，其特征在于采集受检者的口腔粘膜细胞， 提取其基因组DNA，对其基因组DNA的CYPlAl基因上rs4646903位点、CYPlBl基因上 Leu432Val位点、COMT基因上Vall58Met位点和GSTTl基因上Present/Null位点进行检 测，确定其是否发生基因突变而导致雌激素代谢异常。
全文摘要
本发明公开了更年期用药指导遗传检测的方法，通过采集受检者的口腔粘膜细胞，提取其基因组DNA，对其基因组DNA的CYP1A1基因上rs4646903位点、CYP1B1基因上Leu432Val位点、COMT基因上Val158Met位点和GSTT1基因上Present/Null位点多态性进行检测，从基因层面评估更年期用药代谢能力，并作为用药指导。
文档编号G01N21/64GK102108381SQ20091020048
公开日2011年6月29日 申请日期2009年12月23日 优先权日2009年12月23日
发明者冯哲民, 贺宪民, 邹祖烨 申请人:上海主健生物工程有限公司