专利名称：一种复方丹参滴丸的检测方法
技术领域：
本发明涉及一种药物检测方法，特别涉及复方丹参滴丸的检测方法。
背景技术：
复方丹参滴丸是由丹参、三七及冰片等药味组成的复方制剂，具有活血化瘀、理气 止痛的功效。现质量标准收载在《中国药典》2005年版一部中检测的内容如下表 权利要求
1.一种复方丹参滴丸，由丹参、三七及冰片制成，其特征在于，其有效成分通过薄层鉴 别、指纹图谱鉴别及含量测定方法进行全面、准确、科学控制。
2.权利要求1的复方丹参滴丸的检测方法，其特征在于，包括对药物成分三七的鉴别 方法、丹参的指纹图谱鉴别方法、丹参的含量检测方法和三七的含量检测方法。
3.权利要求2的检测方法，其特征在于，所述三七的鉴别方法采用薄层层析法，参照物 选用三七对照药材、人参皂苷对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rb1对照品及三七 皂苷R1对照品。
4.权利要求3的检测方法，其特征在于，所述薄层层析法，步骤如下供试品溶液的 制备取本品20丸，置离心管中，加入稀氨溶液9ml，超声处理使溶解，离心，取上清液，通 过DlOl型大孔吸附树脂柱，用水15ml洗脱，弃去水洗脱液，再用甲醇洗脱，弃去初洗脱液 约0.細1，收集续洗脱液约5ml，浓缩至约anl，作为供试品溶液，对照药材溶液的制备取 三七对照药材0. 5g，置离心管中，加入稀氨溶液9ml，超声处理15分钟，离心，取上清液，通 过DlOl型大孔吸附树脂柱，用水15ml洗脱，弃去水洗脱液，再用甲醇洗脱，弃去初洗脱液约 0.細1，收集续洗脱液约5ml，作为对照药材溶液，对照品溶液的制备分别精密称取三七皂 苷R1对照品、人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷对照品、人参皂苷Re对照品，加甲醇制成 每Iml分别含lmg、0. 5mg、0. 5mg、0. 5mg的混合溶液，作为对照品溶液，薄层条件照中国药 典2005版附录VIB试验，吸取供试品溶液4 8 μ 1、对照药材溶液2 μ 1，对照品溶液2 μ 1 分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水=13 7 25 10°C放置12 小时的下层溶液为展开剂，展开12cm以上，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加 热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材及 对照品色谱相应位置上，分别显相同颜色的斑点或荧光斑点。
5.权利要求2的检测方法，其特征在于，所述丹参的鉴别方法采用指纹图谱比较法，参 照物选用丹参素钠。
6.权利要求5的检测方法，其特征在于，所述指纹图谱比较法，步骤如下色谱条件与 系统适用性试验Waters Acquity UPLC HSS T3色谱柱，以含0. 02% ml/ml磷酸的80%乙 腈为流动相A ；以0. 02% ml/ml的磷酸水溶液为流动相B，按流动相梯度洗脱表进行洗脱； 流速为每分钟0. 4ml ；检测波长为280nm ；柱温40°C ；记录时间为10分钟，理论板数按丹参 素峰计算应不低于8000，流动相梯度洗脱参照表时间(分钟)流动相A流动相B.0 1. 69 —-2291 —-78.1. 6 1. 822 —-2678 —-74.1. 8 8. 026 —-3974 - 61.8. 0 8. 439 —-961 - 91.8. 4 10991对照品溶液的制备取丹参素钠对照品适量，精密称定，加75%甲醇制成每Iml含 0. 16mg的溶液相当于每Iml含丹参素0. 144mg,即得，复方丹参滴丸供试品溶液的制备取本 品10丸，精密称定，置IOml量瓶中，加水适量，超声处理15分钟使溶解，放冷，加水至刻度， 摇勻，过0. 22 μ m微孔滤膜，即得，测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各2 μ 1 4μ1注入液相色谱仪，测定，复方丹参滴丸供试品色谱图与对照指纹图谱经计算机模拟相 似度计算软件计算，相似度应不低于0. 9。
7.权利要求2的检测方法，其特征在于，所述丹参的含量测定，是对其中丹参素的含量 进行测定，采用亚2 μ m液相色谱技术，测定处方中丹参素含量。
8.权利要求7的检测方法，其特征在于，所述丹参素的含量测定方法，步骤与指纹图谱 方法相同，达到指纹图谱鉴别与含量测定同时检测，用外标法计算含量，本品每丸含丹参以 丹参素计，不得少于0. 10mg。
9.权利要求2的检测方法，其特征在于，所述三七的含量测定，是对其中三七皂苷R1， 人参皂苷Rgl及人参皂苷Rbl的含量进行测定，采用亚2 μ m液相色谱技术，测定处方中 三七成分的含量。
10.权利要求9的检测方法，其特征在于，所述三七皂苷队，人参皂苷及人参皂苷 Rb1的含量测定，步骤如下色谱条件及系统适用性试验Waters Aqucity UPLC BEH Shield RP18色谱柱，以水 溶液为流动相A ；以乙腈溶液为流动相B，按流动相梯度洗脱参考进行洗脱；流速为每分钟 0. 4ml ；检测波长为203nm ；柱温40°C ；记录时间为16分钟，理论板数按三七皂苷R1峰计算 应不低于8000，流动相梯度洗脱参照表时间(分钟) 流动相A 流动相B O 7.083 — 79 17 — 21·7. O 13. 5 79 — 64 21 — 36·13.5 13. 6 64 — 10 36 — 90·13.6 14. 51090·14.5 15. O 10 — 83 90 — 17·15.0 16.08317对照品溶液的制备精密称取人参皂苷对照品、人参皂苷Rb1对照品和三七皂苷R1 对照品适量，加甲醇制成每Iml含人参皂苷Rg1O. %ig、人参皂苷Rb1O. %ig、三七皂苷礼0. Img 的混合溶液，即得，供试品溶液的制备取复方丹参滴丸10丸，精密称定，加4%氨水5ml，超 声使溶解，溶液全部通过预处理好的80-100目1. Og的C-18小柱，并用水洗至中性，再用甲 醇洗脱至5ml容量瓶中，定容至刻度，用0. 22 μ m有机滤膜滤过，即得，测定法分别精密吸取 对照品溶液、供试品溶液各2 μ 1注入超高效液相色谱仪，测定，用外标法计算含量，本品含 三七以三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1总量计，每丸不低于0. 10mg。
全文摘要
本发明涉及一种复方丹参滴丸的检测方法，该方法包括以下内容性状的观察，内容物的鉴别，内容物的检查，指纹图谱比较，对含有的成分进行含量测定，本发明的检测方法，包括对药物成分三七的鉴别方法，所述方法采用薄层层析法，参照物选用三七对照药材、人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rb1对照品及三七皂苷R1对照品；本发明的检测方法，还包括对药物成分丹参的鉴别方法和含量测定方法，其中鉴别方法采用亚2μm液相色谱技术进行色谱指纹图谱鉴别，参照物选用丹参素钠，含量测定方法用亚2μm液相色谱技术对丹参中的成分丹参素，三七皂苷R1，人参皂苷Rg1及人参皂苷Rb1进行含量测定。
文档编号G01N30/02GK102119961SQ20101003131
公开日2011年7月13日 申请日期2010年1月7日 优先权日2010年1月7日
发明者孙巍, 孙玉侠, 徐丽媛, 高展 申请人:天津天士力制药股份有限公司