专利名称：一种检测对位红的间接竞争法酶联免疫试剂盒的制作方法
技术领域：
本发明属于酶联免疫和食品安全领域中违禁添加剂检测分析技术领域，具体而言，本发明涉及一种用于检测对位红的间接竞争法酶联免疫检测试剂盒。
背景技术：
对位红属于偶氮系列化工合成染色剂，主要应用于油彩颜料及橡胶制品的着色， 常温下呈固态。由于其结构(见下图)与致癌物苏丹红相似，在代谢过程中偶氮苯可被降解，产生苯胺，苯胺可直接作用于肝细胞，引起中毒性肝病，长期摄入苯胺可造成人体的神经系统损害，并具有潜在的致癌性，因此被禁止用于食品生产。
权利要求
1.一种检测对位红的酶联免疫试剂盒，其中包括对位红特异性抗体、对位红-载体蛋白偶联物和酶标二抗。
2.根据权利要求1所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于所述试剂盒还包括包被了对位红抗原的酶标板、对位红标准溶液、底物显色剂、洗涤液、终止液和浓缩样品稀释液。
3.根据权利要求1或2所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于所述对位红特异性抗体为单克隆抗体或多克隆抗体。
4.根据权利要求1或2所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于所述的载体蛋白为牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)或钥孔铜兰蛋白(KLH)。
5.根据权利要求1或2所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于所述的酶标二抗的酶为辣根过氧化物酶。
6.根据权利要求1或2所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于所述的酶标二抗为羊抗兔IgG抗体或羊抗鼠IgG抗体。
7.根据权利要求2所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于所述的洗涤液为含有 0. 05% -0. 5%吐温-20磷酸盐缓冲液。
8.根据权利要求2所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于所述的底物显色剂由显色剂A 和显色剂B组成，显色剂A为过氧化氢或过氧化脲，显色剂B为邻苯二胺或四甲基联苯胺。
9.根据权利要求2所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于所述的浓缩样品稀释液为含 0. 吐温-20的磷酸盐缓冲液。
10.一种检测样品中对位红含量的方法，包括步骤(1)样品前处理；(2)用权利要求1-9任一所述的试剂盒进行检测，向包被有对位红抗原的酶标板孔中加入标准品或样品溶液，再加入抗对位红多克隆抗体或单克隆抗体工作液，孵育后洗涤拍干，加入酶标记二抗(羊抗兔或羊抗鼠)，孵育后洗涤拍干，显色、终上，用酶标仪测定吸光度值；(3)分析检测结果。
全文摘要
本发明属于生物检测领域。本发明公开了一种检测对位红的酶联免疫试剂盒，本发明所提供的对位红的酶联免疫试剂盒包括对位红特异性单克隆抗体或多克隆抗体、对位红与载体蛋白的偶联物、酶标二抗。本发明的检测对位红的酶联免疫试剂盒灵敏、快速、准确，主要用于大批样品的筛查；盒中的主要试剂均以工作液的形式提供，使用方便，具有高特异性、高灵敏性、高精确性、高准确性等特点，可快速检测食品中残留的对位红。
文档编号G01N33/577GK102346182SQ20101024005
公开日2012年2月8日 申请日期2010年7月29日 优先权日2010年7月29日
发明者于洪侠, 张妍, 张薇薇, 杨曙明, 程玛丽, 邱静, 陈刚, 陈爱亮 申请人:中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所