专利名称：鉴定具有降低的消化脂质和蛋白质的能力的动物的方法
技术领域：
本发明一般性涉及用于鉴定具有降低的消化食物营养素能力的动物的方法，且尤其是鉴定具有降低的消化脂质和蛋白质能力的动物的方法。相关技术说明已知动物消化食物和食物营养素的能力随年龄而变化。简单来讲，评价动物消化食物和食物营养素能力的方法以及影响可消化性的方法是已知的，例如“Changing Perspectives on Aging and Energy Requirements :Aging and Digestive Function in Humans, Dogs and Cats, "The Journal of Nutrition Vol. 128 No. 12 1998 ^ 12 M, pp. 2632S-2635S,禾口Experimental Approaches to Study the Nutritional Value of Food Ingredients for Dogs and Cats, "R. Bras. Zootec. vol. 36 supp L 0 VigOSa 2007 年 7 月。US20050147649公开了提升动物的脂肪可消化性的方法和饮食组合物。US20090136588 公开了改变食物摄取、调节营养素可消化性以及改变大便质量和/或排便频率的方法，例如提升或降低蛋白质可消化性的方法。W003084344和W003084343公开了通过施用包含维持、促进或增强宠物有效消化脂质的能力的成分的可食用组合物来向动物提供具有与脂质或脂质成分的有效同化相关的益处的方法。这些在检测可消化性方面有用的方法，经常需要冗长且复杂的程序，特别在临床情况下，其是困难或者不方便的。因此，需要用于鉴定具有降低的消化脂质和蛋白质的能力的动物的方法。发明简述因此，本发明的一个目的是提供用于鉴定具有降低的消化脂质的能力的动物的方法。本发明的另外一个目的是提供用于鉴定具有降低的消化蛋白质的能力的动物的方法。通过测定动物的选自以下因素中的至少两种因素来实现这些或其它目的维生素 E浓度、维生素B12 (也称为钴胺素)浓度、叶酸浓度、胰脂肪酶免疫反应性、身体状况评分、 皮肤褶厚度和年龄；以及对于相应的因素，如果维生素E浓度低于或等于5mg/L，维生素B12 浓度低于或等于200ng/L，叶酸浓度低于或等于15 μ g/L，胰脂肪酶免疫反应性高于或等于 305 μ g/L，身体状况评分在5分范围低于3分，皮肤褶厚度低于或等于2mm，且年龄等于或高于该类型动物的平均寿命的70%，确定具有降低的消化脂质或蛋白质或二者的能力的动物。如本文所述，多种因素被用于鉴定具有降低的消化脂肪的能力的动物以及多种因素被用于鉴定具有降低的消化蛋白质的能力的动物。对于本领域技术人员而言，本发明的其它目的、特征以及优点是很明显的。
发明详述定义缩写纳克(ng)；升(L)；微克(μ g)；毫米(mm)；以及毫克(mg)。术语“维生素E浓度”、“维生素B12浓度”、“叶酸浓度”和“胰脂肪酶免疫反应性” 是指通过任何适合方法进行测定的动物血液中各化合物的浓度或活性。术语“消化”是指消化、吸收和同化的过程。消化过程将食物在胃肠道内转化为可吸收的营养素，即，使用机械和化学过程将食物粉碎成可被吸收的营养素。吸收是促使被消化的食物营养素从胃肠道进入身体的过程。同化是将消化和吸收的营养素结合进入身体组织和/或用于代谢目的的过程。术语“动物”是指任何能够消化脂质和蛋白质的动物，包括鸟、牛、犬科动物、马、猫科动物、山羊(hircine)、鼠、羊和猪类动物。术语“单独包装”是指套盒的组分在物理上与一个或多个容器相关并且被视作制造、分配、销售或使用的单元。容器非限制性地包括袋子、盒子、瓶子、收缩包装、钉上的或其他附加的组件、或其组合。单独包装可以是用于检测血液参数或物理上相关的非血液因素的组分的容器，以致其被视作制造、分配、销售或使用的单元。术语“虚拟包装”是指套盒的组分通过在一个或多个物理上的或虚拟的套盒组分上的说明书(其用于向使用者说明如何获得其他组分)而相关联，例如，在含有一个组分和说明书的包中，所述说明书向使用者说明去网站、联系记录的信息、浏览可视信息或联系看护者或指导者，以获得如何使用该套盒的说明书。本发明一方面，本发明提供了鉴定具有降低的消化脂质能力的动物的方法。该方法包括测定动物的以下因素中的至少两项维生素E浓度；维生素B12浓度；叶酸浓度；胰脂肪酶免疫反应性；身体状况评分；皮肤褶厚度；和年龄并且，如果对应的因素如下所示时，确定动物具有降低的消化脂质的能力维生素E浓度低于或等于5mg/L ；维生素B12浓度低于或等于200ng/L ；叶酸浓度低于或等于15 μ g/L ；胰脂肪酶免疫反应性高于或等于3. 5 μ g/L ；身体状况评分在5分范围低于3分；皮肤褶厚度低于或等于2mm ；以及年龄等于或高于该类型动物的平均寿命的70%。在多个实施方案中，该方法包括使用三、四、五、六或七个因素，优选使用三或四个因素。在多个优选的实施方案中，所述因素是维生素E浓度和维生素B12浓度；维生素E浓度、维生素B12浓度和叶酸浓度；以及维生素E浓度、维生素B12浓度、维生素E浓度和胰脂肪酶免疫反应性。所述因素的多个组合可以被本领域技术人员选用。在另一方面，本发明提供了鉴定具有降低的消化蛋白质能力的动物的方法。该方法包括测定动物的以下因素中的至少两项维生素E浓度；维生素B12浓度；叶酸浓度；身体状况评分；和年龄并且，如果对应的因素如下所示时，确定动物具有降低的消化脂质的能力维生素E浓度低于或等于5mg/L ；维生素B12浓度低于或等于200ng/L ；叶酸浓度低于或等于15 μ g/L ；身体状况评分在5分范围低于3分；以及年龄等于或高于该类型动物的平均寿命的70%。在多个实施方案中，该方法包括使用三、四或五个因素，优选使用三或四个因素。 在多个优选的实施方案中，所述因素是维生素E浓度和维生素B12浓度；维生素E浓度、维生素B12浓度和叶酸浓度；以及维生素E浓度、维生素B12浓度、维生素E浓度和身体状况评分。所述因素的多个组合可以被本领域技术人员选用。本发明是基于以下发现多种血液和物理因素是动物消化某些食物成分(即脂质和蛋白质，尤其是以脂肪形式的脂质)的能力的预兆。在优选的实施方案中，所述动物是接受了其每日最低推荐需求量的营养因素即维生素E、维生素B12和叶酸的动物。该方法用于鉴定具有降低的消化脂质和蛋白质能力的动物，并调整动物的饮食来保证适当的营养，例如，提高饮食中的脂质或蛋白质或提高饮食中容易消化的脂质或蛋白质的量。并且，该方法用于在动物中评价动物消化脂质和蛋白质的能力，而不需要进行冗长且昂贵的动物或临床试验。该方法用于多种人类和非人类动物，且对于食用动物例如牛和猪以及对于伴侣动物例如犬科和猫科动物、包括狗和猫特别有用。在某些实施方案中，所述动物是伴侣动物。 伴侣动物可以是作为宠物养的任何物种的动物。伴侣动物还可以是来自大量被广泛驯化的动物物种，例如狗(Canis familiar is)和家猫(Felis domesticus)，不论所述动物是否单独作为宠物喂养。因此，伴侣动物包括工作犬类、用于控制啮齿类动物的猫以及宠物猫和狗。在优选的实施方案中，所述动物是年龄等于或大于该类型动物平均寿命的70%，优选 80%，最优选90%的动物。在另一方面，本发明提供了交流以下一种或多种的信息或说明的手段(1)使用维生素E浓度、维生素B12浓度、叶酸浓度、胰脂肪酶免疫反应性、身体状况评分、皮肤褶厚度以及年龄的多种组合来鉴定具有降低的消化脂质、特别是脂肪的能力的动物；( 使用维生素E浓度、维生素B12浓度、叶酸浓度、身体状况评分以及年龄的多种组合来鉴定具有降低的消化蛋白质的能力的动物；以及C3)使用本发明的套盒来鉴定具有降低的消化脂肪或蛋白质的能力的动物。该手段包括含有信息或说明的文档、数据存储介质、光学存储介质、音频展示或可视显示。优选地，所述交流手段是包含该信息或说明的展示网站、可视显示、电话亭、小册子、产品标签、包装说明书、广告、分发物、公告栏、录音带、录像带、DVD、 ⑶-ROM、计算机可读芯片、计算机可读卡、计算机可读磁盘、计算机存储器或其组合。有用的信息包括当动物或动物的看护者对本发明及其应用有疑问时使用的一种或多种联系信息。该交流手段可用于指出使用本发明的益处。在另一方面，本发明提供了适用于鉴定具有降低的消化脂质或蛋白质能力的动物的套盒。该套盒包括在适合于套盒的组分的单一包装中的分隔容器或虚拟包装中的分隔容器中的以下一种或多种组分(a)用于鉴定具有降低的消化脂质能力的动物的说明书， 和(b)用于鉴定具有降低的消化蛋白质能力的动物的说明书，以及至少一种以下组分(1) 用于测定维生素E浓度的组分；(2)用于测定维生素B12浓度的组分；(3)用于测定叶酸浓度的组分；(4)用于测定胰脂肪酶免疫反应性的组分；(5)用于测定身体状况评分的组分； (6)用于测定皮肤褶厚度的组分；以及(7)使用该套盒鉴定具有降低的消化脂质或蛋白质能力的动物的说明书。当所述套盒包含虚拟包装时，该套盒限定于虚拟环境中的说明书和一个或多个物理套盒组分。该套盒可以包含套盒说明书和任何用于鉴定具有降低的消化脂质、蛋白质或两者的能力的动物所需的多种组合的组分。
实施例通过以下实施例能够进一步举例说明本发明，但应当理解，提供这些实施例仅仅出于举例说明的目的，除非另有特别说明，否则其不意味着限制本发明的范围。材料和方法脂质和蛋白质的消化率全部参与实验的猫都是成年且健康的。单一膳食是这些猫的唯一营养来源。全程对这些猫提供水。在实验开始前记录每只猫的体重。向每只猫喂食满足其代谢能量需求的量的食物。在实验之前5日起向这些猫喂食相同膳食。在第六天时记录每只猫的体重。排泄物的收集期是从第6至第11天。记录这期间食物的消耗量。在第6天，将该膳食与以 1. Og/kg食物重量的浓度作为标记物的红色氧化铁一起喂食。从红色标记的粪便开始收集。 将首次出现红色标记的粪便之前的在第6和7天的任何未标记的(正常颜色)粪便弃去。 收集全部红色标记粪便以及在首次观察到红色粪便之后的全部未标记的粪便。将收集的每只猫的粪便在_20°C下冷冻储存。在第10天上午，将红色氧化铁再次加入饮食中(与第6 天相同)；这次是标记试验喂食期的结束，并记录每只猫的体重。继续收集粪便直至红色标记物再次出现。将首先冷冻干燥的两个膳食样本和每只猫的排泄物样本送检，以分析蛋白质、脂肪、干物质和灰分。身体状况评分按照以下方法对猫进行身体状况评分。将每只猫以站立位放置，从一侧进行目测检查，并从猫的上方向下看脊椎骨。在胸部触诊以感觉其肋骨、脊椎骨沿线、脸部、四肢和腹部，来评估脂肪蓄积程度。使用5分的评分系统，其中1是极瘦且5是极胖。身体状况评分(BCS)为1是指具有可见肋骨、无可触及脂肪、严重的腹部褶皱以及容易触及的椎骨和髂骨翼的猫。BCS为2是指具有容易触及的肋骨、最少的脂肪覆盖、明显的腰椎骨、明显的肋骨后的腰部以及最少的腹部脂肪的猫。BCS为3是指具有均勻比例的肋骨后的腰部、由轻度脂肪覆盖的可触及的肋骨以及最少的腹部脂肪垫的猫。BCS为4是指具有难以分辨的腰部、肋骨上的中度脂肪(但仍能触及肋骨)、腹部明显浑圆以及中度的腹部脂肪垫的猫。BCS为5 是指具有大量脂肪覆盖肋骨(无法触及)、腰部区域、脸部和四肢；腹部膨胀而不显示腰部； 且具有大量腹部脂肪堆积的猫。皮肤褶厚度按照以下方法测定猫的皮肤褶厚度。在左侧背部、脊椎骨的下方、接近最后肋骨的腹部位置用无线电动理发推子剃掉约2平方英寸的一片毛发(贴近剃除，但避免皮肤受伤)。将具有钝点的Mitutoyo Digimatic电子测径器设置成以毫米读数。用手指捏起猫的皮肤(不包含肌肉或皮下脂肪)，并用测径器测量(松开捏起的手指得到测量数据)。读取在剃毛区域内的三个位点的最小读数，并记录平均值。血液成分在一组猫中进行如下的血清维生素E、维生素B12、叶酸和胰脂肪酶免疫反应性 (PLI)评价。在获取血液样本前将动物禁食过夜。在右侧或左侧颈静脉的位置上用无线电动理发推子剃掉足够使颈静脉可见的一小片毛发(贴近剃除，但避免皮肤受伤)。使用连接到血清分离管的20或22号血液收集管(Vacutainer)，或者连接3ml或12ml注射器的20 或22号针头，用于获得最少量的3ml全血。按照标准方法分离血清，并在-20°C或更低温度下冷冻，直至转移至合适的实验室进行分析。维生素E分析用HPLC (Waters Separation Module 2690)进行。维生素B12 分析按 Cobas的Elecsys维生素B12试验，应用清单号04745736190进行。叶酸分析按照Cobas的 Elecsys叶酸II试验，应用清单号03253678160进行。胰脂肪酶免疫反应性分析按照下列文献进行Steiner JM,Teague SR, Williams DA. Development and analytic validation of an enzyme-linked immunosorbent assay for the measurement of canine pancreatic lipase immunoreactivity in serum. Can J Vet Res. 2003 ;67 :175-182。实施例1将70只老年猫(7-17岁)用标准罐头食品组合物喂养12个月，并进行消化率试验。在这些猫的剩余生命里继续按照相同膳食喂养。将消化率试验每6个月重复一次。在测定消化率时，对同一批猫进行血清维生素E、血清维生素B12、血清叶酸和血清胰脂肪酶免疫反应性(PLI)的血液样本检测；身体状况评分；通过双能χ-射线吸收仪(DEXA)检测身体组成；以及皮肤褶厚度检测。对脂肪和蛋白质消化率及其它变量之间的数据进行相关性分析。为了计算相关性，使用协方差分析，其中脂肪或蛋白质消化率作为因变量，而时间、猫和这些变量之一作为自变量。对于脂肪消化率，相关性是
权利要求
1.鉴定具有降低的消化脂质能力的动物的方法，该方法包括 测定动物的以下因素中的至少两项维生素E浓度； 维生素B12浓度； 叶酸浓度；胰脂肪酶免疫反应性； 身体状况评分； 皮肤褶厚度；和年龄并且，如果对应的因素如下所示时，确定动物具有降低的消化脂质的能力维生素E浓度低于或等于5mg/L ；维生素B12浓度低于或等于200ng/L ；叶酸浓度低于或等于15yg/L;胰脂肪酶免疫反应性高于或等于3. 5 μ g/L ；身体状况评分在5分范围低于3分；皮肤褶厚度低于或等于2mm ；以及年龄等于或高于该类型动物的平均寿命的70%。
2.权利要求1的方法，其中对动物测定至少三个因素。
3.权利要求1的方法，其中对动物测定至少四个因素。
4.权利要求1的方法，其中所述因素是维生素E浓度和维生素B12浓度。
5.权利要求2的方法，其中所述因素是维生素E浓度、维生素B12浓度和叶酸浓度。
6.权利要求3的方法，其中所述因素是维生素E浓度、维生素B12浓度、维生素E浓度和胰脂肪酶免疫反应性。
7.权利要求1的方法，其中所述动物是伴侣动物。
8.权利要求7的方法，其中所述动物是犬科动物。
9.权利要求7的方法，其中所述动物是猫科动物。
10.鉴定具有降低的消化蛋白质能力的动物的方法，该方法包括 测定动物的以下因素中的至少两项维生素E浓度； 维生素B12浓度； 叶酸浓度； 身体状况评分；和年龄并且，如果对应的因素如下所示时，确定动物具有降低的消化脂质的能力 维生素E浓度低于或等于5mg/L ； 维生素B12浓度低于或等于200ng/L ； 叶酸浓度低于或等于15 μ g/L; 身体状况评分在5分范围低于3分；以及年龄等于或高于该类型动物的平均寿命的70%。
11.权利要求10的方法，其中对动物测定至少三个因素。
12.权利要求10的方法，其中对动物测定至少四个因素。
13.权利要求10的方法，其中所述因素是维生素E浓度和维生素B12浓度。
14.权利要求11的方法，其中所述因素是维生素E浓度、维生素B12浓度和叶酸浓度。
15.权利要求12的方法，其中所述因素是维生素E浓度、维生素B12浓度、维生素E浓度和身体状况评分。
16.权利要求10的方法，其中所述动物是伴侣动物。
17.权利要求16的方法，其中所述动物是犬科动物。
18.权利要求16的方法，其中所述动物是猫科动物。
19.交流以下一种或多种的信息或说明的手段(1)使用维生素E浓度、维生素B12浓度、叶酸浓度、胰脂肪酶免疫反应性、身体状况评分、皮肤褶厚度以及年龄的多种组合来鉴定具有降低的消化脂质的能力的动物；( 使用维生素E浓度、维生素B12浓度、叶酸浓度、 身体状况评分以及年龄的多种组合来鉴定具有降低的消化蛋白质的能力的动物；以及(3) 使用本发明的套盒来鉴定具有降低的消化脂肪或蛋白质的能力的动物，该手段包括含有信息或说明的文档、数据存储介质、光学存储介质、音频展示或可视显示。优选地，所述交流手段是包含该信息或说明的展示网站、可视显示、电话亭、小册子、产品标签、包装说明书、广告、分发物、公告栏、录音带、录像带、DVD, CD-ROM、计算机可读芯片、计算机可读卡、计算机可读磁盘、计算机存储器或其组合。
20.权利要求19的手段，其选自展示网站、小册子、产品标签、包装说明书、广告、展示网站、可视显示。
21.适用于鉴定具有降低的消化脂质或蛋白质能力的动物的套盒，该套盒包括在适合于套盒的组分的单一包装中的分隔容器或虚拟包装中的分隔容器中的以下一种或多种组分(a)用于鉴定具有降低的消化脂质能力的动物的说明书，和(b)用于鉴定具有降低的消化蛋白质能力的动物的说明书，以及至少一种以下组分(1)用于测定维生素E浓度的组分；(2)用于测定维生素B12浓度的组分；(3)用于测定叶酸浓度的组分；(4)用于测定胰脂肪酶免疫反应性的组分；( 用于测定身体状况评分的组分；(6)用于测定皮肤褶厚度的组分；以及(7)使用该套盒鉴定具有降低的消化脂质或蛋白质能力的动物的说明书。
全文摘要
本发明提供了鉴定具有降低的消化脂肪或蛋白质的能力的动物的方法，该方法通过测定动物的多种血液和物理因素并比较所测定的值与标准值而实现，所述标准值是降低的消化脂肪和蛋白质的能力的指示。
文档编号G01N33/50GK102576013SQ201080046455
公开日2012年7月11日 申请日期2010年10月8日 优先权日2009年10月15日
发明者A·帕蒂尔, C·J·库布 申请人:雀巢产品技术援助有限公司