检查装置及检查方法

专利名称：检查装置及检查方法
技术领域：
本发明涉及通过质量分析对血液等生物体样品进行检查的检查装置及检查方法， 尤其涉及具备进行固相提取等前处理的前处理装置的检查装置及检查方法。
背景技术：
相对于作为临床检查中普遍采用的检查方法之一的免疫法，由于质量分析法(MS Mass Spectrometry)根据对象成分的质量进行测定，因此例如是能够进行与代谢物等类似构造分子的识别的测定技术。尤其是，MS/MS解析或MSn解析方法是通过将对象成分碎片信号化，而能够将类似构造成分彼此高精度识别的技术。如此，质量分析法与免疫法相比， 选择性及准确性优良，因此有广泛应用于临床检查的趋势。使用了质量分析的临床应用可以用于血药浓度监视(TDM=Therapeutic Drug Monitoring)或代谢异常筛查。作为TDM的一例可以举出药物体内动态观察。在医疗现场对患者施药时，针对所应用的患者症状而单独地计划施药，但在保障有效性、安全性方面是重要的。作为即使服用同一剂量的药剂而治疗效果却因人而异的原因是由于药物体内动态由于个体不同而导致血中浓度出现差异。因此，进行通过测定各个患者的血中浓度而将剂量和用法最佳化的技术即TDM，以控制在治疗范围内。例如，用于抑制对移植的脏器的排斥反应的免疫抑制剂是必须进行TDM的药剂。免疫抑制剂的治疗范围是数ng/mL至数百ng/ mL的低浓度。若血中浓度超过治疗范围，则有可能引起高血压、高血糖、消化性溃疡、肝脏或肾脏的功能障碍等重大的副作用。因此通常为了减轻副作用而进行混合施药，一边进行 TDM, 一边施用多种免疫抑制剂与类固醇等药剂。此外，作为另一例，已知有在代谢异常筛查中，将全血用于检体，利用液/液提取来提取对象成分，并通过质量分析仪进行测定，由此将丙氨酸或缬氨酸等氨基酸、酰化肉碱类进行定量并进行生物体内的对象物质的代谢反应程度的检查(例如，参照专利文献1)。关于上述2例，MS模式使用选择性高的三连四重极质量分析仪的MRM(Multiple Reaction Monitoring)模式。MRM是在第一级的四重极中仅使前驱信号通过，该信号在下一碰撞单元开裂，在第二级的四重极中仅对生成的化合物中特有的产物信号进行监视的方法。在该方法中，能够利用化合物的特有的质量信息来同定分类并进行检查。另一方面，关于使用了质量分析的临床应用的一系列操作，装置自动地进行样品分析，但样品的前处理需要检查技师操作多个装置来手动地进行多个前处理工序，效率变差。因此，期望通过更有效地实施一系列的检查，实现检查的省力化、检查报告的快速化、检查装置的紧凑所带来的小型化。此外，由于根据检查对象物质的物性不同而局部存在位置不同，因此有检查对象物质存在于血球成分的情况和检查对象物质存在于血清或血浆成分的情况，检体是全血或血清或血浆，因而各自前处理工序不同。因此，期望与各种检查项目即各种前处理工序对应的装置。此外，作为能够进行全血及血清或血浆这两者前处理的技术的一例，已知有能够在一台装置内连续进行使用血清作为检体的生化学检查或免疫血清检查、和使用全血的血液凝固检查的装置(例如，参照专利文献幻。该装置在同一检查区域内同时进行生化学检查或免疫血清检查的前半段工序以及血液凝固检查的工序，连续且有效地实施2种检查。先行技术文献专利文献专利文献1 美国公开2006/0008922号专利文献2 日本特开2001-13151号公报

发明内容
但是，在专利文献1记载的方法中需要人工地进行前处理。此外，专利文献2记载的装置中，能够进行全血及血清或血浆两者前处理，但并不与使用了质量分析的临床应用的前处理操作相对应。此外，专利文献1、2均存在无法将包含前处理的装置结构简单化例如在一个盘上进行全部的前处理的问题。本发明的目的是提供一种检查装置及检查方法，其即使在作为检体混合存在有全血与血清或血浆的检查中也能够有效地进行检查。(1)为了达到上述目的，本发明提供一种检查装置，具备载样器台，其能够将固相提取载样器及过滤器装配在环状轨道上；多个压力负载部，位于该载样器台的上方，且对所述固相提取载样器及所述过滤器的内部进行加压；杯台，其位于所述载样器台的下方，并能够将杯装配在环状轨道上，将提纯后的样品承载在所述杯中；样品探针，其向所述固相提取载样器及所述过滤器分注试料；试药探针，其向所述固相提取载样器及所述过滤器分注试药；分析部，其对前处理结束后的溶出液进行分析，血清或血浆的前处理在所述载样器台旋转一周期间完成，全血的前处理在所述载样器台旋转两周期间完成。根据上述结构，即使在作为检体混合存在有全血与血清或血浆的检查中，也能够有效地进行检查。(2)以上述(1)为基础，优选所述载样器台的环状轨道与所述杯台的环状轨道在从上方观察时在第一位置交叉，所述杯台的环状轨道与所述样品探针的工作位置在第二位置交叉，在所述第一位置处，由设置于所述杯台的杯来承载从设置于所述载样器台的过滤器溶出的溶出液，在所述第二位置处，利用所述样品探针吸引所述杯内的溶出液，并向设置于所述载样器台的所述固相提取载样器喷出。(3)以上述( 为基础，优选所述检查装置还具备所述检查装置还具备水配给器，其在所述载样器台的多个位置处向所述固相提取载样器的内部的液体添加水；甲醇配给器，其在所述载样器台的多个位置处向所述固相提取载样器的内部的液体添加甲醇；试药盘，其配置在所述试药探针的工作位置，并保持多个试药，在血清或血浆的前处理中，将保持于所述试药盘的内标物质添加到所述载样器台上设置的所述固相提取载样器的内部， 在全血的前处理中，将保持于所述试药盘的所述内标物质添加到所述载样器台上设置的所述过滤器的内部。(4)以上述(1)为基础，优选在所述载样器台的环状轨道上设有14个固相提取载样器或过滤器。
(5)以上述(1)为基础，优选每隔一定时间进行所述载样器台上的各处理工序。(6)以上述(1)为基础，优选所述杯台的旋转中心相对于所述载样器台的旋转中心设置在不同的位置，所述样品探针及前处理样品导入机构能够从所述杯台的上方接近所述杯台。(7)此外，为了达到上述目的，本发明提供一种检查方法，进行血清或血浆的前处理和全血的前处理，并对前处理结束后的溶出液进行分析，使用设置于载样器台的固相提取载样器，进行血清或血浆的前处理，使用所述载样器台上设置的过滤器，在进行全血的过滤处理之后，利用设置于杯台的杯来承载来自所述过滤器的溶出液，并将由所述杯承载的溶出液返回至设置于所述载样器台的固相提取载样器，从而进行全血的前处理。根据上述方法，即使在作为检体混合存在有全血与血清或血浆的检查中，也能够有效地进行检查。发明效果根据本发明，即使在作为检体混合存在有全血与血清或血浆的检查中也能够有效地进行检查。


图1是表示本发明的一实施方式涉及的检查装置的整体结构的俯视图。图2是表示本发明的一实施方式涉及的检查装置的主要部分结构的立体图。图3是本发明的一实施方式涉及的检查装置中的血清或血浆及全血的前处理工序的说明图。图4是本发明的一实施方式涉及的检查装置中的血清或血浆的前处理工序中的载样器台的旋转动作的说明图。图5是本发明的一实施方式涉及的检查装置中的血清或血浆的前处理工序的基本循环的说明图。图6A是本发明的一实施方式涉及的检查装置中的全血的前处理工序中的载样器台的旋转动作的说明图。图6B是本发明的一实施方式涉及的检查装置中的全血的前处理工序中的载样器台的旋转动作的说明图。图7是本发明的一实施方式涉及的检查装置中的全血的前处理工序的基本循环的说明图。图8A是本发明的一实施方式涉及的检查装置中的血清或血浆与全血混合情况下的前处理工序中的载样器台的旋转动作的说明图。图8B是本发明的一实施方式涉及的检查装置中的血清或血浆与全血混合情况下的前处理工序中的载样器台的旋转动作的说明图。图8C是本发明的一实施方式涉及的检查装置中的血清或血浆与全血混合情况下的前处理工序中的载样器台的旋转动作的说明图。图8D是本发明的一实施方式涉及的检查装置中的血清或血浆与全血混合情况下的前处理工序中的载样器台的旋转动作的说明图。图9是本发明的一实施方式涉及的检查装置中的血清或血浆与全血混合情况下的前处理工序的基本循环的说明图。图10是表示本发明的一实施方式涉及的检查装置中使用的水配给器的结构的框图。图11是表示本发明的一实施方式涉及的检查装置中使用的搅拌机构的结构的框图。图12是表示本发明的一实施方式涉及的检查装置中使用的压力负载部的结构的框图。
具体实施例方式以下，结合图1 图12对本发明的一实施方式涉及的检查装置的结构及动作进行说明。在此，作为检查装置，以进行全血及血清或血浆的前处理，并利用质量分析进行分析的药物检查装置为例进行说明。首先，结合图1及图2对本发明的一实施方式涉及的检查装置的整体结构进行说明。图1是表示本发明的一实施方式涉及的检查装置的整体结构的俯视图。图2是表示本发明的一实施方式涉及的检查装置的主要部分结构的立体图。需要说明的是，在图1 及图2中，同一符号表示同一部分。图1所示的本实施方式的检查装置是血液成分的检查装置，且包括进行全血及血清或血浆的前处理的前处理部100、对前处理后的样品进行质量分析的质量分析部200、 控制部300。需要说明的是，本实施例中所称的前处理是指向质量分析部导入之前的工序或其工序的各要素。首先，对前处理部100的结构进行说明。前处理部100包括载样器台101、杯台 103,5处压力负载部105、样品盘106、样品探针107、试药盘108、试药探针109、甲醇配给器 110、水配给器111、消耗品架112、2处搅拌机构113。质量分析部200包括质量分析装置202、离子化部204、前处理样品导入机构 206。控制部300对前处理部100的各部分及质量分析部200的各部分进行控制。对于载样器台101，可以在环状轨道上设置14个固相提取载样器102。在载样器台101中，通过在环状轨道上以一定的步调旋转，能够将固相提取载样器102移送到各工序的操作位置，能够效率良好地进行前处理。在本例中，载样器台101为圆形，每隔20秒，顺时针旋转约26度(=360度/14)的角度。若载样器台101旋转约沈度，则在该位置处短暂停止，经过20秒后进一步旋转约沈度，重复上述的动作。如下述，在全血的前处理工序中，在其前半段的过滤处理(溶血及除蛋白质工序) 的情况下，在设置有载样器台101的固相提取载样器102的位置处，设置过滤器。需要说明的是，能够设置于载样器台101的固相提取载样器102的数量并非规定为14个，若减少固相提取载样器102的数量，则装置面积变小，但处理能力降低，若增多数量，则装置面积变大，但各装置间的动作干涉的情况得以减轻。此外，在本实施例中固相提取载样器间的间隔为恒定，但不恒定也可，在该情况下，调整步调的速度。固相提取载样器102为填充有固相珠或膜状的固相提取剂的小容器微柱或载样器。固相提取是指通过使检查对象物质通过固定相而暂时保持于固定相，将固定相清洗然后从固定相回收的分离、精制、浓缩方法。在全血的前处理工序中，在其前半段的过滤处理中使用的过滤器是设有用于去除蛋白质等的过滤器部件的载样器。压力负载部105配置在载样器台101的位置c、e、i、k及m的上方的5个位置处。 压力负载部105在压力负载时与固相提取载样器102的上部密接，并施加压力。结合图12 如下述，压力负载部105如注射器般对空气进行压缩从而进行加压，但也可是如液压式那样对液体进行压缩。此外，在全血的前处理的前半段的过滤处理工序中，压力负载部105与设置于载样器台101的过滤器的上部密接，并施加压力。在血清或血浆的前处理及全血的前处理的后半段的工序中，在载样器台101的位置c、e、i、k及m处进行压力负载。另一方面，在全血的前处理工序的前半段的过滤处理工序中，仅在载样器台101的位置m处进行压力负载。杯台103位于载样器台101的下方，且能够在环状轨道上设置多个杯104。杯台 103绕顺时针旋转。杯台103的旋转中心与载样器台101的旋转中心不同。此外，在从上方观察时，杯台103的环状轨道与载样器台101的位置m及样品探针 107的工作位置交叉。即、杯台103的位置χ位于载样器台101的位置m之下。此外，杯台 103的位置ζ是样品探针107的工作位置。进而，杯台103的位置y是前处理样品导入机构 206的工作位置。因此，在血清或血浆的前处理工序及全血的前处理工序中的后半段工序的固相提取处理的情况下，在载样器台101的位置m处，从固相提取载样器102将样品固相提取后的溶出液承载于杯104。此外，在全血的前处理的前半段的过滤处理工序中，在载样器台101 的位置m处，由过滤器过滤后的溶出液承载于杯104。在杯台103的位置y处，使用前处理样品导入机构206，将进入杯104的固相提取后的溶出液导入质量分析部200。此外，在杯台103的位置ζ处，利用样品探针107对进入杯的过滤处理后的溶出液进行采用。如上所述，杯台103不需要与载样器台101相同形状，旋转轴不是相同位置也可。 如上述那样形成杯台103与载样器台101交叉的结构，因此在杯台103的上方可以形成空间，在由样品探针107从杯104吸引样品时，形成载样器台101不会干涉的结构。在样品盘106上设有多个样品容器106a。在样品容器106a中收纳有检查对象的样品即血清或血浆或全血。样品探针107从设置于样品盘106的样品容器106a吸引样品，并向设置于载样器台101的位置f处的固相提取载样器102或过滤器喷出。在样品为血清或血浆的情况下， 被吸引的样品向设置于载样器台101的位置f的固相提取载样器102喷出。在样品为全血的情况下，被吸引的样品向设置于载样器台101的位置f处的过滤器喷出。此外，样品探针107从设置于杯台103的杯104中吸引全血的前处理工序中被过滤处理后的溶出液，并向设置于载样器台101的固相提取载样器102喷出。如上所述，样品探针107的驱动范围与样品盘106的圆周上的一点及载样器台101 的位置f处交叉。此外，也与杯台103的环状轨道在位置ζ处交叉。样品探针107的驱动范围构成为以描绘圆弧的方式驱动，并且也能够沿上下Z轴移动。对于样品探针107的结构参照图2在下面叙述。需要说明的是，样品盘106在本例中是能够在环状轨道上保管多个样品的盘方式，但也可以是能够设置多串样品的架随时流动的方式。试药盘108上设有多个试药容器108a。试药容器108a中保管有与多个检查对象物质分别对应的内标物质、血清或血浆的前处理中使用的稀释液、全血的前处理的前半段的过滤处理工序中使用的硫酸锌水溶液。需要说明的是，在药物检查装置等中，内标物质也作为试药的一种来处理。进而，在试药盘108中也能够设置生成检量线时使用的检查对象物质的浓度不同的标准试料。试药探针109吸引保管于试药盘108中的试药，并添加到设置于载样器盘101的固相提取载样器102或过滤器。试药探针109的驱动范围在载样器盘101的位置g及位置h处交叉。试药探针109在载样器台101的位置g处向固相提取载样器102添加内标物质。此外，试药探针109在载样器台101的位置h处添加血清或血浆的前处理中使用的稀释液。进而，试药探针109在载样器台101的位置g处向过滤器添加内标物质。此外，试药探针109在载样器台101的位置h处添加全血的前处理工序的前半段的过滤处理中使用的硫酸锌水溶液。需要说明的是，由于稀释液为水，因此也可以从水配给器111供给，或者硫酸锌水溶液作为独立的配给器来供给也可。在将硫酸锌水溶液以配给器方式供给的情况下，试药盘108被小型化，能够实现装置的更进一步的紧凑化。甲醇配给器110具备填充有甲醇的箱，且向设置于载样器台101的位置b及位置1 的固相提取载样器102供给甲醇。在本例中，甲醇配给器110配置在载样器台101的内侧且轴配置在距位置b及位置1相同距离，但也可配置为在载样器台101的外侧具备2个独立的甲醇配给器110。水配给器111具备填充有水的箱，且向设置于载样器台101的位置d及位置j的固相提取载样器102供给水。在本例中，水配给器111配置在载样器台101的内侧且轴配置为距位置d及位置j相同距离，但也可配置为在载样器台101的外侧具备2个独立的水配给器111。搅拌机构113对保持于载样器台101的位置h及位置1的固相提取载样器102及过滤器内的溶液进行搅拌。结合图11在后面详细叙述搅拌机构113，在本例中利用搅拌棒进行搅拌。需要说明的是，作为搅拌机构113，也可以采用通过超声波进行搅拌的机构、利用超声波使搅拌件旋转而进行搅拌的机构、或使固相提取载样器自身振动并进行搅拌的机构。在血清或血浆的前处理及全血的前处理的后半段中，在载样器台101的位置h处进行固相提取载样器102内的溶液的搅拌操作。在全血的前处理的前半段的过滤处理中， 在载样器台101的位置h及位置1处进行过滤器内的溶液的搅拌。消耗品架112具备收纳有固相提取载样器102的架112A、收纳有杯104的架 112B、收纳有过滤器117的架112C、将使用过的固相提取载样器102、杯104或过滤器117 废弃的废弃盒112D、输送固相提取载样器102、杯104或过滤器117的输送机构112E。输送机构112E具备Y轴臂112Ea、X轴臂112Eb、搬运部112Ec、驱动源112Ed。X 轴臂112 利用驱动源112Ed的动力而能够相对于Y轴臂112 沿Y轴方向移动。搬运部 112Ec安装于X轴臂上，能够沿X轴方向移动并能够沿Z轴方向移动。
在全血的前处理的前半段的过滤处理中，搬运部112Ec将设置于架112C的过滤器 117移送到载样器台101的位置a之后并将过滤器设置在该处。此外，搬运部112Ec从载样器台101的位置η将使用过的过滤器移送到废弃盒112D并废弃。在血清或血浆的前处理及全血的前处理的后半段中，搬运部112Ec将设置于架 112Α的固相提取载样器102移送到载样器台101的位置a之后将固相提取载样器设置在该处。此外，搬运部112Ec从载样器台101的位置η将使用过的固相提取载样器102移送到废弃盒112D并废弃。此外，搬运部112Ec将设置于架112Β的杯104移送到杯台103的位置χ之后将杯设置在该处。此外，搬运部112Ec将使用过的杯移送到废弃盒112D并废弃。对固相提取载样器102、杯104及过滤器117进行移送、设置及废弃的时刻由控制部300来控制，在固相提取载样器102上的前处理的一系列的工序内规则地进行。在此，如图2所示，平面PL-A和平面PL-B是存在于Χ_Υ轴上的平面，两平面在Z 轴上离开。平面PL-B位于平面PL-A的下方。载样器台101的上表面、样品台106的上表面、试药台108的上表面位于平面PL-A内。杯台103的上表面位于平面PL-B内。杯台103的位置χ位于载样器台101的位置m的下方。如图1的说明，在载样器台101的位置c、e、i、k及m的上方配置有压力负载部 105。在此，例如图2所示，在位置k的下方设置有承载皿118。当通过压力负载部105而从固相提取载样器102或过滤器的上部施加压力时，由承载皿118承载从固相提取载样器 102或过滤器的下部排出的废液，并废弃至废液箱119中。需要说明的是，在载样器台101 的位置c、e、i及m的下方也同样配置有承载皿118，并将废液废弃至废液箱119中。样品探针107的前端具备探针107a。探针107a能够在与平面PL-A平行的平面内转动，并且能够沿Z轴方向往复运动。将探针107a的前端插入样品容器106a内的样品中或杯104内的溶出液中，并使注射器向一方向动作，能够将规定量的样品或溶出液吸引到探针的内部。之后，探针移动到载样器台101的位置f，将探针插入到设置在载样器台101 上的固相提取载样器102或过滤器的内部，通过使注射器向另一方向动作，能够喷出样品或溶出液。试药探针109的前端具备探针109a。探针109a能够在与平面PL-A平行的平面内转动，并且能够沿Z轴方向往复运动。将探针109a的前端插入试药容器108a内的试药中， 并使注射器向一方向动作，能够将规定量的试药吸引到探针的内部。之后，探针移动到载样器台101的位置g或位置h，并将探针插入到设置于载样器台101的固相提取载样器102或过滤器的内部，通过使注射器向另一方向动作，能够喷出试药。接下来，对质量分析部200进行说明。质量分析装置202对检查对象物质进行质量分析。在本例中，作为质量分析装置使用三连四重极型质量分析仪。需要说明的是，作为质量分析装置也可使用四重极型质量分析仪、离子阱型质量分析仪、飞行时间型质量分析仪及傅立叶变换离子回旋加速器共鸣型质量分析仪或将它们组合为2级并进行MS/MS的质量分析仪。需要说明的是，除了质量分析仪以外，也可使用高速液体色谱HPLC、超高速液体色谱、气体色谱法或毛细管电泳等。离子化部204通过负载电压而进行样品的离子化。样品以液体状态供给到离子化部204。作为离子化部204可以采用用于LC-MS的离子化部。
前处理样品导入机构206位于杯台103的环状轨道上，并从位置y的杯104内吸引进行了血清或血浆及全血的前处理后的样品，并导入离子化部204。前处理样品导入机构 206将从杯104吸引来的液体导入由泵压出的液体中，并可以使用自动采样器机构。控制部300对如下动作进行控制载样器台101的旋转动作、杯台103的旋转动作、压力负载部105的压力负载、样品盘106的旋转动作、样品探针107的样品吸引喷出动作、试药盘108的旋转动作、试药探针109的试药吸引喷出动作、甲醇配给器110的甲醇供给动作、水配给器111的水供给动作、消耗品架112的固相提取载样器102等供给废弃动作、搅拌机构113的搅拌动作、质量分析装置200的分析动作、离子化部204的离子化动作、 前处理样品导入机构206的样品导入动作。接下来，使用图3 图9对本实施方式涉及的检查装置中的血清或血浆及全血的前处理工序进行说明。首先，结合图3对本实施方式涉及的检查装置中的血清或血浆及全血的前处理工序进行说明。图3是本发明的一实施方式涉及的检查装置中的血清或血浆及全血的前处理工序的说明图。检体使用血清的检查项目例如抗癫痫剂具有苯妥英、丙戊酸、卡马西平、苯甲二氮及苯巴比妥等。除了抗癫痫剂以外，也可检查抗真菌剂、抗菌剂、哮喘治疗药、HIV治疗药、 抗癌剂及非法药物等各种项目。此外，检体使用全血的检查对象项目例如有用于抑制对移植后的脏器的排斥反应的免疫抑制剂，具体为他克莫司(tacrolimus)、环孢菌素、西罗莫司及依维莫司等。在对全血及血清或血浆等生物体样品中包含的微量的检查对象物质例如药物等进行检查的情况下，由于检查的成分微量，因此需要精制、浓缩。为了有效地进行精制、浓缩操作，通过使用固相提取，能够更紧凑地进行更多种类的检查，且能够提高处理速度。固相提取是将对象物质暂时保持于填充有固相珠或膜状的小容器微柱或载样器， 清洗固相，然后从固相回收的分离、精制、浓缩方法。工序包括1)使有机溶剂通过固相的固相调节工序、幻使水系溶剂通过固相的固相平衡化工序、幻使样品通过固相的将对象物质向固相保持的保持工序、4)使水通过固相的清洗工序、幻使有机溶剂通过固相并将对象物质从固相溶出的工序。具体来说，如图3所示，血清或血浆的前处理包括工序1 工序14。S卩，包括工序 1 载样器输送、工序2 甲醇添加、工序3 压力负载、工序4 水添加、工序5 压力负载、工序 6 样品添加、工序7 内标物质添加、工序8 稀释液添加及搅拌、工序9 压力负载、工序10 水添加、工序11 压力负载、工序12 甲醇添加、工序13 压力负载、工序14 载样器废弃。此外，在全血的情况下，为了使对象物质局部存在于血球中，在固相提取工序的前半段，需要溶血工序及利用除蛋白质操作将蛋白质成分凝集、沉淀并除去的过滤工序。上述工序为添加硫酸锌水溶液并通过浸透压进行溶血工序，然后添加有机溶剂，并利用离心分离或过滤器进行过滤的工序。全血的前处理包括前半段的工序1 工序7的过滤处理和后半段的工序8 工序 19的固相提取处理。S卩、包括工序1 过滤器移送、工序2 样品添加、工序3 内标物质添加、工序4 硫酸锌水溶液添加、工序5 甲醇添加、工序6 压力负载、工序7 过滤器移送、工序8 载样器输送、工序9 甲醇添加、工序10 压力负载、工序11 水添加、工序12 压力负载、工序13 样品添加、工序14 压力负载、工序15 水添加、工序16 压力负载、工序17 甲醇添加、工序18 压力负载、工序19 载样器废弃。在此，全血的前处理的后半段(工序编号8号以后)即固相提取处理以后是与血清的前处理大致同样的操作。即、在全血的前处理的后半段(工序编号8号以后)中不进行血清的工序7和工序8。在此，血清的工序7的内标物质添加在全血的工序3中进行。如此，对于全血的前处理，通过兼用可兼用于血清的前处理的机构，不会降低血清或血浆的前处理的处理能力，可处理的装置结构最有效。另外，基于上述认识而进一步研究的结果，血清或血浆的前处理在载样器台旋转一周期间完成，全血的前处理在载样器台旋转两周期间完成，也就是说兼用血清或血浆与全血的相同工序即固相提取工序，且至全血的前处理的前半部分固相提取处理的前段，也在与固相提取工序相同的机构上进行，从而能够使装置结构简化，此外能够形成尽可能不降低血清或血浆的处理能力而进行血清或血浆及全血的前处理的装置结构。进而，对于检体使用全血或血清或血浆的比例来说，通常投放免疫抑制剂的医院为进行移植手术的大型医院，实际上不投放免疫抑制剂的医院较多。此外，即使在投放免疫抑制剂的情况下，患者数与投放抗真菌剂、抗菌剂及抗癫痫剂的比例相比也较少。根据这样的用户需求，本装置的基本思想是尽可能提高血清或血浆的前处理的处理能力，并实现更紧凑的装置。接下来，结合图4及图5，对本实施方式涉及的检查装置中的血清或血浆的前处理工序进行说明。在此，说明对于需要血清或血浆的前处理的抗癫痫剂即苯甲二氮进行检查的情况。图4是本发明的一实施方式涉及的检查装置中的血清或血浆的前处理工序中的载样器台的旋转动作的说明图。图5是本发明的一实施方式涉及的检查装置中的血清或血浆的前处理工序的基本循环的说明图。血清或血浆的前处理进行固相提取。固相提取由5个工序构成，具体来说，各工序包括1)使有机溶剂通过固相的固相调节工序、幻使水系溶剂通过固相的固相平衡化工序、3)使样品通过固相的检查对象物质向固相保持的保持工序、4)使水通过固相的清洗工序、5)使有机溶剂通过固相并将检查对象物质从固相溶出的工序。首先，对使有机溶剂通过固相的固相调节工序进行说明。从消耗品架112将固相提取载样器102移送并设置于载样器台101的位置a。另外，载样器台101上的固相提取载样器102旋转到位置b，利用甲醇配给器110 向固相提取载样器102添加200 μ L的甲醇。另外，载样器台101上的固相提取载样器102旋转到位置c，使压力负载部105紧贴于固相提取载样器102的上部并加压，通过使甲醇通过固相提取载样器102而结束固相调节。溶出的废液即甲醇落到承载皿118，该承载皿118位于固相提取载样器102的下方， 并能够承载来自位置c、e、i、k的溶出液。该承载皿118构成为从水平方向倾斜从而溶出液自然流入废液箱119。接下来，对于使水系溶剂通过固相的固相平衡化工序进行说明。载样器台101上的固相提取载样器102旋转到位置d，从水配给器111向固相提取载样器102添加200μ L的水。另外，载样器台101上的固相提取载样器102旋转到位置e，并使压力负载部105 紧贴固相提取载样器102的上部并加压，使水通过固相提取载样器102，从而完成固相平衡
化工序。接下来，对于使样品通过固相的检查对象物质向固相保持的保持工序进行说明。 与载样器台101上的固相提取载样器102旋转到位置f同步，利用样品探针107从样品盘 106吸引样品，并向位置f的固相提取载样器102喷出。在本实施例中，将投放90 μ L的苯甲二氮后的患者血清添加到固相提取载样器102中。此外，样品探针107在吸引、喷出之后适当地利用图上省略的清洗端口来清洗。另外，与载样器台101上的固相提取载样器102旋转到位置g同步，利用试药探针 109从试药盘108吸引内标溶液，并向位置g的固相提取载样器102喷出。在本实施例中， 以使10 μ L的苯甲二氮用内标物质溶液去甲西泮成为5000ng/mL浓度的方式而由甲醇溶液调制后的溶液添加到固相提取载样器102中。此外，试药探针109在吸引、喷出之后适当地由图上省略的清洗端口来清洗。另外，与载样器台101上的固相提取载样器102旋转到位置h同步，利用试药探针 109从试药盘108吸引稀释液，并向位置h的固相提取载样器102喷出。在本实施例中，使用水作为稀释液，将100μ L的稀释液添加到固相提取载样器102中。之后，利用搅拌机构 113，进行固相提取载样器102的样品、内标物质及稀释液的搅拌。搅拌机构113在搅拌之后适当地由图上省略的清洗端口来清洗。另外，载样器台101上的固相提取载样器102旋转到位置i，并使压力负载部105 紧贴固相提取载样器102的上部并加压，包含样品的溶液通过固相提取载样器102，从而完成检查对象物质向固相保持的保持工序。需要说明的是，在本实施例中添加了稀释液，但检查对象物质为治疗范围小而不需要稀释的情况下，在位置h处不进行稀释液的添加。接下来，对于使水通过固相的清洗工序进行说明。与载样器台101上的固相提取载样器102旋转到位置j同步，从水配给器111向固相提取载样器102添加IOOyL的水。另外，载样器台101上的固相提取载样器102旋转到位置k，并使压力负载部105 紧贴固相提取载样器102的上部并加压，使水通过固相提取载样器102而完成清洗工序。接下来，对于将有机溶剂通过固相并从固相溶出检查对象物质的工序进行说明。 与载样器台101上的固相提取载样器102旋转到位置1同步，从甲醇配给器110向固相提取载样器102添加100 μ L的甲醇。另外，与载样器台101上的固相提取载样器102旋转到位置m同步，从消耗品架 112将杯104移送并设置于杯台103的位置χ。之后，压力负载部105紧贴固相提取载样器 102的上部并加压，样品通过固相提取载样器102，进行固相提取后的样品溶出到杯104中。另外，载样器台101上的固相提取载样器102旋转到位置n，进行载样器的废弃。 另一方面，杯台103的杯109旋转到前处理样品导入机构206的驱动位置y，从杯104内吸引进行了前处理(固相提取)后的样品并导入质量分析装置202，由质量分析仪分析后的苯甲二氮及去甲西泮的数据由控制部300解析并输出检查结果。通过上述一系列的流程而进行检查，但载样器台101上的固相提取载样器102的旋转以一定时间总是旋转到相邻的位置。图5表示以血清或血浆为检体的情况下的基本循环的动作例，可以如此并行地进行检查。在本实施例中，最大并行处理14个样品，旋转到相邻位置的间隔设定在20秒，因此以4分40秒完成1样品的检查(图4的η地点)。在最大并行处理14个样品的情况下，每一小时(实际上1小时20秒)能够检查168个样品。接下来，结合图6Α、图6Β及图7，对本实施方式涉及的检查装置中的全血的前处理工序进行说明。在此，说明进行需要由全血来前处理的免疫抑制剂即他克莫司的检查的情况。图6Α、图6Β是本发明的一实施方式涉及的检查装置的全血的前处理工序中的载样器台的旋转动作的说明图。图7是本发明的一实施方式涉及的检查装置中的全血的前处理工序的基本循环的说明图。全血的前处理在载样器台旋转两周的期间完成。图6Α表示全血的前处理工序的前半段，表示图3的工序1 工序7的处理。图6Β表示全血的前处理工序的后半段部分， 表示图3的工序8以后的处理。需要说明的是，全血的前处理的后半段部分(图3的全血的前处理的工序编号8号以后)即固相提取工序与血清或血浆的前处理工序大致相同，因而在此仅说明与图4不同之处。全血的前处理中，在其前半段，在固相提取工序的前段需要溶血工序及利用除蛋白质操作将蛋白质成分凝集、沉淀并除去的工序。通过设置有过滤器的载样器台旋转一周而完成溶血工序及除蛋白质工序。首先，对溶血工序进行说明。从消耗品架112将过滤器117移送并设置于载样器台101的位置a。另外，载样器台101上的过滤器117旋转到位置b。接着，以一定间隔从位置 c-d-e进行移动。接下来，与载样器台101上的过滤器117旋转到位置f同步，利用样品探针107从样品盘106吸引样品，并向位置f的过滤器117喷出。在本实施例中投放有 90 μ L的他克莫司的患者全血被添加到过滤器117中。此外，样品探针107在吸引、喷出之后适当地由图上省略的清洗端口来清洗。另外，与载样器台101上的过滤器117旋转到位置g相同步，利用试药探针109从试药盘108吸引内标溶液，并向位置g的固相提取载样器102喷出。在本实施例中，以使 10 μ L的他克莫司用内标物质溶液长川霉素成为200ng/mL的浓度的方式而由甲醇溶液调制得到的溶液添加到过滤器117。此外，试药探针109在吸引、喷出之后适当地由图上省略的清洗端口来清洗。另外，与载样器台101上的过滤器117旋转到位置h同步，由试药探针109从试药盘108吸引用于溶血的硫酸锌水溶液，并向位置h的过滤器117喷出。在本实施例中，向过滤器117添加200 μ L的0. 5Μ的硫酸锌水溶液。之后，由搅拌机构113进行过滤器117的样品、内标物质及稀释液的搅拌。搅拌机构113在搅拌之后适当地由图上省略的清洗端口
来清洗。另外，载样器台101上的过滤器117以一定间隔从位置i — j — k进行移动，其间通过浸透压进行溶血。接下来，对于除蛋白质工序进行说明。与载样器台101上的过滤器117旋转到位置1同步，从甲醇配给器110向过滤器117添加300yL的甲醇(有机溶剂)。之后，通过搅拌机构113进行过滤器117的样品、内标物质及稀释液的搅拌。搅拌机构113在搅拌之后适当地由图上省略的清洗端口来清洗。另外，与载样器台101上的过滤器117旋转到位置m同步，从消耗品架112将杯104 移送并设置于杯台103的位置m。之后，压力负载部105紧贴过滤器117的上部并加压，样品通过过滤器117，进行完过滤的样品溶出到设置在其下方的杯台103上的杯104中。另外，载样器台101上的过滤器117旋转到位置η并进行过滤器的废弃。另一方面，杯台103的杯109旋转至样品探针107的驱动位置ζ。如此通过载样器台旋转一周，完成全血的前处理的前半(图3中全血的前处理的工序编号1 7号)。接下来，对全血的前处理的后半段部分(图3中全血的前处理的工序编号8号以后)进行说明。在此，与图4所示的血清或血浆的前处理同样进行固相提取。不同点在于位置f处的样品添加，但不是从样品盘106，而是利用样品探针107从保持有刚进行完过滤的样品的杯104吸引，并向位置f的固相提取载样器102喷出。杯104在杯台103的环状轨道上移动，到达位置η之后废弃。样品探针107的驱动范围是与样品盘106的圆周上的一点、载样器台101的位置f及杯台103的环状轨道相交叉，由于需要从杯台103上向载样器台101移送样品，因此以描绘圆弧的方式驱动，并且也能够上下沿Z轴移动。之后，在从位置g 位置m移动期间，执行与图4同样的前处理，在位置m处，样品通过固相提取载样器102，进行固相提取后的样品溶出到杯104中。另外，固相提取载样器102旋转到位置n，进行载样器的废弃。另一方面，杯台103 的杯109旋转到前处理样品导入机构206的驱动位置y，从杯104内吸引进行完前处理(固相提取)后的样品并导入质量分析装置202，由质量分析仪分析得到的他克莫司及长川霉素的数据由控制部300解析并输出检查结果。通过上述一系列的流程进行检查，但载样器台101上的固相提取载样器102的旋转以一定时间总是旋转到相邻的位置。图7表示以血清或血浆为检体的情况的基本循环的动作例，但可以如此并行地进行检查。在本实施例中并行处理最大14个样品，旋转到相邻的位置的间隔设定为20秒，因此以9分20秒完成1个样品的检查(图6A、图6B的位置η 的地点)。在并行处理最大14个样品的情况下，每1小时(实际上1小时零20秒)能够检查84个样品。接下来，结合图8Α、图8Β、图8C、图8D及图9，对本实施方式涉及的检查装置中的血清或血浆和全血混合存在的情况下的前处理工序进行说明。图8Α、图8Β、图8C、图8D是本发明的一实施方式涉及的检查装置中的血清或血浆与全血混合存在的情况下的前处理工序中的载样器台的旋转动作的说明图。图9是本发明的一实施方式涉及的检查装置中的血清或血浆与全血混合存在的情况下的前处理工序的基本循环的说明图。图8Α表示全血与血清或血浆的处理能力为1 10情况下的一例。在该情况下， 将由黑圆表示的2个的端口分配给全血，由白圆表示的10个的端口分配给血清或血浆。需要说明的是，剩余的2个端口是用于应急检体用的端口，在需要进行紧急检体的检查的情况下，使用该2个端口。载样器台101旋转两周完成全血的前处理，载样器台101旋转一周完成血清或血浆的前处理，因此处理能力为2倍。如上所述，对于检体使用全血或血清或血浆的比例，通常投放免疫抑制剂的医院是进行移植手术的大型医院，而实际上不投放免疫抑制剂的医院更多。此外，即使在投放免疫抑制剂的场合下，患者数与投放抗真菌剂、抗菌剂及抗癫痫剂的比例相比也比较少。在这种情况下，如图8A所示，减少用于全血的端口数，而提高血清或血浆的前处理的处理能力。在图8A所示分配的情况下，如图9所示，即使在全血(样品1、幻与血清或血浆 (样品3以后)混合存在的情况下，也能够进行检查。在本实施例中，并行处理2个样品的全血和10个样品的血清或血浆，旋转到相邻的位置的间隔设定为20秒，因此每1小时(实际1小时零20秒)可以检查12个样品的全血、120个样品的血清或血浆、12个样品的紧急检体。图8B表示全血与血清或血浆的处理能力为1 4情况下的一例。在该情况下，将由黑圆表示的4个端口分配给全血，由白圆表示的8个端口分配给血清或血浆。需要说明的是，剩余的2个端口用于应急检体用的端口。在该例中，每1小时(实际上1小时零20 秒)能够检查M个样品的全血，96个样品的血清或血浆。图8C表示全血与血清或血浆的处理能力为1 1情况下的一例。在该情况下，将由黑圆表示的8个端口分配给全血，由白圆表示的4个端口分配给血清或血浆。需要说明的是，剩余的2个端口是用于应急检体用的端口。在该例中每1小时(实际1小时零20秒) 可以检查48个样品的全血、48个样品血清或血浆。图8D表示全血与血清或血浆的处理能力为5 2情况下的一例。在该情况下，将由黑圆表示的10个端口分配给全血，将由白圆表示的2个端口分配给血清或血浆。需要说明的是，剩余的2个端口是用于应急检体用的端口。在该例中，每1小时(实际上1小时零 20秒)能够检查60个样品的全血、M个样品的血清或血浆。需要说明的是，端口的分配方法可以包括预先空出用户处理的检体的种类即全血及血清或血浆或紧急检体用的端口而灵活地设定，便利性优良。此外，对于载样器台的旋转时间，在本实施例中为20秒，但该旋转时间是各工序所需要的时间在全部的工序中设定为相同时间，该时间在压力负载部进行的加压工序中花费最多时间而成为确定该旋转时间的主要原因，但通过将固相提取的填充剂及过滤器的直径改为阻力更小的大径，通过缩短或延长旋转时间，也能够改变处理能力。如此，本实施方式的检查装置不会将装置大型化，即使在作为检体而使全血及血清或血浆混合存在的检查中，也能够有效地高精度且低成本地进行检查。通过将载样器台 101上的端口的使用优先分配给血清或血浆，能够尽量不降低血清或血浆的前处理的处理能力地进行检查。接下来，结合图10对本实施方式涉及的用于检查装置的水配给器111的结构进行说明。图10是表示本发明的一实施方式涉及的检查装置所使用的水配给器的结构的框图。水配给器111包括探针111a、注射器111b、供水阀111c、泵llld、储存箱llle。 在储存箱Ille的内部储存有水。储存箱Ille内部的水通过泵Illd供给至注射器111b。 另外，通过将注射器Illb的内部的柱塞移动一定量，能够使规定量的水从探针Illa的前端喷出。需要说明的是，甲醇配给器110的结构也与水配给器111相同。但是，在储存箱Ille的内部储存有甲醇。接下来，结合图11对本实施方式涉及的检查装置所使用的搅拌机构113的结构进行说明。图11是本发明的一实施方式涉及的检查装置所使用的搅拌机构的结构的框图。搅拌机构113将前端带有叶片113a的搅拌棒11 插入固相提取载样器102等的内部，通过使叶片113a旋转，对载样器等内部的溶液进行搅拌。接下来，结合图12对本实施方式涉及的检查装置中使用的压力负载部103的结构及动作进行说明。图12是表示本发明的一实施方式涉及的检查装置中使用的压力负载部的结构的框图。压力负载部105具备压力负载部支架105a、加压用注射器10恥。压力负载部支架10 无间隙地装配于固相提取载样器102的上部。另一方面，固相提取载样器102包括载样器主体102a、上段过滤器102b、下段过滤器102c、固相提取剂102d。固相提取剂102d夹在上段过滤器102b与下段过滤器102c之间，并保持在载样器主体10 的内部。固相提取剂121具有通过疏水性相互作用而吸附血液试料溶液中的免役抑制剂的作用，通常可以使用被称为反相系的填充剂。例如可以使用在日立高科技公司制的NOBIAS RP-ODl的有机高分子表面上附加有十八烷基而制成的微小粒子。上段过滤器102b及下段过滤器102例如使用过滤器直径为1. Oym左右的过滤器。通过使加压用注射器10 向固相提取载样器102侧(图12的下方向)移动，将载样器内部的气体压缩，并使载样器内部的压力上升。通过加压，溶液通过过滤器102c排出到外部。需要说明的是，全血的前处理的前半段使用的过滤器117包括固相提取载样器 102的载样器主体10 和过滤器102c，并具有与固相提取载样器102相同的外形尺寸。如以上说明，根据本实施方式，关于使用了质量分析的临床应用而混合存在有全血及血清或血浆的检查中，以血清或血浆的前处理在载样器台旋转一周的期间完成，全血的前处理在载样器台旋转两周的期间完成的方式而配置各要素。由此，不会将装置大型化， 即使作为检体而混合存在有全血及血清或血浆的检查中，特别是尽量不降低血清或血浆的前处理的处理能力的情况下，能够有效地高精度且低成本地进行检查。因此，不会将装置大型化，即使作为检体而混合存在有全血与血清或血浆的检查中，也能够有效地高精度且低成本地进行检查。符号说明
101. 载样器台
102. 固相提取载样器
103. 杯台
104..杯
105. 压力负载部
106. 样品盘
107. 样品探针
108. 试药盘
109…试药探针110…甲醇配给器111…水配给器112…消耗品架113…搅拌机构117…过滤器200…质量分析部202…质量分析装置204…离子化部206…前处理样品导入机构300…控制部
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权利要求
1.一种检查装置，其特征在于，具备载样器台，其能够将固相提取载样器及过滤器装配在环状轨道上； 多个压力负载部，位于该载样器台的上方，且对所述固相提取载样器及所述过滤器的内部进行加压；杯台，其位于所述载样器台的下方，并能够将杯装配在环状轨道上，将提纯后的样品承载在所述杯中；样品探针，其向所述固相提取载样器及所述过滤器分注试料； 试药探针，其向所述固相提取载样器及所述过滤器分注试药； 分析部，其对前处理结束后的溶出液进行分析，血清或血浆的前处理在所述载样器台旋转一周期间完成，全血的前处理在所述载样器台旋转两周期间完成。
2.根据权利要求1所述的检查装置，其特征在于，所述载样器台的环状轨道与所述杯台的环状轨道在从上方观察时在第一位置交叉， 所述杯台的环状轨道与所述样品探针的工作位置在第二位置交叉， 在所述第一位置处，由设置于所述杯台的杯来承载从设置于所述载样器台的过滤器溶出的溶出液，在所述第二位置处，利用所述样品探针吸引所述杯内的溶出液，并向设置于所述载样器台的所述固相提取载样器喷出。
3.根据权利要求2所述的检查装置，其特征在于， 所述检查装置还具备水配给器，其在所述载样器台的多个位置处向所述固相提取载样器的内部的液体添加水；甲醇配给器，其在所述载样器台的多个位置处向所述固相提取载样器的内部的液体添加甲醇；试药盘，其配置在所述试药探针的工作位置，并保持多个试药， 在血清或血浆的前处理中，将保持于所述试药盘的内标物质添加到所述载样器台上设置的所述固相提取载样器的内部，在全血的前处理中，将保持于所述试药盘的所述内标物质添加到所述载样器台上设置的所述过滤器的内部。
4.根据权利要求1所述的检查装置，其特征在于，在所述载样器台的环状轨道上设有14个固相提取载样器或过滤器。
5.根据权利要求1所述的检查装置，其特征在于， 每隔一定时间进行所述载样器台上的各处理工序。
6.根据权利要求1所述的检查装置，其特征在于，所述杯台的旋转中心相对于所述载样器台的旋转中心设置在不同的位置， 所述样品探针及前处理样品导入机构能够从所述杯台的上方进行存取动作。
7.一种检查方法，其进行血清或血浆的前处理和全血的前处理，并对前处理结束后的溶出液进行分析，所述检查方法的特征在于，使用设置于载样器台的固相提取载样器，进行血清或血浆的前处理， 使用所述载样器台上设置的过滤器，在进行全血的过滤处理之后，利用设置于杯台上的杯来承载来自所述过滤器的溶出液，并将由所述杯承载的溶出液返回至设置于所述载样器台的固相提取载样器，从而进行全血的前处理。
全文摘要
本发明提供一种检查装置及检查方法，其即使在作为检体混合存在有血清或血浆的检查中也能够有效地进行检查。在载样器台(101)的环状轨道上设有固相提取载样器(102)或过滤器(117)。杯台(103)位于载样器台的下方，在其环状轨道上设置杯(104)，承载由过滤器(117)提纯后的样品。载样器台(101)的环状轨道与杯台(103)的环状轨道在从上方观察时在位置m及样品探针(107)的工作位置这两点交叉，且血清或血浆的前处理在载样器台旋转一周期间完成，全血的前处理在载样器台旋转两周期间完成。
文档编号G01N35/02GK102576009SQ201080046478
公开日2012年7月11日 申请日期2010年10月15日 优先权日2009年10月16日
发明者伊藤伸也, 和气泉, 神田胜弘, 野上真 申请人:株式会社日立高新技术