专利名称:一种检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法
技术领域:
本发明涉及医学领域,具体涉及一种检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法。
背景技术:
系统性红斑狼疮是一种急骤或缓慢发病、侵犯多系统多器官的自身免疫性疾病。其主要免疫学特征是产生多种自身抗体,形成免疫复合物而致病。自身抗体的检测是系统性红斑狼疮诊断的重要指标,目前国内许多医院已经开展了自身抗体的检测。明确系统性红斑狼疮患者抗核抗体的滴度、荧光模式及其与各种自身抗体之间的相互关系,对系统性红斑狼疮的诊断、治疗的有很闻的临床价值。
基于以上问题,发明一种检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法,已成为本技术领域内丞待解决的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供了一种检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法,解决了现有技术中系统性红斑狼疮的诊断方法比较复杂的问题。本发明的一种检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法,具体步骤为
步骤I)以Hep-2/大鼠肝细胞为基质,用间接免疫荧光法检测系统性红斑狼疮患者的抗核抗体,测定四个滴度=1:100, 1:320, 1:1000, 13200 ;
步骤2)以短膜虫为基质,用间接免疫荧光法检测系统性红斑狼疮患者的双链DNA ; 步骤3)用欧蒙免疫印迹法测定抗核抗体谱;
步骤4)用酶联免疫吸附试验检测系统性红斑狼疮患者的单链DNA。
有益效果经检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法,化了现有的检测方法,提高了检测效率及确诊率,有助于系统性红斑狼疮的临床诊断和治疗。
具体实施例方式实施例I
以2008年至2010年苏州市立医院门诊或住院病人中的109例系统性红斑狼疮患者为检测对象,其中女性95例,男性14例,年龄14-82岁,平均年龄43岁。所有系统性红斑狼疮患者病例均符合美国风湿病协会的诊断标准。具体检测步骤如下
步骤I)以Hep-2/大鼠肝细胞为基质,用间接免疫荧光法检测系统性红斑狼疮患者的抗核抗体,测定四个滴度=1:100, 1:320, 1:1000, 13200 ;
步骤2)以短膜虫为基质,用间接免疫荧光法检测系统性红斑狼疮患者的双链DNA ;步骤3)用欧蒙免疫印迹法测定抗核抗体谱(抗RNP抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗Scl-70抗体、抗CENPB抗体、抗ANuA抗体、抗His抗体、抗Rib. P抗体);
步骤4)用酶联免疫吸附试验检测系统性红斑狼疮患者的单链DNA。
所有试剂均由德国欧蒙公司提供,具体操作按说明书进行。检测结果如下
1.抗核抗体的滴度、荧光模式检测结果
109例系统性红斑狼疮(SLE)患者中,抗核抗体(ANA)的阳性为107例,阳性率为
98.2%,大于等于I :1000的抗核抗体高滴度患者有77例,阳性率达70. 6%,其中43. 1%的系统性红斑狼疮患者的抗核抗体滴度为I :1000 ;其荧光核型有颗粒型、均质型、颗粒合并均质型、颗粒合并核仁型、颗粒合并着丝点型、颗粒合并胞浆型,以颗粒型和均质型为主,分别占56. 9%和33. 9%ο具体结果见表I。
权利要求
1.一种检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法,其特征在于,具体步骤为 步骤I)以Hep-2/大鼠肝细胞为基质,用间接免疫荧光法检测系统性红斑狼疮患者的抗核抗体,测定四个滴度=1:100, 1:320, 1:1000, 13200 ; 步骤2)以短膜虫为基质,用间接免疫荧光法检测系统性红斑狼疮患者的双链DNA ; 步骤3)用欧蒙免疫印迹法测定抗核抗体谱;步骤4)用酶联免疫吸附试验检测系统性红斑狼疮患者的单链DNA。
2.根据权利要求I所述的检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法,其特征在于,所述步骤3)中,抗核抗体谱包括抗RNP抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗Scl_70抗体、抗CENPB抗体、抗ANuA抗体、抗His抗体和抗Rib. P抗体。
全文摘要
本发明公开了一种检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法,具体步骤为,首先用间接免疫荧光法分别检测系统性红斑狼疮患者的抗核抗体及双链DNA,然后用欧蒙免疫印迹法测定抗核抗体谱,最后用酶联免疫吸附试验检测系统性红斑狼疮患者的单链DNA。本发明的检测系统性红斑狼疮患者自身抗体的方法,简化了现有的检测方法,提高了检测效率及确诊率,有助于系统性红斑狼疮的临床诊断和治疗。
文档编号G01N33/564GK102818890SQ201110155458
公开日2012年12月12日 申请日期2011年6月10日 优先权日2011年6月10日
发明者黄静芳, 徐红星 申请人:苏州卫生职业技术学院