专利名称：一种快速判断女性妊娠情况的方法
技术领域：
本发明属于医疗器械体外诊断试剂的技术领域，具体是涉及一种快速判断女性妊娠情况的方法。
背景技术：
当受精卵植入子宫后，孕妇体内就会分泌一种新激素，称为人绒毛膜促性腺激素(Human Chorionic Gonadotrophin,简称 HCG), 1927 年 Aschheim 和 zondek 在孕妇尿中首先发现HCG。HCG是细胞滋养层及合体滋养层分泌的一种激素，它首先存在于胎盘中，通过血液循环而排泄到尿中。在胎盘、血液和尿中均存在HCG及其代谢产物。在受孕后10天左右，就可以在孕妇的晨尿中检测到HCG。正常妊娠妇女血清中，HCG浓度在黄体达到峰值后的7 10天或受精卵植入子宫后的4 7天后开始增加，并以指数形式增长，平均每1.5 2天浓度就翻倍，不过增加速率也因人而异。妊娠7 10周后HCG浓度就可达20，000 100，000IU/L，在妊娠13 15周时浓度有所降低，之后又开始缓慢增加直至妊娠30 33周，接着又缓慢降低直至妊娠结束。异位妊娠HCG上升则较缓慢，或怀孕的3 6周，HCG不能持续翻倍增加，应考虑异位妊娠或先兆流产的可能。HCG是早期妊娠中的主要信号，特异性标志，已成为临床上诊断早期妊娠的常用指标。定量动态监测HCG量也作为异位妊娠的监控指标。检测早孕的方法主要有三种:超声检测、基础体温测定和免疫层析试剂。超声检测由于只能检测妊娠6周后子宫的情况，而通常被用于临床上胎儿的监测。基础体温测定虽然简单易行却又比较繁琐。免疫层析试剂由于它的操作简便、具有直观、快速、检测效率高、方法简便、无污染、费用低廉、灵敏度高、特异性强等优点，被广泛应用于临床诊断、野外现场及家庭自我检测。免疫层析检测HCG的试剂运用双抗体夹心法。当测试液浸泡或滴入试纸条的样品垫后，通过吸水纤维的毛细作用，测试液迅速湿透金标结合垫，金标结合垫上的胶体金结合物被溶解，并随测试液一起沿层析材料向前移动。若测试液中存在待测抗原Ag，则它就会和胶体金结合物中的抗体发生特异性免疫反应，形成胶体金结合物-待测抗原的免疫复合物。然后随测试液一起流经固定在Ne膜上T线的捕获试剂。T线的捕获试剂捕获胶体金结合物-待测抗原免疫复合物，即与该免疫复合物发生特异性免疫反应，形成胶体金结合物-待测抗原-捕获试剂的免疫复合物，从而使胶体金结合物-待测抗原免疫复合物滞留在T线处。测试液继续前移，在流经Ne膜上固定有羊抗鼠IgG抗体的C线时，未与待测抗原Ag发生反应的胶体金结合物与C线上羊抗鼠抗体发生免疫反应，从而使得游离的胶体金结合物滞留在C线处。此时T线和C线处均有胶体金结合物滞留，即T线和C线处均能观察到颜色(红色或紫色)，则表示检测结果为阳性结果，即测试液中有待测抗原；若仅C线处观察到颜色，而T线处未观察到颜色，则表示检测结果为阴性结果，即测试液中无待测抗原；待测液中HCG含量不同，所产生的T线颜色深浅也不相同，随着HCG含量的增加，T线颜色就会越深。然而，在一些样品中高浓度HCG则可导致高水平的“钩状效应(hook effect)”，即HCG浓度远远大于胶体金试纸条的检测上限时，HCG测得结果反而随浓度的增加而下降，T线颜色反而变浅，在临床诊断中这就造成HCG低水平的假象，使对病人的诊断出现意想不到的间题。当这种病人的血清稀释后，则会发现其HCG水平实际很高。为克服钩状效应产生的误判、假阴性结果，样本稀释成为本领域的一种常用手段。
发明内容
本发明的目的在于提供一种快速判断女性妊娠情况的方法。实现上述目的本发明的技术方案为，一种快速判断女性妊娠情况的方法，该方法包括以下步骤:(I)测定人绒毛膜促性腺激素(HCG)含量；(2)将步骤(I)中的HCG含量记录在记录表中，并在记录卡坐标图上进行描点；(3)将步骤(2)绘制的记录卡坐标图的纵坐标与标准卡坐标图重合，并将标准卡原点与记录卡第一次测试点重合，观察记录卡上的点在标准卡中所处的区域，根据大多数点所处的区域对女性的妊娠情况进行判断。步骤(I)中的HCG含量的测定首先用HCG试剂(卡型、条型、笔型)进行检测，然后将试剂卡或试剂条上的检测线颜色的深浅与HCG比色卡相比较，读出比色数值即HCG的含量。记录卡坐标图的横坐标为HCG的检测天数,纵坐标为HCG含量。标准坐标图的横坐标为HCG的检测天数，纵坐标为HCG含量。标准坐标图分成四个区域，区域(I)为正常妊娠区域，区域⑵为高可疑区，区域(3)为低可疑区，区域⑷为不确定区域。如落点多数落于高可疑区或，说明母体人绒毛膜促性腺激素分泌量较正常水平高，有可能怀有多胞胎也有可能机体产生其他病变；如落点多数落于低可疑区，说明母体人绒毛膜促性腺激素分泌数值较正常水平低，胎儿生命值较低或异位妊娠应及时就医确诊；如多数落点落于正常区域，说明母体人绒毛膜促性腺激素分泌量正常，属于正常妊娠；如落点多数落于不确定区域，则需要引起注意，进一步检测确诊。HCG比色卡通过以下的方法进行绘制:以国家参考品为参比，将HCG标准品溶液用正常人尿液(阴性)或牛血清稀释成浓度为0mIU/ml、25mIU/ml、50mIU/ml、100mIU/ml、200mIU/ml、400mIU/ml、800mIU/ml、1600mIU/ml、3200mIU/ml、6400mIU/ml 系列标准品，平衡至室温，将制备好的试剂条平放，加入待检标准品，静止5分钟后，读取结果并绘制HCG比色卡色标。本发明与现有技术相比，该判断方法操作简便，设计合理，既克服了现有检测手段对妊娠初期无法对胎儿生长发育进行监测，又将定性检测用胶体金试剂提升至半定量，更加直接有效的将检测结果与患者妊娠情况象对照并进行分析，使患者更加及时了解自身妊娠情况，并对于异常情况做到早知道早就医，避免了患者因延误病情而造成的危险。
图1为记录表；图2为记录卡坐标图；图3为标准卡；
图4为HCG比色卡；图5为对照方式的示意图；1、正常妊娠区域；2、高可疑区；3、低可疑区；4、不确定区域。
具体实施例方式为便于本发明技术方案的理解，下面结合具体的实施方式进行介绍。1.胶体金标记鼠抗HCG-β单克隆抗体标记物垫的制备用氯金酸-柠檬酸三钠还原法制备直径为40nm的胶体金溶液，制备完成后取三份胶体金，分别用0.2MK2C03可将溶液pH调到pH7.5、pH8.5、pH9.5、然后将溶液置于磁力搅拌器上缓慢搅拌，按每IOOml溶液0.5mg、l.0mg、l.5mg鼠抗HCG-β单克隆抗体缓慢滴加到胶体金溶液中，继续搅拌I小时，再加入终浓度为0.2% BSA,0.1%聚乙二醇20000进行封闭30分钟，12000转离心30分钟，弃上清，用胶体金工作液复溶至76.5ml，按Iml溶液铺16cm2的比例均匀地铺在无纺布上，再置干燥间温度20 25°C，，湿度小于30%干燥2 4小时，制成标记物垫，备用。2.NC膜的制备用0.0lM pH7.2PBS 将鼠抗 HCG-α 抗体分别稀释成 1.0mg/mlU.5mg/ml、2.0mg/ml，然后用喷膜仪将鼠抗HCG-α抗体包被液在NC膜上按1.3ul/cm划线包被，同时包被羊抗鼠IgG抗体，包被完成后将NC膜置于干燥间干燥3 4小时，备用。3.试纸条的装配在干燥室内温度20 25°C，湿度小于30 %，取塑料支撑板，将已包被的NC膜放置在塑料支撑板的中部粘贴，在NC膜T线一侧搭接标记物垫，在标记物垫另一侧搭接粘贴上样垫；在NC膜C线一侧距边缘搭接吸样垫。然后用裁剪机将贴好的塑料板切成适当宽度的试纸条。切好的试纸条也可以装入塑料卡(笔)内，形成检测试剂卡(笔)。4.HCG比色卡的色标绘制以国家参考品为参比，将HCG标准品溶液用正常人尿液(阴性)或牛血清稀释成浓度为 0mIU/ml、25mIU/ml、50mIU/ml、100mIU/ml、200mIU/ml、400mIU/ml、800mIU/ml、1600mIU/ml、3200mIU/ml、6400mIU/ml系列标准品，平衡至室温，将制备好的试剂条平放，加入待检标准品，静止5分钟后，读取结果并绘制HCG比色卡色标。5.临床样本检测按照上述检测方法检测临床样本30份，以奥普HCG定量试剂为对照，结果表明HCG比色卡色标与人绒毛膜促性腺激素HCG测试片检测结果一致性100%，特异性100%，和奥普HCG定量试剂结果符合率为98.1 %。6.标准卡绘制以人绒毛膜促性腺激素HCG倍增浓度作为坐标轴纵轴，检测日期作为坐标轴横轴，其中标准卡坐标图中(I)红色区域为正常妊娠区域；(2)蓝色区域为高可疑区；(3)绿色可疑区域为低可疑区；(4)白色区域为不确定区域；蓝色及绿色可疑区均为异常可疑区。上述技术方案仅体现了本发明技术方案的优选技术方案，本技术领域的技术人员对其中某些部分所可能做出的一些变动均体现了本发明的原理，属于本发明的保护范围之内。
权利要求
1.一种快速判断女性妊娠情况的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤: (1)测定人绒毛膜促性腺激素(HCG)含量； (2)将步骤(I)中的HCG含量记录在记录表中，并在记录卡坐标图上进行描点； (3)将步骤(2)绘制的记录卡坐标图的纵坐标与透明的标准卡坐标图重合，并将标准卡原点与记录卡第一次测试点重合，观察记录卡上的点在标准卡中所处的区域，根据大多数点所处的区域对女性的妊娠情况进行判断。
2.根据权利要求1所述的判断方法，其特征在于，步骤(I)中的HCG含量的测定首先是用HCG试剂(卡型、条型、笔型)进行检测，然后将试剂上的检测线颜色的深浅与HCG比色卡相比较，读出比色数值即HCG的含量。
3.根据权利要求1所述的判断方法，其特征在于，记录卡坐标图的横坐标为HCG的检测天数，纵坐标为HCG的倍增含量。
4.根据权利要求1所述的判断方法，其特征在于，标准坐标图的横坐标为HCG的检测天数，纵坐标为HCG的倍增含量。
5.根据权利要求1或4所述的判断方法，其特征在于，标准坐标图分成四个区域，区域(I)为正常妊娠区域，区域(2)为高可疑区，区域(3)为低可疑区，区域(4)为不确定区域。
6.根据权利要求2所述的判断方法，其特征在于，HCG比色卡通过以下的方法进行绘制:以国家参考品为参比，将HCG标准品溶液用正常人尿液(阴性)或牛血清稀释成浓度为OmIU/ml、25mIU/ml、50mIU/ml、100mIU/ml、200mIU/ml、400mIU/ml、800mIU/ml、1600mIU/ml、3200mIU/ml、6400mIU/ml系列标准品，平衡至室温，将制备好的试剂条平放，加入待检标准品，静止5分钟后，读取结果并绘制HCG比色卡色标。
全文摘要
本发明公开了一种快速判断女性妊娠情况的方法，该方法包括以下步骤(1)测定人绒毛膜促性腺激素(HCG)含量；(2)将步骤(1)中的HCG含量记录在记录表中，并在记录卡坐标图上进行描点；(3)将步骤(2)绘制的记录卡坐标图的纵坐标与透明的标准卡坐标图重合，并将标准卡原点与记录卡第一次测试点重合，观察记录卡上的点在标准卡中所处的区域，根据大多数点所处的区域对女性的妊娠情况进行判断。该判断方法操作简便，设计合理，既克服了现有检测手段对妊娠初期无法对胎儿生长发育进行监测，又将定性检测用胶体金试剂提升至半定量，更加直接有效的将检测结果与患者妊娠情况象对照并进行分析，使患者更加及时了解其妊娠情况。
文档编号G01N33/76GK103163305SQ20111042701
公开日2013年6月19日 申请日期2011年12月19日 优先权日2011年12月19日
发明者李洲, 孙宏瑜 申请人:天津中新科炬生物制药有限公司