疾病重症度的检查方法

专利名称：疾病重症度的检查方法
技术领域：
本发明涉及通过测定试样中含有的三磷酸腺苷(以下称为“ATP”)量来检查疾病重症度的方法。此外，本发明还涉及通过测定试样中的ATP量和作为能量代谢中间代谢产物的乳酸或酮体的量来掌握能量产生状态从而检查疾病重症度的方法。
背景技术：
ATP是所有生物用作生存所需的能量的化学物质(核苷酸)。因此，一直以来，为了判定生物试样中含有的微生物的有无而广泛应用ATP的测定。另外，由于ATP主要在细胞内细胞器的线粒体中产生，因此，以前曾经为了测定线粒体的功能而对ATP进行测定。但是，现有的ATP测定技术中没有能高效地提取出生物试样中含有的ATP的技术，因此，生物试样中的ATP浓度的相关信息缺乏准确性，难以使用该数值由ATP量的测定值准确地类推“生物生存所需的细胞内能量状态”。本发明人建立了极为有效地提取试样中的ATP并准确测定细胞内、组织内的ATP浓度的划时代性的技术(专利文献1:W02009/096429，核苷酸的提取方法)。通过本方法，能够准确地得到生物试样中的ATP浓度的相关信息。另一方面，在判定“疾病重症度”的现有技术中，直到目前为止一直在使用根据1985 年修改的 APACHEII 评分(非专利文献 1:KnausWA, Draper EA, Wagner DP, ZimmermanJE: A severity of diseaseclassification system.Critical Care Medicine13:818-829, 1985)来判定住院患者的重症度的方法，但APACHEII评分并非实时评分，因此，需要替代该APACHEII评分的风险标志物和评价方法。APACHEII评分是使用急性生理学评分(包括12个项目:1.深部体温、2.平均动脉压、3.心率、4.呼吸次数、5.氧合能力、
6.动脉血pH、7.血清Na浓度、8.血清K浓度、9.血清肌酐浓度、10.血细胞压积值、11.白细胞值、12.格拉斯哥昏迷指数)+年龄分数+慢性疾病状态的总分数进行评价的方法。此外，还提出 了使用 SOFA 评分(非专利文献 2:Vincent JL, MorenoR, Takala J, Willatts S，DeMendonca A, Bruining H，Reinhart CK, SuterPM, Thijs LG:The SOFA(Sepsis-relatedOrgan Failure Assessment)scoreto describe organ dysfunction/failure.0n behalfof the Working Group onSepsis-Related Problems of the European Society ofIntensive CareMedicine.1ntensive Care Medicine 7:707-710，1996)判定重要器官的损伤度的评价方法。SOFA评分通过急性生理学评分(1.呼吸功能、2.血小板数、3.胆红素值、4.血压、5.格拉斯哥昏迷指数、6.血清肌酐浓度或I天的尿量)的总分数来计算。但是，APACHEII评分、SOFA评分的测定项目多，并且像测定I天尿量这样需要花费时间来进行评价的汇总，因此并非实时标志物，需要建立替代上述评分的评价方法。现有技术文献专利文献专利文献1:国际公开小册子W02009/096429号非专利文献
非专利文献1-Critical Care Medicine 13:818-829, 1985非专利文献2:1ntensive Care Medicine 7:707-710, 199
发明内容
发明所要解决的问题本发明涉及评价疾病重症度的方法，其课题在于提供能够实时地判断疾病重症度的新的生物标志物及其判定基准而不是如上述APACHEII评分或SOFA评分那样将器官损伤度数值化而得到的生理学评分。用于解决问题的手段本发明人为了解决上述问题反复进行了深入研究，结果发现，利用本发明人的核苷酸提取方法(专利文献I)，能够准确地测定试样中的ATP量，从而能够建立由ATP量准确地类推“生物生存所需的细胞内能量状态”的方法，进而能够判定疾病重症度，此外还发现，通过将因重症化伴随的体内能量代谢的崩溃而蓄积在血液中的乳酸或酮体的量和血液的ATP浓度作为指标来进行评价(具体而言，通过乳酸浓度mM/ATP浓度mM进行换算和/或通过酮体浓度mM/ATP浓度mM进行换算)，能够实时地判定疾病重症度，从而完成了本发明。即，本发明包括:[1] 一种疾病重症度的检查方法，其特征在于，对试样中的三磷酸腺苷量进行测定；[2]如上述[I]所述的检查方法，其中，测定包括以下的步骤:1)为了测定试样中含有的三磷酸腺苷量，用含有酚化合物的溶液处理试样来提取试样中的三磷酸腺苷；和2)使用三磷酸腺苷测定用试剂对提取出的三磷酸腺苷量进行测定；[3]如上述[2]所述的检查方法，其中，含有酚化合物的溶液为pH4 10的溶液；[4]如上述[2]或所述的检查方法，其中，含有酚化合物的溶液为还含有蛋白变性剂的溶液；[5]如上述[2r[4]中任一项所述的检查方法，其中，酚化合物为苯酚。另外，本发明还包括:[6]如上述[1] [5]中任一项所述的检查方法，其中，试样为由受试者获取的血液，在该血液中的三磷酸腺苷量低于正常值的下限即0.52mM时，判断为异常；[7]如上述[6]所述的检查方法，其中，在血液中的三磷酸腺苷量低于正常值的下限即0.52mM且为0.3mM以上时，将疾病重症度判断为轻度异常；在血液中的三磷酸腺苷量低于0.3mM时，将疾病重症度判断为重度异常；在血液中的三磷酸腺苷量在I天之内没有恢复至0.3mM以上时，将疾病重症度判断为致死的风险高；[8]如上述[1] [7]中任一项所述的检查方法，其特征在于，进一步对试样中的乳酸量进行测定；[9]如上述[8]所述的检查方法，其中，将试样中的乳酸量(L ；mM)相对于三磷酸腺苷量(A;mM)的换算值(A-LES值)即L/A作为疾病重症度指标；[10]如上述[8]或[9]所述的检查方法，其中，试样为由受试者获取的血液，在该血液中的乳酸量相对于三磷酸腺苷量的换算值超过正常值的上限即3.7时，判断为异常；[11]如上述[10]所述的检查方法，其中，在血液中的乳酸量相对于三磷酸腺苷量的换算值超过正常值的上限即3.7且为8.0以下时，将疾病重症度判断为轻度异常；在血液中的乳酸量相对于三磷酸腺苷量的换算值超过8.0且为25.0以下时，将疾病重症度判断为重度异常；在血液中的乳酸量相对于三磷酸腺苷量的换算值为超过25.0的高值且持续6小时以上时，将疾病重症度判断为致死的重度异常。另外，本发明还包括:[12]如上述[1] [11]中任一项所述的检查方法，其特征在于，进一步对试样中的酮体量进行测定；[13]如上述[12]所述的检查方法，其中，将试样中的酮体量(K ；mM)相对于三磷酸腺苷量(A ；mM)的换算值(A-KES)即K/A作为疾病重症度指标；[14]如上述[12]或[13]所述的检查方法，其中，试样为由受试者获取的血液，在该血液中的酮体量相对于三磷酸腺苷量的换算值超过正常值的上限即0.25时，判断为异常。发明效果根据本发明的检查方法，通过由ATP量准确地类推“生物生存所需的细胞内能量状态”，能够对疾病重症度进行评价和判定。另外，能够将由于所有生命体作为能源摄取的糖、脂质、氨基酸未顺利地产生ATP的能量代谢崩溃状态或ATP产生跟不上过量的能量消耗的代谢崩溃状态等而蓄积在体内的能量代谢中间代谢产物即乳酸或酮体的浓度与ATP浓度相关联来评价和判定疾病重症度。根据本发明的检查方法，能够对以前通过各个测定值单独的信息未能获知的“疾病重症度”以轻度异常状态、重度异常状态、致死的危险性极高的状态等进行评价和判定。


图1是表示健康人来源的试样中的ATP值、年龄、性别分布的图(参考例I)。图2是表示健康人来源的试样中的乳酸值、年龄、性别分布的图(参考例2)。图3是表示由健康人来源的试样中的ATP量和乳酸量换算得到的A-LES值与其年龄、性别分布的图(参考例3)。图4A是表示以试样中的ATP值作为指标进行监测时各种患者在集中治疗室内的重症度的经时变化的图(实施例1)。图4B是表示以A-LES (乳酸值/ATP值)值作为指标进行监测时各种患者在集中治疗室内的重症度的经时变化的图(实施例1)。图5是表示集中治疗室管理下的患者在入室时和出室时(或死亡时)的APACHEII评分与A-LES值的变迁比较的图(实施例2)。图6是表示健康小鼠和流感感染重症化小鼠血液中的ATP值、乳酸值、A-LES值、酮体(3-羟基丁酸)值、A-KES值的图(实施例3)。
具体实施例方式作为本发明的疾病重症度的检查方法，只要是对试样中的ATP量进行测定的方法则没有特别限制，也可以测定乳酸、酮体等能量代谢中间代谢产物的量并使用能量代谢中间代谢产物的量与ATP量的比值进行评价和判定。另外，本发明中，“疾病重症度”是指在ATP量的检查时间点的疾病的严重程度，在本说明书中，与“疾病的重症化程度”、“重症化程度”等无区别地使用。通过掌握疾病的重症度，能够了解检查时间点的疾病状态而作为预测以后的病情变迁的指标，并且能够用于治疗方法的选择等治疗方针的确定。即，在疾病重症度为轻度异常的情况下，可观察到治疗效果或者预测到以后病情减轻。另外，在疾病重症度为重度异常的情况下，观察不到治疗效果或者预测到以后病情恶化，最差的情况下还暗示出致死的可能性。另外，“疾病重症度”中的疾病没有特别限制，可以列举:呼吸系统、血液和循环系统、消化系统、脑神经系统、肾泌尿系统、内分泌系统、感觉系统、生殖系统、骨骼系统和肌肉的疾病、多器官衰竭、感染症等。这些疾病可以是遗传性疾病或生活习惯病等内因性疾病，也可以是由病原菌或病毒的感染引起的疾病，可以优选例示:冠状动脉疾病、感染性心内膜炎、败血症、肺栓塞症、暴发性丙型肝炎、流感肺炎、流感感染症等。本发明中，试样只要是从生物体采集的组织、体液则没有特别限制，可以优选列举能够成为本发明的检查对象的人(受试者)和除人以外的脊椎动物(受试动物)来源的血液试样。作为受试动物，可以列举:哺乳类、鱼类、两栖类、爬行类、鸟类，优选猴、马、牛、绵羊、山羊、猪、狗、猫、兔、大鼠、小鼠等哺乳类动物，其中可以优选例示小鼠。作为血液试样，可以是动脉(Artery:A)血、肺动脉(Pulmonary Artery:PA)血、静脉(Vein:V)血、中心静脉(Central Vein:CV)血、末梢静脉血中的任意一种。通过以下所示的ATP量的测定方法能够确认:在同一受试者中，血液中的ATP量不随血液采集部位的不同而变化(参考表3)。另外，只要不妨碍ATP量和乳酸量或酮体量的测定，也可以适当添加抗凝剂、防腐剂等或者将血液中的特定成分除去或凝结而制成血液试样。本发明检查方法中的试样中的ATP量的测定方法没有特别限制，利用专利文献I中记载的测定方法能够准确地进行测定，因此优选。特别优选的是，在采血后迅速用含有酚化合物的溶液处理试样来提取试样中的ATP，并对该提取出的ATP量进行测定。具体而言，利用包括以下步骤的方法来进行。I)为了测定试样中含有的ATP量，用含有酚化合物的溶液处理试样来提取试样中的ATP ;和2)使用ATP测定用试剂对提取出的ATP量进行测定。本发明的检查方法中的、提取试样中含有的ATP的步骤中使用的酚化合物只要是含有酚基的化合物且能够提取出试样中的ATP的化合物即可，没有特别限定。特别优选的是苯酚。另外，含有酚化合物的溶液中可以含有蛋白变性剂，作为该蛋白变性剂，可以使用公知的蛋白变性剂，特别是可以优选例示能够在现有的ATP提取方法中使用的蛋白变性齐U，例如异硫氰酸胍、高氯酸、TCA、蛋白激酶K等。但是，在试样中含有大量除ATP分解酶以外的蛋白质的情况下，通过添加蛋白变性剂，有时会使蛋白质变性而凝聚。在这种情况下，作为测定对象物的ATP等的核酸有时会埋藏在因变性而凝聚的蛋白质中而难以提取，不能说能够进行准确的测定。另外，也可以将作为现有ATP提取方法的加热处理方法与本发明的核苷酸提取方法组合来进行处理，但在大量含有蛋白质的试样的情况下，有时同样也会使核酸混入因加热而变性的蛋白质中。因此，在不组合蛋白变性剂或加热处理的情况下用含有酚化合物的溶液进行处理有时能够最高效地提取ATP。上述含有酚化合物的溶液的pH没有特别限定，为了以最高的灵敏度进行测定，优选调节至对于荧光素酶测定试剂等核酸测定试剂而言能够最高效地进行反应的pH。使用该含有酚化合物的溶液对试样进行处理时，无论用例如PH4 10等何种pH的溶液进行处理，均比现有提取方法更有效地提取ATP。例如，在使用荧光素酶试剂测定ATP的情况下，根据荧光素酶的特性，能够在约约9的pH下进行有效的测定，因此，优选使本发明的含有酚化合物的溶液的PH为约约9，更优选使pH为约8。上述的ATP提取步骤中使用的含有酚化合物的溶液可以用作从试样中提取ATP的试剂。上述酚化合物的溶剂没有特别限定，可以使用例如TE(IOmMTris-HCl pH8.0，ImMEDTA)。也可以根据需要进一步添加稳定剂。本发明的检查方法中的ATP量的测定中，可以根据测定目标对象物而选择适当的测定方法，可以包括公知的方法以及今后开发的所有测定方法。作为上述公知的方法，可以应用利用荧光素-荧光素酶发光反应的方法、利用ATP转化反应的方法等。作为利用荧光素-荧光素酶发光反应的ATP的测定方法，可以列举:对使含有荧光素和荧光素酶的发光试剂与靶ATP在金属离子(镁离子等)的存在下接触而生成的光的发光量进行测定的方法。例如，通过使用作为市售的ATP测定用试剂盒的XL-ATP试剂盒(株式会社7 口寸 ^二 7公司制造)，能够特异性地且准确地测定ATP。建立本发明的疾病重症度的检查方法时，需要掌握健康人来源的试样中的ATP量。因此，采集健康志愿者的末梢静脉血，通过上述ATP量的测定方法对血中的ATP量进行了测定，结果确认到在一大半健康人中，ATP以0.52-1.3mM的浓度存在。另外，还确认到血中ATP的值不因性别而存在显著差异(参考图1)。本发明中，试样中的ATP量的正常值可以设定为0.52-1.3mM，更详细而言，可以设定为0.52-1.21mM，并且可以将中值设定为0.72mM。另外，正常值的下限可以设定为0.52mM。

本发明的疾病重症度的检查方法中，具体而言，可以根据测得的试样中的ATP量通过以下的方法来评价重症度。对人而言，在试样中的ATP量低于正常值的下限即0.52mM时，可以判断为异常。此外，关于人的疾病重症度，在ATP量低于正常值的下限即0.52mM时，可以根据ATP量的值来判断(I)轻度异常、(2)重度异常。人的ATP量与疾病重症度的关系可以通过以下基准来判断。(I)低于0.52mM且为0.3mM以上时判断为轻度异常(2)低于0.3mM时判断为重度异常。另外，在6_24小时、特别是24小时以内没有恢复至0.3mM以上时，致死的风险高。本发明中的疾病重症度可以通过进一步测定试样中的作为能量代谢中间代谢产物的乳酸量或酮体量而更有效地根据能量代谢来检查疾病重症度。本发明中的“酮体”是指乙酰乙酸和3-羟基丁酸，不包括丙酮。因此，本发明中，酮体量是指乙酰乙酸和/或3-羟基丁酸的量。由于能够利用快速测定装置在数分钟以内进行测定，因此，常常使用3-羟基丁酸的量作为酮体量的指标。试样中的乳酸量或酮体量的测定只要是能够准确地测定血中的乳酸量或酮体量的方法，则可以是公知的方法，也可以是今后开发的方法。例如，乳酸量的测定可以使用全自动血气测定装置(860C0T，WM 了几J rM力 >公司制造)或简易测定装置(9 ^ f 一卜 口，ARKRAY公司制造)等，酮体量的测定可以使用“总酮体力4 7 7 ”或“夕卜夕
7 % r％ ( V—fM力卟y I) 二——V彐 > 文' 夕' I了夕'' 7 ^ r 4夕叉株式
会社制造)”等，可以分别按照制造商推荐的测定方法来测定。建立本发明的疾病重症度的检查方法时，优选掌握健康人来源的试样中作为能量代谢中间代谢产物的乳酸量。因此，采集健康志愿者的末梢静脉血，通过上述乳酸量的测定方法对血中的乳酸量进行了测定，结果确认，在男性中显示为2.7mM以下的值，在女性中显示为1.65mM以下的值，在男性和女性中均为2.7mM以下的浓度(参考图2)。各年龄的中值如图所示。需要说明的是，0.SmM以下为测定器材(9々f 一卜 口:ARKRAY公司制造)的检测限以下，用▽表示，并记载为0.SmM来进行计算。通过使用上述乳酸量计算出相对于通过上述方法测定的ATP量的换算值(A-LES值)，能够以更准确的疾病重症度进行检查。A-LES值可以通过下式I来计算。这样计算而得到的值可以作为由能量代谢引起的疾病的重症度生物标志物(参考图3)。(式I)A-LES 值=乳酸值(L) mM/ATP 值⑷ mM与以ATP量作为基准的情况相比，利用A-LES值能够更细致且更准确地判定疾病重症度。根据A-LES值，可以判断(I)轻度异常、(2)重度异常、(3)致死的重度异常状态。A-LES值与人的重症度的关系可以通过以下基准来判断。(I)超过正常值的上限即3.7且为8.0以下时判断为轻度异常(2)超过8.0且为25.0以下判断为重度异常(3)超过25.0的高值持续6-24小时、特别是持续24小时以上时，判断为致死的重度异常。另外，对于受试动物，可以根据其种类适当设定基准来判断该A-LES值与重症度的关系。本发明中的疾病重症度可以通过进一步测定试样中的作为能量代谢中间代谢产物的酮体量而更有效地根据能量代谢来检查疾病重症度。通过使用上述酮体量计算出相对于通过上述方法测定的ATP量的换算值(A-KES值)，能够以更准确的疾病重症度进行检查。A-KES值可以通过下式II来计算。作为酮体量，可以使用乙酰乙酸和/或3-羟基丁酸的酮体的量，作为该酮体量，由于能够利用快速测定装置在数分钟以内进行测定，因此，优选使用3-羟基丁酸的量作为酮体量，并且常常使用3-羟基丁酸的量作为酮体量。这样计算而得到的值可以作为由能量代谢引起的疾病的重症度生物标志物(参考图6)。(式II)A-KES值=酮体值⑷mM/ATP值⑷mM与以ATP量作为基准的情况相比，利用A-KES值能够更准确地判定疾病重症度。一般认为酮体量(乙酰乙酸值与3-羟基丁酸值的总和)的正常值为130微摩尔/升(0.13mM)以下(参考西*谷晴美等，医学检查，45，3，353(1996);原纳优等，日本临床，48-增刊，323 333 (1990))，并且认为血液中的ATP量低于0.52mM时为异常值，因此，可以将以乙酰乙酸值与3-羟基丁酸值的总和作为酮体量时的A-KES值达到0.13mM/0.52mM=0.25以上作为异常。因此，可以将A-KES值(乙酰乙酸值与3-羟基丁酸值的总和/ATP值)的正常值上限即0.25作为指标来判断人的疾病重症度状态。另外，在以3-羟基丁酸值作为酮体量的情况下，也可以同样地设定正常值上限来判断人的疾病重症度状态。需要说明的是，对于受试者或受试动物，可以分别适当设定基准来判断A-KES值与重症度的关系。实施例为了帮助理解本发明，以下示出参考例和实施例来具体地说明本发明，但本发明当然不受本实施例的限定。(参考例I)健康人来源的试样中的ATP量、年龄、性别分布的研究 本参考例中，在建立本发明的疾病重症度的检查方法时，为了掌握健康人来源的试样中的ATP量，对20多岁至90多岁的68名男性、71名女性共计139名健康志愿者的末梢静脉血的ATP量和乳酸量进行了测定。使用XL-ATP试剂盒(株式会社7 口寸4 二 > ^公司制造)，按照操作说明书从试样中提取ATP并测定ATP 量。作为ATP提取用试剂，使用将本试剂盒附带的提取试剂A (TE饱和苯酚，成分:含69%苯酚，pH8.0)、提取试剂B (氯仿，成分:含99%氯仿)和无菌超纯水分别以3:5:5的比例混合而得到的试剂。具体而言，将0.1ml采集到的血液添加到ATP提取试剂(提取试剂A 0.3ml、提取试剂B 0.5ml、无菌超纯水0.5ml)中并混合,通过离心等分离成有机溶剂层和水层，然后，回收其上清(水层)，由此提取出血液中的ATP。测定结果示于图1、表I和表2中。末梢静脉血的ATP值在男女差异方面几乎没有统计学上的显著差异，随着年龄增高，观察到ATP值有集中于低值0.5mM的倾向。中值在20多岁的男性中显示为0.82mM，在20多岁的女性中显示为0.63mM，在30多岁的男性中显示为0.68mM，在30多岁的女性中显示为0.78mM，在40多岁的男性中显示为0.78mM，在40多岁的女性中显示为0.62mM，在50多岁的男性中显示为0.66mM，在50多岁的女性中显示为0.51mM，在60多岁的男性中显示为0.52mM，在60多岁的女性中显示为0.46mM，在70岁以上的高龄男性中显示为0.46mM，在70岁以上的高龄女性中显示为0.45mM。[表 I]
权利要求
1.一种疾病重症度的检查方法，其特征在于，对试样中的三磷酸腺苷量进行测定。
2.按权利要求1所述的检查方法，其中，测定包括以下的步骤: 1)为了测定试样中含有的三磷酸腺苷量，用含有酚化合物的溶液处理试样来提取试样中的三磷酸腺苷；和 2)使用三磷酸腺苷测定用试剂对提取出的三磷酸腺苷量进行测定。
3.按权利要求2所述的检查方法，其中，含有酚化合物的溶液为pH4 10的溶液。
4.按权利要求2或3所述的检查方法，其中，含有酚化合物的溶液为还含有蛋白变性剂的溶液。
5.按权利要求2 4中任一项所述的检查方法，其中，酚化合物为苯酚。
6.按权利要求1、中任一项所述的检查方法,其中,试样为由受试者获取的血液,在该血液中的三磷酸腺苷量低于正常值的下限即0.52mM时，判断为异常。
7.按权利要求6所述的检查方法，其中，在血液中的三磷酸腺苷量低于正常值的下限即0.52mM且为0.3mM以上时，将疾病重症度判断为轻度异常；在血液中的三磷酸腺苷量低于0.3mM时，将疾病重症度判断为重度异常；在血液中的三磷酸腺苷量在I天之内没有恢复至0.3mM以上时，将疾病重症度判断为致死的风险高。
8.按权利要求广7中任一项所述的检查方法，其特征在于，进一步对试样中的乳酸量进行测定。
9.按权利要求8所述的检查方法，其中，将试样中的乳酸量(L;mM)相对于三磷酸腺苷量(A ；mM)的换算值(A-LES值)即L/A作为疾病重症度指标。
10.按权利要求8或9所述的检查方法，其中，试样为由受试者获取的血液，在该血液中的乳酸量相对于三磷酸腺苷量的换算值超过正常值的上限即3.7时，判断为异常。
11.按权利要求10所述的检查方法，其中，在血液中的乳酸量相对于三磷酸腺苷量的换算值超过正常值的上限即3.7且为8.0以下时，将疾病重症度判断为轻度异常；在血液中的乳酸量相对于三磷酸腺苷量的换算值超过8.0且为25.0以下时，将疾病重症度判断为重度异常；在血液中的乳酸量相对于三磷酸腺苷量的换算值为超过25.0的高值且持续6小时以上时，将疾病重症度判断为致死的重度异常。
12.按权利要求f11中任一项所述的检查方法，其特征在于，进一步对试样中的酮体量进行测定。
13.按权利要求12所述的检查方法，其中，将试样中的酮体量(K；mM)相对于三磷酸腺苷量(A ；mM)的换算值(A-KES)即K/A作为疾病重症度指标。
14.按权利要求12或13所述的检查方法，其中，试样为由受试者获取的血液，在该血液中的酮体量相对于三磷酸腺苷量的换算值超过正常值的上限即0.25时，判断为异常。
全文摘要
本发明涉及实时地测定疾病重症度的方法，其课题在于提供能够比现有的APACHEII、SOFA评分更详细地判断疾病重症度的检查方法。作为解决手段，通过准确地测定试样中的ATP量，能够建立由ATP量准确且快速地类推“生物生存所需的细胞内能量状态”的方法，进而能够判定疾病重症度。此外，本发明还提供一种新的生物标志物即ATP-乳酸盐能量风险评分(ATP-Lactate Energy Risk Score，A-LES)值，其以ATP浓度作为指标对因疾病的重症化伴随的体内代谢平衡的崩溃而蓄积在试样中的乳酸量进行再评价(具体而言，通过乳酸值mM/ATP浓度mM进行换算)，由此能够判定疾病重症度。另外，本发明还提供一种新的生物标志物即ATP-酮体能量风险评分(ATP-Ketone Energy RiskScore，A-KES)值，其以ATP浓度作为指标对试样中的酮体量进行再评价(具体而言，通过酮体值mM/ATP浓度mM进行换算)，由此能够判定疾病重症度。
文档编号G01N33/50GK103097891SQ20118002648
公开日2013年5月8日 申请日期2011年5月27日 优先权日2010年5月31日
发明者木户博, 西村匡司, 千田淳司 申请人:国立大学法人德岛大学