反应容器及其制造方法
反应容器及其制造方法
【专利摘要】本发明提供一种反应容器及其制造方法，能够一贯地、迅速地且有效率地进行包含核酸的提取、扩增等反应在内的处理，减轻使用者的工时，不会使装置规模扩大。该反应容器具有一个或两个以上反应用收容部，该反应用收容部具有：细口管部，收容或能够收容反应用试剂或其一部分；广口管部，与该细口管部连通，设于该细口管部的上侧，且具有比上述细口管部的开口部宽的开口部；及可穿孔薄膜，设成将该广口管部与上述细口管部之间分隔。
【专利说明】反应容器及其制造方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种反应容器及其制造方法。
【背景技术】
[0002]与核酸扩增、需要进行免疫恒温等温度控制的反应同时进行光测量的处理近年来增加。例如进行核酸(DNA (Deoxyribonucleic Acid:脱氧核糖核酸)、RNA (RibonucleicAcid:核糖核酸)等)及其片段(寡聚核苷酸、核苷酸等)的扩增时，遗传因子出现量分析等求解定量性的检查中，需要进行扩增以能够了解各核酸的相对量之比。因此，适用实时PCR(Polymerase Chain Reaction:聚合酶链式反应)法,使用具备热循环仪和分光突光光度计的装置，实时检测分析由PCR生成DNA扩增产物的生成过程，从而不需要电泳法的分析。作为对于包含在扩增前的样品中的各DNA或RNA的相对量之比维持定量性的情况下进行扩增的 DNA 扩增法,使用 SPIA(Single Primer Isothermal Amplification:单引物等温扩增)。在该SPIA法中，采用到利用DNA/RNA嵌合引物、DNA聚合酶、RNaseH (核糖核酸酶H)的等温反应进行的线性DNA扩增法。
[0003]其中，这样的核酸扩增等中的温度控制设为如下:将上述铸型DNA、引物、DNA聚合酶、核苷酸以及反应缓冲液等必要试剂收容在由聚丙烯等形成的容器内，收容在由铝等原材料形成的块状的恒温装置的收容部内，对该金属制的块状的收容部进行加热或冷却，等待液温变为均等的温度分布，从而进行恒温或下一温度的加热或冷却(专利文献1、2、3)。
[0004]此时，用于进行温度控制的容器由盖进行密闭，防止异物从外部侵入，防止液体从内部泄漏，并且尤其需要尽可能排除外部气体和外部气体温度的影响直至上述收容部内的反应液被加热或冷却而变为均等的 液温的温度分布为止。
[0005]这样一来，对于利用荧光物质实时监视扩增的核酸(DNA、RNA等)的实时PCR等来说，需要在温度循环中途观测扩增，因此，对由盖密闭的容器，需要从外部透过透明的盖或侧面来进行光的测量。但是，使用者使用盖，手动打开盖耗费工时，成为对处理的一贯自动化的妨碍。另外，再次由盖进行密闭时，可能与容器内的反应液接触而造成污染。另外，温度控制时，即使将盖从容器取除，因水分使盖密接在容器开口部上而难以容易地打开盖，不能进行迅速的处理。另外，盖打开时，附着于盖的内侧的液体可能会坠落或飞散而造成污染(专利文献4)。
[0006]另外，温度控制时，从上述容器的外部进行上述容器内的测量的情况下，需要使盖容器的盖形成透明而从容器外进行测量，但是盖的内部可能会出现结露而雾化，难以进行测量。
[0007]另一方面，为了进行核酸扩增等处理，现状是:作为其前提，需要从检体提取微量的核酸等，与各种试剂、引物、DNA聚合酶、核苷酸和反应缓冲液等一起在反应容器内，例如手动或使用各种装置进行各种处理，需要与核酸等相关的专门的研究人员和技术人员。
[0008]这样的状况妨碍遗传因子分析的通用化和医院等临床应用的扩大。因此，临床等时，为了防止发生交叉污染且减轻使用者的工时，并容易进行关于核酸的从提取到扩增进而到测量的遗传因子分析，需要实现一贯地自动化进行从核酸的提取到扩增进而到测量的全自动化，并且提供小型化装置且低价位、高精度的装置是重要的。
[0009]专利文献1:日本专利第2622327号公报
[0010]专利文献2:日本特表2000-511435号公报
[0011]专利文献3:美国专利第5，958，349号公报
[0012]专利文献4:日本特开2002-10777公报
【发明内容】
[0013]发明所要解决的问题
[0014]因此，本发明是鉴于上述问题而研发的，其第I目的在于提供一种反应容器及其制造方法，能够切实地防止异物从外部进入进行核酸的扩增等需要温度控制的反应的反应容器、防止液体从反应容器飞散等导致的污染，能够进行可靠性高的处理。
[0015]本发明第2目的在于提供一种反应容器及其制造方法，能够使至少包含核酸扩增等反应和光测量的处理一贯自动化，削减使用者的工时，并迅速且有效率地廉价制造和使用反应容器而不会造成装置规模扩大。
[0016]用于解决课题的方法
[0017]第I发明是一种反应容器，该反应容器具有一个或两个以上反应用收容部，该反应用收容部具有:细口管部，收容或能够收容反应用试剂或其一部分；广口管部，与该细口管部连通，设于该细口管部的上侧，且具有比上述细口管部的开口部宽的开口部；及可穿孔薄膜，设成将该广 口管部与上述细口管部之间分隔。
[0018]此处，“反应试剂或其一部分”是指用于规定的反应的试剂或该试剂的一部分，能够以液态或干燥状态进行收容。例如，在核酸扩增反应的情况下，反应试剂是扩增用溶液，例如基于PCR法进行扩增的情况下，是扩增对象的铸型DNA溶液、引物溶液、DNA聚合酶溶液、核苷酸溶液、反应缓冲液等，在利用SPIA法进行扩增的情况下，是DNA/RNA嵌合引物、DNA聚合酶溶液、RNaseH溶液等。另外，实时PCR中，通常作为使用含有荧光物质的荧光试剂进行的方法，有插入(Intercalation)法、杂交(Hybridization)法以及LUX (light uponextention)法。“插入法”是利用SYBR (注册商标)GREEN 1、溴化乙锭等荧光物质在伸长反应之际进入双链DNA而通过激发光的照射产生荧光的特性来测量DNA量的方法。因此，使扩增用溶液中至少包含上述荧光物质和抑制该荧光物质发光的猝灭剂。“杂交法”是在PCR引物的基础上使用由荧光物质标识的DNA探针仅检测目标PCR产物的方法。即，通过将由荧光标识的DNA探针杂交在目标PCR产物中，从而检测出该杂交的DNA (量)。“LUX法”是利用标识在寡聚核苷酸上的荧光物质的荧光信号受该寡聚核苷酸的形状(排列或单链或双链)影响的性质的方法。实际的实时PCR中，使用由一种荧光物质标识化的PCR引物(LUX引物)和相对于此均未标识化的PCR引物进行实时PCR。该LUX引物被设计成将荧光物质标识在3'前端附近,在与5'前端之间构成发夹结构(hairpin structure)。LUX引物取得发夹结构时，解除消光效果，荧光信号增大。通过测量该信号增大，从而能够测量PCR产物量。
[0019]包含反应用收容部的反应容器、盖等材料例如有聚乙烯(P.E.)、聚丙烯(？1.)、聚苯乙烯、丙烯等树脂、玻璃、金属、金属化合物等。反应容器的尺寸是上述细口管部例如能够收容几μ L到几百μ L的液体、并且分注头的前端能够插入的大小。例如，在圆筒状的情况下，例如一个容器的大小的直径为几mm~几十mm、深度为几mm~几十mm。例如，广口管部的内径例如为9mm程度，细口管部的开口部的内径为4mm程度，细口管部的容量例如是50 μ L程度，所收容的液量例如为25 μ L程度，壁厚为0.2mm程度。
[0020]上述反应容器内能够由温度控制器进行温度控制。
[0021]“温度控制器”具有能够基于来自外部的信号等使收容构成温度控制的对象的液体的反应容器内的温度上升或下降的温度源，作为温度源是在块状部件上例如设置帕尔贴元件、加热器、冷却装置等的结构。为了进行PCR等处理，作为温度控制器，使用了帕尔贴元件的热循环仪为优选。另外，也能够利用LAMP (loop-mediated isothermalamplification:环介导等温扩增)法进行恒温扩增的温度控制。
[0022]“温度控制”是指:依据预先规定的顺序，以所规定的次数执行将成为其对象的液体或容器以所设定的时间维持在一个或两个以上的设定的规定温度。对上述温度控制器的指示基于程序发送所对应的信号。
[0023]“规定温度”是指作为构成对象的液体等的物体要到达的目标的温度，例如上述液体中含有的DNA等核酸或作为核酸的片段的寡聚核苷酸等由PCR法扩增的情况下，作为所设定的规定温度例如是由PCR法进行的温度循环、即DNA变性、退火或伸长所分别需要的各温度，约94°C、50°C到60°C之间的温度以及约72°C。另一方面，利用SPIA法(商标)的情况下，设定为恒定温度例如55°C等。
[0024]另外，该规定温度包含转移促进用温度，用于例如在从高温的规定温度向低温的规定温度转移的情况下，由温 度控制器而以比这些规定的温度低的转移促进用温度进行冷却，或者当在低温的规定温度向高温的规定温度转移的情况下以比这些规定温度更高的转移促进用温度进行加热，从而缩短转移时间，将一个循环时间收敛在规定循环时间内。“规定时间”是各温度的维持所需的时间，其依赖于扩增法的种类、在PCR法中使用的试剂、液量、嘴的形状、原材料、大小、厚度等，但是在一个循环中合计例如为几秒到几十秒，作为PCR法整体的处理时间例如为大约几分钟到几十分钟程度。另外，转移时间也包含在规定时间中。
[0025]可穿孔薄膜例如包括铝箔。对于穿孔，例如在用于对该反应容器分注液体的设于该反应容器外的分注装置的嘴上安装穿孔用尖头，使该穿孔用尖头下降而位于该反应容器上，从进行穿孔。
[0026]“细口管部”是指其开口部的面积小于上述“广口管部”的开口部的面积。优选为，细口管部的开口部的面积小于广口管部的底部整体的面积。存在广口管部和细口管部一体形成的情况和分体形成的情况。
[0027]第2发明:上述反应容器中，上述细口管部的开口部设于该广口管部的底部的中央。
[0028]优选为，广口管部和细口管部旋转对称地形成，并且广口管部和细口管部同轴形成。细口管部的开口部处于广口管部的底部的中央，所以能够切实地沿广口管部的轴向接收来自细口管部的光。另外，“底部”是指遮住广口管部的下方而形成的壁面，与遮住水平方向而形成的侧部不同。通常，该底部相当于从广口管部的内壁面向内侧方向突出设置的水平面、或朝向下方收窄而形成的环状的台阶差的水平面。因此，广口管部的侧部和细口管部的侧部之间即使一体形成，也不能一样地连续连结，而要经由环状的台阶差连结。
[0029]第3发明:上述反应容器中，上述细口管部与上述广口管部一体形成，上述薄膜附着在上述广口管部的底部。
[0030]这种情况下，由于广口管部和细口管部一体成形，所以与分体成形并进行组装的情况相比较，其制作容易，另一方面，对于可穿孔薄膜的附着作业，需要:预先准备根据广口管部的底部的形状而切断的上述薄膜而将反应试剂收容于细口管部后，逐个地从广口管部侧落入，并以与反应试剂不接触的方式仅附着在底部。 [0031]第4发明:上述反应容器中，上述广口管部与上述细口管部分体形成，在上述广口管部的底部的中央穿设孔部，上述细口管部沿其开口部的外周具有包围该开口部的开口缘部，上述细口管部中除了上述开口缘部之外设成能够贯通上述孔部，上述细口管部以贯通上述孔部的方式从广口管部的上述孔部向下方突出，上述开口缘部安装在上述广口管部的底部，上述薄膜附着在上述细口管部的上述开口缘部上。
[0032]此处，广口管部和细口管部分体形成，关于可穿孔薄膜，在上述细口管部内收容了反应试剂后，将多个细口管部以平面状排列后，将大的上述薄膜一次性附着在多个细口管部的开口缘部上，对齐细口管部的开口缘部而一并进行切断。
[0033]之后，使在开口缘部附着了可穿孔薄膜的细口管部进一步贯通上述广口管部的孔部，并以无液体泄漏的方式安装将开口缘部和上述广口管部的底部，从而完成制造。另外，上述开口缘部的外周长比上述孔部的内周长形成得长。
[0034]第5发明:上述反应容器中，还具有密闭盖，该密闭盖安装于上述反应用收容部的上述广口管部的开口部，密闭该反应用收容部，并具有透光性。
[0035]此处，“密闭盖”中除了板状或块状的非可挠性盖外，也包含具有柔性的薄膜状或膜状的盖。上述“安装”通过嵌合、螺纹接合、摩擦、吸附、附着、粘接等进行。这种情况下，优选可拆脱地安装。
[0036]由一个上述密闭盖密闭一个或两个以上的反应容器的开口部。密闭盖例如安装于后述的嘴并进行移动，使用尖头拆装机构使反应容器的开口部密闭。因此，在密闭盖的上侧设置能够相对一个或两个以上的上述嘴而进行拆装的一个或两个以上的安装用的空洞。
[0037]后述的一个或两个以上的上述连接部能够通过上述导光用架台的上下方向的移动而插入该安装用的空洞内并与反应容器连接。
[0038]另外，优选为，使上述导光用架台的各连接部连接于各反应容器后，能够相对于覆盖上述反应容器的开口部的密闭盖，按压或移动上述连接部或嘴。
[0039]优选为，上述连接部以向上述导光用架台的下方突出的方式设置。这种情况下，优选为，连接部例如具有棒状、筒状、锥状等形状，该部件的下端部能够与上述密闭盖接触。
[0040]第6发明:上述反应容器中，上述密闭盖具有:栓部，能够与上述广口管部嵌合，并能够对来自上述细口管部的光进行导光；压入部，设于上述栓部的前端，在该栓部与广口管部嵌合的情况下能够插入上述细口管部的开口部并将穿孔的上述薄膜压入细口管部的内壁，并且能够对来自上述细口管部的光进行导光。
[0041]第7发明:根据权利要求1至6所述的反应容器，上述广口管部或密闭盖设成能够与连接部连接，在上述连接部设置有将设于上述反应容器的外部的光测量器与上述反应用收容部内部进行光学连接的一个或两个以上导光部的前端。[0042]此处，“连接部”是与上述反应容器直接或经由密闭盖等间接地以能够解除的方式连接的部件。在该连接部设置有与上述反应容器内光学连接并能够基于该反应容器内的光学状态对光进行导光的导光部的前端。此处，“与反应容器的连接”是指与反应容器的开口部、外壁、外底部或所安装的密闭盖或套等接近或连结，“接近”是指不接触而能够与导光部之间光学连接的程度接近，“连结”包含接触、密接、密粘、嵌合、安装，至少接触以能够与导光部之间光学连接。通过该连接以将设于连接部的导光部与反应容器内光学连接。作为连接部例如是导光用架台的板状部分，导光部的前端是穿设于其板状部分的孔、光纤等透光性部分或透镜等的光学系统。或者，例如是以从上述导光用架台突出的方式设置的圆筒状等部件，导光部的前端是设于该圆筒状等的部件的空洞、光纤等透光性部分或透镜等的光学系统。所谓具有可挠性的导光部例如是光纤或光纤束。测量荧光的情况下，具有两个以上的导光部，其一部分作为照射用导光部、其他作为受光用导光部。另外，与上述反应容器的开口部直接连接的情况下，是使用矿物油等对反应容器内密闭的情况，这种情况下该连接部以能够密闭该反应容器的方式形成为优选。另外，在开口部以外连接的情况下，上述反应容器或该连接部分需要具有透光性。
[0043]此处，关于“导光用架台”，与后述的第14发明相关联地进行说明。
[0044]第8发明:在上述反应容器中，上述密闭盖具有设于该密闭盖中央的空洞和封闭该空洞的下端的具有透光性的底面，该密闭盖向该反应用收容部的移动、嵌合和/或与上述连接部的连接通过设于反应容器的外部的部件和/或上述连接部插入上述空洞来进行。
[0045]此处，“部件”包括例如设置于分注装置的嘴、分注装置的嘴头、且与嘴联动地移动的密闭盖的移动专用的棒状部件等。
[0046]第9发明:在上述反应容 器中，还具有两个以上的凹部排列成一列状的基板，并且在该凹部的一个凹部形成上述反应用收容部，在除形成有上述反应用收容部的凹部之外的其他凹部具有盒容器，该盒容器收容或能够收容用于移动到上述反应用收容部而进行处理的器具。
[0047]此处，“处理”包括对反应用收容部的分注、设于反应用收容部的可穿孔薄膜的穿孔、密闭盖对反应用收容部的封闭、拆装、或对收容在上述反应用收容部中的溶液进行的测
且雄里寺。
[0048]第10发明:在上述反应容器中，在除形成有上述反应用收容部的凹部之外的其他凹部设有收容上述密闭盖的密闭盖收容部、收容对上述薄膜进行穿孔的穿孔用尖头的穿孔用尖头收容部和/或收容分注头的分注头收容部。
[0049]第11发明:在上述反应容器中，上述细口管部与上述广口管部分体形成，上述广口管部形成于上述凹部，在上述广口管部的底部的中央穿设孔部，上述细口管部具有包围该开口部的开口缘部，上述细口管部以贯通上述孔部的方式从广口管部的上述孔部向下方突出，上述开口缘部安装于上述广口管部的底部，上述薄膜附着于上述细口管部的上述开口缘部。
[0050]第12发明:一种反应容器制造方法，分体制造在底部的中央穿设有孔部的广口管部和沿开口部的外周具有包围该开口部的开口缘部的细口管部，在上述细口管部内收容或不收容反应用试剂或其一部分，使可穿孔薄膜附着在上述细口管部的上述开口缘部，使上述细口管部以除其开口缘部之外贯通上述孔部的方式从该广口管部的上述孔部向下方突出，将上述开口缘部安装于上述广口管部的底部，从而制造反应用收容部。
[0051]第13发明:一种反应容器制造方法，分体制造形成有两个以上的凹部并在该凹部的一个凹部的底部的中央穿设有孔部的基板和沿开口部的外周具有包围该开口部的开口缘部的细口管部，在上述细口管部内收容或不收容反应用试剂或其一部分，使可穿孔薄膜附着在上述细口管部的上述开口缘部，使上述细口管部以除其开口缘部之外贯通上述孔部的方式从该广口管部的上述孔部向下方突出，将上述开口缘部安装于上述凹部的底部而形成反应用收容部，从而制造盒容器。
[0052]第14发明:一种反应容器系统，嘴头，该嘴头设有一个或两个以上嘴，该嘴以能够拆装的方式安装进行气体的吸引和排出的吸引排出机构以及能够通过该吸引排出机构进行液体的吸引和排出的分注头；容器组，至少具有收容或能够收容用于反应的反应用溶液或其一部分的权利要求1至11中任一项所述的反应容器；嘴移动机构，能够在上述嘴头与上述容器组之间相对移动；温度控制器，能够进行上述反应容器内的温度控制；导光用架台，设于上述嘴头，且具有两个以上连接部，该连接部能够与上述反应容器的上述反应用收容部直接或间接连接，该连接部设有与所连接的该反应容器收容部内部光学连接的一个或两个以上的导光部的前端；连接端排列体，与上述各连接部对应设置，该连接端排列体具有沿规定路径排列支承两个以上连接端的排列面，在该连接端设有前端设于该连接部的上述导光部的后端；测量器，设成与上述排列面接近或接触，通过与该各连接端的光学连接而能够接收基于上述反应容器内的光学状态的光，使沿上述连接端排列体的上述规定路径设置的上述各连接端和上述各测量端相对移动以进行光学连接。
[0053]“规定路径”是能够通过上述测量端与上述连接端排列体相对移动而使该测量端扫描沿其排列的全部连接端的平面或曲面上的路径，连接全部连接端的路径是沿没有一重或多重交叉的线段(也包含锯齿线、闭合直线)、曲线(也包含螺旋线、闭合曲线)、或者它们的组合等的路径。一重或多重的各路径优选沿连续的、没有尖点、角的线段或平滑曲线的路径。
[0054]上述连接 部和连接端有一对一对应的情况、多对一的情况、一对多的情况。这能够使得在中途使导光部分支或汇合、或者使由多个导光部构成的导光部束分支或汇合。
[0055]该规定路径优选基于测量器的测量端的个数、形状、配置或尺寸来规定，以能够进行顺畅的扫描。例如优选为，沿着在连接端相对测量端的移动中没有急剧的方向转换例如相对行进方向向钝角、直角方向转换的直线的规定路径。
[0056]连接部的排列图形例如是行列状、列状或行状，连接端的排列图形例如是与其相同的排列、仅尺寸与其不同的相似的排列、或排列图形不同的情况下、例如有圆形、其他闭合曲线状、一列状或具有更少的列数或行数的行列状的情况。以通过全部所排列的连接端的方式规定上述规定路径。
[0057]另外，上述规定路径(或者上述连接端的排列图形)优选是包围上述导光用架台的连接部的排列图形的区域面积或比相邻的连接部之间的间隔小的区域面积或比其小的间隔，实现集成化以使整体扫描距离变短。由此，速度相同的情况下，能够以比测量端直接扫描上述连接部的情况短的时间来进行处理。
[0058]集成化的程度优选为以下程度:例如上述连接端排列体与上述测量器之间的相对移动或扫描能够在可稳定受光时间内完成从待测量的全部反应容器的受光。此处，“可稳定受光时间”是指稳定维持反应容器内的可受光的光学状态的时间，例如实时PCR的插入法或LUX法或杂交法的TaqMan探针的情况下，进行PCR的各循环的伸长反应的时间即相当于上述时间。另外，杂交法中使用 FRET (fluorescence resonance energy transfer:突光能量共振转移)探针的情况下进行退火的时间即相当于上述时间。
[0059]由此，由于对于可稳定受光时间短的发光体等也能够适用，所以通用性高。
[0060]若一个循环所用时间例如为几十秒到几分钟时，则该可稳定受光时间例如是几秒到十秒程度。但是，PCR反应的初始循环中荧光检测量在检测极限以下，PCR反应的后期的循环为冻结状态，在严格意义上为了确保定量性，将是指处于指数函数的PCR扩增能够观察的扩增曲线的范围内。本发明中，利用可稳定受光时间能够用于测量端的反应容器间的移动时间这一情况，在该可稳定受光时间内进行从该反应容器进行受光所需的相对移动，从而能够不使用复杂的光学系统、且不扩大装置规模，由与反应容器个数相比充分少的个数或一个测量器，大致并行进行从多个反应容器进行的受光。
[0061]“光学状态”是发光、显色、变色或变光等的状态。基于光学状态的光是指发光或变光形成的光、针对显色或变色所照射的光的反射光或透射光、散射光等。
[0062]“上述各连接端与上述测量端依次光学连接”是指上述连接端与上述测量端以极近距离相向而进行光学连接。连接的瞬间相当于上述测量器接收的光量的极大值，所以上述测量控制部通过算出该光量的极大值来确定待测量的数据。
[0063]“测量器”例如能够进行荧光、化学发光的测量，前者的情况下，包括滤光片，用于进行一种或两种以上的激发光的照射、进行一种或两种以上的波长的荧光的受光。优选使用光纤对这些光进行导光。
[0064]“测量端”至少具 有设于上述测量器的待接收的光的入射口，在荧光测量的情况下具有待照射的光的射出口。这些能够作为别的测量端而设置。另外，上述入射口或射出口与由设于内部的光电元件构成的受光部或照射源光学连接。此时，能够经由各个受光用导光部或照射用导光部进行连接。
[0065]另外，在上述反应容器用光测量装置中，此外，虽未明示但还具有“测量控制部”，“测量控制部”控制上述测量器和导光切换机构，由内置于上述反应容器用光测量装置的计算机(CPU (Central Processing Unit:中央处理器))和驱动该计算机的程序构成,例如通过DA (Direct Current-Alternating Current:直流交流)转换器将信号发送给驱动上述移动机构的该控制部，从而实现测量控制。
[0066]第15发明:在上述反应容器系统中，上述容器组中还具有两个以上液收容部，该液收容部收容悬浮有能够捕获检体、反应的目标物的磁性粒子的磁性粒子悬浮液、用于上述目标物的分离和提取的分离提取用溶液；上述容器组中还具有磁力部，该磁力部能够对安装于上述嘴的上述分注头或设于上述容器组的液收容部的内部施加和除去磁场而能够将上述磁性粒子吸附于上述分注头或上述液收容部的内壁。
[0067]发明效果
[0068]根据第I发明，反应容器由广口管部和细口管部构成，可穿孔薄膜设成将广口管部和细口管部之间分隔，在细口管部内收容有反应用试剂或其一部分。因此，能够防止穿设上述薄膜时或反应处理时液体飞散。另外，用于在与光测量器之间导光的连接部与上述广口管部的连接之际，通过该连接部的内部的导光部能够将细口管部内的光切实地引导至测量器。
[0069]根据第2发明，由于细口管部的开口部设于广口管部的底部的中央，所以与连接部连接之际，通过该连接部的内部的导光部能够将细口管部内的光切实地引导至测量器，并且由于底部的周边被剩余，所以能够利用此处，切实地附着薄膜或切实地支承分体设置的细口管部。
[0070]根据第3发明，除了第I发明的效果外、由于细口管部与广口管部一体形成，所以成形容易。
[0071]根据第4发明、第11发明、第12发明或第13发明，由于广口管部与细口管部分体形成，薄膜附着于细口管部的开口缘部，所以将多个细口管部以平面状排列后，用大的薄膜一次性附着于多个细口管部的开口缘部，对齐细口管部的开口缘部而一并进行切断，所以能够切实地且容易地将上述薄膜附着于细口管部的开口部。
[0072]根据第5发明，由于设有密闭盖，该密闭盖安装于上述反应部的广口管部的开口部，密闭反应容器，并具有透光性，所以能够切实地进行温度控制和光测量。
[0073]根据第6发明，由于设有压入部，该压入部将穿孔后的可穿孔薄膜压入细口管部的内壁，所以能够防止上述薄膜遮断导光，能够进行可靠性高的测量。
[0074]根据第7发明，由于广口管部或密闭盖与设有导光部的前端的连接部连接，从而不需移动光测量器就能够从多个反应容器依次向一个光测量器进行导光，所以与针对每个反应容器设置光测量器的情况相比较，能够使装置规模紧凑。
[0075]根据第8发明，由于密闭盖能够利用其空洞，移动安装在设于嘴等反应容器外的部件或连接部上，并且能够 通过与连接部连接而与光测量器进行光学连接，所以利用分注装置能够进行密闭盖的移动、按压等，能够不设置新的机构而提供紧凑的装置。
[0076]第9发明中，由于在盒容器的基板设置排列为一列状的两个以上的凹部，在其中一个凹部设有反应用收容部，所以可穿孔薄膜设于比基板面靠下方，从而能够切实地防止穿孔时、温度控制时、分注时液体飞散导致交叉污染。另外，沿基板面接近的状态下能够进行分注头等的移动，所以能够防止交叉污染并容易进行移动控制。
[0077]第10发明中，通过在一个盒容器中一列状地设置上述反应用收容部、密闭盖收容部、穿孔用尖头收容部和分注头收容部，从而利用分注装置，能够使用同一嘴执行对上述反应用收容部的分注、可穿孔薄膜的穿孔和密闭盖的安装。另外，能够防止液体飞散导致的交叉污染，并且能够防止装置规模的扩大。
[0078]根据第14发明，利用设于导光用架台的连接部连接多个反应容器并与反应容器内光学连接，从而将反应容器内的光学状态经由多个上述反应容器和导光用架台以及导光部传递至连接端排列体的排列面的连接端，将沿连接端排列体的排列面上的规定路径排列的连接端和测量器的测量端依次光学连接。因此，与相对反应容器的开口部直接扫描测量端的情况相比较，能够防止测量端和液面之间的光的散射导致的衰减和光的泄漏，并能够重新进行连接端的排列以使与测量端的连接切实、迅速且顺畅地进行，所以能够进行可靠性高的测量、以及更有效率且迅速的反应容器内光学状态的测量。
[0079]因此，考虑到可稳定受光时间、测量端的结构等，能够通过使整体的上述连接端的排列区域或相邻的连接端之间的距离比连接部的排列区域或相邻的距离小的集成化、相比于连接部的排列使规定路径的直线化、曲率半径的扩大带来的测量端的移动的顺畅化来实现。
[0080]由于通过测量端与连接端之间的沿排列面上的上述规定路径的移动来进行光学系统的切换，所以能够简化光学系统的结构。
[0081]上述连接端相对于测量端的移动包括连续或间歇的移动。实时PCR的测量结果作成扩增曲线能够用于DNA的初始浓度的确定等各种分析上。
[0082]另外，由于能够利用可稳定受光时间而由一个测量器并行进行多个反应容器的测量，所以能够削减测量器的个数，抑制装置规模的扩大，削减制造成本。另外，沿预先规定的规定路径依次以最短距离在测量端与连接端之间进行移动而能够进行测量，所以能够仅以移动机构的简单机构并行进行测量。
[0083]由连接部直接或间接地连接反应容器的开口部，从而封闭反应容器而进行反应和测量的情况下，可进行能够切实地防止交叉污染和光的混入的可靠性高的自动测量。
[0084]根据第15发明，自目标物从检体的提取到收容于反应用收容部、稳定控制(反应)以及光测量为止，能够通过一个装置一贯地自动进行而无需进行容器组所属的容器的置换。
【专利附图】
【附图说明】
[0085]图1是表示本发明的第I实施方式的反应用收容部的图。
[0086]图2是与本发明的第I实施方式的反应用收容部有关的处理说明图。
[0087]图3是表示本发明的第I实施方式的密闭盖以及安装了该密闭盖的反应用收容部的图。
[0088]图4是本发明 的第I实施方式的反应用收容部连接了连接部的图。
[0089]图5是本发明的第2实施方式的反应用收容部及其处理的说明图。
[0090]图6是本发明的第2实施方式的反应用收容部连接了连接部的图。
[0091]图7是本发明的第3实施方式的反应用收容部及其处理的说明图。
[0092]图8是表示本发明的第4实施方式的密闭盖以及安装了该密闭盖的反应用收容部的图。
[0093]图9是本发明的第4实施方式的反应用收容部连接了连接部的图。
[0094]图10是表示本发明的第5实施方式的盒容器的图。
[0095]图11是表示本发明的第6实施方式的盒容器的图。
[0096]图12是表示本发明的第7实施方式的实施方式的反应容器系统的整体立体图。
[0097]图13是将图12所示的反应容器系统的容器组放大表示的俯视图。
[0098]图14是将图12所示的反应容器系统的嘴头的整体放大表示的俯视图。
[0099]图15是表示图14所示的反应系统的嘴头的表侧立体图。
[0100]图16是更具体地表示图14所示的移动机构和吸引排出机构的立体图。
[0101]图17是更具体地表示图14所示的吸引排出机构的立体图。
[0102]图18是图14所示的嘴头从背侧观察的立体图。
【具体实施方式】
[0103]接着，基于【专利附图】
【附图说明】本发明的实施方式。另外，该实施方式只要没有特别指定，就不应解释为对本发明限制。另外，在各实施方式中相同的内容使用相同的附图标记，其说明省略。
[0104]图1 (a) (b)表示作为本发明的第I实施方式的反应容器的反应用收容部。
[0105]该反应用收容部I具有:细口管部lb，能够收容作为核酸扩增用的反应试剂的核酸扩增用溶液或其一部分；广口管部la，与该细口管部Ib连通，设于该细口管部Ib的上侦牝且具有比上述细口管部Ib的开口部Ie宽的开口部；及设置成将该广口管部Ia和细口管部Ib之间分隔并由铝箔等形成的可穿孔薄膜lc。细口管部Ib以空的状态由上述薄膜Ic密封，从而能够防止细口管部Ib的污染。该细口管部Ib的开口部Ie设于上述广口管部Ia的底部Id的中央部。另外，该细口管部Ib与广口管部Ia —体形成，上述薄膜Ic附着于上述广口管部Ia的底部Id。 [0106]图2表示使用安装于后述的嘴头50的穿孔用尖头212将图2 Ca)所示的反应用收容部I的上述薄膜Ic如图2 (b)所示地穿孔的情况下的动作。如图2 (c)所示,表示该薄膜Ic被穿孔后收容了反应试剂溶液的状态。
[0107]图3是表示本发明的第I实施方式的由密闭盖251和用该密闭盖251密闭的反应用收容部I构成的反应容器2。
[0108]如图3 (a)、图3 (b)所示，具有透光性的上述密闭盖251具有透光性，包括:栓部251a，能够与广口管部Ia的开口部嵌合；及圆筒部件251c，设于该栓部251a的上侧，且在外侧面排列有沿着轴向的多个突条251b，在栓部251a沿其外周设置设有沿半径方向突出的环状突部251e而与广口管部Ia的内壁密接。在栓部251a的下侧设有压入部251d，该压入部251d插入细口管部Ib的开口部而将穿孔后的可穿孔薄膜Ic向开口周缘压入。
[0109]如图4所示，由被密闭盖251密闭的反应用收容部I构成的反应容器2进一步分别收容于多个凹部中，该凹部以一列状(附图的由表及里方向)排列于进行核酸扩增反应所需的温度控制的温度控制器29的块部29a。该块部29a通过帕尔贴元件29b和散热片29c加热冷却。在上述反应用收容部I的上侧设置导光用架台147，该导光用架台147以一个测量器移动而能够与多个反应用收容部I依次光学连接的方式被载置，多个连接部141i向上述导光用架台147的下方突出，也以一列状(附图的由表及里方向)被接收。各连接部141插入各密闭盖251的空洞251f内，在该连接部141的内部通过的导光部142具有覆盖细口管部Ib的开口部的程度的大小，所以能够将细口管部Ib内的光通过该导光部142没有剩余地可靠地引导至上述导光用架台147上的测量器。由此，利用进行使用了实时PCR法的核酸(DNA、RNA等)或其片段(寡聚核苷酸、核苷酸等)的扩增反应时产生的荧光等稳定的可受光时间使一个测量器移动，从而能够进行与多个反应用收容部I相关的测量，能够使整体装置结构紧凑化。附图标记143是透镜、附图标记144是热盖(hot lid)、附图标记145是加热片、附图标记146是隔热材料、附图标记148是透镜的压环。通过这些结构，可防止核酸扩增反应的征候(sign)在上述密闭盖251结露。另外，设于导光用架台147的槽149引导测量器的移动(附图的由表及里方向)以使上述测量器能够依次与对应上述各反应用收容部I的导光部142连接。
[0110]图5是本发明的第2实施方式的反应用收容部3及其处理的说明图。
[0111]如图5 (a)所示，第2实施方式的反应用收容部3具有:细口管部3b，预先收容作为核酸扩增用的反应试剂的核酸扩增用溶液或其一部分3f ;广口管部3a，与该细口管部3b连通，设于该细口管部3b的上侧，且具有比上述细口管部3b的开口部3e宽的开口部；及设置成将该广口管部3a和细口管部3b之间分隔并由铝箔等形成的可穿孔薄膜3c。细口管部3b由上述薄膜3c密封，从而能够防止收容在细口管部3b内的试剂的蒸发、污染。该细口管部3b的开口部3e设于上述广口管部3a的底部3d的中央部。另外，该细口管部3b和广口管部3a —体形成，上述薄膜3c附着于上述广口管部3a的底部3d。
[0112]图5 (b)表示为了使用安装于后述的嘴头50的穿孔用尖头212对图5 (a)所示的反应收容部I的上述薄膜3c进行穿孔而位于其上方的状态。图5 (c)表示通过使该穿孔用尖头212下降而使前端插入细口管部3b内并将上述薄膜3c穿孔后的状态。图5 Cd)表示呈以下状态并由密闭盖251和反应用收容部I构成的反应容器4:使上述密闭盖251的栓部251a嵌合在上述薄膜3c被穿孔后的反应用收容部3的广口管部3a内、且由设于栓部251a的前端的压入部251d将上述被穿孔后的上述薄膜3c压附于上述细口管部3b的开口部的内壁。
[0113]图6 (a)、图6 (b)表示本发明的第2实施方式的反应用收容部3连接了连接部311的情况。
[0114]呈以下状态:上述密闭盖251的栓部251?与具有穿孔后的薄膜3Cl的上述反应用收容部3的广口管部3a嵌合、且该薄膜3Cl由压入部251屯压附于细口管部3匕的内壁。另外，还呈以下状态:在上述密闭盖25h的空洞251f\中插入了后述的连接部31lt)
[0115]图6 (a)表示以下状态:从后述的导光用架台32的水平板32a向下侧突出的上述连接部31i (此处例如i = I)经由安装于上述反应用收容部3的广口管部3&i上的具有透光性的密闭盖251i而与该反应用收容部3间接连接，在该密闭盖251i的空洞内插入上述连接部31i并其端面与上述密闭盖251i的空洞的底面密接。该反应用收容部3i由广口管部3&i和与该广口管部3&i 连通且形成得比广口管部3&i细的细口管部Sbi构成，在该细口管部3bi预先收容有预先被干燥或液体状态的扩增用溶液3fit)此处，实时用扩增用试剂例如为70yL的由酶、缓冲液、引物等构成的预混试剂(MasterMix) (SYBR (注册商标)GreenMix)。
[0116]在该广口管部2354勺开口部，具有透光性的上述密闭盖251i的向下侧突出的环状的压入部251屯插入细口管部中，该环状的压入部521屯包围该密闭盖251i的光透射的中央部以使该密闭盖251i安装于反应用收容部3i;因而在上述连接部31i的内部通过的作为导光部的光纤(束)33i的直径大于或等于上述细口管部3bi的开口部的直径的大小为优选。由此，能够切实地接收来自上述反应用收容部3i的光。该细口管部3bi收容在由温度控制器29进行加热或冷却的温度控制用块体内。
[0117]该例子中，光纤(束)33i由能够与上述第2测量端43」连接的照射用光纤(束)332i和能够与上述第I测量端42」连接的受光用光纤(束)331j构成。
[0118]图6 (b)表不上述光纤(束)33i由光纤束构成的例子,其中该光纤束是将由能够与上述第2测量端43连接的多根受光用光纤构成的光纤束和由能够与上述第I测量端42j连接的多根照射用光纤构成的光纤束均质地混合而成的。
[0119]图7是本发明的第3实施方式的反应用收容部5及其处理的说明图。
[0120]如图7 (b)所示，第3实施方式的反应用收容部5具有:细口管部5b，预先收容作为核酸扩增用的反应试剂的核酸扩增用溶液或其一部分5f ;广口管部5a，与该细口管部5b连通，设于该细口管部5b的上侧，且具有比上述细口管部5b的开口部5e宽的开口部；及设置成将该广口管部5a和细口管部5b之间分隔并由铝箔等形成的可穿孔薄膜5c。
[0121]如图7 Ca)分解所示，第3实施方式的反应用收容部5与第I或第2实施方式的反应用收容部1、5不同，在该反应用收容部5中，上述广口管部5a与上述细口管部5b分体形成，在该广口管部5a的底部5d的中央穿设孔部5h，上述细口管部5b沿其开口部5e的外周具有包围该开口部5e的开口缘部5g，上述细口管部5b中除了上述开口缘部5g之外设成能够贯通上述孔部5h，上述细口管部5b以贯通上述孔部5h的方式从上述广口管部5a的上述孔部5h向下方突出，上述开口缘部5g安装于上述广口管部5a的底部5d，上述薄膜5c附着于上述细口管部5b的上述开口缘部5g。图7 (c)表示为了使用安装于后述的嘴头50的穿孔用尖头212对图5 (b)所示的反应用收容部5的上述薄膜5c进行穿孔而位于其上方的状态。图5 (d)表示通过使该穿孔用尖头212下降而使前端插入细口管部5b内并将上述薄膜5c穿孔后的状态。
[0122]在制造第3实施方式的反应用收容部5时，如图7 (a)所示，例如使用P.P.或P.E.通过吹塑成形或注塑成形等制造在底部5d的中央穿设有孔部5h的广口管部5a，并且，例如使用P.P.或P.E.通过吹塑成形等分体制造沿开口部5e的外周具有包围该开口部5e的开口缘部5g的细口管部5b。
[0123]在步骤2中，在上述细口管部5b内收容反应试剂或其一部分5f。
[0124]在步骤3中，通过涂敷粘接剂、使用热熔接或超声波熔接以没有空隙的方式将可穿孔薄膜5c附着于该细口管部5b的开口缘部5g的上侧，从而封闭开口部5e，将上述反应试剂或其一部分5f封入细口 管部5b内。另外，薄膜由铝层和树脂层构成。
[0125]在步骤4中，上述细口管部5b中除了其开口缘部5g之外贯通上述广口管部5a的上述孔部5h而向下方突出，通过涂敷粘接剂、使用热熔接或超声波熔接等以没有空隙的方式将上述开口缘部5g的下侧附着安装在上述广口管部5a的底部5d的上侧，从而制造上述反应用收容部5。此处，作为粘接剂例如使用单液湿气硬化型多用途弹性粘接剂(例如HT-Bond Miracle4)。
[0126]图8表示作为使用了第3实施方式的反应用收容部5的其他例的反应容器6、7。
[0127]图8 (a)是表示密闭盖252的图，沿上述栓部252a的下侧的边缘以包围压入部252d的方式而设有O型圈252h。由此，将该密闭盖252也就是上述栓部252a嵌合于上述反应用收容部5的广口管部5a的情况下，将附着于上述细口管部5b的开口缘部5g的上述薄膜5c和上述密闭盖之间密封，能够进行没有液体泄漏的处理。
[0128]图8 (b)是表示密闭盖253的图，沿设于上述栓部253a的前端的压入部253d的前端的外周设有环状突起253h。由此，能够将穿孔后的上述薄膜5c切实地压附于上述细口管部5b的内壁。
[0129]图9是表示将连接部33i连接在图8 (b)所示的反应容器7的上述密闭盖253i上的状态的图。
[0130]图10是表示本发明的第5实施方式的盒容器9的图，还具有设于基板8j的四个凹部(8、8k、81、8m)排列成一列状而成的基板8j，在凹部(8)中形成反应用收容部8，在凹部(8m)中具有收容密闭盖253的密闭盖收容部8m，在凹部(81)中具有收容穿孔用尖头212的穿孔用尖头收容部81，在凹部(8k)中具有收容分注头211的分注头收容部8k。[0131]在制造该盒容器9时，在步骤Si中，如图10所示，例如使用P.P.或P.E.通过吹塑成形或注塑成形等制造四个凹部8a、8k、81、8m排列成一列状并且在上述凹部(广口管部)8a的底部8d的中央穿设有孔部8h的基板8j，并且，例如使用P.P.或P.E.通过吹塑成形等分体制造在开口部8e的外周具有包围该开口部8e的开口缘部8g的细口管部8b。
[0132]在步骤s2中，在上述细口管部8b内收容反应试剂或其一部分8f。
[0133]在步骤s3中，通过涂敷粘接剂、使用热熔接或超声波熔接等以没有空隙的方式将可穿孔薄膜8c附着于上述细口管部Sb的开口缘部Sg的上侧，从而由该可穿孔薄膜Sc封闭开口部Se，将上述反应试剂或其一部分8f封入细口管部Sb内。另外，薄膜由铝层和树脂层构成。
[0134]步骤s4中，上述细口管部8b中除了其开口缘部8g之外贯通上述广口管部8a的孔部8h而向下方突出，通过粘接剂的涂敷、热熔接或超声波熔接等以没有空隙的方式将上述开口缘部8g的下侧附着安装在上述广口管部8a的底部8d的上侧述。此处，作为粘接剂例如使用单液湿气硬化型多用途弹性粘接剂(例如HT-Bond Miracle4)。
[0135]在步骤s5中，将上述分注头211、穿孔用尖头212以及密闭盖253收容于各凹部8k、81、8m，从而制造上述盒容器9。
[0136]图11是表示本发明第6实施方式的盒容器201的图，在图10所示的盒容器9上沿凹部排列的列方向(嘴的移动轨迹)设有分隔壁20L。将其用附图标记。。^来表示。作为使用了该盒容器201i的反应容器系统的反应容器用光测量装置10在以下说明。
[0137]以下，基于图12~图18，更具体地说明上述的本发明的第7实施方式的作为反应系统的反应容器用光测量装 置10。图12是表示上述反应容器用光测量装置10的外观的透视立体图。
[0138]图12 (a)是表示该反应容器用光测量装置10的外观的图，例如是纵500mm (Y轴方向)、横600mm (X轴方向)、高度600mm (Z轴方向)的大小，在其内部具有:收容了上述容器组20、嘴头50、图1说明的嘴头移动机构51以及CPU+程序的框体11 ;设于上述框体11的操作面板13 ;及设有工作台的抽屉15。
[0139]图12 (b)是透视上述框体11内部的立体图，组装了容器组20的工作台设置成能够通过上述抽屉15而向外部抽出，进而上述嘴头50设置成能够通过图1的上述嘴头移动机构51向X轴方向移动。
[0140]如图12 (b)所示，该嘴头50大致包括:具有上述排列体Y轴移动机构41、架台Z轴移动机构35以及嘴Z轴移动机构75的各种移动机构52 ;可横动嘴吸引排出机构17 ;上述测量器40 ;连接端排列体30 ;光纤(束)33i ;上述磁力部57。另外，上述可横动嘴吸引排出机构17以及该可横动嘴7、由上述排列体Y轴移动机构41支承为能够以在专用区域20i中横动的方式向Y轴方向移动。
[0141]图13是放大表示图12所示的容器组20的俯视图。该容器组20中，长度方向沿着X轴方向并一列状地排列有收容部的12个专用区域20i (i = 1，…，12)例如间距为18mm而与Y轴方向平行排列。在各专用区域20i中分体设有本发明第6实施方式的PCR扩增用的盒容器2011、核酸提取用的盒容器2021、尖头收容用盒容器203”另外，各专用区域2(^的盒容器201^202^2034^ X轴方向的单侧的边缘上设有分隔壁201^202^203。，可防止专用区域20i之间的交叉污染。[0142]上述PCR扩增用盒容器201具有:上述反应用收容部Si，经由更具有透光性的一个密闭盖253i以能够拆装的方式连接在设于上述导光用架台32上的12个上述连接部31i上，并且预先收容有PCR反应所需的缓冲液等核酸扩增用溶液；收容了上述密闭盖253i的密闭盖收容部25i ;尖头等收容部21i，分别收容用于对覆盖上述反应用收容部Si以及细口管部Sbi的可穿孔薄膜Sc进行穿孔的穿孔用尖头212i以及分注头211，其中，优选设置显示与该PCR扩增用盒容器201i有关的上述检体信息和检查信息的条形码。
[0143]上述核酸提取用的盒容器202i具有收容核酸提取用的各种试剂的例如7个液收容部272i ;收容被提取的核酸的反应用管232i ;显示与该盒容器相关的各种信息、例如检体信息以及检查信息的条形码82it)上述反应用收容部Si以及上述反应用管232i能够由上述温度控制器29控制温度。 [0144]上述尖头收容用盒容器203i具有收容部21i;该收容部2^收容能够对覆盖上述核酸提取用盒容器202i的薄膜进行穿孔的穿孔用尖头、进行少量液体的分注的两根少量分注头、通过从外部施加且除去磁力而能够将磁性粒子吸附于内壁并分离的分离用分注头等，优选具有显示与该盒容器203,相关的各种信息的条形码。
[0145]上述反应用收容部Si的容量为约200 μ L程度、其他的各反应容器、各液收容部以及管的容量为约2mL程度。
[0146]上述反应用收容部Si用于核酸及其片段的扩增，通过上述温度控制器29例如基于热循环仪(4°C到95°C)等的规定扩增法进行温度控制。该反应用收容部Si例如图10(b)所示形成两段，具有设于下侧并收容上述扩增用溶液Sfi的细口管部Sbi和设于上侧并能够嵌合上述密闭盖253i的广口管部8ait)该广口管部8?的内径例如为8mm，细口管部Sbi的开口部的内径例如为5_程度。在收容于反应管收容孔中的反应用管232i中，为进行培养(incubation)例如温度控制在55°C的恒温状态。
[0147]上述液收容部组272i中如下所示地收容分离提取用溶液。在第I液收容部中收容40 μ L的溶菌(Lysis) 1，在第2液收容部中收容200 μ L的溶菌2，在第3液收容部中收容500 μ L的结合缓冲液，在第4液收容部中收容磁性粒子悬浮液，在第5液收容部中收容700 μ L的清洗液1，在第6液收容部中收容700 μ L的清洗液2，在第7液收容部中收容50 μ L的蒸馏水作为分解液，在稍离开的第8液收容部中收容1300 μ L的用于蛋白质去除等的异丙醇(isopropanol)来作为上述蛋白质分离提取用溶液的一部分。其各开口部通过可穿孔薄膜覆盖，从而上述各试剂等被预包装。
[0148]此外，在另设的蒸馏水槽中收容1.2mL的蒸馏水，对应各专用区域2(^的每一个另行准备有收容细菌、细胞等悬浮液或全血等检体的管。
[0149]图14表示本发明的第7实施方式例的嘴头50的主视图以及侧视图，并且图15表示从正面侧观察的立体图。
[0150]该嘴头50具有:排列了 12个嘴71i的嘴排列部70 ;能够对安装在上述嘴Yli上的分注头211i进行拆卸和安装的尖头拆装机构59 ;吸引排出机构53 ;具有12个设成能够相对上述分注头21^进行连接和分离的磁铁571的磁力部57 ;导光用架台32 ;设于该导光用架台32上的12个连接部31i ;具有嘴Z轴移动机构75和架台Z轴移动机构35的移动机构部52 ;从连接部31i向后侧延伸的具有可挠性的作为导光部的光纤(束)33i ;连接端排列体30 ;该排列体Y轴移动机构41 ;具有测量端44的测量器40 ;可横动嘴7^ ;该可横动嘴71。的吸引排出机构17。
[0151]在上述嘴排列部70设有支承12根缸体531i使其以规定的上述间距例如18mm沿Y轴方向排列的缸体支承部件73，在各缸体531i的下方的前端以与该缸体531i连通的方式设有上述嘴7Iit5
[0152]尖头拆装机构59在两侧设有拆装用主轴593并具有将12根分注头21 Ii通过使其沿上下方向滑动而相对嘴71i进行拆装的尖头拆装部件591。
[0153]如图16或图17具体所示，上述尖头拆装部件591与两根尖头拆装用主轴593的下降联动地使分注头211i相对上述嘴71i进行拆装。上述尖头拆装用主轴593由以向上方施力的方式卷绕于外周的弹簧600弹性地支承于上述缸体支承部件73，其上端比上述缸体531,的上端靠上方、而比后述的缸体用驱动板536的通常的吸引排出的上下移动范围的下限位置靠下方。通过上述缸体用驱动板536超过上述上下移动范围而下降至缸体53込的上端附近，两根该尖头拆装用主轴593被向下方按压，从而使尖头拆装部件591下降。在该导通拆装部件591上，具有比上述嘴71的外径大但比作为上述分注头211的最大外径的安装部211iC小的内径的12个孔以上述间距排列以供该嘴71i贯通。
[0154]如图16或图17具体所示，上述吸引排出机构53具有:与上述嘴71i连通而用于对安装于该嘴71的分注头21 Ii的内部进行气体的吸引排出的上述缸体531i以及在缸体53込内滑动的活塞用杆532 ;驱动该活塞用杆532的驱动板536 ;与该驱动板536螺纹接合的滚珠丝杠533 ;轴支承该滚珠丝杠533并与上述缸体支承部件73 —体形成的嘴Z轴移动体535 ;及载置于该嘴Z轴移动体535上并且旋转驱动上述滚珠丝杠533的马达534。
[0155]上述磁力部57具有设成能够与可拆装地安装在上述嘴71i上的分注头211i的细径部211ia接近或分离、且能 够对分注头211i内施加且去除磁场的磁铁571。
[0156]如图16具体所示，上述嘴Z轴移动机构75具有:滚珠丝杠752，与上述嘴Z轴移动体535螺纹接合而使该Z轴移动体535沿Z轴方向上下移动；嘴头基体753，轴支承该滚珠丝杠752，并在其下侧将上述磁铁571支承为能够沿X轴方向移动并且通过后述的嘴头移动机构51而其自身能够沿X轴方向移动；及马达751，设于该嘴头基体753的上侧并旋转驱动上述滚珠丝杠752。
[0157]如图16具体所示，上述导光用架台32由剖面L字状板的水平板32a和垂直板32b构成，能够与上述PCR用管231的各开口部直接或间接连接，具有与所连接的上述PCR用管231i内部光学连接的光纤(束)33i的前端的12个圆柱状的连接部31i从上述水平板32a向下方突出设置。另外，在该连接部31i的根基处内置有对安装在该连接部31i上的密闭盖25込进行加热来防止结露的加热器37。该加热器37的温度例如预先设定为105°C程度。该导光用架台32通过上述嘴头架台Z轴移动机构35能够沿Z轴方向移动地支承在嘴头基体753上，所以能够在嘴X轴方向和Z轴方向上移动。
[0158]该架台Z轴移动机构35具有:设于上述嘴头基体753的侧板355 ;架台驱动用带状部件354，由架设在轴支承于该侧板355的沿垂直方向排列的两个链轮353之间的时序带352支撑而沿Z轴方向上下移动；及马达，安装在上述嘴头基体753的背侧来旋转驱动该链轮 353。
[0159]如图17所示，在上述可横动嘴吸引排出机构17，在上述吸引排出机构17的下侧、上述嘴7、的上侧设有尖头拆装机构592。另外，嘴上述吸引排出机构17上设有数码相机19。该吸引排出机构17安装在架设于由马达172旋转驱动的两个链轮173之间的时序带171上，设置成能够沿Y轴方向移动。
[0160]图18是上述第7实施方式的嘴头的从背面侧进行观察所得的两个立体图，表示使上述连接端排列体30的各连接端和上述各测量端依次光学连接时的、连接开始位置(图18(a))和连接终止位置(图18 (b))。
[0161]具有:连接端排列体30，在上述连接部31i设置光纤(束)33,的前端，贯通上述导光用架台32的水平板32a，其后端对应各连接部31i而设置，将连接端3七在作为规定路径的沿Y轴方向的直线的路径上以比各连接部31i的间隔短的间隔排列在排列面上；和测量器40，与上述排列面接近或接触地设置，具有能够与该各连接端31沿上述直线依次光学连接的6个测量端，通过该连接端和该测量端的光学连接能够接收上述反应用收容部Si内的形成光学状态的荧光并能够照射激发光。
[0162]另外，在上述导光用架台32，从连接部31i正上方的水平板32a向上方突出设置有筒状体311i，该筒状体31^对从上述连接部31i向后侧延伸的光纤(束)33i以在内部穿通的方式进行保持以防止该光纤(束)33?弯折。同样地，在上述连接端排列体30，在连接端31侧也设置有筒状体301，该筒状体301i对从连接端31延伸的光纤(束)33i以在内部穿通的方式进行保持以防止该光纤(束)33?弯折。
[0163]使该连接端排列体30沿Y轴方向移动的上述排列体Y轴移动机构41具有:设于上述连接端排列体30的臂部412、413 ;使该臂部412、413和时序带结合的结合体411 ;将结合体411沿Y轴方向移动引导的导轨414 ;架设该时序带并沿Y轴方向排列的两个链轮。
[0164]上述测量器40是与荧光的测量对应的装置，由与六种荧光的测量对应地沿作为上述规定路径的Y轴方向的直 线以直列状排列的六种特定波长测量器40j构成，固定设置在嘴头50的基体、例如包围移动机构部52的框架或对其进行支承的部件上。因此，测量器40不会通过设于上述移动机构部52的机构而移动。
[0165]上述测量器40具有多种(本例子中为六种)特定波长测量器40」(j =
1,2, 3,4, 5,6)的测量端，因此，这种情况下，使特定波长测量器4(^_自身排列成一列状而使用固定件45」一体地固定在与上述嘴头基体753连结的部件上。各特定波长测量器40」具有:作为规定路径沿上述Y轴方向的直线状的路径排列以与上述连接端31依次光学连接的测量端44」；光检测部46」，内置有光学系统，该光学系统具有对上述PCR用管231i照射激发光的照射源以及接收由上述反应用收容部Si产生的荧光的受光部；以及电路基板47」。上述测量端44」具有与上述照射源光学连接的第I测量端42」和与上述受光部光学连接的第2测量端43」。此处，光检测部46」和电路基板47」相当于上述测量器主体。
[0166]当连接部31i间的间距例如为18mm时，各连接端3七之间的间距例如为其一半即9mm。这样一来，上述测量端44」间的间距例如为9mm以下。
[0167]该各特定波长测量器啤的测量端41的第I测量端42」和第2测量端43」存在沿上述规定路径且沿Y轴方向的直线在横向(Y轴方向)上并列排列的情况和在纵向(X轴方向)上并列排列的情况。前者的情况下，不停止激发光的发光，以基于上述连接端排列体的速度、连接端间的间距、测量端的第I测量端与第2测量端之间的距离、测量端间的间距来规定的受光的时序，各测量器依次进行受光。
[0168]另一方面，后者的情况下，如图18所示，关于连接端，设置第I连接端和第2连接端，第I连接端仅与上述第I测量端42」连接，第2测量端43」仅与第2连接端连接，上述规定路径为两条路径，光纤(束)33,包括具有上述第I连接端的受光用光纤(束)331,和具有第2连接端的照射用光纤(束)332it)这种情况下，与前者的情况相比较，照射源和受光部通过专用光纤而与上述连接部连接，所以控制容易，能够采用分别适合照射和受光的光纤，可
靠性高。
[0169]上述连接端排列体30相对于上述测量端44」的速度是考虑到上述可稳定受光时间、荧光针对激发光照射的寿命、连接端的个数以及连接端间的间距等(规定路径的距离)而规定的，例如实时PCR的测量的情况下，被控制为秒速IOOmm到500mm。本实施方式中，由于使排列面相对于上述测量端44滑动而进行移动，所以能够防止杂光向测量端44射入。另外，上述连接端排列体30以按照每当前进一个上述连接端间或测量端间的间距则瞬间停止的方式间歇或连续地相对于上述测量端进行移动。
[0170]接着，关于使用第7实施方式的反应容器用光测量装置10进行包含细菌在内的检体的核酸的实时PCR的一连串处理动作进行说明。关于以下的步骤SI到步骤S11，相当于分离提取工序。
[0171]在步骤SI中，打开图12所示的反应容器用光测量装置10的抽屉15，抽出上述容器组20，利用与该容器组20另行设置的上述检体等的供给装置等，预先供给检查对象的检体、各种清洗液、各种试剂，另外，预先安装预包装了试剂等的液收容部。
[0172]在步骤S2中，使容器组20复原并关闭上述抽屉15之后，通过上述操作面板13的触屏等的操作来指示分离提取和扩增处理的开始。
[0173]在步骤S3中，上 述反应容器用光测量装置10的CPU +程序的核酸处理控制部中设置的提取控制部对上述嘴头移动机构51进行指示，使上述嘴头50沿X轴方向移动，使安装在上述嘴71i上的穿孔用尖头位于上述容器组的液收容部组27,的最初的液收容部的上方，通过嘴Z轴移动机构75使嘴下降，从而对覆盖上述液收容部的开口部的薄膜进行穿孔，同样地，使上述嘴头50沿X轴方向移动，关于该液收容部组27i的其他液收容部和反应容器组23i也进行依次进行穿孔。
[0174]在步骤S4中，使上述嘴头50再次沿X轴方向移动，移动到尖头等收容部组211i，并且通过上述嘴Z轴移动机构75使上述各嘴71i下降，安装分注头211”接着，通过上述嘴Z轴移动机构75使该分注头21 Ii上升后，并通过上述嘴头移动机构51而沿X轴移动，进入上述液收容部组27i的第8液收容部中，从该液收容部吸引规定量的异丙醇(isopropanol)，并再次使该分注头211沿X轴移动，以规定量逐一地分注收容在第3液收容部和第5液收容部中的溶液成分(Nacl (氯化钠)、SDS (十二烷基硫酸钠)溶液)以及收容在上述第6液收容部中的蒸馏水，从而在第3、第5、第6各液收容部内作为分离提取用溶液分别调制500 μ L的结合缓冲液(NaCl、SDS、异丙醇)、700μ L的清洗液I (NaCl、SDS、异丙醇)、以及700 μ L的清洗液2 (50%水、50%异丙醇)。
[0175]在步骤S5中，分注头21 Ii的细径部21 Iia移动到尖头等收容部组21i内另行收容有检体的检体用管后，使用嘴Z轴移动机构75使分注头21^的细径部211^下降插入，使上述吸引排出机构53的驱动板536上升或下降，从而对于收容在该检体用管中的检体的悬浮液，反复进行吸引排出而使该检体在液体中悬浮后，将该检体悬浮液吸引在分注头211i内。该检体悬浮液通过上述嘴头移动机构51沿X轴而移动到收容有作为分离提取用溶液的溶菌I (酶)的液收容部组27i的第I液收容部，通过被穿孔后的薄膜的孔而插入上述分注头21込的细径部211^，为了搅拌上述检体悬浮液和上述溶菌I而反复进行吸引排出。
[0176]在步骤S6中，所搅拌的该液体的全部量由上述分注头211i吸引，收容在由上述恒温控制部设定为55°C的保持在上述收容孔中的各反应用管232i中，进行培养。由此，含于上述检体中的蛋白质被破坏而低分子化。经过规定时间后，该反应液残留于上述反应用管中的状态下，由上述嘴头移动机构51将上述分注头211i移动到上述液收容部组27i的第2液收容部中，使用嘴Z轴移动机构75和上述吸引排出机构53吸引该第2液收容部内收容的液体的全部量，并通过嘴头移动机构51使用并移送上述分注头211i，将上述细径部贯通上述薄膜的孔而插入上述第3液收容部内，排出上述反应溶液。 [0177]在步骤S7中，将收容在该第3液收容部内的作为分离提取溶液的结合缓冲液和上述反应溶液进行搅拌，使可溶的蛋白质进一步脱水，使核酸及其片段分散在溶液中。
[0178]在步骤S8中，使用上述分注头21 Ii将其细径部贯通上述薄膜的孔而插入该第3液收容部中，吸引全部量，由嘴Z轴移动机构75使该分注头211i上升，将该反应溶液移送至第4液收容部,将收容在该第4液收容部内的磁性粒子悬浮液和上述反应溶液进行搅拌。形成含于该磁性粒子悬浮液内的磁性粒子的表面所形成的羟基与Na+离子结合的阳离子结构。因此，带负电的DNA被磁性粒子捕获。
[0179]在步骤S9中，使上述磁力部57的磁铁571接近上述分注头21 Ii的细径部211卢，从而使该分注头211i的细径部211#的内壁吸附上述磁性粒子。在使该磁性粒子吸附在该分注头211i的细径部211ia的内壁上的状态下，该分注头211i由上述嘴Z轴移动机构75而上升，使用上述嘴头移动机构51使该分注头211i从该第4液收容部移动到第5液收容部，贯通上述薄膜的孔而插入上述细径部211^。
[0180]使上述磁力部57的上述磁铁571从该分注头21 Ii的细径部21 Ip离开，从而在除去上述细径部211ia内的磁力的状态下，对于收容在该第5液收容部中的清洗液I (NaCl、SDS、异丙醇)反复进行吸引排出，从而使上述磁性粒子从上述内壁脱离，在清洗液I中进行搅拌，从而清洗蛋白质。之后，在通过再次使上述磁力部57的磁铁571接近上述分注头21込的细径部211ia而使上述磁性粒子吸附在细径部211ia的内壁上的状态下，由上述嘴Z轴移动机构75使上述分注头211i上升后由上述嘴头移动机构51使其从该第5液收容部移动至第6液收容部。
[0181]在步骤SlO中，使用嘴Z轴移动机构75贯通上述薄膜的孔而插入上述分注头21込的细径部211^。使上述磁力部57的磁铁571从上述分注头21 Ii的细径部211卢离开，从而在除去上述细径部21 Iia内的磁力的状态下，对于收容在该6液收容部中的清洗液2 (异丙醇)反复进行吸引排出，从而使上述磁性粒子在液体中搅拌，除去NaCl和SDS，将蛋白质清洗。之后，在通过再次使上述磁力部57的磁铁571接近上述分注头211i的细径部211卢而使上述磁性粒子吸附在细径部211ia的内壁上的状态下，由上述嘴Z轴移动机构75使上述分注头211i上升之后由上述嘴头移动机构51使其从该第6液收容部移动至收容有蒸馏水的上述第7液收容部。
[0182]在步骤Sll中，通过嘴Z轴移动机构75使上述分注头21 Ii的细径部21 Ip通过上述孔而下降，将上述磁力施加给上述分注头21^的细径部211ia内的状态下，以缓慢的流速反复进行上述水的吸引排出，从而将异丙醇置换为水而去除。之后，在使上述磁力部57的磁铁571从上述分注头211i的细径部211#离开而除去磁力的状态下，在作为上述分解液的蒸馏水中反复进行吸引排出，从而进行搅拌，使上述磁性粒子所保持的核酸或其片段从磁性粒子分离(析出)到液体中。之后，通过使上述磁铁571接近上述分注头211i的细径部211^，从而对细径部内施加磁场，使磁性粒子吸附在内壁上，使含有所提取的核酸等的溶液残留在上述第8液收容部内。由嘴头移动机构51使上述分注头211i移动到上述尖头等收容部组21i的收容有该分注头211i的收容部，使用上述尖头拆装机构59的上述拆装部件591从该嘴71i使吸附了磁性粒子的该分注头211i与上述磁性粒子一起相对该收容部内拆装。
[0183]接着，从步骤S12到步骤S15相当于核酸扩增和测量工序。
[0184]在步骤S12中，对该嘴71i安装新的分注头21 Ii,吸引上述第8液收容部内收容的含有核酸等的溶液，并移送到预先收容有扩增用溶液Sfi的上述反应用收容部Si中而排出，并导入该容器内。由上述嘴头移动机构51使上述嘴头50移动，使上述嘴71i移动到收容上述容器组20的密闭盖253i的密闭盖收容部81?的上方。使用上述嘴Z轴移动机构75使其下降，从而使上述密闭盖253的上侧的空洞253f与嘴71i的下端嵌合而进行安装。该密闭盖253由该嘴Z轴移动机构75上升后，使用上述嘴头移动机构51使其位于上述反应用收容部8i上，由上述嘴Z轴移动机构75使密闭盖253下降而与该反应用收容部Si的广口管部Sai的开口部嵌合从而密闭安装。
[0185]在步骤S13中，根据上述测量控制部的指示，指示上述嘴头移动机构51，使嘴头50沿X轴移动，从而使上述导光用架台32的上述连接部31i位于安装有上述密闭盖253i的反应用收容部Si上方，由上述架台Z轴移动机构35使上述导光用架台32下降，从而使上述连接部31i插入上述密闭盖253i的空洞253A内，使其下端接触或密接于该空洞的底面253gi。
[0186]在步骤S14中，根 据上述核酸处理控制部的指示，上述温度控制器29例如指示反复进行49次实时PCR的温度控制的循环、例如将该反应用收容部Si以96度加热5秒钟、以60度加热15秒钟的循环。
[0187]在步骤S15中，当上述核酸处理控制部开始各循环中的温度控制时，上述测量控制部判断各循环中的伸长反应工序的开始，指示上述连接端排列体30相对上述测量器40的各测量端44」连续或间歇移动。其移动速度以基于上述可稳定受光时间、荧光寿命以及上述专用区域20i的个数(该例子中为12个)等算出的速度移动。由此，在上述可稳定受光时间内完成从全部12个反应用收容部Si接收光。
[0188]在步骤S16中，上述测量控制部判断例如上述连接部31i的光纤(束)33i和上述测量端44的第一测量端、第二测量端的各个光学连接的瞬间并指示上述测量器40受光。
[0189]该测量针对进行指数函数的扩增的循环而执行，基于该测量得到扩增曲线，基于该扩增曲线进行各种分析。另外，测量时上述测量控制部能够加热内置于上述导光用架台32的加热器37，防止上述密闭盖253结露，能够进行明确的测量。
[0190]以上的实施方式例中，为了更好地理解本发明而进行了具体的说明，但是并非限制方式。因此，在不变更本发明主旨的范围能够进行变更。例如，关于嘴、分注头、穿孔尖头、容器组、其专用区域、收容部、反应用收容部、广口管部、细口管部、测量端、测量器、特定波长测量器、吸引排出机构、移动机构部、磁力部、加热部、反应容器、密闭盖、导光用架台、连接部、导光部、连接端、连接端排列体、连接部排列体、嘴头、温度控制器等的结构、形状、材料、排列、量、个数以及所使用的试剂、检体等都不限于实施方式例。另外，设为使嘴相对容器组移动，但是也能够使容器组相对嘴移动。
[0191]另外，以上的说明中，在上述反应用收容部的密闭中使用了密闭盖，但是也能够取而代之、或并用地、使用矿物油等密闭液进行密闭。另外，也可以代替在上述嘴上安装穿孔用尖头来进行穿孔，而使用由吸引排出机构驱动的穿孔销。另外，以上的说明中，关于实时PCR的测量进行了说明，但是不限于该测量，也能够适用于进行温度控制的其他各种测量。另外，在以上的说明中，说明了将上述测量器设于分注装置的情况，但是不限于此。
[0192]另外，本发明的各实施方式例中说明的装置、形成这些装置的部件或形成这些部件的部件除了能够适当选择、适当变更外、还能够适当组合。另外，本申请中的“上方”、“下方”、“内部”、“外部”、“X轴”、“Y轴”、“Z轴”等空间的表示仅限图解之用，并不限制所述结构的特定的空间上的方向或位置。
[0193]工业实用性
[0194]本发明例如涉及要求进行主要包含DNA、RNA> mRNA、rRNA、tRNA的核酸的处理、检查、分析的领域、例如工业领域、食品、农业、水产加工等农业领域、药品领域、制剂领域、卫生、保险、疾病、遗传等医疗领域、生物化学或生物学等理学领域等。本发明特别能够应用于PCR、实时PCR等处置各种核酸等的处理和分析。
[0195]附图标记说明:
[0196]1、3、5、8反应用收容部
[0197]la、3a、5a、8a广口管部
[0198]lb、3b、5b、8b细口管部
[0199]lc、3c、5c、8c可穿孔薄膜
[0200]lf、3f、5f、8f反应用试剂
[0201]2、4、6、7、9、201 反应容器
[0202]10反应容器用光测量装置
[0203]20容器组
[0204]20i (i=l,..., 12)专用区域
[0205]21込(i=l,…，12)分注头
[0206]212穿孔用尖头
[0207]231i,236i (i=l,..., 12) PCR 用管(反应容器)
[0208]251、252、253密闭盖
[0209]251a、252a、253a栓部
[0210]251b、252b、253b突条
[0211]251c、252c、253c圆筒部件
[0212]251d、252d、252d压入部
[0213]251e、252e、252e环状突部
[0214]251f.252f.253f空洞
[0215]251g、252g、253g空洞的底
[0216]252hO 型圈
[0217]253h环状突部[0218]29温度控制器
[0219]30连接端排列体
[0220]31^14^(1=1,...,12)连接部
[0221]32导光用架台
[0222]33iU42i光纤(导光部) [0223]40、140测量器
[0224]40」.(」=1，…，6)特定波长测量器
[0225]44测量端
[0226]50嘴头
[0227]52移动机构部
[0228]53吸引排出机构
[0229]59尖头拆装机构
[0230]70嘴排列部
[0231]7込(i=l,…，12)嘴
【权利要求】
1.一种反应容器，具有一个或两个以上反应用收容部，该反应用收容部具有: 细口管部，收容或能够收容反应用试剂或其一部分； 广口管部，与该细口管部连通，设于该细口管部的上侧，且具有比所述细口管部的开口部宽的开口部；及 可穿孔薄膜，设成将该广口管部与所述细口管部之间分隔。
2.根据权利要求1所述的反应容器，其中，所述细口管部的开口部设于该广口管部的底部的中央。
3.根据权利要求1或2所述的反应容器，其中，所述细口管部与所述广口管部一体形成，所述薄膜附着于所述广口管部的底部。
4.根据权利要求1或2所述的反应容器，其中， 所述广口管部与所述细口管部分体形成， 在所述广口管部的底部的中央穿设孔部，所述细口管部沿其开口部的外周具有包围该开口部的开口缘部，所述细口管部设成除了所述开口缘部之外能够贯通所述孔部，所述细口管部以贯通所述孔部的方式从广口管部的所述孔部向下方突出，所述开口缘部安装于所述广口管部的底部，所述薄膜附着于所述细口管部的所述开口缘部。
5.根据权利要求1至4所述的反应容器，其中，还具有密闭盖，该密闭盖安装于所述反应用收容部的所述广口管部的开口部，密闭该反应用收容部，并具有透光性。
6.根据权利要求5所述的 反应容器，其中，所述密闭盖具有: 栓部，能够与所述广口管部嵌合，能够对来自所述细口管部的光进行导光 '及 压入部，设于所述栓部的前端，在该栓部与广口管部嵌合的情况下能够插入所述细口管部的开口部并将穿孔后的所述薄膜压于细口管部的内壁，并且能够对来自所述细口管部的光进行导光。
7.根据权利要求1至6所述的反应容器，其中，所述广口管部或密闭盖设成能够与连接部连接，所述连接部设有将设于所述反应容器的外部的光测量器与所述反应用收容部内部光学连接的一个或两个以上导光部的前端。
8.根据权利要求5至7所述的反应容器，其中，所述密闭盖具有设于该密闭盖中央的空洞和封闭该空洞的下端的具有透光性的底面，该密闭盖向该反应用收容部的移动、嵌合和/或与所述连接部的连接通过设于反应容器的外部的部件和/或所述连接部插入所述空洞来进行。
9.根据权利要求1至8所述的反应容器，其中，还具有两个以上凹部排列成一列状的基板，并且在该凹部的一个凹部形成所述反应用收容部，在除形成有所述反应用收容部的凹部之外的其他凹部具有盒容器，该盒容器收容或能够收容用于移动到所述反应用收容部而进行处理的器具。
10.根据权利要求9所述的反应容器，其中，在除形成有所述反应用收容部的凹部之外的所述其他凹部设有:收容所述密闭盖的密闭盖收容部、收容对所述薄膜进行穿孔的穿孔用尖头的穿孔用尖头收容部和/或收容分注头的分注头收容部。
11.根据权利要求9或10所述的反应容器，其中，形成于所述凹部的所述反应用收容部的所述广口管部由形成于所述基板的具有开口部的凹部构成，所述细口管部与所述广口管部分体形成，在所述广口管部的底部的中央穿设孔部，所述细口管部具有包围该开口部的开口缘部，所述细口管部以贯通所述孔部的方式从广口管部的所述孔部向下方突出，所述开口缘部安装于所述广口管部的底部，所述薄膜附着于所述细口管部的所述开口缘部。
12.—种反应容器制造方法， 分体制造在底部的中央穿设有孔部的广口管部和沿开口部的外周具有包围该开口部的开口缘部的细口管部， 在所述细口管部内收容或未收容反应用试剂或其一部分， 使可穿孔薄膜附着于所述细口管部的所述开口缘部， 使所述细口管部以除该开口缘部之外贯通所述孔部的方式从该广口管部的所述孔部向下方突出，将所述开口缘部安装于所述广口管部的底部，从而制造反应用收容部。
13.一种反应容器制造方法， 分体制造形成有两个以上的凹部并在该凹部的一个凹部的底部的中央穿设有孔部的基板和沿开口部的外周具有包围该开口部的开口缘部的细口管部， 在所述细口管部内收容或未收容反应用试剂或其一部分， 使可穿孔薄膜附着于所述细口管部的所述开口缘部， 使所述细口管部以除该开口缘部之外贯通所述孔部的方式从该广口管部的所述孔部向下方突出，将所述开口缘部安装于所述凹部的底部而形成反应用收容部，从而制造盒容器。
14.一种反应容器系统， 嘴头，该嘴头设有一个或两个以上嘴，该嘴以能够拆装的方式安装进行气体的吸引和排出的吸引排出机构以及能够通过该吸引排出机构进行液体的吸引和排出的分注头；容器组，至少具有收容或能够收容用于反应的反应用溶液或其一部分的权利要求1至11中任一项所述的反应容器； 嘴移动机构，能够在所述嘴头与所述容器组之间相对移动； 温度控制器，能够进行所述反应容器内的温度控制； 导光用架台，设于所述嘴头，且具有两个以上连接部，该连接部能够与所述反应容器的所述反应用收容部直接或间接连接，并设有与所连接的该反应容用收容部内部光学连接的一个或两个以上的导光部的前端； 连接端排列体，与所述各连接部对应设置，并具有沿规定路径排列支承两个以上连接端的排列面，该连接端设有前端设于所述连接部的所述导光部的后端；及 测量器，设成与所述排列面接近或接触，通过与该各连接端的光学连接而能够接收基于所述反应容器内的光学状态的光， 使沿所述连接端排列体的所述规定路径设置的所述各连接端和所述各测量端以依次光学连接的方式相对移动。
15.根据权利要求14所述的反应容器系统，其中，所述容器组中还具有两个以上液收容部，该液收容部收容:悬浮有能够捕获检体、反应的目标物的磁性粒子的磁性粒子悬浮液、用于所述目标物的分离和提取的分离提取用溶液；所述容器组中还具有磁力部，该磁力部能够对安装于所述嘴的所述分注头或设于所述容器组的液收容部的内部施加和除去磁场而能够将所述磁性粒子吸附于所述分注头或所述液收容部的内壁。
【文档编号】G01N1/10GK103547666SQ201180070156
【公开日】2014年1月29日 申请日期:2011年8月19日 优先权日:2011年2月22日
【发明者】田岛秀二 申请人:环球生物研究株式会社
【专利摘要】本发明提供一种反应容器及其制造方法，能够一贯地、迅速地且有效率地进行包含核酸的提取、扩增等反应在内的处理，减轻使用者的工时，不会使装置规模扩大。该反应容器具有一个或两个以上反应用收容部，该反应用收容部具有：细口管部，收容或能够收容反应用试剂或其一部分；广口管部，与该细口管部连通，设于该细口管部的上侧，且具有比上述细口管部的开口部宽的开口部；及可穿孔薄膜，设成将该广口管部与上述细口管部之间分隔。
【专利说明】反应容器及其制造方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种反应容器及其制造方法。
【背景技术】
[0002]与核酸扩增、需要进行免疫恒温等温度控制的反应同时进行光测量的处理近年来增加。例如进行核酸(DNA (Deoxyribonucleic Acid:脱氧核糖核酸)、RNA (RibonucleicAcid:核糖核酸)等)及其片段(寡聚核苷酸、核苷酸等)的扩增时，遗传因子出现量分析等求解定量性的检查中，需要进行扩增以能够了解各核酸的相对量之比。因此，适用实时PCR(Polymerase Chain Reaction:聚合酶链式反应)法,使用具备热循环仪和分光突光光度计的装置，实时检测分析由PCR生成DNA扩增产物的生成过程，从而不需要电泳法的分析。作为对于包含在扩增前的样品中的各DNA或RNA的相对量之比维持定量性的情况下进行扩增的 DNA 扩增法,使用 SPIA(Single Primer Isothermal Amplification:单引物等温扩增)。在该SPIA法中，采用到利用DNA/RNA嵌合引物、DNA聚合酶、RNaseH (核糖核酸酶H)的等温反应进行的线性DNA扩增法。
[0003]其中，这样的核酸扩增等中的温度控制设为如下:将上述铸型DNA、引物、DNA聚合酶、核苷酸以及反应缓冲液等必要试剂收容在由聚丙烯等形成的容器内，收容在由铝等原材料形成的块状的恒温装置的收容部内，对该金属制的块状的收容部进行加热或冷却，等待液温变为均等的温度分布，从而进行恒温或下一温度的加热或冷却(专利文献1、2、3)。
[0004]此时，用于进行温度控制的容器由盖进行密闭，防止异物从外部侵入，防止液体从内部泄漏，并且尤其需要尽可能排除外部气体和外部气体温度的影响直至上述收容部内的反应液被加热或冷却而变为均等的 液温的温度分布为止。
[0005]这样一来，对于利用荧光物质实时监视扩增的核酸(DNA、RNA等)的实时PCR等来说，需要在温度循环中途观测扩增，因此，对由盖密闭的容器，需要从外部透过透明的盖或侧面来进行光的测量。但是，使用者使用盖，手动打开盖耗费工时，成为对处理的一贯自动化的妨碍。另外，再次由盖进行密闭时，可能与容器内的反应液接触而造成污染。另外，温度控制时，即使将盖从容器取除，因水分使盖密接在容器开口部上而难以容易地打开盖，不能进行迅速的处理。另外，盖打开时，附着于盖的内侧的液体可能会坠落或飞散而造成污染(专利文献4)。
[0006]另外，温度控制时，从上述容器的外部进行上述容器内的测量的情况下，需要使盖容器的盖形成透明而从容器外进行测量，但是盖的内部可能会出现结露而雾化，难以进行测量。
[0007]另一方面，为了进行核酸扩增等处理，现状是:作为其前提，需要从检体提取微量的核酸等，与各种试剂、引物、DNA聚合酶、核苷酸和反应缓冲液等一起在反应容器内，例如手动或使用各种装置进行各种处理，需要与核酸等相关的专门的研究人员和技术人员。
[0008]这样的状况妨碍遗传因子分析的通用化和医院等临床应用的扩大。因此，临床等时，为了防止发生交叉污染且减轻使用者的工时，并容易进行关于核酸的从提取到扩增进而到测量的遗传因子分析，需要实现一贯地自动化进行从核酸的提取到扩增进而到测量的全自动化，并且提供小型化装置且低价位、高精度的装置是重要的。
[0009]专利文献1:日本专利第2622327号公报
[0010]专利文献2:日本特表2000-511435号公报
[0011]专利文献3:美国专利第5，958，349号公报
[0012]专利文献4:日本特开2002-10777公报
【发明内容】
[0013]发明所要解决的问题
[0014]因此，本发明是鉴于上述问题而研发的，其第I目的在于提供一种反应容器及其制造方法，能够切实地防止异物从外部进入进行核酸的扩增等需要温度控制的反应的反应容器、防止液体从反应容器飞散等导致的污染，能够进行可靠性高的处理。
[0015]本发明第2目的在于提供一种反应容器及其制造方法，能够使至少包含核酸扩增等反应和光测量的处理一贯自动化，削减使用者的工时，并迅速且有效率地廉价制造和使用反应容器而不会造成装置规模扩大。
[0016]用于解决课题的方法
[0017]第I发明是一种反应容器，该反应容器具有一个或两个以上反应用收容部，该反应用收容部具有:细口管部，收容或能够收容反应用试剂或其一部分；广口管部，与该细口管部连通，设于该细口管部的上侧，且具有比上述细口管部的开口部宽的开口部；及可穿孔薄膜，设成将该广 口管部与上述细口管部之间分隔。
[0018]此处，“反应试剂或其一部分”是指用于规定的反应的试剂或该试剂的一部分，能够以液态或干燥状态进行收容。例如，在核酸扩增反应的情况下，反应试剂是扩增用溶液，例如基于PCR法进行扩增的情况下，是扩增对象的铸型DNA溶液、引物溶液、DNA聚合酶溶液、核苷酸溶液、反应缓冲液等，在利用SPIA法进行扩增的情况下，是DNA/RNA嵌合引物、DNA聚合酶溶液、RNaseH溶液等。另外，实时PCR中，通常作为使用含有荧光物质的荧光试剂进行的方法，有插入(Intercalation)法、杂交(Hybridization)法以及LUX (light uponextention)法。“插入法”是利用SYBR (注册商标)GREEN 1、溴化乙锭等荧光物质在伸长反应之际进入双链DNA而通过激发光的照射产生荧光的特性来测量DNA量的方法。因此，使扩增用溶液中至少包含上述荧光物质和抑制该荧光物质发光的猝灭剂。“杂交法”是在PCR引物的基础上使用由荧光物质标识的DNA探针仅检测目标PCR产物的方法。即，通过将由荧光标识的DNA探针杂交在目标PCR产物中，从而检测出该杂交的DNA (量)。“LUX法”是利用标识在寡聚核苷酸上的荧光物质的荧光信号受该寡聚核苷酸的形状(排列或单链或双链)影响的性质的方法。实际的实时PCR中，使用由一种荧光物质标识化的PCR引物(LUX引物)和相对于此均未标识化的PCR引物进行实时PCR。该LUX引物被设计成将荧光物质标识在3'前端附近,在与5'前端之间构成发夹结构(hairpin structure)。LUX引物取得发夹结构时，解除消光效果，荧光信号增大。通过测量该信号增大，从而能够测量PCR产物量。
[0019]包含反应用收容部的反应容器、盖等材料例如有聚乙烯(P.E.)、聚丙烯(？1.)、聚苯乙烯、丙烯等树脂、玻璃、金属、金属化合物等。反应容器的尺寸是上述细口管部例如能够收容几μ L到几百μ L的液体、并且分注头的前端能够插入的大小。例如，在圆筒状的情况下，例如一个容器的大小的直径为几mm~几十mm、深度为几mm~几十mm。例如，广口管部的内径例如为9mm程度，细口管部的开口部的内径为4mm程度，细口管部的容量例如是50 μ L程度，所收容的液量例如为25 μ L程度，壁厚为0.2mm程度。
[0020]上述反应容器内能够由温度控制器进行温度控制。
[0021]“温度控制器”具有能够基于来自外部的信号等使收容构成温度控制的对象的液体的反应容器内的温度上升或下降的温度源，作为温度源是在块状部件上例如设置帕尔贴元件、加热器、冷却装置等的结构。为了进行PCR等处理，作为温度控制器，使用了帕尔贴元件的热循环仪为优选。另外，也能够利用LAMP (loop-mediated isothermalamplification:环介导等温扩增)法进行恒温扩增的温度控制。
[0022]“温度控制”是指:依据预先规定的顺序，以所规定的次数执行将成为其对象的液体或容器以所设定的时间维持在一个或两个以上的设定的规定温度。对上述温度控制器的指示基于程序发送所对应的信号。
[0023]“规定温度”是指作为构成对象的液体等的物体要到达的目标的温度，例如上述液体中含有的DNA等核酸或作为核酸的片段的寡聚核苷酸等由PCR法扩增的情况下，作为所设定的规定温度例如是由PCR法进行的温度循环、即DNA变性、退火或伸长所分别需要的各温度，约94°C、50°C到60°C之间的温度以及约72°C。另一方面，利用SPIA法(商标)的情况下，设定为恒定温度例如55°C等。
[0024]另外，该规定温度包含转移促进用温度，用于例如在从高温的规定温度向低温的规定温度转移的情况下，由温 度控制器而以比这些规定的温度低的转移促进用温度进行冷却，或者当在低温的规定温度向高温的规定温度转移的情况下以比这些规定温度更高的转移促进用温度进行加热，从而缩短转移时间，将一个循环时间收敛在规定循环时间内。“规定时间”是各温度的维持所需的时间，其依赖于扩增法的种类、在PCR法中使用的试剂、液量、嘴的形状、原材料、大小、厚度等，但是在一个循环中合计例如为几秒到几十秒，作为PCR法整体的处理时间例如为大约几分钟到几十分钟程度。另外，转移时间也包含在规定时间中。
[0025]可穿孔薄膜例如包括铝箔。对于穿孔，例如在用于对该反应容器分注液体的设于该反应容器外的分注装置的嘴上安装穿孔用尖头，使该穿孔用尖头下降而位于该反应容器上，从进行穿孔。
[0026]“细口管部”是指其开口部的面积小于上述“广口管部”的开口部的面积。优选为，细口管部的开口部的面积小于广口管部的底部整体的面积。存在广口管部和细口管部一体形成的情况和分体形成的情况。
[0027]第2发明:上述反应容器中，上述细口管部的开口部设于该广口管部的底部的中央。
[0028]优选为，广口管部和细口管部旋转对称地形成，并且广口管部和细口管部同轴形成。细口管部的开口部处于广口管部的底部的中央，所以能够切实地沿广口管部的轴向接收来自细口管部的光。另外，“底部”是指遮住广口管部的下方而形成的壁面，与遮住水平方向而形成的侧部不同。通常，该底部相当于从广口管部的内壁面向内侧方向突出设置的水平面、或朝向下方收窄而形成的环状的台阶差的水平面。因此，广口管部的侧部和细口管部的侧部之间即使一体形成，也不能一样地连续连结，而要经由环状的台阶差连结。
[0029]第3发明:上述反应容器中，上述细口管部与上述广口管部一体形成，上述薄膜附着在上述广口管部的底部。
[0030]这种情况下，由于广口管部和细口管部一体成形，所以与分体成形并进行组装的情况相比较，其制作容易，另一方面，对于可穿孔薄膜的附着作业，需要:预先准备根据广口管部的底部的形状而切断的上述薄膜而将反应试剂收容于细口管部后，逐个地从广口管部侧落入，并以与反应试剂不接触的方式仅附着在底部。 [0031]第4发明:上述反应容器中，上述广口管部与上述细口管部分体形成，在上述广口管部的底部的中央穿设孔部，上述细口管部沿其开口部的外周具有包围该开口部的开口缘部，上述细口管部中除了上述开口缘部之外设成能够贯通上述孔部，上述细口管部以贯通上述孔部的方式从广口管部的上述孔部向下方突出，上述开口缘部安装在上述广口管部的底部，上述薄膜附着在上述细口管部的上述开口缘部上。
[0032]此处，广口管部和细口管部分体形成，关于可穿孔薄膜，在上述细口管部内收容了反应试剂后，将多个细口管部以平面状排列后，将大的上述薄膜一次性附着在多个细口管部的开口缘部上，对齐细口管部的开口缘部而一并进行切断。
[0033]之后，使在开口缘部附着了可穿孔薄膜的细口管部进一步贯通上述广口管部的孔部，并以无液体泄漏的方式安装将开口缘部和上述广口管部的底部，从而完成制造。另外，上述开口缘部的外周长比上述孔部的内周长形成得长。
[0034]第5发明:上述反应容器中，还具有密闭盖，该密闭盖安装于上述反应用收容部的上述广口管部的开口部，密闭该反应用收容部，并具有透光性。
[0035]此处，“密闭盖”中除了板状或块状的非可挠性盖外，也包含具有柔性的薄膜状或膜状的盖。上述“安装”通过嵌合、螺纹接合、摩擦、吸附、附着、粘接等进行。这种情况下，优选可拆脱地安装。
[0036]由一个上述密闭盖密闭一个或两个以上的反应容器的开口部。密闭盖例如安装于后述的嘴并进行移动，使用尖头拆装机构使反应容器的开口部密闭。因此，在密闭盖的上侧设置能够相对一个或两个以上的上述嘴而进行拆装的一个或两个以上的安装用的空洞。
[0037]后述的一个或两个以上的上述连接部能够通过上述导光用架台的上下方向的移动而插入该安装用的空洞内并与反应容器连接。
[0038]另外，优选为，使上述导光用架台的各连接部连接于各反应容器后，能够相对于覆盖上述反应容器的开口部的密闭盖，按压或移动上述连接部或嘴。
[0039]优选为，上述连接部以向上述导光用架台的下方突出的方式设置。这种情况下，优选为，连接部例如具有棒状、筒状、锥状等形状，该部件的下端部能够与上述密闭盖接触。
[0040]第6发明:上述反应容器中，上述密闭盖具有:栓部，能够与上述广口管部嵌合，并能够对来自上述细口管部的光进行导光；压入部，设于上述栓部的前端，在该栓部与广口管部嵌合的情况下能够插入上述细口管部的开口部并将穿孔的上述薄膜压入细口管部的内壁，并且能够对来自上述细口管部的光进行导光。
[0041]第7发明:根据权利要求1至6所述的反应容器，上述广口管部或密闭盖设成能够与连接部连接，在上述连接部设置有将设于上述反应容器的外部的光测量器与上述反应用收容部内部进行光学连接的一个或两个以上导光部的前端。[0042]此处，“连接部”是与上述反应容器直接或经由密闭盖等间接地以能够解除的方式连接的部件。在该连接部设置有与上述反应容器内光学连接并能够基于该反应容器内的光学状态对光进行导光的导光部的前端。此处，“与反应容器的连接”是指与反应容器的开口部、外壁、外底部或所安装的密闭盖或套等接近或连结，“接近”是指不接触而能够与导光部之间光学连接的程度接近，“连结”包含接触、密接、密粘、嵌合、安装，至少接触以能够与导光部之间光学连接。通过该连接以将设于连接部的导光部与反应容器内光学连接。作为连接部例如是导光用架台的板状部分，导光部的前端是穿设于其板状部分的孔、光纤等透光性部分或透镜等的光学系统。或者，例如是以从上述导光用架台突出的方式设置的圆筒状等部件，导光部的前端是设于该圆筒状等的部件的空洞、光纤等透光性部分或透镜等的光学系统。所谓具有可挠性的导光部例如是光纤或光纤束。测量荧光的情况下，具有两个以上的导光部，其一部分作为照射用导光部、其他作为受光用导光部。另外，与上述反应容器的开口部直接连接的情况下，是使用矿物油等对反应容器内密闭的情况，这种情况下该连接部以能够密闭该反应容器的方式形成为优选。另外，在开口部以外连接的情况下，上述反应容器或该连接部分需要具有透光性。
[0043]此处，关于“导光用架台”，与后述的第14发明相关联地进行说明。
[0044]第8发明:在上述反应容器中，上述密闭盖具有设于该密闭盖中央的空洞和封闭该空洞的下端的具有透光性的底面，该密闭盖向该反应用收容部的移动、嵌合和/或与上述连接部的连接通过设于反应容器的外部的部件和/或上述连接部插入上述空洞来进行。
[0045]此处，“部件”包括例如设置于分注装置的嘴、分注装置的嘴头、且与嘴联动地移动的密闭盖的移动专用的棒状部件等。
[0046]第9发明:在上述反应容 器中，还具有两个以上的凹部排列成一列状的基板，并且在该凹部的一个凹部形成上述反应用收容部，在除形成有上述反应用收容部的凹部之外的其他凹部具有盒容器，该盒容器收容或能够收容用于移动到上述反应用收容部而进行处理的器具。
[0047]此处，“处理”包括对反应用收容部的分注、设于反应用收容部的可穿孔薄膜的穿孔、密闭盖对反应用收容部的封闭、拆装、或对收容在上述反应用收容部中的溶液进行的测
且雄里寺。
[0048]第10发明:在上述反应容器中，在除形成有上述反应用收容部的凹部之外的其他凹部设有收容上述密闭盖的密闭盖收容部、收容对上述薄膜进行穿孔的穿孔用尖头的穿孔用尖头收容部和/或收容分注头的分注头收容部。
[0049]第11发明:在上述反应容器中，上述细口管部与上述广口管部分体形成，上述广口管部形成于上述凹部，在上述广口管部的底部的中央穿设孔部，上述细口管部具有包围该开口部的开口缘部，上述细口管部以贯通上述孔部的方式从广口管部的上述孔部向下方突出，上述开口缘部安装于上述广口管部的底部，上述薄膜附着于上述细口管部的上述开口缘部。
[0050]第12发明:一种反应容器制造方法，分体制造在底部的中央穿设有孔部的广口管部和沿开口部的外周具有包围该开口部的开口缘部的细口管部，在上述细口管部内收容或不收容反应用试剂或其一部分，使可穿孔薄膜附着在上述细口管部的上述开口缘部，使上述细口管部以除其开口缘部之外贯通上述孔部的方式从该广口管部的上述孔部向下方突出，将上述开口缘部安装于上述广口管部的底部，从而制造反应用收容部。
[0051]第13发明:一种反应容器制造方法，分体制造形成有两个以上的凹部并在该凹部的一个凹部的底部的中央穿设有孔部的基板和沿开口部的外周具有包围该开口部的开口缘部的细口管部，在上述细口管部内收容或不收容反应用试剂或其一部分，使可穿孔薄膜附着在上述细口管部的上述开口缘部，使上述细口管部以除其开口缘部之外贯通上述孔部的方式从该广口管部的上述孔部向下方突出，将上述开口缘部安装于上述凹部的底部而形成反应用收容部，从而制造盒容器。
[0052]第14发明:一种反应容器系统，嘴头，该嘴头设有一个或两个以上嘴，该嘴以能够拆装的方式安装进行气体的吸引和排出的吸引排出机构以及能够通过该吸引排出机构进行液体的吸引和排出的分注头；容器组，至少具有收容或能够收容用于反应的反应用溶液或其一部分的权利要求1至11中任一项所述的反应容器；嘴移动机构，能够在上述嘴头与上述容器组之间相对移动；温度控制器，能够进行上述反应容器内的温度控制；导光用架台，设于上述嘴头，且具有两个以上连接部，该连接部能够与上述反应容器的上述反应用收容部直接或间接连接，该连接部设有与所连接的该反应容器收容部内部光学连接的一个或两个以上的导光部的前端；连接端排列体，与上述各连接部对应设置，该连接端排列体具有沿规定路径排列支承两个以上连接端的排列面，在该连接端设有前端设于该连接部的上述导光部的后端；测量器，设成与上述排列面接近或接触，通过与该各连接端的光学连接而能够接收基于上述反应容器内的光学状态的光，使沿上述连接端排列体的上述规定路径设置的上述各连接端和上述各测量端相对移动以进行光学连接。
[0053]“规定路径”是能够通过上述测量端与上述连接端排列体相对移动而使该测量端扫描沿其排列的全部连接端的平面或曲面上的路径，连接全部连接端的路径是沿没有一重或多重交叉的线段(也包含锯齿线、闭合直线)、曲线(也包含螺旋线、闭合曲线)、或者它们的组合等的路径。一重或多重的各路径优选沿连续的、没有尖点、角的线段或平滑曲线的路径。
[0054]上述连接 部和连接端有一对一对应的情况、多对一的情况、一对多的情况。这能够使得在中途使导光部分支或汇合、或者使由多个导光部构成的导光部束分支或汇合。
[0055]该规定路径优选基于测量器的测量端的个数、形状、配置或尺寸来规定，以能够进行顺畅的扫描。例如优选为，沿着在连接端相对测量端的移动中没有急剧的方向转换例如相对行进方向向钝角、直角方向转换的直线的规定路径。
[0056]连接部的排列图形例如是行列状、列状或行状，连接端的排列图形例如是与其相同的排列、仅尺寸与其不同的相似的排列、或排列图形不同的情况下、例如有圆形、其他闭合曲线状、一列状或具有更少的列数或行数的行列状的情况。以通过全部所排列的连接端的方式规定上述规定路径。
[0057]另外，上述规定路径(或者上述连接端的排列图形)优选是包围上述导光用架台的连接部的排列图形的区域面积或比相邻的连接部之间的间隔小的区域面积或比其小的间隔，实现集成化以使整体扫描距离变短。由此，速度相同的情况下，能够以比测量端直接扫描上述连接部的情况短的时间来进行处理。
[0058]集成化的程度优选为以下程度:例如上述连接端排列体与上述测量器之间的相对移动或扫描能够在可稳定受光时间内完成从待测量的全部反应容器的受光。此处，“可稳定受光时间”是指稳定维持反应容器内的可受光的光学状态的时间，例如实时PCR的插入法或LUX法或杂交法的TaqMan探针的情况下，进行PCR的各循环的伸长反应的时间即相当于上述时间。另外，杂交法中使用 FRET (fluorescence resonance energy transfer:突光能量共振转移)探针的情况下进行退火的时间即相当于上述时间。
[0059]由此，由于对于可稳定受光时间短的发光体等也能够适用，所以通用性高。
[0060]若一个循环所用时间例如为几十秒到几分钟时，则该可稳定受光时间例如是几秒到十秒程度。但是，PCR反应的初始循环中荧光检测量在检测极限以下，PCR反应的后期的循环为冻结状态，在严格意义上为了确保定量性，将是指处于指数函数的PCR扩增能够观察的扩增曲线的范围内。本发明中，利用可稳定受光时间能够用于测量端的反应容器间的移动时间这一情况，在该可稳定受光时间内进行从该反应容器进行受光所需的相对移动，从而能够不使用复杂的光学系统、且不扩大装置规模，由与反应容器个数相比充分少的个数或一个测量器，大致并行进行从多个反应容器进行的受光。
[0061]“光学状态”是发光、显色、变色或变光等的状态。基于光学状态的光是指发光或变光形成的光、针对显色或变色所照射的光的反射光或透射光、散射光等。
[0062]“上述各连接端与上述测量端依次光学连接”是指上述连接端与上述测量端以极近距离相向而进行光学连接。连接的瞬间相当于上述测量器接收的光量的极大值，所以上述测量控制部通过算出该光量的极大值来确定待测量的数据。
[0063]“测量器”例如能够进行荧光、化学发光的测量，前者的情况下，包括滤光片，用于进行一种或两种以上的激发光的照射、进行一种或两种以上的波长的荧光的受光。优选使用光纤对这些光进行导光。
[0064]“测量端”至少具 有设于上述测量器的待接收的光的入射口，在荧光测量的情况下具有待照射的光的射出口。这些能够作为别的测量端而设置。另外，上述入射口或射出口与由设于内部的光电元件构成的受光部或照射源光学连接。此时，能够经由各个受光用导光部或照射用导光部进行连接。
[0065]另外，在上述反应容器用光测量装置中，此外，虽未明示但还具有“测量控制部”，“测量控制部”控制上述测量器和导光切换机构，由内置于上述反应容器用光测量装置的计算机(CPU (Central Processing Unit:中央处理器))和驱动该计算机的程序构成,例如通过DA (Direct Current-Alternating Current:直流交流)转换器将信号发送给驱动上述移动机构的该控制部，从而实现测量控制。
[0066]第15发明:在上述反应容器系统中，上述容器组中还具有两个以上液收容部，该液收容部收容悬浮有能够捕获检体、反应的目标物的磁性粒子的磁性粒子悬浮液、用于上述目标物的分离和提取的分离提取用溶液；上述容器组中还具有磁力部，该磁力部能够对安装于上述嘴的上述分注头或设于上述容器组的液收容部的内部施加和除去磁场而能够将上述磁性粒子吸附于上述分注头或上述液收容部的内壁。
[0067]发明效果
[0068]根据第I发明，反应容器由广口管部和细口管部构成，可穿孔薄膜设成将广口管部和细口管部之间分隔，在细口管部内收容有反应用试剂或其一部分。因此，能够防止穿设上述薄膜时或反应处理时液体飞散。另外，用于在与光测量器之间导光的连接部与上述广口管部的连接之际，通过该连接部的内部的导光部能够将细口管部内的光切实地引导至测量器。
[0069]根据第2发明，由于细口管部的开口部设于广口管部的底部的中央，所以与连接部连接之际，通过该连接部的内部的导光部能够将细口管部内的光切实地引导至测量器，并且由于底部的周边被剩余，所以能够利用此处，切实地附着薄膜或切实地支承分体设置的细口管部。
[0070]根据第3发明，除了第I发明的效果外、由于细口管部与广口管部一体形成，所以成形容易。
[0071]根据第4发明、第11发明、第12发明或第13发明，由于广口管部与细口管部分体形成，薄膜附着于细口管部的开口缘部，所以将多个细口管部以平面状排列后，用大的薄膜一次性附着于多个细口管部的开口缘部，对齐细口管部的开口缘部而一并进行切断，所以能够切实地且容易地将上述薄膜附着于细口管部的开口部。
[0072]根据第5发明，由于设有密闭盖，该密闭盖安装于上述反应部的广口管部的开口部，密闭反应容器，并具有透光性，所以能够切实地进行温度控制和光测量。
[0073]根据第6发明，由于设有压入部，该压入部将穿孔后的可穿孔薄膜压入细口管部的内壁，所以能够防止上述薄膜遮断导光，能够进行可靠性高的测量。
[0074]根据第7发明，由于广口管部或密闭盖与设有导光部的前端的连接部连接，从而不需移动光测量器就能够从多个反应容器依次向一个光测量器进行导光，所以与针对每个反应容器设置光测量器的情况相比较，能够使装置规模紧凑。
[0075]根据第8发明，由于密闭盖能够利用其空洞，移动安装在设于嘴等反应容器外的部件或连接部上，并且能够 通过与连接部连接而与光测量器进行光学连接，所以利用分注装置能够进行密闭盖的移动、按压等，能够不设置新的机构而提供紧凑的装置。
[0076]第9发明中，由于在盒容器的基板设置排列为一列状的两个以上的凹部，在其中一个凹部设有反应用收容部，所以可穿孔薄膜设于比基板面靠下方，从而能够切实地防止穿孔时、温度控制时、分注时液体飞散导致交叉污染。另外，沿基板面接近的状态下能够进行分注头等的移动，所以能够防止交叉污染并容易进行移动控制。
[0077]第10发明中，通过在一个盒容器中一列状地设置上述反应用收容部、密闭盖收容部、穿孔用尖头收容部和分注头收容部，从而利用分注装置，能够使用同一嘴执行对上述反应用收容部的分注、可穿孔薄膜的穿孔和密闭盖的安装。另外，能够防止液体飞散导致的交叉污染，并且能够防止装置规模的扩大。
[0078]根据第14发明，利用设于导光用架台的连接部连接多个反应容器并与反应容器内光学连接，从而将反应容器内的光学状态经由多个上述反应容器和导光用架台以及导光部传递至连接端排列体的排列面的连接端，将沿连接端排列体的排列面上的规定路径排列的连接端和测量器的测量端依次光学连接。因此，与相对反应容器的开口部直接扫描测量端的情况相比较，能够防止测量端和液面之间的光的散射导致的衰减和光的泄漏，并能够重新进行连接端的排列以使与测量端的连接切实、迅速且顺畅地进行，所以能够进行可靠性高的测量、以及更有效率且迅速的反应容器内光学状态的测量。
[0079]因此，考虑到可稳定受光时间、测量端的结构等，能够通过使整体的上述连接端的排列区域或相邻的连接端之间的距离比连接部的排列区域或相邻的距离小的集成化、相比于连接部的排列使规定路径的直线化、曲率半径的扩大带来的测量端的移动的顺畅化来实现。
[0080]由于通过测量端与连接端之间的沿排列面上的上述规定路径的移动来进行光学系统的切换，所以能够简化光学系统的结构。
[0081]上述连接端相对于测量端的移动包括连续或间歇的移动。实时PCR的测量结果作成扩增曲线能够用于DNA的初始浓度的确定等各种分析上。
[0082]另外，由于能够利用可稳定受光时间而由一个测量器并行进行多个反应容器的测量，所以能够削减测量器的个数，抑制装置规模的扩大，削减制造成本。另外，沿预先规定的规定路径依次以最短距离在测量端与连接端之间进行移动而能够进行测量，所以能够仅以移动机构的简单机构并行进行测量。
[0083]由连接部直接或间接地连接反应容器的开口部，从而封闭反应容器而进行反应和测量的情况下，可进行能够切实地防止交叉污染和光的混入的可靠性高的自动测量。
[0084]根据第15发明，自目标物从检体的提取到收容于反应用收容部、稳定控制(反应)以及光测量为止，能够通过一个装置一贯地自动进行而无需进行容器组所属的容器的置换。
【专利附图】
【附图说明】
[0085]图1是表示本发明的第I实施方式的反应用收容部的图。
[0086]图2是与本发明的第I实施方式的反应用收容部有关的处理说明图。
[0087]图3是表示本发明的第I实施方式的密闭盖以及安装了该密闭盖的反应用收容部的图。
[0088]图4是本发明 的第I实施方式的反应用收容部连接了连接部的图。
[0089]图5是本发明的第2实施方式的反应用收容部及其处理的说明图。
[0090]图6是本发明的第2实施方式的反应用收容部连接了连接部的图。
[0091]图7是本发明的第3实施方式的反应用收容部及其处理的说明图。
[0092]图8是表示本发明的第4实施方式的密闭盖以及安装了该密闭盖的反应用收容部的图。
[0093]图9是本发明的第4实施方式的反应用收容部连接了连接部的图。
[0094]图10是表示本发明的第5实施方式的盒容器的图。
[0095]图11是表示本发明的第6实施方式的盒容器的图。
[0096]图12是表示本发明的第7实施方式的实施方式的反应容器系统的整体立体图。
[0097]图13是将图12所示的反应容器系统的容器组放大表示的俯视图。
[0098]图14是将图12所示的反应容器系统的嘴头的整体放大表示的俯视图。
[0099]图15是表示图14所示的反应系统的嘴头的表侧立体图。
[0100]图16是更具体地表示图14所示的移动机构和吸引排出机构的立体图。
[0101]图17是更具体地表示图14所示的吸引排出机构的立体图。
[0102]图18是图14所示的嘴头从背侧观察的立体图。
【具体实施方式】
[0103]接着，基于【专利附图】
【附图说明】本发明的实施方式。另外，该实施方式只要没有特别指定，就不应解释为对本发明限制。另外，在各实施方式中相同的内容使用相同的附图标记，其说明省略。
[0104]图1 (a) (b)表示作为本发明的第I实施方式的反应容器的反应用收容部。
[0105]该反应用收容部I具有:细口管部lb，能够收容作为核酸扩增用的反应试剂的核酸扩增用溶液或其一部分；广口管部la，与该细口管部Ib连通，设于该细口管部Ib的上侦牝且具有比上述细口管部Ib的开口部Ie宽的开口部；及设置成将该广口管部Ia和细口管部Ib之间分隔并由铝箔等形成的可穿孔薄膜lc。细口管部Ib以空的状态由上述薄膜Ic密封，从而能够防止细口管部Ib的污染。该细口管部Ib的开口部Ie设于上述广口管部Ia的底部Id的中央部。另外，该细口管部Ib与广口管部Ia —体形成，上述薄膜Ic附着于上述广口管部Ia的底部Id。 [0106]图2表示使用安装于后述的嘴头50的穿孔用尖头212将图2 Ca)所示的反应用收容部I的上述薄膜Ic如图2 (b)所示地穿孔的情况下的动作。如图2 (c)所示,表示该薄膜Ic被穿孔后收容了反应试剂溶液的状态。
[0107]图3是表示本发明的第I实施方式的由密闭盖251和用该密闭盖251密闭的反应用收容部I构成的反应容器2。
[0108]如图3 (a)、图3 (b)所示，具有透光性的上述密闭盖251具有透光性，包括:栓部251a，能够与广口管部Ia的开口部嵌合；及圆筒部件251c，设于该栓部251a的上侧，且在外侧面排列有沿着轴向的多个突条251b，在栓部251a沿其外周设置设有沿半径方向突出的环状突部251e而与广口管部Ia的内壁密接。在栓部251a的下侧设有压入部251d，该压入部251d插入细口管部Ib的开口部而将穿孔后的可穿孔薄膜Ic向开口周缘压入。
[0109]如图4所示，由被密闭盖251密闭的反应用收容部I构成的反应容器2进一步分别收容于多个凹部中，该凹部以一列状(附图的由表及里方向)排列于进行核酸扩增反应所需的温度控制的温度控制器29的块部29a。该块部29a通过帕尔贴元件29b和散热片29c加热冷却。在上述反应用收容部I的上侧设置导光用架台147，该导光用架台147以一个测量器移动而能够与多个反应用收容部I依次光学连接的方式被载置，多个连接部141i向上述导光用架台147的下方突出，也以一列状(附图的由表及里方向)被接收。各连接部141插入各密闭盖251的空洞251f内，在该连接部141的内部通过的导光部142具有覆盖细口管部Ib的开口部的程度的大小，所以能够将细口管部Ib内的光通过该导光部142没有剩余地可靠地引导至上述导光用架台147上的测量器。由此，利用进行使用了实时PCR法的核酸(DNA、RNA等)或其片段(寡聚核苷酸、核苷酸等)的扩增反应时产生的荧光等稳定的可受光时间使一个测量器移动，从而能够进行与多个反应用收容部I相关的测量，能够使整体装置结构紧凑化。附图标记143是透镜、附图标记144是热盖(hot lid)、附图标记145是加热片、附图标记146是隔热材料、附图标记148是透镜的压环。通过这些结构，可防止核酸扩增反应的征候(sign)在上述密闭盖251结露。另外，设于导光用架台147的槽149引导测量器的移动(附图的由表及里方向)以使上述测量器能够依次与对应上述各反应用收容部I的导光部142连接。
[0110]图5是本发明的第2实施方式的反应用收容部3及其处理的说明图。
[0111]如图5 (a)所示，第2实施方式的反应用收容部3具有:细口管部3b，预先收容作为核酸扩增用的反应试剂的核酸扩增用溶液或其一部分3f ;广口管部3a，与该细口管部3b连通，设于该细口管部3b的上侧，且具有比上述细口管部3b的开口部3e宽的开口部；及设置成将该广口管部3a和细口管部3b之间分隔并由铝箔等形成的可穿孔薄膜3c。细口管部3b由上述薄膜3c密封，从而能够防止收容在细口管部3b内的试剂的蒸发、污染。该细口管部3b的开口部3e设于上述广口管部3a的底部3d的中央部。另外，该细口管部3b和广口管部3a —体形成，上述薄膜3c附着于上述广口管部3a的底部3d。
[0112]图5 (b)表示为了使用安装于后述的嘴头50的穿孔用尖头212对图5 (a)所示的反应收容部I的上述薄膜3c进行穿孔而位于其上方的状态。图5 (c)表示通过使该穿孔用尖头212下降而使前端插入细口管部3b内并将上述薄膜3c穿孔后的状态。图5 Cd)表示呈以下状态并由密闭盖251和反应用收容部I构成的反应容器4:使上述密闭盖251的栓部251a嵌合在上述薄膜3c被穿孔后的反应用收容部3的广口管部3a内、且由设于栓部251a的前端的压入部251d将上述被穿孔后的上述薄膜3c压附于上述细口管部3b的开口部的内壁。
[0113]图6 (a)、图6 (b)表示本发明的第2实施方式的反应用收容部3连接了连接部311的情况。
[0114]呈以下状态:上述密闭盖251的栓部251?与具有穿孔后的薄膜3Cl的上述反应用收容部3的广口管部3a嵌合、且该薄膜3Cl由压入部251屯压附于细口管部3匕的内壁。另外，还呈以下状态:在上述密闭盖25h的空洞251f\中插入了后述的连接部31lt)
[0115]图6 (a)表示以下状态:从后述的导光用架台32的水平板32a向下侧突出的上述连接部31i (此处例如i = I)经由安装于上述反应用收容部3的广口管部3&i上的具有透光性的密闭盖251i而与该反应用收容部3间接连接，在该密闭盖251i的空洞内插入上述连接部31i并其端面与上述密闭盖251i的空洞的底面密接。该反应用收容部3i由广口管部3&i和与该广口管部3&i 连通且形成得比广口管部3&i细的细口管部Sbi构成，在该细口管部3bi预先收容有预先被干燥或液体状态的扩增用溶液3fit)此处，实时用扩增用试剂例如为70yL的由酶、缓冲液、引物等构成的预混试剂(MasterMix) (SYBR (注册商标)GreenMix)。
[0116]在该广口管部2354勺开口部，具有透光性的上述密闭盖251i的向下侧突出的环状的压入部251屯插入细口管部中，该环状的压入部521屯包围该密闭盖251i的光透射的中央部以使该密闭盖251i安装于反应用收容部3i;因而在上述连接部31i的内部通过的作为导光部的光纤(束)33i的直径大于或等于上述细口管部3bi的开口部的直径的大小为优选。由此，能够切实地接收来自上述反应用收容部3i的光。该细口管部3bi收容在由温度控制器29进行加热或冷却的温度控制用块体内。
[0117]该例子中，光纤(束)33i由能够与上述第2测量端43」连接的照射用光纤(束)332i和能够与上述第I测量端42」连接的受光用光纤(束)331j构成。
[0118]图6 (b)表不上述光纤(束)33i由光纤束构成的例子,其中该光纤束是将由能够与上述第2测量端43连接的多根受光用光纤构成的光纤束和由能够与上述第I测量端42j连接的多根照射用光纤构成的光纤束均质地混合而成的。
[0119]图7是本发明的第3实施方式的反应用收容部5及其处理的说明图。
[0120]如图7 (b)所示，第3实施方式的反应用收容部5具有:细口管部5b，预先收容作为核酸扩增用的反应试剂的核酸扩增用溶液或其一部分5f ;广口管部5a，与该细口管部5b连通，设于该细口管部5b的上侧，且具有比上述细口管部5b的开口部5e宽的开口部；及设置成将该广口管部5a和细口管部5b之间分隔并由铝箔等形成的可穿孔薄膜5c。
[0121]如图7 Ca)分解所示，第3实施方式的反应用收容部5与第I或第2实施方式的反应用收容部1、5不同，在该反应用收容部5中，上述广口管部5a与上述细口管部5b分体形成，在该广口管部5a的底部5d的中央穿设孔部5h，上述细口管部5b沿其开口部5e的外周具有包围该开口部5e的开口缘部5g，上述细口管部5b中除了上述开口缘部5g之外设成能够贯通上述孔部5h，上述细口管部5b以贯通上述孔部5h的方式从上述广口管部5a的上述孔部5h向下方突出，上述开口缘部5g安装于上述广口管部5a的底部5d，上述薄膜5c附着于上述细口管部5b的上述开口缘部5g。图7 (c)表示为了使用安装于后述的嘴头50的穿孔用尖头212对图5 (b)所示的反应用收容部5的上述薄膜5c进行穿孔而位于其上方的状态。图5 (d)表示通过使该穿孔用尖头212下降而使前端插入细口管部5b内并将上述薄膜5c穿孔后的状态。
[0122]在制造第3实施方式的反应用收容部5时，如图7 (a)所示，例如使用P.P.或P.E.通过吹塑成形或注塑成形等制造在底部5d的中央穿设有孔部5h的广口管部5a，并且，例如使用P.P.或P.E.通过吹塑成形等分体制造沿开口部5e的外周具有包围该开口部5e的开口缘部5g的细口管部5b。
[0123]在步骤2中，在上述细口管部5b内收容反应试剂或其一部分5f。
[0124]在步骤3中，通过涂敷粘接剂、使用热熔接或超声波熔接以没有空隙的方式将可穿孔薄膜5c附着于该细口管部5b的开口缘部5g的上侧，从而封闭开口部5e，将上述反应试剂或其一部分5f封入细口 管部5b内。另外，薄膜由铝层和树脂层构成。
[0125]在步骤4中，上述细口管部5b中除了其开口缘部5g之外贯通上述广口管部5a的上述孔部5h而向下方突出，通过涂敷粘接剂、使用热熔接或超声波熔接等以没有空隙的方式将上述开口缘部5g的下侧附着安装在上述广口管部5a的底部5d的上侧，从而制造上述反应用收容部5。此处，作为粘接剂例如使用单液湿气硬化型多用途弹性粘接剂(例如HT-Bond Miracle4)。
[0126]图8表示作为使用了第3实施方式的反应用收容部5的其他例的反应容器6、7。
[0127]图8 (a)是表示密闭盖252的图，沿上述栓部252a的下侧的边缘以包围压入部252d的方式而设有O型圈252h。由此，将该密闭盖252也就是上述栓部252a嵌合于上述反应用收容部5的广口管部5a的情况下，将附着于上述细口管部5b的开口缘部5g的上述薄膜5c和上述密闭盖之间密封，能够进行没有液体泄漏的处理。
[0128]图8 (b)是表示密闭盖253的图，沿设于上述栓部253a的前端的压入部253d的前端的外周设有环状突起253h。由此，能够将穿孔后的上述薄膜5c切实地压附于上述细口管部5b的内壁。
[0129]图9是表示将连接部33i连接在图8 (b)所示的反应容器7的上述密闭盖253i上的状态的图。
[0130]图10是表示本发明的第5实施方式的盒容器9的图，还具有设于基板8j的四个凹部(8、8k、81、8m)排列成一列状而成的基板8j，在凹部(8)中形成反应用收容部8，在凹部(8m)中具有收容密闭盖253的密闭盖收容部8m，在凹部(81)中具有收容穿孔用尖头212的穿孔用尖头收容部81，在凹部(8k)中具有收容分注头211的分注头收容部8k。[0131]在制造该盒容器9时，在步骤Si中，如图10所示，例如使用P.P.或P.E.通过吹塑成形或注塑成形等制造四个凹部8a、8k、81、8m排列成一列状并且在上述凹部(广口管部)8a的底部8d的中央穿设有孔部8h的基板8j，并且，例如使用P.P.或P.E.通过吹塑成形等分体制造在开口部8e的外周具有包围该开口部8e的开口缘部8g的细口管部8b。
[0132]在步骤s2中，在上述细口管部8b内收容反应试剂或其一部分8f。
[0133]在步骤s3中，通过涂敷粘接剂、使用热熔接或超声波熔接等以没有空隙的方式将可穿孔薄膜8c附着于上述细口管部Sb的开口缘部Sg的上侧，从而由该可穿孔薄膜Sc封闭开口部Se，将上述反应试剂或其一部分8f封入细口管部Sb内。另外，薄膜由铝层和树脂层构成。
[0134]步骤s4中，上述细口管部8b中除了其开口缘部8g之外贯通上述广口管部8a的孔部8h而向下方突出，通过粘接剂的涂敷、热熔接或超声波熔接等以没有空隙的方式将上述开口缘部8g的下侧附着安装在上述广口管部8a的底部8d的上侧述。此处，作为粘接剂例如使用单液湿气硬化型多用途弹性粘接剂(例如HT-Bond Miracle4)。
[0135]在步骤s5中，将上述分注头211、穿孔用尖头212以及密闭盖253收容于各凹部8k、81、8m，从而制造上述盒容器9。
[0136]图11是表示本发明第6实施方式的盒容器201的图，在图10所示的盒容器9上沿凹部排列的列方向(嘴的移动轨迹)设有分隔壁20L。将其用附图标记。。^来表示。作为使用了该盒容器201i的反应容器系统的反应容器用光测量装置10在以下说明。
[0137]以下，基于图12~图18，更具体地说明上述的本发明的第7实施方式的作为反应系统的反应容器用光测量装 置10。图12是表示上述反应容器用光测量装置10的外观的透视立体图。
[0138]图12 (a)是表示该反应容器用光测量装置10的外观的图，例如是纵500mm (Y轴方向)、横600mm (X轴方向)、高度600mm (Z轴方向)的大小，在其内部具有:收容了上述容器组20、嘴头50、图1说明的嘴头移动机构51以及CPU+程序的框体11 ;设于上述框体11的操作面板13 ;及设有工作台的抽屉15。
[0139]图12 (b)是透视上述框体11内部的立体图，组装了容器组20的工作台设置成能够通过上述抽屉15而向外部抽出，进而上述嘴头50设置成能够通过图1的上述嘴头移动机构51向X轴方向移动。
[0140]如图12 (b)所示，该嘴头50大致包括:具有上述排列体Y轴移动机构41、架台Z轴移动机构35以及嘴Z轴移动机构75的各种移动机构52 ;可横动嘴吸引排出机构17 ;上述测量器40 ;连接端排列体30 ;光纤(束)33i ;上述磁力部57。另外，上述可横动嘴吸引排出机构17以及该可横动嘴7、由上述排列体Y轴移动机构41支承为能够以在专用区域20i中横动的方式向Y轴方向移动。
[0141]图13是放大表示图12所示的容器组20的俯视图。该容器组20中，长度方向沿着X轴方向并一列状地排列有收容部的12个专用区域20i (i = 1，…，12)例如间距为18mm而与Y轴方向平行排列。在各专用区域20i中分体设有本发明第6实施方式的PCR扩增用的盒容器2011、核酸提取用的盒容器2021、尖头收容用盒容器203”另外，各专用区域2(^的盒容器201^202^2034^ X轴方向的单侧的边缘上设有分隔壁201^202^203。，可防止专用区域20i之间的交叉污染。[0142]上述PCR扩增用盒容器201具有:上述反应用收容部Si，经由更具有透光性的一个密闭盖253i以能够拆装的方式连接在设于上述导光用架台32上的12个上述连接部31i上，并且预先收容有PCR反应所需的缓冲液等核酸扩增用溶液；收容了上述密闭盖253i的密闭盖收容部25i ;尖头等收容部21i，分别收容用于对覆盖上述反应用收容部Si以及细口管部Sbi的可穿孔薄膜Sc进行穿孔的穿孔用尖头212i以及分注头211，其中，优选设置显示与该PCR扩增用盒容器201i有关的上述检体信息和检查信息的条形码。
[0143]上述核酸提取用的盒容器202i具有收容核酸提取用的各种试剂的例如7个液收容部272i ;收容被提取的核酸的反应用管232i ;显示与该盒容器相关的各种信息、例如检体信息以及检查信息的条形码82it)上述反应用收容部Si以及上述反应用管232i能够由上述温度控制器29控制温度。 [0144]上述尖头收容用盒容器203i具有收容部21i;该收容部2^收容能够对覆盖上述核酸提取用盒容器202i的薄膜进行穿孔的穿孔用尖头、进行少量液体的分注的两根少量分注头、通过从外部施加且除去磁力而能够将磁性粒子吸附于内壁并分离的分离用分注头等，优选具有显示与该盒容器203,相关的各种信息的条形码。
[0145]上述反应用收容部Si的容量为约200 μ L程度、其他的各反应容器、各液收容部以及管的容量为约2mL程度。
[0146]上述反应用收容部Si用于核酸及其片段的扩增，通过上述温度控制器29例如基于热循环仪(4°C到95°C)等的规定扩增法进行温度控制。该反应用收容部Si例如图10(b)所示形成两段，具有设于下侧并收容上述扩增用溶液Sfi的细口管部Sbi和设于上侧并能够嵌合上述密闭盖253i的广口管部8ait)该广口管部8?的内径例如为8mm，细口管部Sbi的开口部的内径例如为5_程度。在收容于反应管收容孔中的反应用管232i中，为进行培养(incubation)例如温度控制在55°C的恒温状态。
[0147]上述液收容部组272i中如下所示地收容分离提取用溶液。在第I液收容部中收容40 μ L的溶菌(Lysis) 1，在第2液收容部中收容200 μ L的溶菌2，在第3液收容部中收容500 μ L的结合缓冲液，在第4液收容部中收容磁性粒子悬浮液，在第5液收容部中收容700 μ L的清洗液1，在第6液收容部中收容700 μ L的清洗液2，在第7液收容部中收容50 μ L的蒸馏水作为分解液，在稍离开的第8液收容部中收容1300 μ L的用于蛋白质去除等的异丙醇(isopropanol)来作为上述蛋白质分离提取用溶液的一部分。其各开口部通过可穿孔薄膜覆盖，从而上述各试剂等被预包装。
[0148]此外，在另设的蒸馏水槽中收容1.2mL的蒸馏水，对应各专用区域2(^的每一个另行准备有收容细菌、细胞等悬浮液或全血等检体的管。
[0149]图14表示本发明的第7实施方式例的嘴头50的主视图以及侧视图，并且图15表示从正面侧观察的立体图。
[0150]该嘴头50具有:排列了 12个嘴71i的嘴排列部70 ;能够对安装在上述嘴Yli上的分注头211i进行拆卸和安装的尖头拆装机构59 ;吸引排出机构53 ;具有12个设成能够相对上述分注头21^进行连接和分离的磁铁571的磁力部57 ;导光用架台32 ;设于该导光用架台32上的12个连接部31i ;具有嘴Z轴移动机构75和架台Z轴移动机构35的移动机构部52 ;从连接部31i向后侧延伸的具有可挠性的作为导光部的光纤(束)33i ;连接端排列体30 ;该排列体Y轴移动机构41 ;具有测量端44的测量器40 ;可横动嘴7^ ;该可横动嘴71。的吸引排出机构17。
[0151]在上述嘴排列部70设有支承12根缸体531i使其以规定的上述间距例如18mm沿Y轴方向排列的缸体支承部件73，在各缸体531i的下方的前端以与该缸体531i连通的方式设有上述嘴7Iit5
[0152]尖头拆装机构59在两侧设有拆装用主轴593并具有将12根分注头21 Ii通过使其沿上下方向滑动而相对嘴71i进行拆装的尖头拆装部件591。
[0153]如图16或图17具体所示，上述尖头拆装部件591与两根尖头拆装用主轴593的下降联动地使分注头211i相对上述嘴71i进行拆装。上述尖头拆装用主轴593由以向上方施力的方式卷绕于外周的弹簧600弹性地支承于上述缸体支承部件73，其上端比上述缸体531,的上端靠上方、而比后述的缸体用驱动板536的通常的吸引排出的上下移动范围的下限位置靠下方。通过上述缸体用驱动板536超过上述上下移动范围而下降至缸体53込的上端附近，两根该尖头拆装用主轴593被向下方按压，从而使尖头拆装部件591下降。在该导通拆装部件591上，具有比上述嘴71的外径大但比作为上述分注头211的最大外径的安装部211iC小的内径的12个孔以上述间距排列以供该嘴71i贯通。
[0154]如图16或图17具体所示，上述吸引排出机构53具有:与上述嘴71i连通而用于对安装于该嘴71的分注头21 Ii的内部进行气体的吸引排出的上述缸体531i以及在缸体53込内滑动的活塞用杆532 ;驱动该活塞用杆532的驱动板536 ;与该驱动板536螺纹接合的滚珠丝杠533 ;轴支承该滚珠丝杠533并与上述缸体支承部件73 —体形成的嘴Z轴移动体535 ;及载置于该嘴Z轴移动体535上并且旋转驱动上述滚珠丝杠533的马达534。
[0155]上述磁力部57具有设成能够与可拆装地安装在上述嘴71i上的分注头211i的细径部211ia接近或分离、且能 够对分注头211i内施加且去除磁场的磁铁571。
[0156]如图16具体所示，上述嘴Z轴移动机构75具有:滚珠丝杠752，与上述嘴Z轴移动体535螺纹接合而使该Z轴移动体535沿Z轴方向上下移动；嘴头基体753，轴支承该滚珠丝杠752，并在其下侧将上述磁铁571支承为能够沿X轴方向移动并且通过后述的嘴头移动机构51而其自身能够沿X轴方向移动；及马达751，设于该嘴头基体753的上侧并旋转驱动上述滚珠丝杠752。
[0157]如图16具体所示，上述导光用架台32由剖面L字状板的水平板32a和垂直板32b构成，能够与上述PCR用管231的各开口部直接或间接连接，具有与所连接的上述PCR用管231i内部光学连接的光纤(束)33i的前端的12个圆柱状的连接部31i从上述水平板32a向下方突出设置。另外，在该连接部31i的根基处内置有对安装在该连接部31i上的密闭盖25込进行加热来防止结露的加热器37。该加热器37的温度例如预先设定为105°C程度。该导光用架台32通过上述嘴头架台Z轴移动机构35能够沿Z轴方向移动地支承在嘴头基体753上，所以能够在嘴X轴方向和Z轴方向上移动。
[0158]该架台Z轴移动机构35具有:设于上述嘴头基体753的侧板355 ;架台驱动用带状部件354，由架设在轴支承于该侧板355的沿垂直方向排列的两个链轮353之间的时序带352支撑而沿Z轴方向上下移动；及马达，安装在上述嘴头基体753的背侧来旋转驱动该链轮 353。
[0159]如图17所示，在上述可横动嘴吸引排出机构17，在上述吸引排出机构17的下侧、上述嘴7、的上侧设有尖头拆装机构592。另外，嘴上述吸引排出机构17上设有数码相机19。该吸引排出机构17安装在架设于由马达172旋转驱动的两个链轮173之间的时序带171上，设置成能够沿Y轴方向移动。
[0160]图18是上述第7实施方式的嘴头的从背面侧进行观察所得的两个立体图，表示使上述连接端排列体30的各连接端和上述各测量端依次光学连接时的、连接开始位置(图18(a))和连接终止位置(图18 (b))。
[0161]具有:连接端排列体30，在上述连接部31i设置光纤(束)33,的前端，贯通上述导光用架台32的水平板32a，其后端对应各连接部31i而设置，将连接端3七在作为规定路径的沿Y轴方向的直线的路径上以比各连接部31i的间隔短的间隔排列在排列面上；和测量器40，与上述排列面接近或接触地设置，具有能够与该各连接端31沿上述直线依次光学连接的6个测量端，通过该连接端和该测量端的光学连接能够接收上述反应用收容部Si内的形成光学状态的荧光并能够照射激发光。
[0162]另外，在上述导光用架台32，从连接部31i正上方的水平板32a向上方突出设置有筒状体311i，该筒状体31^对从上述连接部31i向后侧延伸的光纤(束)33i以在内部穿通的方式进行保持以防止该光纤(束)33?弯折。同样地，在上述连接端排列体30，在连接端31侧也设置有筒状体301，该筒状体301i对从连接端31延伸的光纤(束)33i以在内部穿通的方式进行保持以防止该光纤(束)33?弯折。
[0163]使该连接端排列体30沿Y轴方向移动的上述排列体Y轴移动机构41具有:设于上述连接端排列体30的臂部412、413 ;使该臂部412、413和时序带结合的结合体411 ;将结合体411沿Y轴方向移动引导的导轨414 ;架设该时序带并沿Y轴方向排列的两个链轮。
[0164]上述测量器40是与荧光的测量对应的装置，由与六种荧光的测量对应地沿作为上述规定路径的Y轴方向的直 线以直列状排列的六种特定波长测量器40j构成，固定设置在嘴头50的基体、例如包围移动机构部52的框架或对其进行支承的部件上。因此，测量器40不会通过设于上述移动机构部52的机构而移动。
[0165]上述测量器40具有多种(本例子中为六种)特定波长测量器40」(j =
1,2, 3,4, 5,6)的测量端，因此，这种情况下，使特定波长测量器4(^_自身排列成一列状而使用固定件45」一体地固定在与上述嘴头基体753连结的部件上。各特定波长测量器40」具有:作为规定路径沿上述Y轴方向的直线状的路径排列以与上述连接端31依次光学连接的测量端44」；光检测部46」，内置有光学系统，该光学系统具有对上述PCR用管231i照射激发光的照射源以及接收由上述反应用收容部Si产生的荧光的受光部；以及电路基板47」。上述测量端44」具有与上述照射源光学连接的第I测量端42」和与上述受光部光学连接的第2测量端43」。此处，光检测部46」和电路基板47」相当于上述测量器主体。
[0166]当连接部31i间的间距例如为18mm时，各连接端3七之间的间距例如为其一半即9mm。这样一来，上述测量端44」间的间距例如为9mm以下。
[0167]该各特定波长测量器啤的测量端41的第I测量端42」和第2测量端43」存在沿上述规定路径且沿Y轴方向的直线在横向(Y轴方向)上并列排列的情况和在纵向(X轴方向)上并列排列的情况。前者的情况下，不停止激发光的发光，以基于上述连接端排列体的速度、连接端间的间距、测量端的第I测量端与第2测量端之间的距离、测量端间的间距来规定的受光的时序，各测量器依次进行受光。
[0168]另一方面，后者的情况下，如图18所示，关于连接端，设置第I连接端和第2连接端，第I连接端仅与上述第I测量端42」连接，第2测量端43」仅与第2连接端连接，上述规定路径为两条路径，光纤(束)33,包括具有上述第I连接端的受光用光纤(束)331,和具有第2连接端的照射用光纤(束)332it)这种情况下，与前者的情况相比较，照射源和受光部通过专用光纤而与上述连接部连接，所以控制容易，能够采用分别适合照射和受光的光纤，可
靠性高。
[0169]上述连接端排列体30相对于上述测量端44」的速度是考虑到上述可稳定受光时间、荧光针对激发光照射的寿命、连接端的个数以及连接端间的间距等(规定路径的距离)而规定的，例如实时PCR的测量的情况下，被控制为秒速IOOmm到500mm。本实施方式中，由于使排列面相对于上述测量端44滑动而进行移动，所以能够防止杂光向测量端44射入。另外，上述连接端排列体30以按照每当前进一个上述连接端间或测量端间的间距则瞬间停止的方式间歇或连续地相对于上述测量端进行移动。
[0170]接着，关于使用第7实施方式的反应容器用光测量装置10进行包含细菌在内的检体的核酸的实时PCR的一连串处理动作进行说明。关于以下的步骤SI到步骤S11，相当于分离提取工序。
[0171]在步骤SI中，打开图12所示的反应容器用光测量装置10的抽屉15，抽出上述容器组20，利用与该容器组20另行设置的上述检体等的供给装置等，预先供给检查对象的检体、各种清洗液、各种试剂，另外，预先安装预包装了试剂等的液收容部。
[0172]在步骤S2中，使容器组20复原并关闭上述抽屉15之后，通过上述操作面板13的触屏等的操作来指示分离提取和扩增处理的开始。
[0173]在步骤S3中，上 述反应容器用光测量装置10的CPU +程序的核酸处理控制部中设置的提取控制部对上述嘴头移动机构51进行指示，使上述嘴头50沿X轴方向移动，使安装在上述嘴71i上的穿孔用尖头位于上述容器组的液收容部组27,的最初的液收容部的上方，通过嘴Z轴移动机构75使嘴下降，从而对覆盖上述液收容部的开口部的薄膜进行穿孔，同样地，使上述嘴头50沿X轴方向移动，关于该液收容部组27i的其他液收容部和反应容器组23i也进行依次进行穿孔。
[0174]在步骤S4中，使上述嘴头50再次沿X轴方向移动，移动到尖头等收容部组211i，并且通过上述嘴Z轴移动机构75使上述各嘴71i下降，安装分注头211”接着，通过上述嘴Z轴移动机构75使该分注头21 Ii上升后，并通过上述嘴头移动机构51而沿X轴移动，进入上述液收容部组27i的第8液收容部中，从该液收容部吸引规定量的异丙醇(isopropanol)，并再次使该分注头211沿X轴移动，以规定量逐一地分注收容在第3液收容部和第5液收容部中的溶液成分(Nacl (氯化钠)、SDS (十二烷基硫酸钠)溶液)以及收容在上述第6液收容部中的蒸馏水，从而在第3、第5、第6各液收容部内作为分离提取用溶液分别调制500 μ L的结合缓冲液(NaCl、SDS、异丙醇)、700μ L的清洗液I (NaCl、SDS、异丙醇)、以及700 μ L的清洗液2 (50%水、50%异丙醇)。
[0175]在步骤S5中，分注头21 Ii的细径部21 Iia移动到尖头等收容部组21i内另行收容有检体的检体用管后，使用嘴Z轴移动机构75使分注头21^的细径部211^下降插入，使上述吸引排出机构53的驱动板536上升或下降，从而对于收容在该检体用管中的检体的悬浮液，反复进行吸引排出而使该检体在液体中悬浮后，将该检体悬浮液吸引在分注头211i内。该检体悬浮液通过上述嘴头移动机构51沿X轴而移动到收容有作为分离提取用溶液的溶菌I (酶)的液收容部组27i的第I液收容部，通过被穿孔后的薄膜的孔而插入上述分注头21込的细径部211^，为了搅拌上述检体悬浮液和上述溶菌I而反复进行吸引排出。
[0176]在步骤S6中，所搅拌的该液体的全部量由上述分注头211i吸引，收容在由上述恒温控制部设定为55°C的保持在上述收容孔中的各反应用管232i中，进行培养。由此，含于上述检体中的蛋白质被破坏而低分子化。经过规定时间后，该反应液残留于上述反应用管中的状态下，由上述嘴头移动机构51将上述分注头211i移动到上述液收容部组27i的第2液收容部中，使用嘴Z轴移动机构75和上述吸引排出机构53吸引该第2液收容部内收容的液体的全部量，并通过嘴头移动机构51使用并移送上述分注头211i，将上述细径部贯通上述薄膜的孔而插入上述第3液收容部内，排出上述反应溶液。 [0177]在步骤S7中，将收容在该第3液收容部内的作为分离提取溶液的结合缓冲液和上述反应溶液进行搅拌，使可溶的蛋白质进一步脱水，使核酸及其片段分散在溶液中。
[0178]在步骤S8中，使用上述分注头21 Ii将其细径部贯通上述薄膜的孔而插入该第3液收容部中，吸引全部量，由嘴Z轴移动机构75使该分注头211i上升，将该反应溶液移送至第4液收容部,将收容在该第4液收容部内的磁性粒子悬浮液和上述反应溶液进行搅拌。形成含于该磁性粒子悬浮液内的磁性粒子的表面所形成的羟基与Na+离子结合的阳离子结构。因此，带负电的DNA被磁性粒子捕获。
[0179]在步骤S9中，使上述磁力部57的磁铁571接近上述分注头21 Ii的细径部211卢，从而使该分注头211i的细径部211#的内壁吸附上述磁性粒子。在使该磁性粒子吸附在该分注头211i的细径部211ia的内壁上的状态下，该分注头211i由上述嘴Z轴移动机构75而上升，使用上述嘴头移动机构51使该分注头211i从该第4液收容部移动到第5液收容部，贯通上述薄膜的孔而插入上述细径部211^。
[0180]使上述磁力部57的上述磁铁571从该分注头21 Ii的细径部21 Ip离开，从而在除去上述细径部211ia内的磁力的状态下，对于收容在该第5液收容部中的清洗液I (NaCl、SDS、异丙醇)反复进行吸引排出，从而使上述磁性粒子从上述内壁脱离，在清洗液I中进行搅拌，从而清洗蛋白质。之后，在通过再次使上述磁力部57的磁铁571接近上述分注头21込的细径部211ia而使上述磁性粒子吸附在细径部211ia的内壁上的状态下，由上述嘴Z轴移动机构75使上述分注头211i上升后由上述嘴头移动机构51使其从该第5液收容部移动至第6液收容部。
[0181]在步骤SlO中，使用嘴Z轴移动机构75贯通上述薄膜的孔而插入上述分注头21込的细径部211^。使上述磁力部57的磁铁571从上述分注头21 Ii的细径部211卢离开，从而在除去上述细径部21 Iia内的磁力的状态下，对于收容在该6液收容部中的清洗液2 (异丙醇)反复进行吸引排出，从而使上述磁性粒子在液体中搅拌，除去NaCl和SDS，将蛋白质清洗。之后，在通过再次使上述磁力部57的磁铁571接近上述分注头211i的细径部211卢而使上述磁性粒子吸附在细径部211ia的内壁上的状态下，由上述嘴Z轴移动机构75使上述分注头211i上升之后由上述嘴头移动机构51使其从该第6液收容部移动至收容有蒸馏水的上述第7液收容部。
[0182]在步骤Sll中，通过嘴Z轴移动机构75使上述分注头21 Ii的细径部21 Ip通过上述孔而下降，将上述磁力施加给上述分注头21^的细径部211ia内的状态下，以缓慢的流速反复进行上述水的吸引排出，从而将异丙醇置换为水而去除。之后，在使上述磁力部57的磁铁571从上述分注头211i的细径部211#离开而除去磁力的状态下，在作为上述分解液的蒸馏水中反复进行吸引排出，从而进行搅拌，使上述磁性粒子所保持的核酸或其片段从磁性粒子分离(析出)到液体中。之后，通过使上述磁铁571接近上述分注头211i的细径部211^，从而对细径部内施加磁场，使磁性粒子吸附在内壁上，使含有所提取的核酸等的溶液残留在上述第8液收容部内。由嘴头移动机构51使上述分注头211i移动到上述尖头等收容部组21i的收容有该分注头211i的收容部，使用上述尖头拆装机构59的上述拆装部件591从该嘴71i使吸附了磁性粒子的该分注头211i与上述磁性粒子一起相对该收容部内拆装。
[0183]接着，从步骤S12到步骤S15相当于核酸扩增和测量工序。
[0184]在步骤S12中，对该嘴71i安装新的分注头21 Ii,吸引上述第8液收容部内收容的含有核酸等的溶液，并移送到预先收容有扩增用溶液Sfi的上述反应用收容部Si中而排出，并导入该容器内。由上述嘴头移动机构51使上述嘴头50移动，使上述嘴71i移动到收容上述容器组20的密闭盖253i的密闭盖收容部81?的上方。使用上述嘴Z轴移动机构75使其下降，从而使上述密闭盖253的上侧的空洞253f与嘴71i的下端嵌合而进行安装。该密闭盖253由该嘴Z轴移动机构75上升后，使用上述嘴头移动机构51使其位于上述反应用收容部8i上，由上述嘴Z轴移动机构75使密闭盖253下降而与该反应用收容部Si的广口管部Sai的开口部嵌合从而密闭安装。
[0185]在步骤S13中，根据上述测量控制部的指示，指示上述嘴头移动机构51，使嘴头50沿X轴移动，从而使上述导光用架台32的上述连接部31i位于安装有上述密闭盖253i的反应用收容部Si上方，由上述架台Z轴移动机构35使上述导光用架台32下降，从而使上述连接部31i插入上述密闭盖253i的空洞253A内，使其下端接触或密接于该空洞的底面253gi。
[0186]在步骤S14中，根 据上述核酸处理控制部的指示，上述温度控制器29例如指示反复进行49次实时PCR的温度控制的循环、例如将该反应用收容部Si以96度加热5秒钟、以60度加热15秒钟的循环。
[0187]在步骤S15中，当上述核酸处理控制部开始各循环中的温度控制时，上述测量控制部判断各循环中的伸长反应工序的开始，指示上述连接端排列体30相对上述测量器40的各测量端44」连续或间歇移动。其移动速度以基于上述可稳定受光时间、荧光寿命以及上述专用区域20i的个数(该例子中为12个)等算出的速度移动。由此，在上述可稳定受光时间内完成从全部12个反应用收容部Si接收光。
[0188]在步骤S16中，上述测量控制部判断例如上述连接部31i的光纤(束)33i和上述测量端44的第一测量端、第二测量端的各个光学连接的瞬间并指示上述测量器40受光。
[0189]该测量针对进行指数函数的扩增的循环而执行，基于该测量得到扩增曲线，基于该扩增曲线进行各种分析。另外，测量时上述测量控制部能够加热内置于上述导光用架台32的加热器37，防止上述密闭盖253结露，能够进行明确的测量。
[0190]以上的实施方式例中，为了更好地理解本发明而进行了具体的说明，但是并非限制方式。因此，在不变更本发明主旨的范围能够进行变更。例如，关于嘴、分注头、穿孔尖头、容器组、其专用区域、收容部、反应用收容部、广口管部、细口管部、测量端、测量器、特定波长测量器、吸引排出机构、移动机构部、磁力部、加热部、反应容器、密闭盖、导光用架台、连接部、导光部、连接端、连接端排列体、连接部排列体、嘴头、温度控制器等的结构、形状、材料、排列、量、个数以及所使用的试剂、检体等都不限于实施方式例。另外，设为使嘴相对容器组移动，但是也能够使容器组相对嘴移动。
[0191]另外，以上的说明中，在上述反应用收容部的密闭中使用了密闭盖，但是也能够取而代之、或并用地、使用矿物油等密闭液进行密闭。另外，也可以代替在上述嘴上安装穿孔用尖头来进行穿孔，而使用由吸引排出机构驱动的穿孔销。另外，以上的说明中，关于实时PCR的测量进行了说明，但是不限于该测量，也能够适用于进行温度控制的其他各种测量。另外，在以上的说明中，说明了将上述测量器设于分注装置的情况，但是不限于此。
[0192]另外，本发明的各实施方式例中说明的装置、形成这些装置的部件或形成这些部件的部件除了能够适当选择、适当变更外、还能够适当组合。另外，本申请中的“上方”、“下方”、“内部”、“外部”、“X轴”、“Y轴”、“Z轴”等空间的表示仅限图解之用，并不限制所述结构的特定的空间上的方向或位置。
[0193]工业实用性
[0194]本发明例如涉及要求进行主要包含DNA、RNA> mRNA、rRNA、tRNA的核酸的处理、检查、分析的领域、例如工业领域、食品、农业、水产加工等农业领域、药品领域、制剂领域、卫生、保险、疾病、遗传等医疗领域、生物化学或生物学等理学领域等。本发明特别能够应用于PCR、实时PCR等处置各种核酸等的处理和分析。
[0195]附图标记说明:
[0196]1、3、5、8反应用收容部
[0197]la、3a、5a、8a广口管部
[0198]lb、3b、5b、8b细口管部
[0199]lc、3c、5c、8c可穿孔薄膜
[0200]lf、3f、5f、8f反应用试剂
[0201]2、4、6、7、9、201 反应容器
[0202]10反应容器用光测量装置
[0203]20容器组
[0204]20i (i=l,..., 12)专用区域
[0205]21込(i=l,…，12)分注头
[0206]212穿孔用尖头
[0207]231i,236i (i=l,..., 12) PCR 用管(反应容器)
[0208]251、252、253密闭盖
[0209]251a、252a、253a栓部
[0210]251b、252b、253b突条
[0211]251c、252c、253c圆筒部件
[0212]251d、252d、252d压入部
[0213]251e、252e、252e环状突部
[0214]251f.252f.253f空洞
[0215]251g、252g、253g空洞的底
[0216]252hO 型圈
[0217]253h环状突部[0218]29温度控制器
[0219]30连接端排列体
[0220]31^14^(1=1,...,12)连接部
[0221]32导光用架台
[0222]33iU42i光纤(导光部) [0223]40、140测量器
[0224]40」.(」=1，…，6)特定波长测量器
[0225]44测量端
[0226]50嘴头
[0227]52移动机构部
[0228]53吸引排出机构
[0229]59尖头拆装机构
[0230]70嘴排列部
[0231]7込(i=l,…，12)嘴
【权利要求】
1.一种反应容器，具有一个或两个以上反应用收容部，该反应用收容部具有: 细口管部，收容或能够收容反应用试剂或其一部分； 广口管部，与该细口管部连通，设于该细口管部的上侧，且具有比所述细口管部的开口部宽的开口部；及 可穿孔薄膜，设成将该广口管部与所述细口管部之间分隔。
2.根据权利要求1所述的反应容器，其中，所述细口管部的开口部设于该广口管部的底部的中央。
3.根据权利要求1或2所述的反应容器，其中，所述细口管部与所述广口管部一体形成，所述薄膜附着于所述广口管部的底部。
4.根据权利要求1或2所述的反应容器，其中， 所述广口管部与所述细口管部分体形成， 在所述广口管部的底部的中央穿设孔部，所述细口管部沿其开口部的外周具有包围该开口部的开口缘部，所述细口管部设成除了所述开口缘部之外能够贯通所述孔部，所述细口管部以贯通所述孔部的方式从广口管部的所述孔部向下方突出，所述开口缘部安装于所述广口管部的底部，所述薄膜附着于所述细口管部的所述开口缘部。
5.根据权利要求1至4所述的反应容器，其中，还具有密闭盖，该密闭盖安装于所述反应用收容部的所述广口管部的开口部，密闭该反应用收容部，并具有透光性。
6.根据权利要求5所述的 反应容器，其中，所述密闭盖具有: 栓部，能够与所述广口管部嵌合，能够对来自所述细口管部的光进行导光 '及 压入部，设于所述栓部的前端，在该栓部与广口管部嵌合的情况下能够插入所述细口管部的开口部并将穿孔后的所述薄膜压于细口管部的内壁，并且能够对来自所述细口管部的光进行导光。
7.根据权利要求1至6所述的反应容器，其中，所述广口管部或密闭盖设成能够与连接部连接，所述连接部设有将设于所述反应容器的外部的光测量器与所述反应用收容部内部光学连接的一个或两个以上导光部的前端。
8.根据权利要求5至7所述的反应容器，其中，所述密闭盖具有设于该密闭盖中央的空洞和封闭该空洞的下端的具有透光性的底面，该密闭盖向该反应用收容部的移动、嵌合和/或与所述连接部的连接通过设于反应容器的外部的部件和/或所述连接部插入所述空洞来进行。
9.根据权利要求1至8所述的反应容器，其中，还具有两个以上凹部排列成一列状的基板，并且在该凹部的一个凹部形成所述反应用收容部，在除形成有所述反应用收容部的凹部之外的其他凹部具有盒容器，该盒容器收容或能够收容用于移动到所述反应用收容部而进行处理的器具。
10.根据权利要求9所述的反应容器，其中，在除形成有所述反应用收容部的凹部之外的所述其他凹部设有:收容所述密闭盖的密闭盖收容部、收容对所述薄膜进行穿孔的穿孔用尖头的穿孔用尖头收容部和/或收容分注头的分注头收容部。
11.根据权利要求9或10所述的反应容器，其中，形成于所述凹部的所述反应用收容部的所述广口管部由形成于所述基板的具有开口部的凹部构成，所述细口管部与所述广口管部分体形成，在所述广口管部的底部的中央穿设孔部，所述细口管部具有包围该开口部的开口缘部，所述细口管部以贯通所述孔部的方式从广口管部的所述孔部向下方突出，所述开口缘部安装于所述广口管部的底部，所述薄膜附着于所述细口管部的所述开口缘部。
12.—种反应容器制造方法， 分体制造在底部的中央穿设有孔部的广口管部和沿开口部的外周具有包围该开口部的开口缘部的细口管部， 在所述细口管部内收容或未收容反应用试剂或其一部分， 使可穿孔薄膜附着于所述细口管部的所述开口缘部， 使所述细口管部以除该开口缘部之外贯通所述孔部的方式从该广口管部的所述孔部向下方突出，将所述开口缘部安装于所述广口管部的底部，从而制造反应用收容部。
13.一种反应容器制造方法， 分体制造形成有两个以上的凹部并在该凹部的一个凹部的底部的中央穿设有孔部的基板和沿开口部的外周具有包围该开口部的开口缘部的细口管部， 在所述细口管部内收容或未收容反应用试剂或其一部分， 使可穿孔薄膜附着于所述细口管部的所述开口缘部， 使所述细口管部以除该开口缘部之外贯通所述孔部的方式从该广口管部的所述孔部向下方突出，将所述开口缘部安装于所述凹部的底部而形成反应用收容部，从而制造盒容器。
14.一种反应容器系统， 嘴头，该嘴头设有一个或两个以上嘴，该嘴以能够拆装的方式安装进行气体的吸引和排出的吸引排出机构以及能够通过该吸引排出机构进行液体的吸引和排出的分注头；容器组，至少具有收容或能够收容用于反应的反应用溶液或其一部分的权利要求1至11中任一项所述的反应容器； 嘴移动机构，能够在所述嘴头与所述容器组之间相对移动； 温度控制器，能够进行所述反应容器内的温度控制； 导光用架台，设于所述嘴头，且具有两个以上连接部，该连接部能够与所述反应容器的所述反应用收容部直接或间接连接，并设有与所连接的该反应容用收容部内部光学连接的一个或两个以上的导光部的前端； 连接端排列体，与所述各连接部对应设置，并具有沿规定路径排列支承两个以上连接端的排列面，该连接端设有前端设于所述连接部的所述导光部的后端；及 测量器，设成与所述排列面接近或接触，通过与该各连接端的光学连接而能够接收基于所述反应容器内的光学状态的光， 使沿所述连接端排列体的所述规定路径设置的所述各连接端和所述各测量端以依次光学连接的方式相对移动。
15.根据权利要求14所述的反应容器系统，其中，所述容器组中还具有两个以上液收容部，该液收容部收容:悬浮有能够捕获检体、反应的目标物的磁性粒子的磁性粒子悬浮液、用于所述目标物的分离和提取的分离提取用溶液；所述容器组中还具有磁力部，该磁力部能够对安装于所述嘴的所述分注头或设于所述容器组的液收容部的内部施加和除去磁场而能够将所述磁性粒子吸附于所述分注头或所述液收容部的内壁。
【文档编号】G01N1/10GK103547666SQ201180070156
【公开日】2014年1月29日 申请日期:2011年8月19日 优先权日:2011年2月22日
【发明者】田岛秀二 申请人:环球生物研究株式会社
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