专利名称：中药金银花全时段三波长融合同时测定四种成分含量的方法
技术领域：
本发明属于采用现代分析检测手段和信息处理手段对中药材的质量进行检测的技术领域，涉及ー种中药材质量的控制方法，更具体的说是ー种全时段三波长融合同时测定中药金银花四种成分含量的方法。
背景技术：
据中华人民共和国药典2010年版一部记载本品为忍冬科植物忍冬ZofliceraJaponica Thunb.的干燥花蕾或带初开的花。芳香的金银花是我国古老的药物，享有“药铺小神仙之誉”。本品性甘，寒。归肺、心、胃经。清热解毒，凉散风热。《神农本草经》载“金银花性寒味甘，具有清热解毒、凉血化瘀之功效，主治外感风热、瘟病初起、疮疡疔毒、红肿热痛、便脓血”等。药理研究表明金银花具有抗病原微生物、抗炎、解热、保肝、抗生育、止血、 免疫调节、降血脂、中枢兴奋等作用；临床上主要用于多种感染、各种炎症、高热症、高脂血症、肿瘤放疗、化疗ロ干症等。金银花在我国资源丰富，分布广泛，主产山东、河南等省，山东金银花产量大，俗称济银花、东银花；河南产品质佳，俗称密银花。至目前为止，已经发现的化学成分主要有挥发油、黄铜类、有机酸、三萜类、无机元素等。随着科学技术的发展，现代先进分析检测仪器的普遍使用以及信息处理技术的逐步完善，使中药分析检测水平有了显著提高，中药质量控制方法得到不断改进。近年来通过建立指纹图谱对中药材指标成分进行含量測定成为中药质量控制和评价的一种发展趋势。中药指纹图谱是指某些中药材或中成药经过适当处理后，利用现代信息采集技术和质量分析手段得到的能够显现中药材或中成药化学特征的光谱图或色谱图。由于在三个不同色谱条件下使用不同的前处理方法对金银花中绿原酸、咖啡酸、芦丁和木犀草苷分别进行检测是无法实现对金银花指纹图谱进行全面和整体评价的，因此，遵循信息最大化原则建立金银花药材全时段三波长融合指纹图谱并对其指标成分进行含量測定可以获取一种较为有效的质量控制方法，从而保证金银花药材质量的安全、稳定和可靠。金银花药材在中药材中占有十分重要的地位。目前，市售的金银花药材质量參差不齐，因此甘草药材的稳定性难以保证。2010版中国药典规定的含量測定本品按干燥品计算，含绿原酸(C16H18O9)不得少于I. 5% ;木犀草苷(C21H2tlO11)不得少于O. 050%。
发明内容
本发明目的在于采用现代分析检测手段和信息处理手段建立金银花药材的全新指纹图谱，及以该指纹图谱为基础的全时段多波长融合的含量測定方法，以确保金银花药材的质量控制方法更加简便、合理、可靠。本发明是通过以下技术方案实现的
中药金银花全时段三波长融合同时测定四种成分含量的方法，其特征在于该方法按如下步骤进行(1)供试品溶液的制备取金银花药材粉末(过40目筛)约2g，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入水20mL，称定重量，加热回流I. 5小时，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液即得；
(2)对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品、咖啡酸对照品、芦丁对照品和木犀草苷对照品适量，加甲醇分别制成每ImL含绿原酸对照品2. 413mg、咖啡酸对照品O. 783mg、芦丁对照品O. 235mg和木犀草苷对照品O. 262mg的溶液，即得；
(3)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基键合硅胶为填充剂的AgilentTC-C18 (4. 6mmX250 mm, 5微米)色谱柱；以I %醋酸水为流动相A，以こ腈为流动相B，按表I中的规定进行梯度洗脱；流速I. OmL/min ;柱温25 V ；DAD检测器在波长254nm、327nm和350nm下同时进行检测；进样量20 μ L ;理论塔板数计算，应不低于3000 ；
表I流动相梯度洗脱表
权利要求
1.中药金银花全时段三波长融合同时测定四种成分含量的方法，其特征在于该方法按如下步骤进行 (1)供试品溶液的制备取过40目筛的金银花药材粉末2g，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入水20mL，称定重量，加热回流I. 5小时，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液即得； (2)对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品、咖啡酸对照品、芦丁对照品和木犀草苷对照品适量，加甲醇分别制成每ImL含绿原酸对照品2. 413mg、咖啡酸对照品O. 783mg、芦丁对照品O. 235mg和木犀草苷对照品O. 262mg的溶液，即得； (3)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基键合硅胶为填充剂的AgilentTC-C18色谱柱，色谱柱规格为4. 6mmX250 mm, 5微米；以I %醋酸水为流动相A，以こ腈为流动相B，按表I中的规定进行梯度洗脱；流速I. OmL/min ;柱温25°C ;DAD检测器在波长254nm、327nm和350nm下同时进行检测；进样量20 μ L ;理论塔板数计算，应不低于3000 ； 流动相梯度洗脱技术參数为
2.根据权利要求I所述的中药金银花全时段三波长融合同时测定四种成分含量的方法，其特征在于，全时段三波长融合采用三波长融合指纹图谱技术将254nm、327nm和350nm三个波长下的谱图数据进行全时段融合，得到ー张能够同时包含三个波长信息的色图谱。
全文摘要
本发明公开了中药金银花全时段三波长融合同时测定四种成分含量的方法，它是将现代分析检测手段和信息处理手段结合起来，有效融合中药材指标成分的谱图信息，所测成分均为最大紫外吸收波长，增大检测成分的信噪比，可以克服单一波长单一指标检测时信息量不足的缺点，从而可以较完善地反映中药材的内在质量。本发明的四种成分质量控制方法操作简单、稳定可靠、重现性较好，可用于中药材质量评价和控制及中药新药研发中。特别是可将其作为金银花药材质量控制及真伪鉴别的指标之一。
文档编号G01N30/02GK102692460SQ20121015879
公开日2012年9月26日 申请日期2012年5月22日 优先权日2012年5月22日
发明者包永睿, 姚东, 孟宪生, 崔亚玲, 王帅 申请人:辽宁中医药大学