专利名称：一种用液相色谱法分离测定埃索美拉唑镁及其光学异构体的方法
技术领域：
本发明属分析化学领域，具体涉及用液相色谱法分离测定埃索美拉唑镁及其光学异构体的方法。
背景技术：
埃索美拉唑镁是一种治疗胃食管反流性疾病(GERD)的药物，包括治疗和维持治疗糜烂性食管炎和减少非甾体消炎药引起的胃溃疡。分子式为C34H42MgN6O9S2,其化学名为双-S-5-甲氧基-2-{[(4-甲氧基-3，5-二甲基-2-吡啶基)甲基]亚磺酰基}-IH-苯并咪唑镁三水合物。埃索美拉唑镁的化学结构式为
w,OCH3
OCH3I
Mg2' 3Η20
H2
-J 2对于埃索美拉唑镁的光学异构体为杂质，在生产埃索美拉唑镁进程中需要进行质量控制。因此，实现对埃索美拉唑镁与其光学异构体的分离测定，在埃索美拉唑镁的质量控制方面具有现实意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用手性色谱柱分离测定埃索美拉唑镁及其光学异构体的高效液相方法，从而保证埃索美拉唑镁的光学纯度的准确测定，实现对埃索美拉唑镁原料药的质量控制。本方法所述的用高效液相色谱法分离测定埃索美拉唑镁及其光学异构体(杂质)的方法，是采用直链淀粉-三(3，5_ 二甲苯基氨基甲酸酯)或纤维素-三[3，5_ 二甲苯基氨基甲酸酯]为填料的手性色谱柱，以正己烷-低级醇溶液为流动相。这里所说的液相色谱法包括高效液相色谱法或高效液相色谱法-质谱法联用。上述所说的手性色谱柱选自品牌为CHIRALCEL AD,CHIRALCEL AD_H、CHIRALCELOJ和 CHIRALCEL OJ-H 色谱柱。本发明的低级醇选自以下化合物甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇，优选为乙醇或异丙醇。本发明的方法，其流动相混合溶液中正己烷-低级醇的体积比为99 I 30 70。本发明所述的分离分析方法，可按照以下方法实现
I)取埃索美拉唑镁或含埃索美拉唑镁的制剂样品适量，用乙醇或流动相溶解样品，配制成含埃索美拉唑镁O. 2 2. Omg的样品溶液。2)设置流动相流速为O. 4 I. 5mL/min,检测波长为270 320nm，色谱柱柱箱温度为20 40°C ；3)取I)的样品溶液10 50 μ L注入液相色谱仪，完成埃索美拉唑镁与其光学异构体的分离测定。其中高效液相色谱仪的型号，无特别要求，本发明采用的色谱仪为岛津LC-lOATvp，SPD-MlOAvp色谱柱AD-H柱(CHIRALCEL，250 X 4. 6mm) 流动相正己烷-异丙醇(80 20)或正己烷-乙醇(70 30)流速0.5mT ,/mi η检测波长300nm柱温20°C进样体积20 μ L在另一具体实施方案中，本发明所述的用液相色谱法分离测定埃索美拉唑镁及其光学异构体的方法，其特征在于采用纤维素-三[3，5_ 二甲苯基氨基甲酸酯]为填料的手性色谱柱，以正己烷-低级醇溶液为流动相，其体积比为99 : I 30 : 70。，其方法包括以下步骤I)取埃索美拉唑镁或含埃索美拉唑镁的制剂样品适量，用乙醇或流动相溶解样品，配制成含埃索美拉唑镁O. 2 2. Omg的样品溶液；2)设置流动相流速为O. 4 I. 5mL/min,检测波长为270 340nm，色谱柱柱箱温度为20 40°C ；3)取I)的样品溶液10 50 μ L注入液相色谱仪，完成埃索美拉唑镁与其光学异构体的分离测定。其中高效液相色谱仪的型号，无特别要求，本发明采用的色谱仪为岛津LC-lOATvp，SPD-MlOAvp色谱柱0J-H柱(CHIRALCEL，250 X 4. 6mm)流动相正己烷-异丙醇(90 10)流速0.5mT ,/mi η检测波长300nm柱温20°C进样体积20 μ L本发明采用采用纤维素-三[3，5_ 二甲苯基氨基甲酸酯]或直链淀粉-三(3，5- 二甲苯基氨基甲酸酯)为填料的手性色谱柱，能够有效的分离测定埃索美拉唑镁及其光学异构体。本发明解决了分离测定埃索美拉唑镁及其光学异构体的分离问题，从而确保了埃索美拉唑镁原料药的质量可控。
图I :实施例I空白溶剂的高效液相色谱图；图2 :施例I埃索美拉唑镁消旋体的高效液相色谱图；图3 :实施例2埃索美拉唑镁的高效液相色谱图；图4 :实施例3空白溶剂的高效液相色谱图；图5 :实施例3埃索美拉唑镁消旋体的高效液相色谱图；图6 :实施例4埃索美拉唑镁的高效液相色谱图；图7 :实施例5空白溶剂的高效液相色谱图；
图8 :实施例5埃索美拉唑镁消旋体的高效液相色谱图；图9 :实施例6埃索美拉唑镁的高效液相色谱图。
具体实施例方式以下实施例用于进一步理解本发明，但不限于本实施的范围。实施例I仪器与条件高效液相色谱仪岛津LC_10ATvp,SPD-MIOAvp色谱柱AD-H柱(CHIRALCEL，250 X 4. 6mm)流动相正己烷-异丙醇(80 20)流速0.5mT ,/mi η检测波长300nm柱温20°C进样体积20 μ L实验步骤取埃索美拉唑镁消旋体约25mg，置50mL量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。分别取试剂空白溶液和供试品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见图I、图2。图2中保留时间为21. 313min的色谱峰为埃索美拉唑镁对映异构体的色谱峰，27. 616min的色谱峰为埃索美拉唑镁的色谱峰，由图可以看出，埃索美拉唑镁与其对映体能够达到基线分离，符合中国药典的要求。实施例2仪器与条件高效液相色谱仪岛津LC_10ATvp,SPD-MIOAvp色谱柱AD-H柱(CHIRALCEL，250 X 4. 6mm)流动相正己烷-异丙醇(80 20)流速0.5mT ,/mi η检测波长300nm柱温20°C进样体积20 μ L实验步骤
取埃索美拉唑镁原料约25mg，置50mL量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取供试品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见图3。图3中保留时间为27. 487min的色谱峰为埃索美拉唑镁的色谱峰，由图可以证明，埃索美拉唑镁的光学纯度达到原料药的要求，本法可以用于埃索美拉唑镁的质量监测。实施例3仪器与条件高效液相色谱仪岛津LC_10ATvp,SPD-MIOAvp色谱柱AD-H柱(CHIRALCEL，250 X 4. 6mm)·
流动相正己烷-无水乙醇(70 30)流速0.8mL/min检测波长300nm柱温20°C进样体积20 μ L实验步骤取埃索美拉唑镁消旋体约25mg，置50mL量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。分别取试剂空白溶液和供试品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见图4、图5。图5中保留时间为23. 147min的色谱峰为埃索美拉唑镁对映异构体的色谱峰，35. 030min的色谱峰为埃索美拉唑镁的色谱峰，由图可以看出，埃索美拉唑镁与其对映体能够达到基线分离，符合中国药典的要求。实施例4仪器与条件高效液相色谱仪岛津LC_10ATvp,SPD-MIOAvp色谱柱AD-H柱(CHIRALCEL，250 X 4. 6mm，5 μ m)流动相正己烷-无水乙醇(70 30)流速0.8mL/min检测波长300nm柱温20°C进样体积20 μ L实验步骤取埃索美拉唑镁原料约25mg，置50mL量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取供试品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见图6。图6中保留时间为35. 004min的色谱峰为埃索美拉唑镁的色谱峰，由图可以证明，埃索美拉唑镁的光学纯度达到原料药的要求，本法可以用于度洛西汀的质量监测。实施例5仪器与条件
高效液相色谱仪岛津LC_10ATvp,SPD-MIOAvp色谱柱0J-H柱(CHIRALCEL，250 X 4. 6mm，5 μ m)流动相正己烧_异丙醇(90 : 10)流速0.5mT ,/mi η检测波长300nm柱温20°C进样体积20 μ L
实验步骤取埃索美拉唑镁消旋体约25mg，置50mL量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。分别取试剂空白溶液和供试品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见图7、图8。图8中保留时间为30. 561的色谱峰为埃索美拉唑镁对映异构体的色谱峰，36. 347的色谱峰为埃索美拉唑镁的色谱峰，由图可以看出，埃索美拉唑镁与其对映体能够达到基线分离，符合中国药典的要求。实施例6仪器与条件高效液相色谱仪岛津LC_10ATvp,SPD-MIOAvp色谱柱0J-H柱(CHIRALCEL，250 X 4. 6mm，5 μ m)流动相正己烷-异丙醇(90 10)流速0.5mL/min检测波长300nm柱温20O进样体积20 μ L实验步骤取埃索美拉唑镁原料约25mg，置50mL量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取供试品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见图9。图9中保留时间为36. 244min的色谱峰为埃索美拉唑镁的色谱峰，由图可以证明，埃索美拉唑镁的光学纯度达到原料药的要求，本法可以用于埃索美拉唑镁的质量监测。
权利要求
1.一种用液相色谱法分离测定埃索美拉唑镁或/和其光学异构体的方法，其特征在于以纤维素-三[3，5_ 二甲苯基氨基甲酸酯]或直链淀粉-三(3，5_ 二甲苯基氨基甲酸酯)为填料的手性色谱柱，以正己烷-低级醇的混合溶液为流动相。
2.根据权利I所述的分离测定方法，手性色谱柱选自品牌为CHIRALCELAD,CHIRALCELAD-H、CHIRALCEL OJ 和 CHIRALCEL OJ-H 色谱柱。
3.根据权利I所述的分离测定方法，所说的低级醇选自以下化合物中的一种甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇。
4.根据权利3所述的分离测定方法，所说的低级醇为乙醇或异丙醇。
5.根据权利I所述的分离测定方法，流动相混合溶液中正己烷-低级醇的体积比99 : I 30 : 70。
6.根据权利I所述的分离测定方法，其特征在于所说的方法包括以下步骤 1)取埃索美拉唑镁样品适量，用乙醇或流动相溶解样品，配制成每ImL含埃索美拉唑镁O. 2 2. Omg的样品溶液； 2)设置流动相流速为O.4 I. 5mL/min，检测波长为270 320nm，色谱柱柱箱温度为20 40°C ； 3)取I)的样品溶液10 50μ L注入液相色谱仪，完成埃索美拉唑镁与其光学异构体的分离测定。
7.根据权利要求6所述的分析分离方法，步骤2)流动相流速优选为O.5 I. OmL/min。
8.根据权利要求6所述的分析分离方法，步骤2)所说的检测波长为300nm。
9.根据权利要求6所述的分析分离方法，步骤2)所说的色谱柱柱箱温度为20°C。
全文摘要
本发明公开了埃索美拉唑镁光学异构体的分离与分析测定方法，本发明用高效液相色谱法或高效液相色谱-质谱联用法，在一定的色谱条件下分离测定埃索美拉唑镁的光学异构体，通过该方法能快速准确地分离和测定埃索美拉唑镁的光学异构体。
文档编号G01N30/02GK102890127SQ201210270388
公开日2013年1月23日 申请日期2012年8月1日 优先权日2012年8月1日
发明者陈东, 郭夏, 宋雪梅 申请人:北京万全德众医药生物技术有限公司