一种食品添加剂的检测方法和系统的制作方法
【专利摘要】建立一种HPLC法快速测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的分析方法。采用C18反向高效液相色谱柱，以甲醇和乙酸铵溶液为流动相洗脱，用紫外检测器于230nm波长处检测。当流动相甲醇与乙酸铵的比例(V/V)为40∶60时，各组分均得到较好的分离，色谱峰分离度达到3.0以上，色谱峰型尖锐，保留时间较短。色谱峰面积和保留时间的RSD均小于1%，表明该方法具有很好的准确度和精密度。在该色谱条件下，分别对饮料、调料等实际样品进行检测，结果表明该色谱条件的HPLC法快速、准确，重现性好，可作为食品中防腐剂和甜味剂的定性定量的参考方法。
【专利说明】一种食品添加剂的检测方法和系统
【技术领域】
[0001]本发明属于食品分析领域，具体地涉及一种食品添加剂的检测方法。
【背景技术】食品添加剂是指为改善食品色、香、味以及为防腐和加工工艺的需要而加入到食品中的化学合成物质或天然物质。目前，随着食品添加剂的种类和使用不断增加，其安全性受到广泛关注。经常食用添加剂超标的食品，会对人体消化道造成刺激，严重者还会损伤肝脏，造成食物中毒，所以要严格控制其使用量。苯甲酸、山梨酸和糖精钠是常用的食品添加剂，国家卫生标准严格规定了它们的使用限量。目前，食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的常用测定方法有气相色谱法(Ge)、薄层色谱法(TLC)和高效液相色谱法(HPLC);糖精钠的测定有GC法、TLC法和离子选择电极法(ISE)。TLC法操作复杂，仅可半定量分析；ISE法需特殊设备；HPLC法应用广泛，可同时对3种添加剂进行测定。国标GB/T23495-2009就是采用高效液相色谱法测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的含量。但是，国标方法在实际工作中检测时间较长。
[0002]
【发明内容】
[0003]本发明的目的是提供一种食品中多种添加剂含量的快速测定方法。通过对HPLC的色谱条件的优化，建立了一种快速检测食品中的山梨酸、苯甲酸和糖精钠的HPLC方法，并用于实际样品的检测。采用本发明的方法，快速、准确，提高了检测效率，降低了检测成本。为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是:一种食品中多种添加剂的检测方法，具体包括:
I)对照液的配制糖精钠标准储备溶液，准确称取1.0OOOg经120°C烘干4h后的糖精钠，加水溶解，定容至100.0mL0苯甲酸或山梨酸标准储备溶液，准确称取0.5000g苯甲酸或山梨酸，加碳酸氢钠溶液50mL，加热溶解，定容至100mL。标准混合使用溶液，吸取准确吸取各标准储备液5.0mL于IOOmL容量瓶中，定容至刻度，过滤，超声脱气。
[0004]2)样品的处理
汽水类和茶饮料直接称量，微温搅拌除去二氧化碳，用氨水(体积比为1:1)调PH值约7，加水定容25ml，经滤膜过滤，超声脱气。果汁类样品是将全部样品充分离心沉淀，取上清液，然后称量，用氨水(体积比为1:1)调pH值约7，加水定容25ml，经滤膜过滤，超声脱气。调料类样品是直接称量，加水定容10ml，经滤膜过滤，超声脱气。3)测定条件的选择:
ODS C18色谱柱(250mmX4.6mm，5iim)，紫外检测波长230nm，进样量IOii L。流动相:V (甲醇):V (乙酸铵溶液)(0.02mol/L)=40: 60，流速 1.0mL/min，柱温 35°C。4)操
作步骤:
将HPLC甲醇和0.02mol/L乙酸铵分别经溶剂过滤装置将流动相过滤，超声脱气。取样品处理液各10 u L，按上述色谱条件，分别注入高效液相色谱仪进行分析。
[0005]本发明的有益效果是:通过本发明的方法实现了对几种食品添加剂山梨酸、苯甲酸和糖精钠的快速检测。使几种添加剂的检测时间由国标中的20min缩短到5min内完成，且各组分均得到较好的分离，对实际样品的检测结果表明该色谱条件的HPLC法快速、准确，重现性好，可以在各类食品检测中得到的应用。
[0006]
【具体实施方式】
[0007]1、色谱条件优化根据国家标准，当甲醇与乙酸铵比例为5: 95时，苯甲酸的保留时间为10.315min,山梨酸的保留时间为14.282min，糖精钠的保留时间为18.382min，为了缩短检测时间，提高检测效率，选择调整2种溶剂的比例。当流动相甲醇与乙酸铵的比例(V/V)从5: 95改变至55: 45时，发现流动相中甲醇的体积直接影响分析物的出峰时间，甲醇体积增加，所有分析物的保留时间都缩短，其中以糖精钠尤为明显。当调整流动相甲醇与乙酸铵的比例(V/V)为40: 60时，在5min内可以完成检测，各组分均得到较好的分离，色谱峰分离度达到3.0以上，拖尾因子小，色谱峰型尖锐。出峰顺序为糖精钠、苯甲酸、山梨酸，出峰保留时间分别为3.587，4.176和4.788min。2、检测波长的选择糖精的最大紫外吸收波长为202nm、苯甲酸为230nm、山梨酸为253nm。糖精的最大吸收波长与甲醇的截止波长靠近，如果采用202nm作为检测波长，则流动相本身吸光度太大。如果用253nm作为检测波长，糖精的吸收太弱。综合以上采用230nm作为检测波长。3、标准曲线分别移取糖精钠和苯甲酸、山梨酸标准储备液各0.00，0.25，0.50，1.00，2.00，4.0OmL于IOmL容量瓶，用蒸馏水定容至刻度，得到苯甲酸、山梨酸浓度为0,0.00625,0.0125,0.025,0.05，0.lg/L和糖精钠浓度为0，0.0125,0.025,0.05，0.1,0.2g/L标准系列。按优化的色谱条件测定峰面积，3种添加剂的工作曲线及相关性见表1。
[0008]表1 3种添加剂的工作曲线_
【权利要求】
1.一种检测食品添加剂的方法，其特征在于，包括以下方法: A、对照液的配制 B、样品的处理 C、测定条件的选择 D、操作步骤。
2.一种食品中多种添加剂含量的方法，其特征在于，所述步骤A对照液的配制的具体步骤如下: 糖精钠对照液，准确称取1.0OOOg经120°C烘干4h后的糖精钠，加水溶解，定容至100.0mL。苯甲酸及山梨酸对照液，准确称取0.5000g苯甲酸或山梨酸，加碳酸氢钠溶液50mL,加热溶解,定容至100mL。标准混合对照液，吸取准确吸取各标准对照液5.0mL于IOOmL容量瓶中，定容至刻度，过滤，超声脱气。
3.一种食品中多种添加剂含量的方法，其特征在于，所述步骤B样品的处理的具体步骤如下: 汽水类和茶饮料直接称量5ml，微温搅拌除去二氧化碳，用氨水(体积比为1:1)调PH值约7，加水定容至25ml，经滤膜过滤，超声脱气。果汁类样品是将全部样品充分离心沉淀，取上清液，然后称量5ml，用氨水(体积比为1:1)调pH值约7，加水定容至25ml，经滤膜过滤，超声脱气。调料类样品是直接称量5g，加水定容至10ml，经滤膜过滤，超声脱气。
4.一种食品中多种添加剂含量的方法，其特征在于，所述步骤C测定条件的选择具体如下: ODS C18色谱柱(250mmX4.6mm，5iim)，紫外检测波长230nm，进样量IOii L。流动相:V (甲醇):V (乙酸铵溶液)(0.02mol/L)=40: 60，流速 1.0mL/min，柱温 35°C。
5.一种食品中多种添加剂含量的方法，其特征在于，所述步骤D操作步骤如下: 将HPLC甲醇和0.02mol/L乙酸铵分别经溶剂过滤装置将流动相过滤，超声脱气。取样品处理液各10 u L，按上述色谱条件，分别注入高效液相色谱仪进行分析。
【文档编号】G01N30/06GK103616448SQ201310627315
【公开日】2014年3月5日 申请日期:2013年11月29日 优先权日:2013年11月29日
【发明者】郭狄 申请人:中山鼎晟生物科技有限公司