用于光度式测定样品中的β-D-葡聚糖的存在的试剂盒的制作方法
【专利摘要】本实用新型提供了一种用于光度式测定样品中的β-D-葡聚糖的存在的试剂盒，其中，所述试剂盒包括：a)至少一个容量为1～1000ml的第一容器，和容纳在所述第一容器内的选自卡尔科弗卢尔型染料的第一组分，b)至少一个容量为1～1000ml的第二容器，和容纳在所述第二容器内的选自缓冲溶液的第二组分，以及可任选的c)至少一个容量为1～1000ml的第三容器，和容纳在所述第三容器内的选自用于涵盖浓度范围在1～2000mg/l的β-葡聚糖的标准溶液的第三组分。
【专利说明】用于光度式测定样品中的β-D-葡聚糖的存在的试剂盒
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及液体样品或被制成液体形式的样品的分析。更具体地说，本实用新型涉及一种用于测定样品(例如，谷物来源的样品)中的β-葡聚糖的浓度的试剂盒。本实用新型还可用于其中天然地含有β-D-葡聚糖或者其中含有外加β-D-葡聚糖的非谷物来源的样品。本实用新型还提供了一种测定β_葡聚糖的浓度的方法，以及卡尔科弗卢尔染料的新用途。
【背景技术】
[0002]在啤酒酿造过程中，葡聚糖是最重要的分析物之一。葡聚糖存在于麦芽和大麦的细胞壁中，并且在某些条件下在碾压过程中所释放葡聚糖可能不能充分地水解。这种β_葡聚糖能够堵塞加工过程的过滤器，并且高水平的β_葡聚糖会导致麦芽汁过滤和啤酒过滤性能变差。过量的葡聚糖可能导致产品浑浊，甚至损害啤酒的味道。由于这个原因，测定β-葡聚糖的浓度就很重要，特别是其分子量大小约为10，OOODa或更大的葡聚糖聚合物部分。
[0003]有关酿造工业中的标准分析方法的手册Analytica-EBC(欧洲酿酒协会)以及ASBC(美洲啤酒酿造化学家学会)提供了各种测定麦芽的总混联(1，3) (1，4)-β-D-葡聚糖含量、麦芽提取物(协定糖化)以及麦芽热水提取物(恒温糖化)方法。
[0004]Analytica-EBC中所介绍的最常用的常规方法是基于使用卡尔科弗卢尔荧光染料通过流动注射(FIA)分析仪或者通过在微孔板甲酸中进行荧光分析的任何荧光测量(参看EBC法4.16.2)。所使用的荧光染料卡尔科弗卢尔在溶液中与含有分子量超过10，OOODa的高分子量β_葡聚糖复合，以增加染料的荧光强度。
[0005]Analytica-EBC还例举了基于吸收波长在550nm的β -葡聚糖_染料复合物的形成来测定β -葡聚糖的分光光度分析法(EBC4.16.3)。(EBC法4.16.3是含有染料混合物的商品化试剂盒，刚果红作为一种或主要的组分)。
[0006]现有方法存在一些缺陷。
[0007]卡尔科弗卢尔法是基于染料与葡聚糖之间的对光和氧高度敏感的反应。EBC8.13.2,4.16.2和3.10.2中所公布的那种荧光法尚未应用于分立式分析仪；而自动分立式分析仪通常是基于光度分析法。
[0008]另一方面，采用所推荐的光度法(刚果红，EBC方法集4.16.3)所获得的结果与采用卡尔科弗卢尔法所产生的结果不相吻合。这明显地反映出这两种方法测定的是β_葡聚糖聚合物的不同部分的事实。实际上，所使用的染料卡尔科弗卢尔与刚果红对于不同种类的分子分数很敏感。进一步来说，光度EBC刚果红法很难在自动分析仪中使用，这是因为它优选需要一个预处理柱以区分不同大小的分子。该方法也很慢。
[0009]除了在EBC手册中规定的具体方法外，本领域中还有其他的分析β -葡聚糖浓度的方法。
[0010]一种替代的分光光度法是基于使用Lichinase酶，该方法包括测量和测定从β-葡聚糖中获得的作为酶降解产物的葡萄糖。但是，此方法也没有得到与荧光卡尔科弗卢尔法相吻合的结果，这是因为酶将所有的聚合物链拆分为葡萄糖单体，这意味着分析结果将反映葡聚糖分子的所有大小/聚合物的总浓度。正如EBC4.16.3中的分光光度法，此方法也很难用于自动操作，这是因为它需要加热以及样品中原葡萄糖含量的测量。
[0011]总之，Analytica-EBC中所述的且常用于酿造工业中的荧光分析法需要流动注射分析或者微孔板阅读器，以进行荧光性并以及因此β_葡聚糖的可重现量化。手动的光度法是基于分子量大小约2.5Χ IO5的β -葡聚糖吸附到染料刚果红上和/或在测量之前他们需要进行依赖大小的过滤来获得最佳效果。
[0012]荧光法和分光光度法的结果彼此不相吻合，为此，分光光度法方法在酿造工业中的应用范围较小。
[0013]实际上，啤酒工业必须遵循EBC或ASBC的建议。因此，卡尔科弗卢尔一直都用于荧光检测，其商品名为卡尔科弗卢尔和荧光增白剂28。
实用新型内容
[0014]本实用新型的目的是解决至少一部分本领域中存在的上述问题，并提供一种用于选择性地测定液体样品中的β -D-葡聚糖的技术方案。
[0015]本实用新型提供了 一种容易适用于样品、如采自谷物(如燕麦或大麦)的加工过程的液体样品的分析方法，其可任选地可以在自动分析仪上施行。这种谷物样品可能可任选地含有单独添加的β-D-葡聚糖。作为加工的结果，与样品中天然存在的水平的含量相比，该样品可能还会出现β-D-葡聚糖含量的贫化。
[0016]本实用新型还提供了一种分析方法，该方法容易适用于其中天然含有β-D-葡聚糖或其中含有单独添加的β-D-葡聚糖的非谷物来源的样品，并且可任选地可以在自动分析仪上施行。
[0017]本实用新型基于下述发现，即二苯乙烯基荧光试剂卡尔科弗卢尔可以在测定液体样品中的β-D-葡聚糖的分光光度法中用作染料。
[0018]与荧光分析中使用的卡尔科弗卢尔试剂相反，卡尔科弗卢尔荧光增白剂M2R(Calcofluor White M2R)是无色的，已经用于壳聚糖酶的动力学光度分析中来测定其酶活力(Somashekat和Josept, 1997年)。该方法既不是定量的，也不是自动的或快速的。相反，该方法被用于研究染料和壳聚糖酶之间的相互作用。在406nm的波长处测定吸光度。
[0019]本实用新型依赖于卡尔科弗卢尔试剂和葡聚糖多糖聚合物的大分子量部分之间的复合物的形成或络合反应。
[0020]出人意料地，发现了相同的试剂或者相同类型(卡尔科弗卢尔)的试剂在所述染料用于测量荧光性的反应时和在采用光度测定法测量样品时得到相同的结果。
[0021]基于上述，该方法包括以下步骤使含有样品的β_葡聚糖与液相中的染料接触，将β -葡聚糖与染料络合得到改良液相，在主波长及次波长(可任选地)处采用光度法测量改良液相的吸光度，并且基于改良液相的吸光度来测定β -葡聚糖浓度。
[0022]荧光卡尔科弗卢尔染料可用于谷物来源的样品或者含有添加的β -葡聚糖的非谷物来源的样品中的β_葡聚糖的光度法测定中。优选地，样品含有由水或溶剂形成的液相。[0023]该试剂能够以其中包含至少一个含有卡尔科弗卢尔的容器的光度法检测试剂盒的形式提供。
[0024]更加具体地说，本实用新型提供了一种用于光度式测定样品中的β -D-葡聚糖的存在的试剂盒，其中，所述试剂盒包括:
[0025]a)至少一个容量为I?1000ml的第一容器，和容纳在第一容器内的选自卡尔科弗卢尔型染料的第一组分，
[0026]b)至少一个容量为I?IOOOml的第二容器，和容纳在第二容器内的选自缓冲溶液的第二组分，以及可任选的
[0027]c)至少一个容量为I?IOOOml的第三容器，和容纳在第三容器内的选自用于涵盖浓度范围在I?2000mg/l的β -葡聚糖的标准溶液的第三组分。
[0028]根据本实用新型，所述试剂盒包括至少一个容量为I?IOOml并且含有卡尔科弗卢尔染料的容器，以及可任选的b)至少一个容量为I?IOOml的含有缓冲溶液的容器，以及可任选的c)至少一个容量为I?IOOml的含有用于涵盖浓度范围为15?500mg/l的β-葡聚糖的标准溶液的容器。
[0029]在一个实施例中，对于每种组分包括I?100个容器，至少I个容器用于每个组分。所述试剂盒包括I?100个容器，而至少I个容器用于每个组分。在一个实施例中，该试剂盒包括例如I?50个容器，优选I?20个容器，一般每个组分多达10个容器，而至少I个容器用于每个组分。
[0030]根据本实用新型，所述试剂盒包括第一组容器，其包括2?50个含有第一组分的容器，可任选地包括第二组容器，其包括2?50个含有第二组分的容器，以及可任选地包括第三组容器，其包括2?50个含有第三组分的容器。
[0031]在一个实施例中，所述试剂盒中，至少一个容器含有5?60ml的卡尔科弗卢尔染料。
[0032]在一另个实施例中，所述试剂盒中，至少一个容器含有5?60ml的缓冲溶液。
[0033]根据本实用新型，所述试剂盒中，至少一个容器含有5?60ml的用于涵盖浓度范围为I?2000mg/l的β -葡聚糖的标准溶液。在一个实施例中，该β -葡聚糖的标准溶液的浓度范围优选为I?1500mg/l、更优选为I?1000mg/l、进一步优选为15?500mg/l。
[0034]在一个实施例中，所述试剂盒包括清洗溶液、样品预处理溶液或稀释溶液及其组合，这些溶液在至少一个容器的容量均为I?1000ml，优选为I?100ml。
[0035]在另一个实施例中，所述试剂盒包括至少一个空的容器。
[0036]根据本实用新型，所述试剂盒包括选自使用说明、分析证明及加样说明中的一项或多项。
[0037]在一个实施例中，所述试剂盒包括其中至少有一部分具有条形码的容器。
[0038]通过本实用新型可以获得相当大的优势。因此，本方法所获得的结果与依照EBC8.13.2，4.16.2，3.10.2和ASBC Wort-18所规定的使用卡尔科弗卢尔荧光染料通过荧光计所获得的结果相吻合。本实用新型提供了使用卡尔科弗卢尔荧光染料对大麦β_葡聚糖进行自动化的高通量定量光度分析。
[0039]上文已经提到，该方法可以对各种样品特别是液体样品、溶液以及分散体施行。其特别适用于测定谷物来源的液体样品的β -D-葡聚糖含量。[0040]样品的例子尤其是取自麦芽、麦芽汁和啤酒的样品，一般是取自诸如麦芽等的谷物粉的任何样品及其混合物，其本身或经发酵或其他化学或生化处理后的均一样品。样品的进一步来源包括水果和浆果的果汁，以及在不同处理阶段的葡萄酒，尤其是年轻葡萄酒，及其他来自有机来源的食品。在一个实施方式中，样品取自在将谷物粉、诸如麦芽等浸入水中、优选25~100°C的温水或热水中以及发酵(可任选地)时获得的成分。
[0041]除本身含有的β -D-葡聚糖成分，样品中还可能包含其中还含有添加的或掺杂的β-D-葡聚糖的成分。
[0042]样品可以是液体等的形式，或者还可以通过在水或溶剂中溶解或分散样品材料来获得。
【专利附图】
【附图说明】
[0043]接下来将借助于详细说明并参照附图来详细说明本实用新型。
[0044]图1显示了采用自动光度测定分析仪(Gallery)测得的校准曲线示例，
[0045]图2显示了采用自动光度测定分析仪(Gallery)测得的线性度示例，
[0046]图3是根据本实用新型的试剂盒的示意图。
【具体实施方式】
[0047]如以上的简要说明，本实用新型提供了一种光度法测定例如谷物来源的液体样品中的β-D-葡聚糖的新方法。
[0048]在下文中，“ β -D`-葡聚糖”和“ β -葡聚糖”可以替换使用。
[0049]提供了一种新型试剂组合物。该组合物的活性组分包含一种或几种卡尔科弗卢尔染料，特别是具有能够结合到葡聚糖中所存在的羟基的硫磺基团(例如磺基)的一种或几种卡尔科弗卢尔染料，或者由上述组成，或者基本上由上述组成。
[0050]尤其是，所述染料选自4，4’-双[4-[双(2-羟乙基)氨基]-6-苯胺基-1，3，5-三嗪基_2_基]氨基]二苯乙烯-2，2’- 二磺酸、5_[[4-(苯胺基)-6-[双(2-轻乙基)氨基]-1，3，5-三嗪基-2-基]氨基]_2-[2-[4-[[4-(苯胺基)-6-[双(2-羟乙基)氨基]-1，3，5-三嗪基-2-基]氨基]-2-磺酰苯基]乙烯基]苯磺酸盐，以及4，4’ -双[6-苯胺基_[4_[双(2-轻乙基)氨基]-1，3, 5- 二嗪基-2-基]氨基]二苯乙烯_2，2’ - 二磺酸酯及其盐，如钠盐。因此，在上述情况中列出的三种染料可以使用其相应的二钠盐。
[0051]其他卡尔科弗卢尔染料的例子包括7_( 二乙氨基)-4_甲基色烯-2-酮和7_( 二乙氨基)-4-甲基-2H-1-苯并吡喃-2-酮及其盐。
[0052]优选地，该活性组分即该染料可以在pH值9~11的条件下再生。
[0053]该试剂盒组合物通常包括一种液体组合物，其由染料溶于额外含有用来调节反应pH值的缓冲剂、例如TritonX-1OO的液相中形成。根据一个优选实施例，所述液体组合物含有以质量计大约0.01~0.1%、例如大约0.05%的染料，以及以质量计0.01~1%、特别是大约0.1%的缓冲液，其用合适的碱如NaOH将pH值调整到10±0.5的范围内。
[0054]所述染料的商品名为荧光增白剂28(Fluorescent Brighter28)、卡尔科弗卢尔荧光增白剂 M2R (Calcofluor White M2R)，以及天来宝 UNPA-GX (Tinopal UNPA-GX)? 其分子的CAS号码为4404-43-7，或者是含有如荧光增白剂或其盐类的卡尔科弗卢尔类试剂的衍生物，如CAS号码为4193-55-9或95508-20-6。
[0055]在卡尔科弗卢尔染料中，尤其优选的是卡尔科弗卢尔荧光增白剂M2R，因为它是无色的。然而，卡尔科弗卢尔荧光增白剂染料也容易使用，因为它的蓝颜色或色调可以在分析中被消隐。
[0056]这种染料与β -D葡聚糖之间的反应是在缓冲pH值范围为7?10，特别是7.5?
8.5的条件下进行的。
[0057]在一个实施例中，任何样品颜色干扰都可以通过缓冲液或样品消隐来消除。实际上已经发现，样品的颜色会干扰检测，例如含有在测量范围内具有吸光度的组分的啤酒。根据该实施例，这种干扰可以通过使用一种其中样品的颜色可采用消隐法消除的双试剂测量法来消除。在测量中，首先对三羟甲基氨基甲烷缓冲液以及样品(例如10?1000 μ I的体积量的一部分，例如约50?300 μ I)进行测量以确定背景吸光度。然后添加试剂染料，并在反应进程中或者在反应完成后进行另一吸光度值的测定。与使用卡尔科弗卢尔的不稳定的(对光和氧化敏感)荧光测定法不同，已获得了一种稳定的光度反应。
[0058]若要消除试剂本身的任何光敏性，可以将该试剂存储在深色瓶子内。在用于自动测量(板载)时，试剂可以很好地避光。因此，这里所述的试剂组合物特别适用于可以同时处理若干分析物的自动分析仪中进行可靠性好、重复性高的光度法测定。
[0059]消隐法与可靠性好的光度测量法的结合将消除原试剂染料的稳定性差的问题。
[0060]基于上述，该方法包括以下步骤:
[0061]-在缓冲pH值为7?10条件下使样品与卡尔科弗卢尔染料接触；
[0062]-使β-葡聚糖与染料复合；
[0063]-在波长为380?450nm、例如405nm处对复合物的吸光度进行光度法测量；
[0064]-基于由此得到的吸光度来测定葡聚糖的复合部分的浓度。
[0065]利用规定的方法，可以对未经单独预处理的样品进行β -D-葡聚糖的测定。
[0066]在一个优选实施例中，在该方法中，实际测量步骤优选在温度范围为0.5?50°C，例如在温度范围为I?20°C，或在高于室温的温度，例如在大约37°C ±5°C的温度的条件下进行。
[0067]在一个优选实施例中，吸光度不仅可以在被认为是主波长的规定波长405nm处，或更为一般地在380?450nm处测量，而且还可以在500?800nm、如600nm的次波长处测量。
[0068]在另一个优选实施例中，该方法包括对β_葡聚糖进行定量的终点测定。因此，反应可在开始进行吸光度测定前完成。反应在终点测量之前的孵育步骤中发生。反应速度取决于温度，孵育时间依赖于测量时的温度和溶液的体积。
[0069]在另一个实施例中，通过动力学测量进行测定，该术语是指这样一种过程，其中吸光度是在反应进行过程中按照一定的时间间隔进行测量。动力学检测也可在微量滴定板阅读器平台上进行。在一个实施例中，在大约I?30°C、例如在15?25°C的温度下进行动力学测量。合适的温度取决于反应动力学。反应向较低的温度减慢，使得可以采用动力学测量而非终点测量。可以根据仪器规格来选择适宜的温度。上文中所提供的方法可以在自动分析仪上施行。如果需要的话，可对样品进行自动稀释。
[0070]因此,在一个实施例中，所述方法采用Thermo Fisher Scientific Gallery或Arena分析仪(由赛默飞世尔科技有限公司，Thermo Fisher Scientific Inc.提供)或另一种光度测定分立式分析仪施行。
[0071]在另一个实施例中，所述方法采用流动注射型仪器、微孔板阅读仪进行，或使用常规型分光光度计手动进行。
[0072]由于是测定β-D-葡聚糖组合物的选择性部分，即大分子部分，通常分子量为10，OOODa或更大，例如达到700，OOODa,因而本实用新型是选择性的。从这个方面来看，该测定的结果能够完全地与使用不同的卡尔科弗卢尔染料的荧光分析结果相当。
[0073]如上所述，在一个实施例中，液体样品是“均一的”是指通常的任何样品，一般为任何含有目标分子的可被分析的代表性部分水基样品。一方面，均一的样品是透明的，或者任何分散相在室温下持续在至少30min以上的时间、优选至少2个小时不发生沉积。
[0074]在另一个实施例中，对浑浊的样品或经离心处理的浑浊的有色样品进行测定。出人意料地发现，通过样品的消隐可以消除任何本底吸收，而不会减损测量的可靠性。该方法是特别适用于对源自啤酒制备过程中的工业生产液流的样品进行常规分析。所述样品取自含有麦芽汁或麦芽的液体流，或者一般是取自诸如麦芽等的谷物粉的任何样品及其混合物，其本身或经发酵或其他化学或生化处理后的液体流。
[0075]样品中β -葡聚糖的浓度通常大致上约为0.1?10，000mg/l，特别地约为0.1?1500mg/l,优选地约为0.1?500mg/l。原β -葡聚糖浓度高的样品可以被稀释到更适合的浓度范围。
[0076]本实用新型提供了一种用于光度法测定含有所述葡聚糖的样品中的β -D-葡聚糖的存在的试剂盒10，如图3所示。该试剂盒10包括:a)至少一个容量为I?IOOOml的含有选自卡尔科弗卢尔型染料的第一组分的第一容器1，可任选地b)至少一个容量为I?IOOOml的含有选自缓冲溶液的第二组分的第二容器2，以及可任选地c)至少一个容量为I?IOOOml的含有选自用于涵盖浓度范围在I?2000mg/l的β -葡聚糖的例如用于质量控制或校定目的的标准溶液的第三组分的第三容器3 (见下文)。该试剂盒还可以另外包括清洗溶液、样品预处理溶液或稀释溶液，每种至少存在于一个容量为I?IOOOml的容器中。另外，还可以包括至少一个空的容器。
[0077]通常情况下，该容器的容量在I?20ml、I?60ml、I?IOOmlU?200ml、I?300ml、I ?400ml、I ?500ml、I ?600ml、I ?700ml、I ?800ml、I ?900ml 或 I ?IOOOml
的范围内。
[0078]用于第一试剂的容器的一般尺寸为20ml、50ml和60ml。
[0079]上述标准溶液可涵盖从I?2000mg/l、l?1500mg/l、l?1000mg/l或15?500mg/l的浓度范围。
[0080]每个试剂盒中通常有I?20个容器，然而也可以提供包含有甚至50?150个容器的试剂盒(每盒)。至少I个容器用于每种试剂或组分，一般每个试剂(即组分)多达10个容器。在一个实施例中，每种组分可以包含于一组容器中，每组分别包含有2?50个容器。
[0081]根据一个实施例，至少一个容器中含有5?60ml的卡尔科弗卢尔染料(取决于容器容量)。根据另一个实施例，至少一个容器中含有5?60ml的缓冲溶液(取决于容器容量)。根据又一个实施例，至少一个容器中含有5?60ml的β -葡聚糖的标准溶液或溶液(取决于容器容量)。还可以是这些实施例中的两个或三个的组合。[0082]该试剂盒还可能含有例如使用说明、分析证明或加样说明。在容器上可以任选地设有条形码。
[0083]接下来通过非限制性的工作实施例对本实用新型进行说明。
[0084]在这些实施例中，空白试剂和启动试剂组成如下:
[0085]空白试剂:
[0086]三羟甲基氨基甲烷缓冲液，pH大约为8。
[0087]启动试剂:
[0088]0.05%的荧光增白剂28溶于0.1%的TritonX-100中，用IM的NaOH将pH值调整到约10。
[0089]荧光增白剂是4，4’-双[4-[双(2-羟乙基)氨基]_6_苯氨基_1，3，5_三嗪基-2-基]氨基]-二苯乙烯-2，2’ - 二横酸的二钠盐。
[0090]实施例1
[0091]用于分立式分析仪的应用实施例
[0092]下面的实施例在自动光度分析仪上进行，该分析仪由赛默飞世尔科技提供，名为Thermo Scientific Gallery Plus。它是专门用于食品、饮料、水和土壤检测的高容量台式系统。Thermo Scientific Gallery Plus是一种自动化的系统,可用于大量样品的实验室检测。分析步骤均为自动。
[0093]Gallery Plus的分立单元技术允许对同一样品同时进行若干不同检测的测量，并且不需要随时间而改变方法。该技术适应于各种工业和环境应用。Gallery Plus能够达到很低的检出水平，这是特别重要的，例如在实验室进行水质检测。此外，利用比色法可以通过任选的电化学(ECM)装置来测量电导率和pH值。在必要时，稀释和再分析均可以完全自动地处理,正如对试剂使用情况进行实时监视一样。
[0094]以下参数适合于在Gallery或类似类型的分立式分析仪上应用本实用新型的方法:
[0095]缓冲液，pH值8，分配量120 μ I (2?120 μ I)
[0096]样品，分配量20 μ 1(2 ?120 μ I)
[0097]孵育，200s(O ?3600s)
[0098]空白测量，在405nm(380 ?450nm)处，次波长 600nm(500 ?800nm)
[0099]启动试剂，分配量18 μ 1(2 ~ 120 μ I)
[0100]孵育，450s(O ?3600s)
[0101]终点测量，在405nm处，次波长600nm
[0102]分配量取决于样本基质和浓度。孵育时间取决于分配量和温度。
[0103]图1显示出采用Gallery测得的校准曲线的示例。校准曲线取决于实际应用和基质。不同的校准器、分配量和孵育时间可能会改变所测得的吸光度。
[0104]图2显示了采用Gallery测得的线性度示例。线性度是利用水基标准溶液(15?500mg/l,大麦β -葡聚糖,Sigma-Aldrich)获得的。线性曲线取决于实际应用和基质。不同的基质、分配量和孵育时间可能会改变线性曲线。可以通过改变自动稀释参数或使用手动预稀释来扩展线性度范围。
[0105]表1.利用Gallery测得的精度示例
【权利要求】
1.一种用于光度式测定含有β-D-葡聚糖的样品中的所述β-D-葡聚糖的存在的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括: a)至少一个容量为I?IOOOml的第一容器，和容纳在所述第一容器内的选自卡尔科弗卢尔型染料的第一组分， b)至少一个容量为I?IOOOml的第二容器，和容纳在所述第二容器内的选自缓冲溶液的第二组分，以及可任选的 c)至少一个容量为I?IOOOml的第三容器，和容纳在所述第三容器内的选自用于涵盖浓度范围在I?2000mg/l的β -葡聚糖的标准溶液的第三组分。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，包括至少一个容量为I?IOOml并且含有卡尔科弗卢尔染料的容器，以及可任选的b)至少一个容量为I?IOOml的含有缓冲溶液的容器，以及可任选的c)至少一个容量为I?IOOml的含有用于涵盖浓度范围为15?500mg/l的β-葡聚糖的标准溶液的容器。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，对于每种组分包括I?100个容器，至少I个容器用于所述每个组分。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，包括第一组容器，其包括2?50个含有第一组分的容器，可任选地包括第二组容器，其包括2?50个含有第二组分的容器，以及可任选地包括第三组容器，其包括2?50个含有第三组分的容器。
5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，至少一个容器含有5?60ml的卡尔科弗卢尔染料。
6.根据权利要求1?5中任意一项所述的试剂盒，其特征在于，至少一个容器含有5?60ml的缓冲溶液。
7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，至少一个容器含有5?60ml的用于涵盖浓度范围为I?2000mg/l的β -葡聚糖的标准溶液。
8.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，包括至少一个空的容器。
9.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，包括选自使用说明、分析证明及加样说明中的一项或多项。
10.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，包括其中至少有一部分具有条形码的容器。
【文档编号】G01N21/78GK203630037SQ201320065541
【公开日】2014年6月4日 申请日期:2013年2月4日 优先权日:2012年2月3日
【发明者】莎莉·蒂卡诺亚, 安奴·索涅米·卡哈拉, 莉莎·奥塔马 申请人:赛默飞世尔科技公司