选择或鉴别用于v1B拮抗剂治疗的受试者的方法
【专利摘要】本发明提供了一种用于检测生物样品中的HPA轴功能标记的方法。所述方法可以用于确定患者是否是V1B拮抗剂治疗的合适候选人。所述HPA标记可以是基因组标记、非基因组标记，或它们的组合。取决于HPA标记的类型，所述检测方法可以是例如免疫测定或基因分型。
【专利说明】选择或鉴别用于v1B拮抗剂治疗的受试者的方法
[0001] 本申请要求2012年3月13日提交的美国申请号61/610, 101的权益，它们的内容 通过引用并入本文。
【技术领域】
[0002] 本发明涉及确定受试者是否是V1B拮抗剂治疗的合适候选人的方法。
【背景技术】
[0003] 近年来，加压素或精氨酸加压素（AVP)在不同病理学状态中的作用已经成为密集 研究的对象，并且不同加压素受体的选择性拮抗作用已经打开了通向新颖临床远景的途 径。已知4种受体介导AVP的作用：缩宫素、V 1A、V1B或V3和V2。与它在垂体和中枢神经系 统（CNS)边缘脑区域中的位置一致，V 1B受体的拮抗剂在动物模型中显示出抗焦虑作用和抗 抑郁作用。参见 Griebel 等人，PNAS 99，6370 (2002);和 Serradeid-Le Gal 等人，工 Pharm. Exp. Ther. 300，1122 (2002)。尽管没有理解由V1B受体介导的加压素的特定CNS 作用，但是所述动物模型效应似乎经由垂体和CNS受体二者来介导。
[0004] AVP从下丘脑释放，并且是下丘脑-垂体-肾上腺（ΗΡΑ)轴活性的关键介质。AVP 经由V1B受体而作用于垂体，以刺激促肾上腺皮质激素（ACTH)的释放，所述促肾上腺皮质激 素又作用于肾上腺以模拟应激激素皮质醇的释放。通过降低皮质醇的水平，可以使用V 1B拮 抗剂来有效地治疗以下丘脑-垂体肾上腺轴（ΗΡΑ轴）调节异常为特征的障碍。
[0005] 通常，并非所有具有障碍的受试者类似地对治疗良好应答。使受试者能够与所述 受试者最可能对其做出应答的治疗匹配的方法可以改善健康护理。要克服的一个主要缺点 是，不存在鉴别可能对V 1B拮抗剂治疗有利地应答的受试者的方法。目前，为V1B拮抗剂治疗 选择受试者的唯一方式是，在治疗过程中观察疾病的临床进程。这可能延迟受试者将接受 有效治疗的时候，由此增加发病率风险和降低生活质量。因此，需要鉴别与障碍有关的一种 或多种生物学标记、遗传标记或它们的组合，所述障碍与对V 1B拮抗剂的应答有关。
【发明内容】
[0006] 在一个方面，本发明涉及一种确定受试者是否是V1B拮抗剂治疗的合适候选人的 方法。所述方法可以包括：提供得自受试者的生物样品，并然后检测所述样品中的ΗΡΑ轴功 能标记。可替换地，所述方法包括：检测得自所述受试者的生物样品中的ΗΡΑ轴功能标记。 所述标记的存在指示，所述受试者是V 1B拮抗剂治疗的合适候选人。以大于正常受试者样品 中的标记分布的约第60百分位（优选地大于约第65、第70、第75、第80、第85、第90或第 95百分位）的水平存在的ΗΡΑ轴功能标记指示，所述受试者是V 1B拮抗剂治疗的特别合适 的候选人。所述受试者可具有以ΗΡΑ轴功能障碍为特征的障碍。
[0007] 所述ΗΡΑ轴功能标记可以是：包含SEQ ID N0:1 (LHPP res7088418)的核苷酸序列 和包含SEQ ID N0:2 (AKRID1 rsl7169521)的核苷酸序列；包含NR3C1基因型的核苷酸序 列，或它们的组合。所述NR3C1基因型可以是SEQ ID N0:3 (rsl0482672)或SEQ ID N0:4 (rsl7100236)。所述标记可以通过基因分型来检测，诸如扩增包含所述标记的核酸，并然后 检测扩增的核酸，由此检测所述标记。所述标记可以通过测序来检测。
[0008] 在另一个方面，本发明涉及一种确定受试者是否是V1B拮抗剂治疗的合适候选人 的方法。所述方法可以包括：提供得自受试者的生物样品，并然后检测所述样品中的ΗΡΑ轴 功能标记。如果所述ΗΡΑ轴功能标记以大于正常受试者样品中的标记分布的约第60百分 位的水平存在，所述受试者是V 1B拮抗剂治疗的合适候选人。所述受试者可具有以ΗΡΑ轴功 能障碍为特征的障碍。所述ΗΡΑ轴功能标记可以以大于正常受试者样品中的ΗΡΑ轴功能标 记分布的约第65、第70、第75、第80、第85、第90和第95百分位的水平存在。所述标记可 以是AVP、肽素、皮质醇、可的松、ACTH、皮质醇的肝代谢物、可的松的肝代谢物、CRH或它们 的组合。所述肽素可以是血浆肽素。所述AVP可以是血浆AVP。所述皮质醇的肝代谢物可 以是ct -四氢皮质醇、β-四氢皮质醇、ct-皮甾五醇、β-皮甾五醇、ct-cortolic acid、 β-cortolic acid或它们的组合。所述可的松的肝代谢物可以是四氢可的松、皮酮四醇、 cortolonic acid或它们的组合。根据本发明的某些实施方案,本文描述的确定受试者是否 是V1B拮抗剂治疗的合适候选人的方法是一种体分方法。所述生物样品可以是含有核酸的 样品、血清、血浆、血液、尿或唾液。所述生物样品可以是尿。所述标记可以是皮质醇、可的 松、α-四氢皮质醇、β -四氢皮质醇和四氢可的松的尿量的总和。所述标记可以是α-四 氢皮质醇、四氢皮质醇和四氢可的松的尿量的总和。所述标记可以是所有皮质醇和可 的松代谢物的总和。所述标记可以是皮质醇和可的松代谢物的尿量的总和除以相同尿样品 中肌酸酐的量。所述尿样品可以是得自所述受试者的24-小时尿收集物。所述尿样品可以 是得自所述受试者的过夜尿收集物。所述尿样品可以在单次排泄中收集自所述受试者。所 述样品可以是含有大于或等于9 pg/mL AVP的血浆样品，这通过放射免疫测定确定。所述 样品可以是含有大于或等于2.75 ng/mL肽素的血浆样品，这通过酶免疫测定确定。所述样 品可以是含有大于或等于3. 44 mg/mg肌酸酐的皮质醇、可的松、α -四氢可的松、β -四氢 皮质醇和四氢可的松的总和的尿样品。根据所述方法的一个特定实施方案，所述样品是血 楽样品，且所述样品中大于或等于9 pg/mL AVP的量指示，所述受试者是V1B拮抗剂治疗的 合适候选人。在该实施方案中，AVP的量可以通过放射免疫测定来确定。根据所述方法的 另一个特定实施方案，所述样品是血浆样品，且所述样品中大于或等于2. 75 ng/mL肽素的 量指示，所述受试者是V1B拮抗剂治疗的合适候选人。在该实施方案中，肽素的量可以通过 酶免疫测定来确定。根据所述方法的另一个特定实施方案，所述样品是尿样品，且大于或等 于3. 44 mg/mg肌酸酐的样品中的皮质醇、可的松、α -四氢可的松、β -四氢皮质醇和四氢 可的松的总和指示，所述受试者是V1B拮抗剂治疗的合适候选人。
[0009] 在本文所述的方法中，所述样品可以是含有核酸的样品、血清、血浆、血液、尿或唾 液。所述标记可以通过免疫测定来检测。所述标记可以通过质谱法来检测。
[0010] 具体地，将上述方法用于处于具有以ΗΡΑ轴调节异常为特征的障碍的风险中或者 疑似具有所述障碍的受试者。所述障碍可以是库欣综合征、痴呆、认知损害、心境障碍、焦虑 障碍、物质相关的障碍、骨质疏松症、关节炎、糖尿病、血脂异常、肥胖、高血压、疼痛、青光眼 或它们的组合。所述心境障碍可以是抑郁症。所述抑郁症可以是严重抑郁障碍。所述焦虑 障碍可以是创伤后应激障碍、广泛性焦虑障碍或惊恐障碍。所述物质相关的障碍可以是酒 精依赖性或滥用或药物依赖性或滥用。所述痴呆可以是阿尔茨海默型。所述认知损害可以 是由阿尔茨海默氏病引起的轻度认知损害。
[0011] 在另一个方面，本发明涉及一种监测受试者对V1B拮抗剂治疗的应答的方法。所 述方法可以包括：提供得自受试者的生物样品，并然后检测所述样品中的ΗΡΑ轴功能标记。 可替换地，所述方法包括：检测得自接受V1B拮抗剂治疗的受试者的生物样品中的ΗΡΑ轴功 能标记。如果与基线相比存在大于25%的标记水平变化，那么V 1B拮抗剂可用于治疗所述 受试者。所述大于25%的变化可以是与基线相比的增加或降低。所述ΗΡΑ轴功能标记可以 是：皮质醇；可的松；促皮质素释放激素；促肾上腺皮质激素（ACTH);皮质醇的肝代谢物， 可的松的肝代谢物，或它们的组合。所述可的松的肝代谢物可以是四氢可的松、皮酮四醇、 cortolonic acid或它们的组合。所述标记可以是皮质醇、可的松、α-四氢皮质醇、β-四 氢皮质醇和四氢可的松的尿量的总和。所述标记可以是α-四氢皮质醇、β-四氢皮质醇 和四氢可的松的尿量的总和。可以将尿量的总和除以相同尿样品中的肌酸酐的量。所述基 线可以是3 pg/mL至13 pg/mL之间的水平的皮质醇。皮质醇的基线可以使用酶免疫测定 来确定。所述基线可以指示在开始V1B拮抗剂治疗之前取自所述受试者的样品中的ΗΡΑ轴 功能标记的水平。所述ACTH可以是血浆ACTH。根据本发明的某些实施方案，本文描述的监 测受试者对V 1B拮抗剂治疗的应答的方法是一种体外方法。所述生物样品可以是含有核酸 的样品、血清、血浆、血液、尿或唾液。具体地，将所述方法用于具有以ΗΡΑ轴调节异常为特 征的障碍的受试者。所述障碍可以是库欣综合征、痴呆、认知损害、心境障碍、焦虑障碍、物 质相关的障碍、骨质疏松症、关节炎、糖尿病、血脂异常、肥胖、高血压、疼痛、青光眼或它们 的组合。所述心境障碍可以是抑郁症。所述抑郁症可以是严重抑郁障碍。所述焦虑障碍可 以是创伤后应激障碍、广泛性焦虑障碍或惊恐障碍。所述物质相关的障碍可以是酒精依赖 性或滥用或药物依赖性或滥用。所述痴呆可以是阿尔茨海默型。所述认知损害可以是由阿 尔茨海默氏病引起的轻度认知损害。
[0012] 所述V1B拮抗剂可以具有式I :
【权利要求】
1. 一种确定受试者是否是V1B拮抗剂治疗的合适候选人和治疗被鉴别为所述治疗的合 适候选人的受试者的方法，所述方法包括下述步骤： (a) 提供得自所述受试者的生物样品；和 (b) 检测下丘脑-垂体-肾上腺（"ΗΡΑ"）轴功能标记； 其中所述受试者具有以ΗΡΑ轴调节异常为特征的障碍； 其中所述标记的存在指示，所述受试者是V1B拮抗剂治疗的合适候选人；和 (c) 用V1B拮抗剂治疗在步骤（b)中被鉴别为合适候选人的受试者。
2. 根据权利要求1所述的方法，其中所述ΗΡΑ轴功能标记选自：包含SEQ ID N0:1 (LHPP rs7088418)的核苷酸序列和包含SEQ ID N0:2 (AKRID1 rsl7169521)的核苷酸序 列；包含NR3C1基因型的核苷酸序列；和它们的组合。
3. 根据权利要求2所述的方法，其中所述NR3C1基因型选自：SEQ ID NO: 3 (rsl0482672)和 SEQ ID N0:4 (rsl7100236)。
4. 根据权利要求1所述的方法，其中所述标记通过基因分型来检测。
5. 根据权利要求4所述的方法，其中所述基因分型包括： (a) 扩增包含所述标记的核酸；和 (b) 检测扩增的核酸，由此检测所述标记。
6. 根据权利要求5所述的方法，其中所述标记通过测序来检测。
7. -种确定受试者是否是V1B拮抗剂治疗的合适候选人和治疗被鉴别为所述治疗的合 适候选人的受试者的方法，所述方法包括下述步骤： (a) 提供得自所述受试者的生物样品；和 (b) 检测下丘脑-垂体-肾上腺（"ΗΡΑ"）轴功能标记； 其中所述受试者具有以ΗΡΑ轴调节异常为特征的障碍； 其中如果所述ΗΡΑ轴功能标记以高于正常受试者样品中的标记分布的约第60百分位 的水平存在，所述受试者适合于V1B拮抗剂治疗；和 (c) 用V1B拮抗剂治疗在步骤（b)中被鉴别为适合治疗的受试者。
8. 根据权利要求7所述的方法，其中所述ΗΡΑ轴功能标记以大于正常受试者样品中 的ΗΡΑ轴功能标记的分布的下述百分位的水平存在，所述百分位选自正常受试者样品中的 ΗΡΑ轴功能标记分布的约第65、第70、第75、第80、第85、第90和第95百分位。
9. 根据权利要求7所述的方法，其中所述标记选自：AVP、肽素、皮质醇、可的松、ACTH、 皮质醇的肝代谢物、可的松的肝代谢物、CRH，和它们的组合。
10. 根据权利要求9所述的方法，其中所述肽素是血浆肽素。
11. 根据权利要求9所述的方法，其中所述AVP是血浆AVP。
12. 根据权利要求9所述的方法，其中所述皮质醇的肝代谢物选自：α-四氢皮质醇、 四氢皮质醇、α_皮甾五醇、皮甾五醇、a_cortolic acid、0-cortolic acid,和它 们的组合。
13. 根据权利要求9所述的方法，其中所述可的松的肝代谢物选自：四氢可的松、皮酮 四醇、cortolonic acid,和它们的组合。
14. 根据权利要求1或7所述的方法，其中所述生物样品选自：含有核酸的样品、血清、 血浆、血液、尿和唾液。
15. 根据权利要求14所述的方法，其中所述生物样品是尿。
16. 根据权利要求15所述的方法，其中所述标记是皮质醇、可的松、α-四氢皮质醇、 β-四氢皮质醇和四氢可的松的尿量的总和。
17. 根据权利要求15所述的方法，其中所述标记是α -四氢皮质醇、β -四氢皮质醇和 四氢可的松的尿量的总和。
18. 根据权利要求16或17所述的方法，其中将所述尿量的总和除以相同尿样品中的肌 酸酐的量。
19. 根据权利要求16、17或18所述的方法，其中所述尿样品是得自所述受试者的 24-小时尿收集物。
20. 根据权利要求16、17或18所述的方法，其中所述尿样品是得自所述受试者的过夜 尿收集物。
21. 根据权利要求16、17或18所述的方法，其中所述尿样品在单次排泄中收集自受试 者。
22. 根据权利要求7所述的方法，其中所述样品是含有大于或等于8.6 pg/mL AVP的血 浆样品，如通过放射免疫测定所测得。
23. 根据权利要求7所述的方法，其中所述样品是含有大于或等于2.8 ng/mL肽素的血 浆样品，如通过酶免疫测定所测得。
24. 根据权利要求7所述的方法，其中所述样品是含有大于或等于3.44 mg/mg肌酸酐 的皮质醇、可的松、α -四氢可的松、β -四氢皮质醇和四氢可的松的总和的尿样品。
25. 根据权利要求7所述的方法，其中所述标记通过免疫测定来检测。
26. 根据权利要求7所述的方法，其中所述标记通过质谱法来检测。
27. 根据权利要求1或7所述的方法，其中所述障碍选自：库欣综合征、痴呆、认知损 害、心境障碍、焦虑障碍、物质相关的障碍、骨质疏松症、关节炎、糖尿病、血脂异常、肥胖、高 血压、疼痛、青光眼，和它们的组合。
28. 根据权利要求27所述的方法，其中所述心境障碍是抑郁症。
29. 根据权利要求28所述的方法，其中所述抑郁症是严重抑郁障碍。
30. 根据权利要求27所述的方法，其中所述焦虑障碍选自：创伤后应激障碍、广泛性焦 虑障碍和惊恐障碍。
31. 根据权利要求27所述的方法，其中所述物质相关的障碍选自：酒精依赖性或滥用， 和药物依赖性或滥用。
32. 根据权利要求27所述的方法，其中所述痴呆是阿尔茨海默型。
33. 根据权利要求27所述的方法，其中所述认知损害是由阿尔茨海默氏病引起的轻度 认知损害。
34. -种监测受试者对V1B拮抗剂治疗的应答的方法，所述方法包括： (a) 提供得自接受V1B拮抗剂治疗的受试者的生物样品； (b) 检测下丘脑-垂体-肾上腺（"ΗΡΑ"）轴功能标记； 其中所述受试者具有以ΗΡΑ轴调节异常为特征的障碍；和 其中标记水平与基线相比大于25%的变化指示，V1B拮抗剂可用于治疗所述受试者；和 (c) 基于在步骤（b)中检测到的标记水平相对于基线的变化，继续或中断受试者中的 V1B拮抗剂治疗。
35. 根据权利要求34所述的方法，其中所述ΗΡΑ轴功能标记选自：皮质醇；可的松；促 皮质素释放激素，促肾上腺皮质激素（ACTH);皮质醇的肝代谢物，可的松的肝代谢物，和它 们的组合。
36. 根据权利要求35所述的方法，其中所述可的松的肝代谢物选自：四氢可的松、皮酮 四醇、cortolonic acid,和它们的组合。
37. 根据权利要求35所述的方法，其中所述标记是皮质醇、可的松、α-四氢皮质醇、 β-四氢皮质醇和四氢可的松的尿量的总和。
38. 根据权利要求35所述的方法，其中所述标记是α -四氢皮质醇、β -四氢皮质醇和 四氢可的松的尿量的总和。
39. 根据权利要求37或38所述的方法，其中将所述尿量的总和除以相同尿样品中的肌 酸酐的量。
40. 根据权利要求34所述的方法，其中所述基线是在3 pg/mL至13 pg/mL之间的水平 的皮质醇。
41. 根据权利要求34所述的方法，其中使用酶免疫测定确定所述皮质醇基线。
42. 根据权利要求34所述的方法，其中所述基线指示在开始V1B拮抗剂治疗之前取自 所述受试者的样品中的ΗΡΑ轴功能标记的水平。
43. 根据权利要求35所述的方法，其中所述ACTH是血浆ACTH。
44. 根据权利要求34所述的方法，其中所述生物样品选自：含有核酸的样品、血清、血 浆、血液、尿和唾液。
45. 根据权利要求34所述的方法，其中所述障碍选自：库欣综合征、痴呆、认知损害、心 境障碍、焦虑障碍、物质相关的障碍、骨质疏松症、关节炎、糖尿病、血脂异常、肥胖、高血压、 疼痛、青光眼，和它们的组合。
46. 根据权利要求45所述的方法，其中所述心境障碍是抑郁症。
47. 根据权利要求46所述的方法，其中所述抑郁症是严重抑郁障碍。
48. 根据权利要求45所述的方法，其中所述焦虑障碍选自：创伤后应激障碍、广泛性焦 虑障碍和惊恐障碍。
49. 根据权利要求45所述的方法，其中所述物质相关的障碍选自：酒精依赖性或滥用， 和药物依赖性或滥用。
50. 根据权利要求45所述的方法，其中所述痴呆是阿尔茨海默型。
51. 根据权利要求45所述的方法，其中所述认知损害是由阿尔茨海默氏病引起的轻度 认知损害。
52. 根据权利要求34所述的方法，其中标记水平的大于25%的变化是相对于基线增加 的变化。
53. 根据权利要求34所述的方法，其中标记水平的大于25%的变化是相对于基线降低 的变化。
54. 根据权利要求1、7或34所述的方法，其中所述V1B拮抗剂具有式I :
其中A是芳族单环杂环，其中所述杂环是5或6元环且包含至多4个选自N、0和S的 杂原子，其中不超过一个杂原子是氧或硫原子，且A可以被基团Rll、R12和/或R13取代， 其中R11、R12和R13在每次出现时彼此独立地选自氢、氯、溴、碘、氟、CN、CF 3、0CF3、N02、0H、 0-Q-C；-烷基、〇-苯基、O-Ci-C；-亚烷基-苯基、苯基、&-(；-烷基、c 2-c6-烯基、c2-c6-炔基、 NH2、NH (crc4-烷基）和N (CrQ-烷基）2，R3和R4彼此独立地选自氢、氯、溴、碘、氟、CN、CF 3、 0CF3、N02、OH、0-CfC4-烧基、0 -苯基、0-CfC4-亚烧基-苯基、苯基、CfC 6-烧基、C2-C6-稀 基、c 2-c6-炔基、NH2、NH (crc4-烷基）和N (crc4-烷基）2，或R3和R4连接以产生-CH=CH-C H=CH_、- (CH2) 4_ 或-(CH2) 3_， R5是
其中W选自NR54、NR54- (CfC4-亚烷基）和键，R54独立地选自氢、CfCf烷基、C2-C6-烯 基、C2-C6-炔基、苯基和CfC4-亚烷基-苯基，其中苯基环可以被至多2个基团R59取代，R59 独立地选自氢、氯、溴、碘、氟、CN、CF 3、0CF3、N02、OH、O-Q-C；-烷基、CrQ-烷基、C2-C 6-烯基、 C2-C6-炔基、NH2、NH(CrC 4-烷基）和N(CrC4-烷基）2, R63彼此独立地选自氢、氯、溴、碘、 氟、CN、CF3、0CF3、N02、OH、〇-C「C 4-烷基、0-苯基、〇-C「C4-亚烷基-苯基、苯基、C「C6-烷 基、C 2-C6-烯基、C2-C6-炔基、NH2、NH(C rC4-烷基）和N(CrC4-烷基）2, R6和R7彼此独立 地选自氢、氯、溴、碘、氟、CN、CF3、0CF3、N0 2、OH、O-Q-C；-烷基原子、0-苯基、O-Q-C；-亚烷 基-苯基、苯基、CfQ-烧基、C2_C 6_稀基、C2_C6_块基、NH2、MKCfQ-烧基）和N(C「C 4-烧 基）2，和它们的互变异构形式、它们的对映异构形式和非对映异构形式。
55. 根据权利要求54所述的方法，其中A是包含1或2个杂原子的芳族杂单环系统，其 中2个杂原子之一是氮。
56. 根据权利要求54所述的方法，其中A选自嘧啶、吡啶、哒嗪、吡嗪、噻唑、咪唑、噻 吩-和呋喃。
57. 根据权利要求54所述的方法，其中所述V1B拮抗剂是：
58. 根据权利要求54所述的方法，其中所述V1B拮抗剂是：
59. 根据权利要求1或7所述的方法，其中所述方法用于筛选受试者对于临床试验而言 的合格性。
60. 根据权利要求1或7所述的方法，其中所述方法用于分级受试者对于临床试验而言 的随机化。
61. 根据权利要求1或7所述的方法，其中所述方法用于分级临床试验的分析。
62. -种用于稳定血浆样品中的AVP的试剂盒，其中所述试剂盒包含一个或多个收集 试管，所述收集试管包含一种或多种蛋白酶抑制剂。
63. -种用于测定血液衍生的基体中的AVP的试剂盒，其中所述试剂盒包含收集试管 和关于在室温稳定AVP的说明书。
【文档编号】G01N33/68GK104303060SQ201380014125
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2013年3月13日 优先权日:2012年3月13日
【发明者】D.A.卡茨, M.范加伦 申请人:艾伯维公司, 艾伯维德国有限责任两合公司