川芎药材的检测方法、鉴定方法
【专利摘要】本发明提供了川芎药材的检测方法。本发明还提供了川芎药材的鉴定方法。本发明提供的检测方法，重现性良好，可以快速、有效的检测川芎质量，为控制正品川芎药材的品质提供了保障。
【专利说明】川芎药材的检测方法、鉴定方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及川芎药材的检测方法、鉴定方法。
【背景技术】
[0002]川芎，原名芎藭。一种中药植物，常用于活血行气，祛风止痛，主要栽培于四川、云南、贵州、广西、湖北等地。川芎辛温香燥，走而不守，既能行散，上行可达巅顶；又入血分，下行可达血海。活血祛瘀作用广泛，适宜瘀血阻滞各种病症；祛风止痛，效用甚佳，可治头风头痛、风湿痹痛等症。昔人谓川芎为血中之气药,殆言其寓辛散、解郁、通达、止痛等功能。
[0003]目前多采用气相色谱法、液相色谱法对川芎的质量进行控制和检测，还未见使用荧光分光光度法对)11芎质量进行系统研究的报道。
[0004]目前川芎药材质量控制多以藁本内酯、阿魏酸和川芎嗪等为指标性成分，采用HPLC、GC、TLS-S等现代分析方法测定药材中相关成分含量。总内酯类成分、总生物碱、总酚酸类成分等的测定多采用分光光度法测定。纵览研究结果，虽对药材质量控制具有一定的意义，但存在的问题亦不容回避。藁本内酯在生药的含量约为0.6%，约占挥发油总量58%，该成分含量高低对区分是否出自道地产区有一定意义，但藁本内酯在室温下可发生脱氢、氧化、水解、降解等异构化反应，药材在贮藏过程中含量变化较大，以其作为质控指标，其稳定性问题引人关注；阿魏酸在生药中含量约为0.1%?0.2%，但阿魏酸是多种药用植物共有成分，作为定量指标其专属性较差；而川芎嗪在生药中的含量低于万分之一，不宜作为药材质量控制的指标性成分。指纹图谱用于川芎药材质量控制亦见报道，但由于制约因素较多而限制其推广应用。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是提供了一种川芎药材的检测方法；本发明还提供了正品川芎药材的鉴定方法。
[0006]本发明提供了川芎药材的检测方法，它是以荧光分光光度法检测的，检测方法包括如下操作步骤:
[0007](I)取川芎，粉碎后，乙醇提取，收集乙醇提取液，定容后，即得供试品溶液；
[0008](2)以藁本内酯为对照品，制备对照品溶液；
[0009](3)分别取供试品溶液和对照品溶液，以荧光分光光度法进行检测即可；其中，荧光分光光度法的条件如下:激发波长为320?325nm，发射波长为452?458nm
[0010]其中，所述激发波长为323nm,发射波长为455nm或450nm。
[0011]进一步地,步骤(I)中，所述乙醇浓度为60?95%v/v。
[0012]更进一步地,步骤(I)中，所述乙醇浓度为80%v/v。
[0013]其中，步骤(I)中，所述乙醇提取采用超声、索氏、浸提或回流提取。
[0014]一种川芎药材的鉴定方法，它包括如下方法:
[0015]a、以藁本内酯为对照品，采用荧光分光光度法测定川芎药材中总荧光物质的含量;
[0016]b、若总荧光物质含量在3.0%w/w以上，为正品川芎药材。
[0017]总荧光物指川芎中在紫外或短波长的可见光的激发下能产生一定波长荧光的物质的总称。其中，川芎药材中总荧光物质含量在3.9%w/w以上。
[0018]所述荧光分光光度法的具体操作步骤如上所述的检测方法。
[0019]本发明提供的检测方法，重现性良好，可以快速、有效的检测川芎质量，为控制正品川芎药材的品质提供了保障。
【专利附图】
【附图说明】
[0020]图1荧光光谱扫描图；
[0021]其中，A为激发波长扫描图，B为发射波长扫描图；藁本内酯标准品(蓝色);阿魏酸标准品(红色)；供试品溶液(绿色)；溶剂空白(紫色)。
【具体实施方式】
[0022]实施例1本发明川芎的检测方法
[0023]川芎的断面在紫外灯下显亮淡蓝色荧光、外皮显棕色荧光，是川芎传统理化鉴别的重要特征，川芎中的藁本内酯、阿魏酸等有效成分都为荧光物质，本文采用荧光分光光度法对川芎中荧光类物质的总量进行了测定。
[0024]( I)激发波长和发射波长的选择
[0025]取川芎样品0.1g,精密称定，置于250ml三角瓶中，精密加入乙醇25ml，精密称定重量，超声提取45min，放冷，再精密称量重量，以乙醇补足损失的重量，摇匀，过滤，取续滤液25μ 1，置于IOml量瓶中，加乙醇稀释至刻度即得供试品溶液。取该供试品溶液，固定激发波长，在200?700nm波长范围扫描，测得其最大发射波长λ EM为455nm，固定该发射波长，在200?500nm波长范围扫描，得到其最大激发波长λ Ex为323nm。供试品光谱扫描图见图1。
[0026]( 2)对照品种类的选择
[0027]分别取阿魏酸对照品、洋川芎内酯A和藁本内酯对照品适量，加乙醇制成一定浓度的对照品溶液，进行光谱扫描，结果，洋川芎内酯A对照品无荧光，阿魏酸对照品最大激发波长为335nm，最大发射波长为420nm ;藁本内酯最大激发波长为323nm，最大发射波长为455nm，与供试品溶液一致，因此选择以藁本内酯为对照，计算川芎中总荧光物质含量。
[0028](3)标准溶液的配制精密称取藁本内酯对照品2.4200mg于IOml容量瓶中，加乙醇至刻度，得到浓度为0.242mg/ml的对照品储备液。再分别精密吸取该对照品液1.5 μ 1，
2.5 μ 1，5 μ 1，10 μ 1,17.5 μ 1，20 μ 1，25 μ 1，30 μ 1，置于 IOml 容量瓶中，用乙醇定容至刻度，摇匀得不同浓度的一系列标准品溶液。
[0029](4)测定和计算方法
[0030]取各供试液、对照品溶液、溶剂空白溶液于λΕχ323ηπκ λ EM455nm条件下测定荧光强度，按下式计算供试品溶液的浓度。
[0031]Cx= (Rx — Rxb) / (Rr 一 Rrb) X Cr
[0032]Cx为供试品溶液的浓度；Rx为供试品溶液的荧光强度；[0033]Rxb为供试品溶液试剂空白的荧光强度；
[0034]Rr为对照品溶液的荧光强度；
[0035]Rrb为对照品溶液试剂空白的荧光强度；
[0036]Cr为对照品溶液的浓度。
[0037](5)供试品溶液的制备方法考察
[0038]①提取溶媒的考察
[0039]取彭州敖平一等川芎样品粉末(过四号筛)0.lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精密加入甲醇，水，乙醇，丙酮，乙酸乙酯各25ml，密塞，称定重量，超声处理30min，放冷，称重，补足损失的溶媒，摇匀，取续滤液25μ 1，置IOml量瓶中，加相应溶媒稀释至刻度即得，结果见表1。
[0040]表1不同提取溶媒对川芎中总荧光物质含量的影响(η=2)
【权利要求】
1.川芎药材的检测方法，其特征在于:它是以荧光分光光度法检测，检测方法包括如下操作步骤: (1)取川芎，粉碎后，乙醇提取，收集乙醇提取液，定容后，即得供试品溶液； (2)以蔓本内酷为对照品，制备对照品溶液； (3)分别取供试品溶液和对照品溶液，以荧光分光光度法进行检测即可；其中，荧光分光光度法的条件如下:激发波长为320?325nm，发射波长为452?458nm。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于:所述激发波长为323nm，发射波长为455nm 或 450nmo
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于:步骤(I)中，所述乙醇浓度为60?95%v/v。
4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于:步骤(I)中，所述乙醇浓度为80%v/Vo
5.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于:步骤(I)中，所述乙醇提取采用超声、索氏、浸提或回流提取。
6.川芎药材的鉴定方法，其特征在于:它包括如下方法: a、以藁本内酯为对照品，采用荧光分光光度法测定川芎药材中总荧光物质的含量； b、若总荧光物质含量在3.0%w/w以上，为正品川芎药材。
7.根据权利要求6所述的鉴定方法，其特征在于:川芎药材中总荧光物质含量在3.9%w/w 以上。
8.根据权利要求6或7所述的鉴定方法，其特征在于:所述荧光分光光度法的具体操作步骤如权利要求1-5任意一项所述的检测方法。
【文档编号】G01N21/64GK103743716SQ201410044565
【公开日】2014年4月23日 申请日期:2014年2月7日 优先权日:2013年1月31日
【发明者】彭成, 刘友平, 陈林, 陈鸿平 申请人:成都中医药大学