利用分散液液微萃取方式检测豆浆中塑化剂的方法
【专利摘要】本发明公开了一种利用分散液液微萃取方式检测豆浆中塑化剂的方法，首先取一定量的待测豆浆，向待测豆浆中加入盐并进行搅拌或震荡，使待测豆浆中的盐充分溶解，然后向待测豆浆加入设定量的有机溶剂，再进行离心，然后取上清液备用；再取用经过上述步骤a制备的上清液作为待测萃取体系，向待测萃取体系中用进样针快速加入设定量的萃取剂，然后对萃取体系进行离心，再弃去上清液，然后取沉淀物进入GC-MS进行分析，从而得到豆浆中塑化剂分析结果。本发明在检测过程中无需使用大量的有机溶剂，可以节约有机溶剂，对环境友好，且富集效率高，检测结果精确度高。
【专利说明】利用分散液液微萃取方式检测豆浆中塑化剂的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种液态饮料中塑化剂的检测方法，特别是涉及一种采用萃取方法检测液态饮料中塑化剂的方法，应用于食品安全和食品成分检测【技术领域】。
【背景技术】
[0002]在中国，豆浆是一种传统的发明于中国的饮品。由于豆浆价格低廉，营养价值高，深受广大老百姓的喜爱。豆浆常用的包装袋的材料是聚氯乙烯(PVC)，在合成PVC的过程中，邻苯二甲酸酯类(PEAs)是最常用的添加剂，虽然它可以改变PVC的柔软、使其易于弯曲、折叠、弹性佳的性质而易于塑形，但是长期食用，可能造成生殖系统的异常、胎儿畸形或者癌症的危险。在合成PVC的过程中，由于不完全反应，使得未反应的邻苯二甲酸脂类由包装进入食品之中，危及人们的健康。2011年5月，台湾的塑化剂风波，引起了人们对邻苯二甲酸脂类的广泛关注。很多实验室开始了对邻苯二甲酸脂类进行了研究，现在从食品中提取邻苯二甲酸脂类最常用方法是分散液液微萃取(DLLME)，它是在2008年由Rezaee发明的一种萃取方法。分散液液微萃取这种前处理方法是使用微量注射器将萃取剂快速注入萃取体系，在分散剂-水相内形成萃取剂微珠，悬浮于溶液中，这样不仅仅扩展了有机萃取剂微珠和水样之间相接触面，而且还使得分析物迅速的转移到萃取剂中，几秒内即可达到萃取平衡。这种萃取方法萃取速度快，萃取效率和富集倍数高，且操作简便、消耗低，环境友好，是一种非常具有发展潜力的分离富集技术。但现有的萃取技术中存在有机溶剂用量比较大，容易造成环境不友好；二是豆浆具有复杂的基质，如果处理不好，会影响后续的实验的问题。
【发明内容】
[0003]为了解决现有技术问题，本发明的目的在于克服已有技术存在的不足，提供一种利用分散液液微萃取方式检测豆浆中塑化剂的方法，在检测过程中无需使用大量的有机溶齐U，可以节约有机溶剂，对环境友好，且富集效率高，检测结果精确度高。
[0004]为达到上述发明创造目的，本发明采用下述技术方案:
一种利用分散液液微萃取方式检测豆浆中塑化剂的方法，包括如下步骤:
a.取一定量的待测豆浆，向待测豆浆中加入盐并进行搅拌或震荡，使待测豆浆中的盐充分溶解，然后向待测豆浆加入设定量的有机溶剂，再进行离心，然后取上清液备用；向待测豆浆中加入的盐优选采用NaCl，向待测豆浆加入的有机溶剂优选采用乙腈，对于5ml的待测豆浆，优选控制有机溶剂的加入量为3ml，并优选控制盐的加入量为0.5g ；
b.取用经过上述步骤a制备的上清液作为待测萃取体系，向待测萃取体系中用进样针快速加入设定量的萃取剂，然后对萃取体系进行离心，再弃去上清液，然后取沉淀物进入GC-MS进行分析，从而得到豆浆中塑化剂分析结果；优选采用的萃取剂为四氯化碳，并对于取在上述步骤a中制备的上清液1ml，优选向其中加入体积为40ul的萃取剂；优选采用乙腈作为分散剂，向在上述步骤a中制备的上清液每Iml中，优选加入分散剂的体积为1ml。
[0005]作为本发明优选的技术方案，在上述步骤a之前，预先制备含塑化剂成分的标准溶液，利用气相色谱-质谱联用仪检测标准溶液，得保留时间和标准曲线；在上述步骤b之后，将通过GC-MS分析获得的检测结果与在上述步骤a之前对标准溶液检测得到的保留时间和标准曲线比对，对塑化剂成分进行定性定量的计算，从而得到豆浆中塑化剂分析结果。
[0006]本发明在气相色谱-质谱联用仪检测过程中，气相色谱-质谱联用仪的检测条件是:色谱柱为HP-5MS石英毛细管柱(30mX0.25mm (内径)Χ0.25 um);进样口的温度为250°C，升温程序为初始柱温60°C，保持lmin，以20°C /min升温至220°C，保持lmin，再以5V /min升至280°C,保持4min。载气为氦气,流速为lml/min。质谱条件为:色谱与质谱的接口温度为280°C，电子轰击源(EI)。电离能量，70eV ;溶剂延迟，5min。
[0007]本发明与现有技术相比较，具有如下显而易见的突出实质性特点和显著优点:
本发明适用于豆浆中的塑化剂的检测，在检测过程中无需使用大量的有机溶剂，可以节约有机溶剂，对环境友好，且富集效率高，检测结果精确度高。
【专利附图】
【附图说明】
[0008]图1为本发明实施例一检测到第一种豆浆中DEHP的GC-MS图。
[0009]图2为本发明实施例一检测到第二种豆浆中DBP的GC-MS图。
[0010]图3为本发明实施例一检测到第三种豆浆中DCHP的GC-MS图。
[0011]图4为本发明实施例一检测到第三种豆浆中DEP的GC-MS图。
[0012]图5为本发明实施例一检测到第三种豆浆中DIBP的GC-MS图。
[0013]图6为本发明实施例一检测到第四种豆浆中DCHP的GC-MS图。
[0014]图7为本发明实施例一检测到第五种豆浆中DEP的GC-MS图。
[0015]图8为本发明实施例一检测到第五种豆浆中DCHP的GC-MS图。
【具体实施方式】
[0016]本发明的优选实施例详述如下:
实施例一:
在本实施例中，从市场上购买五种不同品牌的豆浆，测定五种豆浆中的塑化剂。
[0017]1.制备标准溶液，利用气相色谱-质谱联用仪检测，得保留时间和标准曲线，具体的数据如表一与表二；表IGC-MS裣测3转邻苯二甲|_g的保留时tl_定鬉高子
—............................弱............................11.................................——Issfi1.......r?ii)——............................................................................—
-gp ；Ο、?63
2DBP8.6=149=
3MBP10.S1?
4DBP11.014§.5DPP.12.S149
6 DCHP 17.1149
I DEHP 17.4149
8 DWjP 19.8149
表2 GC_Ms裣测8种邻苯二甲酸||的#准曲线以及富集參^
序号名_ #S5M R2LR(mgl-l) LOD/ugg-1LOQ/ugg-1 RSD(S) EF (fold)
^I DHP^Y=i3255x1-2T23 0.3994Cf.1-400 0.0443^0.1492 ^3.2 ^200^
2DEP f=13295xtl$34 Cl 99?0.1-400 0.19750,6583 3,0220
3DIBP f=T?426x^4464 0.99950.1-400 0.011270.03155 2.9237
4DBP Y=21064x?245 0.99940.1-400 0.05360.1736 3.0212
5DDP Y=l?389x K343 0.39950.1-400 0.072640.2421 3.0238$ CCHP Y=7029x+i222 0.99.0.1-400 0,25210.8403 3.1236T DEHP ￥=42231X+1SH 0.99930.1-400 Cf.019480.06493 3.22608 DNOP ￥=76?Sx+110? 0.99960.1-400 0.1T860.5952 2.9246
表1、2中序号1-8依次为:邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二异丁酯(DIBP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二戊酯(DDP)、邻苯二甲酸二环己酯(DCHP)、邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)、邻苯二甲酸正二辛酯(DNOP)。
[0018]2.取5ml的豆浆，加入适量的盐摇晃使盐溶解，然后加入3ml乙腈，以4000r/min的转速离心15min后，取上清液。
[0019]3.取适量的上一步骤中获得的Iml上清液加入5ml的去离子水中，然后用进样针快速的加入40ul的四氯化碳溶液，以4000r/min的转速离心15min后,弃去上清液,取Iul的沉淀进入GC-MS进行分析。
[0020]4.将步骤3中获得的检测结果与步骤I中得到的保留时间和标准曲线比对，对塑化剂进行定性定量的计算。
[0021]在本实施例中，采用的试剂、仪器、检测条件、检测过程如下:
(I)试剂和仪器
邻苯二甲酸酯标准储备液(0.4mg/g);甲醇，色谱纯，其余试剂也均为色谱纯气相色谱-质谱仪，电子天平，精确到0.1mg,离心机，实验室常用玻璃器皿，所用玻璃器皿洗净后，用甲醇淋洗后在烘箱内烘干，冷却至室温备用。
[0022](2)检测条件
色谱条件:色谱柱为HP-5MS石英毛细管柱(30mX0.25mm (内径)X0.25 um);进样口的温度为250°C，升温程序为初始柱温60°C，保持lmin，以20°C /min升温至220°C，保持lmin，再以5°C /min升至280°C,保持4min。载气为氦气,流速为lml/min。进样方式:不分流进样；进样量:I μ!。
[0023]质谱条件:色谱与质谱的接口温度为280°C，电子轰击源(EI)。电离能量，70eV ;溶剂延迟，5min。
[0024](3)检测过程
将制备的标准溶液在上述要求的色谱条件下进行色谱测定，记录保留时间和响应值。并利用标准溶液经过优化后的实验条件下进行分散液液微萃取技术萃取后，进行色谱测定，计算富集参数。
[0025]在本实例中，从市场上购买五种不同品牌的豆浆，分别利用分散液液微萃取方式检测豆浆中塑化剂，包括如下步骤:
a.取5ml的待测豆浆，向待测豆浆中加入0.5g的NaCl并进行摇晃使盐溶解，使待测豆浆中的盐充分溶解，然后向待测豆浆加入3ml的乙腈有机溶剂，以4000r/min的转速离心5min后,然后取上清液备用；
b.取用经过上述步骤a制备的上清液Iml作为待测萃取体系，加入5ml的去离子水中，向待测萃取体系中用进样针快速加入40ul的四氯化碳溶液萃取剂，以4000r/min的转速离心15min后，再弃去上清液，然后取Iul的沉淀物进入GC-MS进行分析，并记录各组分的保留时间和响应值，利用相应的标准曲线计算出各组分的含量，从而得到豆浆中塑化剂分析结果。
[0026]利用上述检测方法进行检测，参见图1~图8。得出以下结果:
【权利要求】
1.一种利用分散液液微萃取方式检测豆浆中塑化剂的方法，其特征在于，包括如下步骤: a.取一定量的待测豆浆，向待测豆浆中加入盐并进行搅拌或震荡，使待测豆浆中的盐充分溶解，然后向待测豆浆加入设定量的有机溶剂，再进行离心，然后取上清液备用； b.取用经过上述步骤a制备的上清液作为待测萃取体系，向待测萃取体系中用进样针快速加入设定量的萃取剂，然后对萃取体系进行离心，再弃去上清液，然后取沉淀物进入GC-MS进行分析，从而得到豆浆中塑化剂分析结果。
2.根据权利要求1所述利用分散液液微萃取方式检测豆浆中塑化剂的方法，其特征在于:在上述步骤a中，向待测豆浆中加入的盐为NaCl，向待测豆浆加入的有机溶剂为乙腈，对于5ml的待测豆浆，控制有机溶剂的加入量为3ml，控制盐的加入量为0.5g。
3.根据权利要求2所述利用分散液液微萃取方式检测豆浆中塑化剂的方法，其特征在于:在上述步骤b中，采用的萃取剂为四氯化碳，取在上述步骤a中制备的上清液1ml，向其中加入体积为40ul的萃取剂。
4.根据权利要求3所述利用分散液液微萃取方式检测豆浆中塑化剂的方法，其特征在于:在上述步骤b中，采用乙腈作为分散剂，向在上述步骤a中制备的上清液每Iml中，加入分散剂的体积为1ml。
5.根据权利要求1?4中任意一方所述利用分散液液微萃取方式检测豆浆中塑化剂的方法，其特征在于:在上述步骤a之前，预先制备含塑化剂成分的标准溶液，利用气相色谱-质谱联用仪检测标准溶液，得保留时间和标准曲线；在上述步骤b之后，将通过GC-MS分析获得的检测结果与在上述步骤a之前对标准溶液检测得到的保留时间和标准曲线比对，对塑化剂成分进行定性定量的计算，从而得到豆浆中塑化剂分析结果。
【文档编号】G01N30/02GK104198597SQ201410286361
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年6月24日 优先权日:2014年6月24日
【发明者】王文甜, 杨洋, 白松春, 胡帆, 徐晓霞, 程平 申请人:上海大学