一种植物维生素c含量的测定方法
【专利摘要】本发明提供一种植物维生素C含量的测定方法，通过称取待测样品，加入等质量的草酸溶液，经捣碎成浆状样品，再称取浆状样品，然后用草酸溶液将浆状样品稀释得到样液，加入白陶土去色，再离心分离吸取上清液，用常规染料溶液滴定直至上清液呈粉红色，最后按公式计算每百克样品中所含抗坏血酸的毫克数。本发明能大大缩短提取分析时间，避免维生素C暴露于空气中造成氧化，防止了维生素C的损失，保全了植物中维生素C的本来含量，所测得维生素C的含量准确，测量结果精度高。另外，对于油脂类植物不仅能实现完全分离，还避免了过滤器具难以清洗的问题，解决了现有技术对油脂类植物维生素C测定的不准确问题。
【专利说明】一种植物维生素C含量的测定方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种维生素C测定方法，尤其是一种植物维生素C含量的测定方法，属于分析化学【技术领域】。
【背景技术】
[0002]在植物提取、植物营养成分分析中，常常涉及到植物维生素C含量的测定。然而，现有技术中对维生素C的标准分析时间过长，特别是在待测样品过滤时，常规的自然过滤使维生素C暴露于空气中易于氧化，以使维生素C损失过多，导致测定时所得维生素C含量过低，不能准确测定。
[0003]另外，对于坚果等油脂类植物，在常规自然过滤时耗时更长，且不能达到完全过滤效果，还会黏附过滤器具。这样不仅造成维生素C损失过多，还使得维生素C含量测定误差更大，难以获得准确数据。因此，有必要对现有技术加以改进。
【发明内容】
[0004]为克服现有技术存在耗时过长、维生素C易损失等问题，本发明提供一种植物维生素C含量的测定方法，以实现快速、准确的测定。
[0005]本发明通过下列技术方案实现:一种植物维生素C含量的测定方法，其特征在于对样液进行离心分离，具体经过下列各步骤:
(1)称取待测样品50?100克，加入等质量的质量浓度为2%的草酸溶液，经捣碎成浆状样品，再称取10?30克浆状样品，然后用质量浓度为I %的草酸溶液将浆状样品稀释至I克浆状样品/毫升草酸，并摇匀得到样液；
(2)在步骤(I)所得样液中，按0.4?5克/克待测样品的量加入白陶土去色，再在转速为2000?2500rpm下进行离心分离5?1min,再静置5?1min,然后迅速吸取上清液，用常规染料溶液滴定直至上清液呈粉红色于15秒内不褪色为止；
(3)计算每百克样品中所含抗坏血酸的毫克数=(VXTXA)/WX 100
式中，V—滴定时所耗去染料溶液的量(mL) ；T—每毫升染料溶液相当于抗坏血酸的毫克数(mg) ；A——稀释倍数10倍;W——滴定时所取的浆状样品中的待测样品量(g)。
[0006]所述步骤(I)的捣碎是使用除金属容器以外的器具进行捣碎，防止浸提剂草酸与金属发生反应。
[0007]本发明具有下列优点和效果:采用上述方案测定植物维生素C含量时，是用离心沉淀法取代现有分析技术中的常规滤法，同时将脱色与过滤一步完成。在转速为2000?2500rpm下进行离心分离，能达到植物样液的分层效果佳，避免了转速过慢导致分层不完全，也避免了转速过快造成油脂类植物的样液与水在剧烈运动下形成乳状而无法分离；而采用离心分离5?1min也是经反复试验才能获得的最佳分离时间，时间过短难以达到分离效果，时间过长会使油脂类植物的样液形成难以判别的轻微乳状，对分析测定结果造成非常大的误差。本发明能大大缩短提取分析时间，避免维生素C暴露于空气中造成氧化，防止了维生素C的损失，保全了植物中维生素C的本来含量，所测得维生素C的含量准确，测量结果精度高。另外，对于油脂类植物不仅能实现完全分离，还避免了过滤器具难以清洗的问题，解决了现有技术对油脂类植物维生素C测定的不准确问题。
【具体实施方式】
[0008]下面通过实施例对本发明做进一步说明。
[0009]实施例1
A、准确称取20mg抗坏血酸，于1mL量瓶中溶解抗坏血酸于质量浓度为I%的草酸溶液中，再用质量浓度为I %的草酸溶液稀释至10mL,混匀后即得到抗坏血酸标准溶液，置于4°C下保存；
B、吸取步骤A所得抗坏血酸标准溶液5mL，再用质量浓度为I%的草酸溶液定容至50mL,即得到抗坏血酸使用溶液，然后吸取抗坏血酸使用溶液5mL，再加入质量浓度为6%的碘化钾溶液0.5mL,并滴入质量浓度为I %的淀粉溶液3滴，然后以浓度为0.0OlN的碘酸钾标准溶液滴定至混合溶液呈淡黄色；
C、计算抗坏血酸标准溶液的浓度(mg/mL)= (V1X0.088) /V2=0.0238mg/mL
式中，V1—滴定时所耗0.0OlN碘酸钾标准溶液的量1.35mL ；V2——所取抗坏血酸标准溶液的量5mL ；0.088——ImL的0.0OlN碘酸钾标准溶液相当于抗坏血酸的量(mg/mL)；
D、取碳酸氢钠52mg,溶于200mL沸水中，再将2，6-二氯靛酹50mg溶解于上述碳酸氢钠溶液中，待冷却至室温，置于4°C下静置过夜，次日经过滤后将滤液用水稀释至250mL，然后摇匀，即得到染料溶液，置于棕色瓶并于4°C下保存；
E、取5mL步骤A所得的抗坏血酸标准溶液，加入质量浓度为I%的草酸溶液5mL，经摇匀后，用步骤D所得染料溶液滴定至混合溶液呈粉红色并于15秒不褪色为止；
F、计算每毫升染料溶液相当于抗坏血酸的毫克数T(mg) = (CXV1) /V2=0.107mg 式中，C—步骤C所得抗坏血酸标准溶液的浓度(0.0238mg/mL)；V1——步骤E所用抗坏血酸标准溶液的量5mL ；V2——步骤E所消耗染料溶液的量1.1lmL ；
G、称取油橄榄鲜果样50克，加入50克的质量浓度为2%的草酸溶液，经陶瓷研钵捣碎成浆状样品，再称取10克浆状样品，然后用质量浓度为I %的草酸溶液将浆状样品稀释至I克浆状样品/毫升草酸，并摇匀得到样液；
H、在步骤G所得样液中，按3克/克待测样品的量加入白陶土去色，再在转速为2000rpm下进行离心分离5min，再静置5min，然后迅速吸取上清液，用常规染料溶液滴定直至上清液呈粉红色于15秒内不褪色为止；
1、计算每百克样品中所含抗坏血酸的毫克数=(VXTXA)/WX 100=23.5mg/100g样式中，V——滴定时所耗去染料溶液的量1.1OmL ；T——每毫升染料溶液相当于抗坏血酸的毫克数(mg) ；A——稀释倍数10倍;W——滴定时所取的浆状样品中的待测样品量为5g=50%X10。
[0010]实施例2
A、准确称取20mg抗坏血酸，于1mL量瓶中溶解抗坏血酸于质量浓度为I %的草酸溶液中，再用质量浓度为I %的草酸溶液稀释至10mL,混匀后即得到抗坏血酸标准溶液，置于5°C下保存； B、吸取步骤A所得抗坏血酸标准溶液5mL，再用质量浓度为I%的草酸溶液定容至50mL,即得到抗坏血酸使用溶液，然后吸取抗坏血酸使用溶液5mL，再加入质量浓度为6%的碘化钾溶液0.5mL,并滴入质量浓度为I %的淀粉溶液3滴，然后以浓度为0.0OlN的碘酸钾标准溶液滴定至混合溶液呈淡黄色；
C、计算抗坏血酸标准溶液的浓度(mg/mL)= (V1X0.088) /V2=0.0208mg/mL
式中，V1—滴定时所耗0.0OlN碘酸钾标准溶液的量1.18mL ；V2——所取抗坏血酸标准溶液的量5mL ；0.088——ImL的0.0OlN碘酸钾标准溶液相当于抗坏血酸的量(mg/mL)；
D、取碳酸氢钠52mg,溶于200mL沸水中，再将2，6-二氯靛酹50mg溶解于上述碳酸氢钠溶液中，待冷却至室温，置于5°C下静置过夜，次日经过滤后将滤液用水稀释至250mL，然后摇匀，即得到染料溶液，置于棕色瓶并于5°C下保存；
E、取5mL步骤A所得的抗坏血酸标准溶液，加入质量浓度为I%的草酸溶液5mL，经摇匀后，用步骤D所得染料溶液滴定至混合溶液呈粉红色并于15秒不褪色为止；
F、计算每毫升染料溶液相当于抗坏血酸的毫克数T(mg) = (CXV1) /V2=0.104mg 式中，C—步骤C所得抗坏血酸标准溶液的浓度0.0208mg/mL -,N1——步骤E所用抗坏血酸标准溶液的量(5mL) ；V2——步骤E所消耗染料溶液的量(1.0OmL)；
G、称取新鲜核桃仁样80克，加入80克的质量浓度为2%的草酸溶液，经陶瓷器皿捣碎成浆状样品，再称取20克浆状样品，然后用质量浓度为I %的草酸溶液将浆状样品稀释至I克浆状样品/毫升草酸，并摇匀得到样液；
H、在步骤G所得样液中，按0.4克/克待测样品的量加入白陶土去色，再在转速为2200rpm下进行离心分离8min，再静置lOmin，然后迅速吸取上清液，用常规染料溶液滴定直至上清液呈粉红色于15秒内不褪色为止；
1、计算每百克样品中所含抗坏血酸的毫克数=(VXTXA)/WX100=20.5mg/100g样式中，V——滴定时所耗去染料溶液的量(1.97mL) ；T——每毫升染料溶液相当于抗坏血酸的毫克数(0.104mg) ；A——稀释倍数10倍；W——滴定时所取的浆状样品中的待测样品量 10g=50%X20。
[0011]实施例3
A、准确称取20mg抗坏血酸，于1mL量瓶中溶解抗坏血酸于质量浓度为I%的草酸溶液中，再用质量浓度为I %的草酸溶液稀释至10mL,混匀后即得到抗坏血酸标准溶液，置于4°C下保存；
B、吸取步骤A所得抗坏血酸标准溶液5mL，再用质量浓度为I%的草酸溶液定容至50mL,即得到抗坏血酸使用溶液，然后吸取抗坏血酸使用溶液5mL，再加入质量浓度为6%的碘化钾溶液0.5mL,并滴入质量浓度为I %的淀粉溶液3滴，然后以浓度为0.0OlN的碘酸钾标准溶液滴定至混合溶液呈淡黄色；
C、计算抗坏血酸标准溶液的浓度(mg/mL)= (V1X0.088) /V2=0.0201mg/mL
式中，V1——滴定时所耗0.0OlN碘酸钾标准溶液的量(1.14mL) ；V2——所取抗坏血酸标准溶液的量(5mL) ；0.088-1mL的0.0OlN碘酸钾标准溶液相当于抗坏血酸的量(mg/
mL)；
D、取碳酸氢钠52mg,溶于200mL沸水中，再将2，6-二氯靛酹50mg溶解于上述碳酸氢钠溶液中，待冷却至室温，置于5°C下静置过夜，次日经过滤后将滤液用水稀释至250mL，然后摇匀，即得到染料溶液，置于棕色瓶并于4°C下保存；
E、取5mL步骤A所得的抗坏血酸标准溶液，加入质量浓度为I%的草酸溶液5mL，经摇匀后，用步骤D所得染料溶液滴定至混合溶液呈粉红色并于15秒不褪色为止；
F、计算每毫升染料溶液相当于抗坏血酸的毫克数T(mg) = (CXV1) /V2=0.1Olmg 式中，C—步骤C所得抗坏血酸标准溶液的浓度(0.0201mg/mL)；V1——步骤E所用抗坏血酸标准溶液的量(5mL) ；V2——步骤E所消耗染料溶液的量(1.0OmL)；
G、称取新鲜板栗果样100克，加入100克的质量浓度为2%的草酸溶液，经陶瓷器皿捣碎成浆状样品，再称取30克浆状样品，然后用质量浓度为I %的草酸溶液将浆状样品稀释至I克浆状样品/毫升草酸，并摇匀得到样液；
H、在步骤G所得样液中，按5克/克待测样品的量加入白陶土去色，再在转速为2500rpm下进行离心分离lOmin，再静置8min，然后迅速吸取上清液，用常规染料溶液滴定直至上清液呈粉红色于15秒内不褪色为止；
1、计算每百克样品中所含抗坏血酸的毫克数=(VXTXA)/WX 100=33.6mg/100g样式中，V——滴定时所耗去染料溶液的量(4.99mL) ；T——每毫升染料溶液相当于抗坏血酸的毫克数；A——稀释倍数10倍;W——滴定时所取的浆状样品中的待测样品量15g=50%X30。
[0012]下面采用对比试验对本发明的效果进行说明。
[0013]试验组:采用实施例2的植物和方法。
[0014]对照组:采用与实施例2相同的植物，测定维生素C时用现有技术的常规滤法，即使用定性滤纸进行过滤。
[0015]试验结果见下表所示:
组别I分离过滤时间I整个测定过程时间 I维生素C含量测定值试验组 20 ?30min 2 ?2.5h_20.5mg/100g 样_
对照组4?5h6?8h10.lmg/100g样由上表可知，本发明提供的方法能大大缩短提取分析时间，避免维生素C暴露于空气中造成氧化，防止了维生素C的损失，保全了植物中维生素C的本来含量，所测得维生素C
的含量准确，测量结果精度高。
【权利要求】
1.一种植物维生素C含量的测定方法，其特征在于经过下列各步骤: (1)称取待测样品50?100克，加入等质量的质量浓度为2%的草酸溶液，经捣碎成浆状样品，再称取10?30克浆状样品，然后用质量浓度为I %的草酸溶液将浆状样品稀释至I克浆状样品/毫升草酸，并摇匀得到样液； (2)在步骤(I)所得样液中，按0.4?5克/克待测样品的量加入白陶土去色，再在转速为2000?2500rpm下进行离心分离5?1min,再静置5?1min,然后迅速吸取上清液，用常规染料溶液滴定直至上清液呈粉红色于15秒内不褪色为止； (3)计算每百克样品中所含抗坏血酸的毫克数=(VXTXA)/WX 100 式中，V—滴定时所耗去染料溶液的量(mL) ；T—每毫升染料溶液相当于抗坏血酸的毫克数(mg) ；A——稀释倍数10倍;W——滴定时所取的浆状样品中的待测样品量(g)。
2.根据权利要求1所述的植物维生素C含量的测定方法，其特征在于:所述步骤(I)的捣碎是使用除金属容器以外的器具进行捣碎。
【文档编号】G01N31/16GK104181274SQ201410460275
【公开日】2014年12月3日 申请日期:2014年9月11日 优先权日:2014年9月11日
【发明者】耿树香, 陈海云, 马婷, 宁德鲁, 张艳丽, 李勇杰, 贺娜, 肖良俊, 徐田 申请人:云南省林业科学院