本发明属于生物
技术领域：
，具体涉及一种毛叶山桐子幼苗雌雄株的鉴别方法。
背景技术：
：毛叶山桐子(idesiapolycarpamaxim.var.vestitadiels)是大风子科毛叶山桐子属的落叶乔木，具有极高的经济价值和观赏价值。毛叶山桐子是雌雄异株植物，雌性植株在脱离雄性植株的条件下也能长出一些果实，但想要获得果实和种子必须同时栽培雌株和雄株。毛叶山桐子在天然条件下繁殖能力极弱，因此在栽种早期，根据幼苗植株的雌雄进行规划栽种具有重要的意义。现有技术中对毛叶山桐子植株的鉴别可采用同工酶谱或染色体核型鉴定法，准确率较高。但在幼苗的早期鉴定时，可选择的酶种类较少，显色的酶带不多，有时并不能区分开雌雄株。采用染色体核型鉴定，操作复杂，需要专门的仪器，不适于基层的推广应用。因此提供一种毛叶山桐子幼苗雌雄株的鉴别方法，操作简单，不需要专门的仪器，适于在基层的推广应用，成为了本领域技术人员亟待解决的问题。技术实现要素：本发明要解决的技术问题是：提供一种毛叶山桐子幼苗雌雄株的鉴别方法，解决现有技术中毛叶山桐子幼苗雌雄株的鉴别方法操作复杂，需用专门仪器，不适于在基层推广应用的问题。为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：本发明公开的一种毛叶山桐子幼苗雌雄株的鉴别方法，该方法包括以下步骤：a：取洁净干燥的毛叶山桐子的幼苗叶片10g，剪碎，加入磷酸缓冲液，匀浆，得匀浆液；b：将匀浆液于室温静置1－2小时后，离心，取上清液，备用；c：取上清液2ml，加入2μg/ml的甲基红乙醇溶液，混匀，得混合液；d：将步骤c所得混合液置于30℃温度下，观察其颜色变化，并每隔2-3min记录颜色变化。优选地，所述磷酸缓冲液的ph值为6。优选地，所述步骤b中离心为5000rpm离心5min。优选地，根据所述混合液的颜色变化判定雌雄株，具体方法为：所述步骤b中所得混合液为黄色，随着时间延长，在10-15min内雌株混合液由黄色转至红色，雄株混合液仍为黄色。与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：(1)采用本发明方法对毛叶山桐子幼苗雌雄株进行鉴别，结果准确，操作简便，检测时间短，成本低廉，适于在基层推广应用。(2)采用本发明方法鉴别毛叶山桐子幼苗雌雄株的结果与采用形态鉴别法相比，结果一致，表明本方法结果准确。(3)本发明方法采用显色法鉴别，操作简便，不需要专门的仪器，成本低廉，普通技术工人就能掌握，适于推广应用，具有较强的产业化意义。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明作进一步描述，但不限制本发明的保护范围和应用范围。实施例1磷酸缓冲液ph值的确定取洁净干燥的毛叶山桐子的幼苗叶片10g，剪碎，加入如表1所示的不同ph值的磷酸缓冲液，匀浆，得匀浆液；将匀浆液于室温静置1－2小时后，5000rpm离心5min，取上清液，备用；取上清液2ml，加入2μg/ml的甲基红乙醇溶液，混匀，得混合液；将所得混合液置于30℃温度下，观察其颜色变化，并每隔2-3min记录颜色变化，结果见表1。表1不同ph值的磷酸缓冲液试验结果表序号ph值试验结果15.6雌雄株浸提液颜色有区别，但变色所需时间较长25.8雌雄株浸提液颜色有区别，但变色所需时间较长36.0雌雄株浸提液颜色有区别，变色所需时间较短46.2雌雄株浸提液颜色无区别56.4雌雄株浸提液颜色无区别由表1可知，磷酸缓冲液ph值为6.0时较适宜。实施例2采用本发明方法对不同的毛叶山桐子幼苗进行雌雄株鉴别，将所得结果与采用形态法的鉴别结果相比较，见下表。表2不同方法鉴别结果表由表2可知，采用本发明方法鉴别毛叶山桐子幼苗雌雄株，结果准确。上述实施例仅为本发明的优选实施方式之一，不应当用于限制本发明的保护范围，但凡在本发明的主体设计思想和精神上作出的毫无实质意义的改动或润色，其所解决的技术问题仍然与本发明一致的，均应当包含在本发明的保护范围之内。技术特征：技术总结本发明公开了一种毛叶山桐子幼苗雌雄株的鉴别方法，解决了现有技术中毛叶山桐子幼苗雌雄株的鉴别方法操作复杂，需用专门仪器，不适于在基层推广应用的问题。该方法包括以下步骤：取洁净干燥的毛叶山桐子的幼苗叶片10g，剪碎，加入磷酸缓冲液，匀浆，得匀浆液；将匀浆液于室温静置1－2小时后，离心，取上清液2ml，加入2μg/ml的甲基红乙醇溶液，混匀，得混合液；将混合液置于30℃温度下，观察其颜色变化，并每隔2‑3min记录颜色变化。本发明结果准确，操作简便，检测时间短，成本低廉，适于在基层推广应用。技术研发人员：杨志良;孔利文;辜晓平;杨强受保护的技术使用者：四川森迪科技发展股份有限公司技术研发日：2017.03.06技术公布日：2017.08.25