本发明涉及药物分析领域，具体涉及一种托吡司特片的检测方法。本检测方法的重现性好，能满足托吡司特片中托吡司特的检测要求，可用于托吡司特片的质量控制。
背景技术：
托吡司特，化学名为4-[5-(吡啶-4-基)-1h-1,2,4-三唑-3-基]吡啶-2-甲腈，结构式为：
分子式：c13h8n6
分子量：248.24
高尿酸血症是指血清尿酸值超过7.0mg/dl，是尿酸盐沉积症（痛风性关节炎、肾损伤等）的主要病因，表现为血清尿酸浓度超过体液中的溶解度。痛风是随着血尿酸水平升高，过饱和状态的尿酸钠微小结晶析出，沉积于关节、滑膜、肌腱、肾及结缔组织等组织或器官，形成痛风结石，引发急、慢性炎症和组织损伤，出现关节炎、尿路结石及肾疾病等多系统损害。我国约有痛风、高尿酸血症患者1.2亿人，高发年龄为中老年男性和绝经后女性，但近年来有年轻化趋势。目前现正在使用的降尿酸药物都有不同程度的缺点，仍需进行改善。
托吡司特是无嘌呤结构的选择性黄嘌呤氧化酶（xor）抑制剂。对氧化型和还原型的xor均有显著的抑制作用，因而其降低尿酸的作用更强大、持久，因此托吡司特可用于治疗痛风、高尿酸血症。与别嘌呤醇相比有两个明显优势：1、别嘌呤醇只对还原型的xor有抑制作用，而托吡司特对氧化型和还原型的xor均有显著的抑制作用，因而其降低尿酸的作用更强大、持久；2、由于别嘌呤醇为嘌呤类似物，不可避免的造成涉及嘌呤及吡啶代谢其他酶活性的影响，因此别嘌呤醇治疗中，需要重复大剂量给药来维持较高的药物水平，由此也带来由于药物蓄积所致的严重甚至致命的不良反应，而托吡司特为非嘌呤类xor抑制剂，因此具有更好的安全性。
现有托吡司特片检测技术中针对托吡司特的检测方法较少，且普遍存在精确度和重复性低的问题。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种精确稳定、重复性高的托吡司特检测方法。
本申请解决该技术问题的技术方案是一种托吡司特片的检测方法，通过hplc法对托吡司特进行检测，所述hplc法采用下列条件进行：
色谱柱：c18柱；
流动相：磷酸二氢钾、乙腈；
进样量：5-15μl；
流速：1.5-2.0ml/min；
柱温：30-40℃；
检测波长：220nm。
优选的，所述流动相磷酸二氢钾、乙腈比例为4:1。
优选的，所述流动相用磷酸调节ph值至3-4。
进一步优选的，所述流动相用磷酸调节ph值至3.3。
优选的，所述进样量为10μl。
优选的，所述柱温为35℃。
本发明的有益效果：
本发明的托吡司特的检测方法采用hplc法对托吡司特进行检测。本发明对hplc法的条件进行了优化筛选，确定了最优的流动相等条件，托吡司特的线性关系良好，准确度和精密度均良好，专属性强，稳定性高。本检测方法的重现性好，能满足托吡司特片中托吡司特的检测要求，可用于托吡司特片的质量控制。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例或份数按重量计。
除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域技术人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
实施例1供试品溶液制备
取本品细粉适量，加甲醇溶解并稀释制成每1ml中约含托吡司特5μg的样品溶液，过滤，取续滤液作为供试品溶液。
实施例2对照品溶液制备
取托吡司特对照品适量加甲醇制成每1ml含托吡司特5μg的溶液作为对照品溶液。
实施例3检测方法的建立
（一）线性范围
取本品对照品适量，用稀释剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含托吡司特0.5mg的溶液，作为供试品储备液。精密量取供试品储备液1ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为各浓度梯度的供试液。分别精密量取各供试液10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。由供试液浓度c对峰面积a进行线性回归，试验结果见表1。
表1托吡司特线性试验结果
结果表明：托吡司特在浓度为9.65～77.19μg/ml的范围内，峰面积对浓度呈良好的线性关系。
（二）重复性试验
精密量取本品供试品溶液及对照品溶液各10μl，注入色谱仪，记录色谱图，外标法计算含量，考察本方法的重复性，结果如表2。
表2托吡司特片含量测定重复性试验结果
结果表明：本发明的托吡司特片含量测定重复性试验结果良好。
（三）回收率试验
按80%、100%、120%三个浓度梯度，分别精密称取托吡司特及其处方量的相应空白辅料照含量测定项下的方法操作，测定本品含量，计算回收率，结果见表3。
表3托吡司特片含量回收率
结果表明：本发明的托吡司特检测方法平均回收率为99.9%，rsd值小于2%，回收率高。
（四）溶液的稳定性试验
取本品供试液，分别于0、2、4、6、8小时进样，记录峰面积并计算平均值和相对标准偏差，结果见表4。
表4托吡司特片含量测定溶液稳定性试验结果
结果表明：本发明的托吡司特含量测定检测溶液在8小时内稳定。
（五）中间精密度试验
取同批次托吡司特片，由两个分析人员使用不同的仪器，照含量测定法，分别连续测定6次含量，计算含量的相对标准偏差，结果见表5。
表5托吡司特片含量测定中间精密度试验结果
结果表明：本发明的托吡司特片含量测定中间精密度试验结果良好。
实施例4供试品及日本上市片剂的含量测定
取本品20片，精密称定，研细，精密称取相当于托吡司特25mg，置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取托吡司特对照品，精密称定，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。结果见表6。
表6托吡司特片含量测定结果
结果表明：本发明的托吡司特片的检测方法稳定可靠。
本发明的托吡司特片的检测方法线性关系良好，重复性高，回收率高，检测溶液稳定，中间精密度高，本发明检测方法稳定可靠。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用以限定本发明的实质技术内容范围，本发明的实质技术内容是广义地定义于申请的权利要求范围中，任何他人完成的技术实体或方法，若是与申请的权利要求范围所定义的完全相同，也或是一种等效的变更，均将被视为涵盖于该权利要求范围之中。