一种用于细胞荧光分析的校准基片的制作方法

本实用新型涉及生物医学仪器校验基片技术领域，具体为一种用于细胞荧光分析的校准基片。

背景技术：

自动化细胞荧光图像检测分析系统作为一种医学计量设备，需要进行定期校准以保证测量分析的精密度。自动化细胞荧光图像检测分析系统的工作流程包括自动扫描设定靶区域的单荧光或多荧光图像和分析读取靶区域内特定荧光形态事件的所属细胞类型集合。此类荧光仪器校验基片至少应满足三个条件：1)适配自动化检测仪器样本装载模块的基片；2)多波段和/或多强度荧光载体模拟细胞荧光形态；3)荧光强度稳定。

目前已有的荧光校验基片产品可根据结构用途分为两大类：1)采用荧光染料喷涂在仪器适配支持介质表面，用于任意扫描靶区荧光照度检测校验；2)采用单一荧光或多荧光标记微球制备为一定集成度的校验基片，用于单一通道校验和多通道共焦校准。应用于自动化细胞荧光分析仪器校验时，二者的缺点是：第一种校验基片由于采用染料作为标准品，无法实现被分析事件类型检测校验；第二种校验基片通常不能与自动化检测仪器的固定扫描区域匹配，并且需要在校验过程中反复多次调节扫描区域和重新调焦，操作复杂，耗时长。

技术实现要素：

本实用新型主要是提供一种用于细胞荧光分析的校准基片，解决现有技术操作复杂、耗时长等问题。

为了解决上述技术问题，本实用新型采用如下技术方案：

一种用于细胞荧光分析的校准基片，包括载玻片本体，以及设置于所述载玻片本体上的样本框；所述样本框内涂设有多色多强度荧光微球，所述多色多强度荧光微球外设置有保护层。

进一步，所述样本框为方形样本框。

进一步，所述载玻片本体采用空白玻璃基片或表面化学修饰的玻璃基片或表面涂有高分子膜的玻璃基片。

进一步，所述方形样本框的边长为10-12mm。

进一步，所述多色多强度荧光微球包括直径为3-20μm的聚苯乙烯微球和混合荧光基团。

进一步，所述聚苯乙烯微球在所述样本框中的分布密度为800-3000个/mm²。

进一步，所述保护层采用透明的低荧光背景的膜。

进一步，所述透明的低荧光背景的膜厚度小于50μm。

进一步，所述透明的低荧光背景的膜包括聚甲基硅氧烷膜、聚乙烯醇膜。

有益效果：本实用新型通过在载玻片表面设置样本区，可适配已设置固定扫描区域的细胞荧光分析仪器，无需校验时重新设置靶区域和调整自动聚焦范围，便于操作，具有广泛的固定扫描区域适配性；同一样本区内集成了多通道校验、共焦校验、荧光强度校验等功能，易于使用。样本区内均匀分布可模拟细胞荧光形态的多色多强度荧光微球，便于细胞荧光分析仪器进行目标事件识别和根据指定量化参数分级归类。多色多强度荧光微球光学性质稳定，耐光漂白，使用寿命长，可标定光源的激发强度波动情况，可为检测光路校验提供量化支持。

附图说明

图1为本实施例的校准基片主视示意图；

图2为本实施例的校准基片横截面示意图。

附图标记：载玻片本体1、样本框2、多色多强度荧光微球3、保护层4。

具体实施方式

以下将结合实施例对本实用新型涉及的一种用于细胞荧光分析的校准基片技术方案进一步详细说明。

在本实用新型的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本实用新型中的具体含义。

如图1、图2所示，本实施例的一种用于细胞荧光分析的校准基片，包括载玻片本体1，以及设置于所述载玻片本体1上的样本框2；所述样本框2内涂设有多色多强度荧光微球3，所述多色多强度荧光微球3外设置有保护层4。所述样本框2为方形样本框2。所述载玻片本体1采用空白玻璃基片或表面化学修饰的玻璃基片或表面涂有高分子膜的玻璃基片。所述方形样本框2的边长为10-12mm。所述多色多强度荧光微球3包括直径为3-20μm的聚苯乙烯微球和混合荧光基团。所述聚苯乙烯微球在所述样本框2中的分布密度为800-3000个/mm²。所述保护层4采用透明的低荧光背景的膜。所述透明的低荧光背景的膜厚度小于50μm。所述透明的低荧光背景的膜包括聚甲基硅氧烷膜、聚乙烯醇膜。为了提高多色多强度荧光微球3在基片表面的固定强度，须在基片表面涂覆保护层4。本实用新型通过在载玻片表面设置样本区，可适配已设置固定扫描区域的细胞荧光分析仪器，无需校验时重新设置靶区域和调整自动聚焦范围，便于操作，具有广泛的固定扫描区域适配性；同一样本区内集成了多通道校验、共焦校验、荧光强度校验等功能，易于使用。样本区内均匀分布可模拟细胞荧光形态的多色多强度荧光微球3，便于细胞荧光分析仪器进行目标事件识别和根据指定量化参数分级归类。多色多强度荧光微球3光学性质稳定，耐光漂白，使用寿命长，可标定光源的激发强度波动情况，可为检测光路校验提供量化支持。

提供了一种将本实用新型用于临床血样细胞类型识别分析仪器校验的范例。该仪器样本装载台为2×8载玻片支架。将本实用新型的校准基片分别装载于第一列1号位和第二列8号位，运行该仪器淋巴细胞分析程序后获得所有5个波段荧光强度检测结果，dapi通道颜色呈现为深蓝色，fitc通道颜色呈现为绿色，tr通道颜色呈现为红色，cy5通道颜色呈现为紫色，cy7通道颜色呈现为青蓝色。

提供了一种将本实用新型用于细胞形态分析的荧光显微镜共焦校验的应用。将本实用新型固定于该荧光显微镜样品架上，随机选择一个视野拍摄所有通道照片。进行共焦调节后，对同一视野再次拍摄所有通道照片。荧光微球图像由调整前无法共焦的椭圆形变为共焦调整后的圆形。

尽管已经示出和描述了本实用新型的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本实用新型的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本实用新型的范围由所附权利要求及其等同物限定。

技术特征：

1.一种用于细胞荧光分析的校准基片，其特征在于：包括载玻片本体，以及设置于所述载玻片本体上的样本框；所述样本框内涂设有多色多强度荧光微球，所述多色多强度荧光微球外设置有保护层。

2.根据权利要求1所述的一种用于细胞荧光分析的校准基片，其特征在于：所述样本框为方形样本框。

3.根据权利要求1所述的一种用于细胞荧光分析的校准基片，其特征在于：所述载玻片本体采用空白玻璃基片或表面化学修饰的玻璃基片或表面涂有高分子膜的玻璃基片。

4.根据权利要求2所述的一种用于细胞荧光分析的校准基片，其特征在于：所述方形样本框的边长为10——12mm。

5.根据权利要求1所述的一种用于细胞荧光分析的校准基片，其特征在于：所述多色多强度荧光微球包括直径为3——20μm的聚苯乙烯微球和混合荧光基团。

6.根据权利要求5所述的一种用于细胞荧光分析的校准基片，其特征在于：所述聚苯乙烯微球在所述样本框中的分布密度为800——3000个/mm²。

7.根据权利要求1所述的一种用于细胞荧光分析的校准基片，其特征在于：所述保护层采用透明的低荧光背景的膜。

8.根据权利要求7所述的一种用于细胞荧光分析的校准基片，其特征在于：所述透明的低荧光背景的膜厚度小于50μm。

9.根据权利要求7所述的一种用于细胞荧光分析的校准基片，其特征在于：所述透明的低荧光背景的膜包括聚甲基硅氧烷膜、聚乙烯醇膜。

技术总结
本实用新型涉及生物医学仪器校验基片技术领域，且公开了一种用于细胞荧光分析的校准基片，包括载玻片本体，以及设置于所述载玻片本体上的样本框；所述样本框内涂设有多色多强度荧光微球，所述多色多强度荧光微球外设置有保护层。本实用新型具有广泛的固定扫描区域适配性；同一样本区内集成了多通道校验、共焦校验、荧光强度校验等功能，易于使用。多色多强度荧光微球光学性质稳定，耐光漂白，使用寿命长，可标定光源的激发强度波动情况，可为检测光路校验提供量化支持。

技术研发人员：张洁;李平;江涛;郭雨朦;白雪皎;仇海燕;李男男
受保护的技术使用者：北京中科纳泰生物科技有限公司
技术研发日：2020.03.24
技术公布日：2021.01.05